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斑地锦(Euphorbia maculata) CHS2基因的表达与槲皮素累积量的关系

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分子植物育种 2023年

作者：郭三保宋美玲桂明明张永康苏慧黄胜和江西中医药高等专科学校医学基础部南昌大学抚州医学院江西中医药高等专科学校药学系

为了探究斑地锦(Euphorbia maculata) CHS2基因表达模式与槲皮素累积量的相关性，本研究综合运用转录组测序、RACE和Tail-PCR技术克隆了斑地锦CHS2基因，将其命名为EmCHS2 (GenBank登录号为OP751804)。生物信息学分析结果显示，EmCHS2... 详细信息

为了探究斑地锦(Euphorbia maculata) CHS2基因表达模式与槲皮素累积量的相关性，本研究综合运用转录组测序、RACE和Tail-PCR技术克隆了斑地锦CHS2基因，将其命名为EmCHS2 (GenBank登录号为OP751804)。生物信息学分析结果显示，EmCHS2开放阅读框(ORF)全长为1 194 bp，编码397个氨基酸，相对分子质量为43.09 kD，理论等电点为5.63，为结构稳定的亲水性非分泌蛋白，不含跨膜区域，定位于细胞质，二级结构以α-螺旋和无规卷曲结构为主，与其他植物CHS基因相似性较高。RT-qPCR结果显示，EmCHS2在斑地锦各组织中表达水平存在差异，且随着斑地锦的成熟，相同组织EmCHS2基因表达水平呈下调趋势。HPLC结果显示，随着斑地锦的成熟，相同组织槲皮素累积量呈下降趋势。结果表明不同生长期相同组织EmCHS2基因表达水平与槲皮素累积量呈正相关，推测EmCHS2基因可能是斑地锦槲皮素生物合成途径中主效基因之一。进一步分析启动子序列显示，EmCHS2表达水平可能受光照、激素(赤霉素，茉莉酸甲酯)等因素的影响，这有望为后续的表达调控研究提供重要线索。本研究不仅丰富了斑地锦的CHS基因资源，也为深入研究CHS2基因功能、表达调控机制以及培育高槲皮素含量斑地锦品种提供了基础。

关键词：斑地锦(Euphorbia maculata) CHS2 槲皮素生物信息学分析基因表达

基于扩展UML的软件可靠性测试模型构建方法研究

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基于扩展UML的软件可靠性测试模型构建方法研究

作者：桂明明杭州电子科技大学

学位级别：硕士

随着计算机在生活中的广泛应用,加上其软件规模不断扩大,复杂性不断提升,软件质量受到了社会的普遍关注,人们对软件可靠性要求也越来越高。软件可靠性测试模型是可靠性工程的基础和关键,引起了社会的广泛关注和重视。软件可靠性测试模... 详细信息

随着计算机在生活中的广泛应用,加上其软件规模不断扩大,复杂性不断提升,软件质量受到了社会的普遍关注,人们对软件可靠性要求也越来越高。软件可靠性测试模型是可靠性工程的基础和关键,引起了社会的广泛关注和重视。软件可靠性测试模型对优化系统架构、保证开发测试工作顺利进行以及保障软件质量,具有重要意义。UML模型作为面向对象软件开发中的标准建模语言,已得到了广泛应用,基于设计模型构建软件可靠性测试模型受到了学术界与工业界的普遍关注。本文以实现软件可靠性分析为目标,以软件UML模型为基础,提出了一种基于扩展UML模型构建软件Markov链使用模型的方法。本文对标准UML模型进行了可靠性扩展和形式化定义,为使用模型构建工作提供了语义基础。通过对UML2.0新特性的研究,在模型扩展和形式化定义中实现了对新增组合片段的支持。构建使用模型之前需要对UML模型进行一致性检查,本文给出了模型一致性验证的具体方法。此外,本文还提出了一种基于梯形模糊数F-AHP分析方法确定使用模型转移概率的方法,能够自动计算得到使用模型的转移概率。依据所提方法,本文设计开发了一个可靠性模型构建工具-UM2M。该工具能够利用其它建模工具设计的UML模型构建得到Markov链使用模型。最后,本文以课题研究的无人机飞行控制系统中多种飞行模式UML模型为基础,实现了无人机飞行控制系统不同飞行模式下Markov链使用模型的构建,为完成该无人机飞行控制系统的可靠性测试提供了基础和保障。

关键词： UML 软件可靠性测试 Markov链使用模型形式化定义

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基于转录组测序的斑地锦内参基因筛选及验证

热带作物学报 2023年第11期44卷 2273-2280页

作者：许建丰桂明明张永康尧子钊黄胜和饶泽昌南昌大学抚州医学院江西抚州344000 江西中医药高等专科学校医学基础部江西抚州344000

斑地锦(Euphorbia maculata)是一种常用中药材,其中黄酮类化合物槲皮素是其主要药效成分之一。目前斑地锦槲皮素生物合成基因研究鲜见报道,而实时荧光定量PCR(RT-qPCR)是基因研究的常用方法之一,但具有合适的内参基因是RT-qPCR相对定量... 详细信息

斑地锦(Euphorbia maculata)是一种常用中药材,其中黄酮类化合物槲皮素是其主要药效成分之一。目前斑地锦槲皮素生物合成基因研究鲜见报道,而实时荧光定量PCR(RT-qPCR)是基因研究的常用方法之一,但具有合适的内参基因是RT-qPCR相对定量的前提条件。为了获得适合的斑地锦内参基因,本研究基于转录组测序结果,筛选出斑地锦EmSE、EmUBC、EmGDI1、EmLSM12、EmGBP、EmSYP22、EmTRI1、EmRSZ21、EmRPL7以及课题组前期得到的EmUBQ共10个基因作为侯选内参基因。通过RT-qPCR检测10个候选内参基因在斑地锦营养生长期和生殖生长期的根、茎、叶及果中的表达情况,利用geNorm、NormFinder和BestKeeper软件分析候选基因的表达稳定性,通过几何平均值法对不同软件所得结果进行整合并明确综合排名,即EmGDI1>EmUBQ>EmSE>EmUBC>EmLSM12=EmGBP>EmTRI1>EmSYP22> EmRSZ21=EmRPL7。以EmGDI1为内参基因,对槲皮素生物合成过程中的一个关键酶基因EmC4H进行表达分析,EmC4H在不同生长期不同组织内的表达差异与转录组测序结果趋势基本一致。本研究开发的内参基因EmGDI1可作为斑地锦不同生长期基因组织特异性表达研究中适合的内参基因。

关键词：斑地锦内参基因转录组测序实时荧光定量PCR

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斑地锦查尔酮合酶基因及启动子的克隆与分析

生物技术通报 2023年第4期39卷 148-156页

作者：郭三保宋美玲李灵心尧子钊桂明明黄胜和江西中医药高等专科学校药学系抚州344000 江西中医药高等专科学校医学基础部抚州344000 南昌大学抚州医学院抚州344000

黄酮类化合物槲皮素是斑地锦主要药效成分之一,而查尔酮合酶(CHS)是槲皮素生物合成过程中的关键酶。为阐明斑地锦中槲皮素生物合成机制,本研究以斑地锦为材料,根据转录组测序数据结合3'RACE、Tail-PCR技术,克隆了CHS基因及其启动子,将... 详细信息

黄酮类化合物槲皮素是斑地锦主要药效成分之一,而查尔酮合酶(CHS)是槲皮素生物合成过程中的关键酶。为阐明斑地锦中槲皮素生物合成机制,本研究以斑地锦为材料,根据转录组测序数据结合3'RACE、Tail-PCR技术,克隆了CHS基因及其启动子,将该基因命名为EmCHS(GenBank登录号为ON652865)。对EmCHS蛋白进行氨基酸序列比对、理化性质、跨膜结构域、亚细胞定位和系统进化树等分析,并采用实时荧光定量PCR技术检测EmCHS在不同生长期不同组织中的表达情况。结果显示,EmCHS开放阅读框(ORF)全长为1194 bp,编码397个氨基酸,EmCHS蛋白定位于细胞质,理论等电点为5.96,相对分子质量为43.48 kD,不含跨膜区域,为结构稳定的亲水性蛋白。氨基酸序列比对和系统进化树分析结果显示,EmCHS与同为大戟科的木薯氨基酸序列相似性最高(91.92%),符合植物分类学的特点。RT-qPCR实验表明,EmCHS基因在斑地锦不同生长期不同组织中均有表达,且存在明显差异,在生殖生长期叶内表达水平最低,生殖生长期根内表达水平最高。克隆到的EmCHS启动子(GenBank登录号为OP626754),长度为971 bp,生物信息学分析结果显示,其既含TATA-box、CAAT-box等基本序列,也含有MYB、MYC等转录因子结合位点、多个光反应元件(G-box等)和激素反应元件(ABRE等)等顺式作用元件。实验结果为进一步研究斑地锦CHS基因功能及表达调控奠定基础。

关键词：斑地锦 CHS 启动子克隆热不对称交错PCR 生物信息学基因表达

斑地锦黄酮醇合成酶基因(EmFLS)及其启动子克隆及表达分析

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南方农业学报 2023年第7期54卷 1914-1924页

作者：宋美玲郭三保桂明明张永康李灵心黄胜和江西中医药高等专科学校医学基础部江西抚州344000 江西中医药高等专科学校药学系江西抚州344000 南昌大学抚州医学院江西抚州344000

【目的】克隆斑地锦黄酮醇合成酶基因(EmFLS)及其启动子序列,并检测EmFLS基因在斑地锦不同生长期不同组织中的表达模式,为后续研究该基因对黄酮醇化合物生物合成的调控机制提供理论参考。【方法】以斑地锦为材料,采用cDNA末端快速扩增(R... 详细信息

【目的】克隆斑地锦黄酮醇合成酶基因(EmFLS)及其启动子序列,并检测EmFLS基因在斑地锦不同生长期不同组织中的表达模式,为后续研究该基因对黄酮醇化合物生物合成的调控机制提供理论参考。【方法】以斑地锦为材料,采用cDNA末端快速扩增(RACE)技术和热不对称交互式PCR(Tail-PCR)技术克隆EmFLS基因及启动子序列,对其进行生物信息学分析,并通过实时荧光定量PCR检测其在不同生长期不同组织中的表达模式。【结果】扩增获得EmFLS基因开放阅读框(ORF)(GenBank登录号ON821211.1),长度为1002 bp,编码333个氨基酸残基,蛋白相对分子质量为37.62 kD,定位于细胞质,为不稳定的亲水性蛋白,属于2OG-Fe(II)加氧酶超家族。EmFLS蛋白与其他13种植物FLS蛋白的氨基酸序列相似性为63.55%~70.51%,其中与木薯FLS蛋白的氨基酸序列相似性最高,且在系统发育进化树上处于一个独立的分支。EmFLS基因启动子约1800 bp,除含有真核生物启动子核心元件TATA-box和CAAT-box外,还含激素响应、胁迫响应和光响应等顺式作用元件。EmFLS基因在营养生长期和生殖生长期的根、茎、叶和果中均有表达,但在根和茎中的相对表达量显著高于叶和果(P0.05)。【结论】EmFLS基因表达具有组织特异性,且在根和茎中具有发育阶段特异性,推测EmFLS基因主要参与调控斑地锦根和茎中黄酮醇化合物的生物合成。

关键词：斑地锦黄酮醇合成酶(FLS) 基因克隆启动子生物信息学分析表达分析

毕赤酵母表达gp96-scFv抗体及生物活性测定

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生物工程学报 2014年第4期30卷 595-604页

作者：桂明明武慧英孙璐徐亚星赵报李鑫李长菲王希东孟颂东新疆农业大学农学院新疆乌鲁木齐830052 中国科学院微生物研究所中国科学院病原微生物与免疫学重点实验室北京100101 中国科学院大学北京100049

旨在利用毕赤酵母分泌表达gp96-scFv抗体,纯化后得到能特异性结合gp96抗原的小分子抗体片段(scFv)。根据gp96-scFv抗体基因序列,合成gp96-scFv抗体基因序列,将gp96-scFv抗体序列克隆到毕赤酵母表达质粒pPICZα-A,线性化的重组表达载体... 详细信息

旨在利用毕赤酵母分泌表达gp96-scFv抗体,纯化后得到能特异性结合gp96抗原的小分子抗体片段(scFv)。根据gp96-scFv抗体基因序列,合成gp96-scFv抗体基因序列,将gp96-scFv抗体序列克隆到毕赤酵母表达质粒pPICZα-A,线性化的重组表达载体电转化到毕赤酵母X33,甲醇诱导目的蛋白表达,通过亲和层析法纯化目的蛋白,并以SDS-PAGE和Western blotting进行鉴定。通过Western blotting、Immunofluorescence、ELISA、FACS方法对gp96-scFv抗体的生物活性进行了检测。结果成功地构建了分泌表达抗gp96蛋白scFv抗体的毕赤酵母菌,每升毕赤酵母菌培养上清经纯化可获约50 mg gp96-scFv抗体,所获抗体其分子量大约为15 kDa,具有与gp96抗原特异性结合的活性。本研究通过毕赤酵母菌成功表达了gp96-scFv抗体,生物活性Western blotting、Immunofluorescence、ELISA、FACS分析表明该抗体能特异性结合gp96。

关键词： gp96-scFv抗体毕赤酵母 gp96 分泌表达亲和力特异性

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热轧钢板桩国内外应用及开发

热轧钢板桩国内外应用及开发

2012年全国轧钢生产技术会

作者：臧悦桂明明王俊英祝晓鸽中钢设备有限公司北京科技大学

钢板桩是工程建设领域一种新型绿色环保型基础施工材料,分为冷弯钢板桩和热轧钢板桩,热轧钢板桩是工程应用的主导产品。本文不仅对热轧钢板桩的应用和种类做了简单介绍,还对其国内外的应用做了概要说明,指出热轧钢板桩将成为我国工程材... 详细信息

钢板桩是工程建设领域一种新型绿色环保型基础施工材料,分为冷弯钢板桩和热轧钢板桩,热轧钢板桩是工程应用的主导产品。本文不仅对热轧钢板桩的应用和种类做了简单介绍,还对其国内外的应用做了概要说明,指出热轧钢板桩将成为我国工程材料领域的"新军"。

关键词：钢板桩热轧工程材料应用

来源： cnki会议评论

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基于思维导图应用于高中英语写作教学研究

中学生英语 2021年第36期 39-39页

作者：桂明明山东省寿光市现代中学

英语写作是英语学习中的重要组成部分,它考验着学生们的词汇积累,语法掌握,以及思维逻辑等综合能力。尤其是高中的英语写作,在整体上对学生们的英语综合能力具有更高的要求,因此英语写作成为了高中英语学习的重点与难点。为了能使高中...

英语写作是英语学习中的重要组成部分,它考验着学生们的词汇积累,语法掌握,以及思维逻辑等综合能力。尤其是高中的英语写作,在整体上对学生们的英语综合能力具有更高的要求,因此英语写作成为了高中英语学习的重点与难点。为了能使高中英语写作教学能有高效的提升,笔者在教学实践中不断摸索出一些优化措施。笔者认为在英语写作教学中,

关键词：

基于非线性扰动补偿的超局部无模型永磁同步电机电流预测控制

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兵工学报 2024年第4期45卷 1129-1140页

作者：陈桂明许令亮火箭军工程大学陕西西安710025

在电机运转过程中,电机参数会发生变化,产生参数漂移,同时电机会受到内外部未知扰动,导致控制性能下降,抗干扰性和鲁棒性较差。为解决这些问题,提出非线性扰动补偿的超局部无模型电流预测控制方法。只利用电流环的输入和输出,建立超局... 详细信息

在电机运转过程中,电机参数会发生变化,产生参数漂移,同时电机会受到内外部未知扰动,导致控制性能下降,抗干扰性和鲁棒性较差。为解决这些问题,提出非线性扰动补偿的超局部无模型电流预测控制方法。只利用电流环的输入和输出,建立超局部无模型电流预测控制模型,不涉及任何电机参数,解决了因参数变化导致的模型失配问题。针对系统总扰动,建立非线性扰动补偿模型,能够较为准确和稳定地估计系统总扰动,并进行前馈补偿,实时更新控制信息,仅需调节两个控制参数。为防止产生较大的电流,建立电流限幅控制,提高电机控制性能。仿真和实验结果表明,提出的控制方法对于参数变化和外部扰动,具有较强的鲁棒性、抗干扰能力,能够实现较快的动态响应,减小电流纹波,降低电流静差,获得较优的电流环动静态性能;抑制转速脉动和超调量,稳定跟踪额定转速,有利于电机的平稳运行。

关键词：永磁同步电机超局部无模型电流预测控制电流限幅非线性扰动补偿

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