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接种疫苗防流感

科学世界 2014年第12期 4-9页

作者：校海霞中国科学院天津工业生物技术研究所

又到秋冬之交，我国很多地方开始进入流感高发期。流感是由不同类型的流感病毒引起的，历史上的流感大流行曾经造成数千万人的死亡。接种流感疫苗是控制与预防流感大规模流行的有效办法。流感是由什么引起的？流感，是流行性感冒（influ... 详细信息

又到秋冬之交，我国很多地方开始进入流感高发期。流感是由不同类型的流感病毒引起的，历史上的流感大流行曾经造成数千万人的死亡。接种流感疫苗是控制与预防流感大规模流行的有效办法。流感是由什么引起的？流感，是流行性感冒（influenza）的简称。这个词源自意大利语，原意是“影响”。几百年前，相信占星术的意大利人认为这是一种由于星星（天象）的不利“影响”而引起的疾病。

关键词：流感病毒接种疫苗流行性感冒流感疫苗意大利高发期占星术死亡

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B型流感病毒血凝素的表达及免疫原性测定

生物工程学报 2022年第3期38卷 1112-1123页

作者：杨晨耿小宇原恺张娟琨校海霞天津科技大学生物工程学院天津300457 中国科学院天津工业生物技术研究所天津300308 山西高等创新研究院山西太原030032

B型流感病毒是引起季节性流感的原因之一,严重时会造成重大疾病或死亡。为了检测B型流感病毒2个疫苗候选毒株的血凝素(hemagglutinin,HA)蛋白胞外段在哺乳动物细胞中的表达及在小鼠体内的免疫原性,本研究将带有三聚体标签的HA胞外段(HA-... 详细信息

B型流感病毒是引起季节性流感的原因之一,严重时会造成重大疾病或死亡。为了检测B型流感病毒2个疫苗候选毒株的血凝素(hemagglutinin,HA)蛋白胞外段在哺乳动物细胞中的表达及在小鼠体内的免疫原性,本研究将带有三聚体标签的HA胞外段(HA-ectodomain,HA-ecto)序列及神经氨酸酶(neuraminidase,NA)全长编码框经密码子优化后构建至pCAGGS载体中,通过线性聚乙烯亚胺将pCAGGS-HA-ecto与pCAGGS-NA共转染293T细胞。收集转染后96h的上清,通过镍离子亲和层析及分子筛层析获得三聚体形式的HA-ecto蛋白,然后将HA-ecto三聚体蛋白免疫小鼠,进行酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)及血凝抑制实验(hemagglutination inhibition,HAI)检测HA-ecto蛋白诱导小鼠后产生的抗体水平。纯化结果显示,通过哺乳动物细胞表达系统能够得到分泌型表达的三聚体HA-ecto蛋白。ELISA及HAI结果显示,三聚体HA-ecto蛋白二次免疫小鼠后,能诱导小鼠产生较高水平的同源和异源交叉抗体。以上结果表明,哺乳动物细胞表达的B型流感病毒HA蛋白可作为亚单位重组流感疫苗的候选。

关键词： B型流感病毒血凝素蛋白哺乳动物细胞表达系统疫苗候选毒株

H7N9亚型禽流感病毒血凝素蛋白的真核表达及抗原性的鉴定

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畜牧与兽医 2015年第5期47卷 16-19页

作者：郭天玲杨咪刘浩校海霞天津科技大学生物工程学院天津300457 中国科学院天津工业生物技术研究所天津300308

目的:通过哺乳动物细胞表达出禽源H7N9流感表面HA蛋白,并鉴定其抗原性。方法:通过引物设计,利用融合PCR方法扩增得到H7N9禽流感HA基因,以p CAGGS为表达载体构建重组质粒p CAGGS-H7-thrombin。测序正确后将重组质粒转染293T细胞。经72 h... 详细信息

目的:通过哺乳动物细胞表达出禽源H7N9流感表面HA蛋白,并鉴定其抗原性。方法:通过引物设计,利用融合PCR方法扩增得到H7N9禽流感HA基因,以p CAGGS为表达载体构建重组质粒p CAGGS-H7-thrombin。测序正确后将重组质粒转染293T细胞。经72 h后收获上清,通过镍柱和凝胶层析柱纯化后得到目的蛋白。Western blot和ELISA结果鉴定纯化的H7蛋白的抗原性。结果:293T细胞表达的上清经HisTrapTMHP纯化后过Superdex 200 10/300 GL分子筛,在洗脱体积达到11 m L左右出峰,由出峰位置判断其为H7三聚体。Western blot检测在60 ku左右有一条阳性条带,ELISA检测其对抗H7N9小鼠阳性血清有很高的反应值。试验成功表达禽流感病毒H7N9的H7蛋白,并且针对H7N9的阳性血清有较高的灵敏性,为进一步研究H7N9亚单位疫苗奠定了基础。

关键词：禽流感病毒 H7N9 血凝素蛋白 293T细胞 Western blot ELISA

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鹧鸪单核细胞增多性李氏杆菌的分离鉴定

河北农业大学学报 2003年第1期26卷 69-72页

作者：高轩校海霞马新英宋臣峰李潭清阎广强河北农业大学动物科技学院河北保定071001

2000年冬,从河北省某鹧鸪养殖场送检的病死鹧鸪中分离到3株革兰氏阳性球杆菌。应用细菌学检验方法,对此分离菌进行了培养特性观察和生化特性分析等,并结合流行病学调查、临床症状和病理剖检变化,将其鉴定为单核细胞增多性李氏杆菌。致... 详细信息

2000年冬,从河北省某鹧鸪养殖场送检的病死鹧鸪中分离到3株革兰氏阳性球杆菌。应用细菌学检验方法,对此分离菌进行了培养特性观察和生化特性分析等,并结合流行病学调查、临床症状和病理剖检变化,将其鉴定为单核细胞增多性李氏杆菌。致病性试验表明,分离菌具有较强的致病性。选用敏感药物治疗后,病情得到了有效地控制。

关键词：鹧鸪单核细胞增多性李氏杆菌分离鉴定

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犬瘟热病毒融合蛋白的真核细胞表达及鉴定

今日畜牧兽医 2020年第5期36卷 5-7页

作者：白桂杰张同存校海霞天津科技大学生物工程学院 300457 中国科学院天津工业生物技术研究所 300308

目的:通过293T真核细胞表达犬瘟热病毒融合蛋白,并鉴定其抗原性。方法:利用PCR方法扩增犬瘟热病毒(Onderstepoort株)的融合蛋白胞外段,在C末端引入氨基酸突变和His标签,插入pFuse载体,构建重组质粒pFuse-CDV-sF-ecto。将重组质粒转染293... 详细信息

目的:通过293T真核细胞表达犬瘟热病毒融合蛋白,并鉴定其抗原性。方法:利用PCR方法扩增犬瘟热病毒(Onderstepoort株)的融合蛋白胞外段,在C末端引入氨基酸突变和His标签,插入pFuse载体,构建重组质粒pFuse-CDV-sF-ecto。将重组质粒转染293T细胞,72~96h后收上清,通过镍离子亲和层析和凝胶层析纯化目的蛋白,利用酶联免疫吸附试验(ELISA)鉴定sF-ecto蛋白抗原性。结果 :细胞上清先经His-TrapTM富集,而后用Superdex 200 10/300GL纯化,出峰体积为8.43 mL,由出峰位置判断表达的CDV-sF-ecto蛋白为多聚体。ELISA检测发现CDV-sF-ecto与商业化犬瘟热病毒单克隆抗体有较高反应值。本研究成功表达了犬瘟热病毒融合蛋白的胞外段,并证明该蛋白对犬瘟热病毒特异性单克隆抗体有较高的结合活性。

关键词：犬瘟热病毒融合蛋白抗原性表达 ELISA

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人用H7N9疫苗的研究进展

微生物学免疫学进展 2019年第2期47卷 58-63页

作者：谷津津刘浩校海霞天津科技大学生物工程学院生物工程专业天津300450 中国科学院天津工业生物技术研究所蛋白质工程与疫苗实验室天津300308

2013年3月,在中国首次出现低致病性H7N9病毒感染者并致死的病例。迄今为止,中国共出现5次H7N9病毒流行的疫情。其间,H7N9病毒不断发生变异,新的基因型以及高致病性H7N9病毒相继出现。变异的H7N9病毒对禽类养殖业和人类的公共卫生造成了... 详细信息

2013年3月,在中国首次出现低致病性H7N9病毒感染者并致死的病例。迄今为止,中国共出现5次H7N9病毒流行的疫情。其间,H7N9病毒不断发生变异,新的基因型以及高致病性H7N9病毒相继出现。变异的H7N9病毒对禽类养殖业和人类的公共卫生造成了严重的威胁,疫苗是预防H7N9病毒流行的有效措施。目前,全世界尚无临床可用的人用H7N9疫苗,但各类备选H7N9疫苗都在研究中,如灭活疫苗、减毒疫苗、亚单位疫苗、病毒样颗粒疫苗、核酸疫苗和病毒载体疫苗等。其中,一些H7N9疫苗已进入临床研究阶段。现对各类人用H7N9疫苗的研究进展作一概述。

关键词： H7N9病毒 H7N9疫苗临床试验

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B型流感病毒小鼠致死模型的建立

军事医学 2017年第1期41卷 53-57页

作者：张海亮冯俊霞肖冬光校海霞天津科技大学天津300457 中国科学院天津工业生物技术研究所天津300300 中国科学院流感研究与预警中心北京100101

目的建立B型流感病毒致死小鼠动物模型,为研究B型流感病毒的致病与传播机制、开发新疫苗和抗病毒药物奠定基础。方法将病毒B/Lee/1940在小鼠体内连续传代5次后,获得小鼠致死性病毒适应株。利用MDCK细胞扩增的小鼠致死性病毒适应株感染小... 详细信息

目的建立B型流感病毒致死小鼠动物模型,为研究B型流感病毒的致病与传播机制、开发新疫苗和抗病毒药物奠定基础。方法将病毒B/Lee/1940在小鼠体内连续传代5次后,获得小鼠致死性病毒适应株。利用MDCK细胞扩增的小鼠致死性病毒适应株感染小鼠,连续监测14 d小鼠体质量变化和死亡情况。同时对P0代病毒和P5代小鼠致死性病毒适应株的8个基因片段(PB2,PB1,PA,HA,NA/NB,NP,M,NS)进行序列分析。结果与结论传代过程中每一代小鼠肺中都可检测到病毒;感染致死性病毒适应株的小鼠体质量变化剧烈,小鼠死亡率为100%,并且在小鼠肺中能检测到病毒。测序分析发现小鼠致死性病毒适应株在PB2、NP片段的部分位点发生了氨基酸突变。该研究通过将病毒在小鼠体内连续传代成功建立了B型流感病毒小鼠致死模型,为B型流感病毒的研究奠定了基础。

关键词：流感病毒,B型模型,动物 BALB/c小鼠致死毒株连续传代死亡率

鸡新城疫、禽流感(H9亚型)二联油乳剂灭活疫苗最小免疫剂量试验

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中国兽药杂志 2004年第11期38卷 13-15页

作者：王宏俊姜北宇校海霞北京市农林科学院畜牧兽医研究所北京100089 河北农业大学动物科技学院河北保定071001

　将ND AI(H9亚型)二联苗分别以1.0、0.5、0.2、0.1、0.05、0.02mL6个不同剂量免疫5周龄SPF鸡,免疫后3周采血测NDV及AIV的HI抗体,并用H9亚型AIV及NDVF48株攻击。结果表明,这6个免疫组鸡的NDVHI抗体几何平均效价分别为210、28.8、28.5、2... 详细信息

　将ND AI(H9亚型)二联苗分别以1.0、0.5、0.2、0.1、0.05、0.02mL6个不同剂量免疫5周龄SPF鸡,免疫后3周采血测NDV及AIV的HI抗体,并用H9亚型AIV及NDVF48株攻击。结果表明,这6个免疫组鸡的NDVHI抗体几何平均效价分别为210、28.8、28.5、27.0、26.1、25.7;AIVHI抗体水平分别为29.3、28.4、27.7、25.7、25.1、22.8;对照组鸡的NDV及AIVHI抗体均为零。攻毒试验证实,以0.1～1.0mL剂量免疫鸡获得了100%的抵抗NDV及AIV强毒攻击的保护力;0.02mL和0.05mL的免疫剂量也可使其对NDV与AIV的保护率达到90%～100%。

关键词：鸡新城疫禽流感二联苗油乳剂灭活疫苗最小免疫剂量免疫效力

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肉鸡大肠杆菌病发病情况报告

中国动物保健 2005年第6期7卷 23-25页

作者：姜北宇宋立校海霞王凤强符芳北京市农林科学院畜牧兽医研究所北京100089 中国兽医药品监察所北京100081 中国科学院微生物研究所北京100080 沈阳农业大学兽医学院沈阳118161 河北农业大学动物科技学院保定071001

鸡大肠杆菌病是由埃希氏大肠杆菌的某些致病菌株所引起的一类疾病.其特征是引起鸡的心包炎、肝周炎、气囊炎、腹膜炎、滑膜炎、大肠杆菌病肉芽肿、败血症、肠炎、脑炎等多种临诊病型.随着我国集约化养鸡业的不断发展,饲养密度的增加,鸡... 详细信息

鸡大肠杆菌病是由埃希氏大肠杆菌的某些致病菌株所引起的一类疾病.其特征是引起鸡的心包炎、肝周炎、气囊炎、腹膜炎、滑膜炎、大肠杆菌病肉芽肿、败血症、肠炎、脑炎等多种临诊病型.随着我国集约化养鸡业的不断发展,饲养密度的增加,鸡的大肠肝菌病呈明显的上升趋势,给养鸡业造成了巨大的经济损失.笔者2004年在禽病诊治工作中,遇到两起肉鸡出现高致死率的病例,经过临床及实验室诊断,证明为鸡大肠杆菌病.现将发病情况报告如下:

关键词：发病情况肉鸡大肠杆菌病报告埃希氏大肠杆菌大肠肝菌病 2004年实验室诊断致病菌株饲养密度上升趋势经济损失养鸡业心包炎气囊炎腹膜炎滑膜炎肉芽肿败血症集约化致死率肠炎病型脑炎诊治禽病