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应用生物素—亲和素预定位技术对荷人大肠癌裸鼠模型MR免疫显像的实验研究

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应用生物素—亲和素预定位技术对荷人大肠癌裸鼠模型MR免疫显像的...

作者：柴青芬第一军医大学

学位级别：硕士

实验目的：单克隆抗体介导的MR免疫成像不但有助于微小癌灶的检出，而且有可能对肿瘤的组织类型作出术前诊断。但由于肿瘤局部选择性浓集的Gd离子浓度较低，产生的信号较弱，成为MR免疫成像发展的障碍。生物素-亲和素预定位系统三步... 详细信息

实验目的：单克隆抗体介导的MR免疫成像不但有助于微小癌灶的检出，而且有可能对肿瘤的组织类型作出术前诊断。但由于肿瘤局部选择性浓集的Gd离子浓度较低，产生的信号较弱，成为MR免疫成像发展的障碍。生物素-亲和素预定位系统三步法具有信号放大作用，能够大幅度提高肿瘤/非肿瘤的放射性核素的比值，在放射免疫显像动物实验和临床应用中取得了良好的效果。MR免疫成像的原理基本同放射免疫成像，只是所用的示踪元素不同。为了提高瘤靶局部Gd离子的浓度，增强肉眼可辨的信号强度，本实验设想应用生物素-亲和素预定位技术，对皮下接种人大肠癌的裸鼠模型进行实验研究，探索抗体生物素化的条件、预定位增强方法和增强特点，以达到提高MR免疫成像敏感性的目的。材料和方法：1、6-8周龄的BALB/C裸鼠20只，在右前肢背部和部分右臀部皮下注射入大肠癌LoVo细胞，制作肿瘤模型。2、将抗CEA 单克隆抗体CL和生物素酯(NHS-LS-Biotin/DMSO)，按1∶30-50摩尔比，在碱性条件下活化。3、GdCl和DTPA-B反应后，用G-10凝胶层析法去除游离的Gd离子。4、单克隆抗体CL与cDTPA偶联，并用超速离心法除去游离的DTPA，将CL-DTPA偶合物标记Gd。5、将动物分为三组：预定位组、抗体对照组和Gd-DTPA组。预定位组，在第一天尾静脉注射生物素化单抗(McAb-B)，24小时后腹腔注射Av和SA，48 小时尾静脉注射Gd-DTPA-B。抗体对照组和Gd-DTPA组则在第三天，即预定位组的首次注射后48小时，尾静脉分别注射McAb-Gd-DTPA和 Gd-DTPA。所有动物均进行平扫，注射Gd造影剂增强后20分钟、2小时、8小时及24小时5次扫描，测定各时间点信号强度及背景噪声标准差。结果：1、CL单克隆抗体在生物素化后，每个抗体可结合11-23个生物素分子，结合12个时，抗体活性高达95％。2、应用G-10凝胶层析法可去除Gd-DTPA-B中所含的游离Gd离子。3、预定位法对肿瘤有特异性增强作用，注射Gd-DTPA-B 2小时后，只有肿瘤组织有明显强化作用，而肌肉组织则无强化作用。在注射 Gd－DTPAB 20分钟，肿瘤信号强度明显升高，以后呈缀慢下降趋势，在24小时后仍可见到有差别。4、预定位法有信号放大作用，其特异性信号升高幅度(强化率)约为43％， McAbodoTPA对肿瘤亦有特异性增强作用，但其增强幅度较低，在24 ’J＼时时其信号升高门．9％。据此预定位法强化率为抗体直接标记法的 2．4 倍。5、与直接标记单抗相比，预定位法提高了增强后对比度噪声比，增强后各时间分别是平扫的5．7、4．2、4．8、4．3倍。而抗体对照组在24 ，J’ 时最大时仅为平扫的2．4倍。结论：预定位法对荷人大肠癌裸鼠肿瘤有特异性增强作用和信号放大作用，对提高瘤靶Gd3”的选择性浓集，具有显著性促进作用;优于传统的抗体直接标记法。可为Gd标记的单克隆抗体磁共振靶向诊断提供新途径。

关键词：预定位生物素-亲和素系统磁共振成像大肠癌 Gd

超声诊断以外阴包块为临床表现的左髂静脉受压1例

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中国超声医学杂志 2018年第6期34卷 547-548页

作者：来利娟柴青芬中国人民解放军第一五三中心医院超声科

患者女,31岁。因发现"右侧大阴唇无痛性包块4个月"就诊,4个月前无明显诱因出现右侧大阴唇包块,患者平卧时外阴未见包块,下蹲用力时包块逐渐增大,质软,无红肿压痛,与周围界限清晰,起立后包块逐渐消失。外院超声提示:腹股沟疝。为进一步... 详细信息

患者女,31岁。因发现"右侧大阴唇无痛性包块4个月"就诊,4个月前无明显诱因出现右侧大阴唇包块,患者平卧时外阴未见包块,下蹲用力时包块逐渐增大,质软,无红肿压痛,与周围界限清晰,起立后包块逐渐消失。外院超声提示:腹股沟疝。为进一步诊断来我院复查超声:患者取截石位,暴露外阴,浅表超声可见右侧大阴唇皮下探及迂曲走行无回

关键词：回声带髂总静脉血流信号声像图表现髂静脉无回声区超声表现静脉血流均质高回声静脉回流疝内容物

应用生物素-亲和素预定位技术对荷人大肠癌裸鼠模型MR免疫显像的实验研究

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中华放射学杂志 2001年第12期35卷 941-946页

作者：柴青芬黄其鎏许乙凯刘岘吴元魁第一军医大学南方医院影像中心广州博士研究生510515

目的　探索抗体生物素化的条件、MR预定位增强方法和增强特点 ,以达到提高MR免疫成像敏感性的目的。方法　 (1)将抗癌胚抗原 (CEA)单克隆抗体CL-3 和生物素酯 (NHS LS biotin) ,按 1/ 30～ 5 0摩尔比 ,在碱性条件下活化。 (2 )GdCl3 和... 详细信息

目的　探索抗体生物素化的条件、MR预定位增强方法和增强特点 ,以达到提高MR免疫成像敏感性的目的。方法　 (1)将抗癌胚抗原 (CEA)单克隆抗体CL-3 和生物素酯 (NHS LS biotin) ,按 1/ 30～ 5 0摩尔比 ,在碱性条件下活化。 (2 )GdCl3 和二乙三胺五乙酸生物胞素 (diethylenetriaminepentaaceticacid biocyin ,DTPA B)反应后 ,用G 10凝胶层析法去除游离的Gd3 + 离子。 (3)将动物分为3组 :预定位组 ,抗体对照组和Gd DTPA组。进行平扫 ,注射Gd对比剂增强后 2 0min、2h、8h及 2 4h ,共 5次扫描 ,测定各时间点肿瘤信号强度。结果　 (1)CL-3 单克隆抗体在生物素化后 ,每个抗体可结合 11～ 2 3个生物素分子 ,抗体活性高达 94 9%。 (2 )预定位法对肿瘤有特异性增强作用 ,在注射钆二乙三胺五乙酸生物素 (gadolinium diethylenetriaminepentaaceticacid biotin ,Gd DTPA Bt) 2 0min ,肿瘤信号强度明显升高 ,以后呈缓慢下降趋势 ,在 2 4h后仍可见到有差别。 (3)预定位法有信号放大作用 ,强化率为抗体直接标记法的 2 4倍。结论　预定位法对荷人大肠癌裸鼠肿瘤有特异性增强作用和信号放大作用 ,优于传统的抗体直接标记法。

关键词：放射免疫检测磁共振成像结肠肿瘤动物实验

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磁共振免疫成像的研究现状

影像诊断与介入放射学 1999年第4期8卷 241-243页

作者：柴青芬广州第一军医大学南方医院影像中心 510515

单克隆抗体问世以来,由于它具有高度的组织特异性,能与相应抗原发生特异性结合,已被用于实验及临床研究的各个方面,用单克隆抗体标记生物素、酶、放射性核素、造影剂及其它物质可用于疾病的诊断,用单抗标记放射性抗核素及药物则可用于... 详细信息

单克隆抗体问世以来,由于它具有高度的组织特异性,能与相应抗原发生特异性结合,已被用于实验及临床研究的各个方面,用单克隆抗体标记生物素、酶、放射性核素、造影剂及其它物质可用于疾病的诊断,用单抗标记放射性抗核素及药物则可用于肿瘤的治疗,称之为靶向诊断和治疗。由于放射免疫成像是利用闪烁成像技术,不能清楚显示肿瘤及邻近组织解剖结构,分辨率不高;并且放射性同位素在体内停留过久危害身体,而MRI具有很高的软组织分辨率,能多方向切面扫描,能清楚显示软组织,如将抗体与MRI造影剂结合,则可提高其诊断特异性。

关键词： NMR 免疫成像原理方法局限性

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胎儿动脉导管狭窄超声心动图诊断分析

中华实用诊断与治疗杂志 2016年第8期30卷 769-771页

作者：柴青芬解放军第153医院特诊科郑州455000

目的探讨超声心动图诊断胎儿动脉导管狭窄的价值。方法孕32~38周孕妇常规产科超声检查发现胎儿右心增大伴三尖瓣反流58例,进一步行胎儿超声心动图检查,于动脉导管横断面、三血管气管切面和动脉导管弓切面观察导管形态,测量导管内径及血... 详细信息

目的探讨超声心动图诊断胎儿动脉导管狭窄的价值。方法孕32~38周孕妇常规产科超声检查发现胎儿右心增大伴三尖瓣反流58例,进一步行胎儿超声心动图检查,于动脉导管横断面、三血管气管切面和动脉导管弓切面观察导管形态,测量导管内径及血流频谱。结果超声诊断胎儿动脉导管狭窄6例,均表现右心明显增大,三尖瓣中-重度反流,三尖瓣最大反流速度3.5~4.5m/s,最大压差(maximum transprosthetic pressure gradient,MTPG)49~81mm Hg;胎儿动脉导管呈弯曲或折角现象,管腔细窄,内径1.5~2.5 mm,收缩期峰值血流速度1.8~3.2 m/s,MTPG 13~41mm Hg,舒张期血流速度0.4~2.0m/s,MTPG 0.64~16.00mm Hg;胎儿出生后7d^3个月复查心脏超声,2例三尖瓣反流消失,4例仅有少量反流,心脏大小、形态均恢复正常。结论胎儿超声心动图可显示动脉导管形态和血流异常,较早发现胎儿动脉导管狭窄,评估胎儿风险,对提高围产儿安全有重要价值。

关键词：动脉导管狭窄胎儿超声

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磁共振靶向对比剂的研究进展

国外医学（临床放射学分册） 2000年第5期23卷 286-290页

作者：柴青芬许乙凯中国人民解放军第一军医大学南方医院影像中心

MR靶向对比剂是MR顺磁性或超顺磁性对比剂和特定的载体结合,能够特异地靶向一定的组织或器官,具有高度选择性和特异性,能够确定病变性质。其种类按磁性物质可分为顺磁性或超顺磁性对比剂,载体种类有单克隆抗体、受体蛋白、多肽、多聚糖... 详细信息

MR靶向对比剂是MR顺磁性或超顺磁性对比剂和特定的载体结合,能够特异地靶向一定的组织或器官,具有高度选择性和特异性,能够确定病变性质。其种类按磁性物质可分为顺磁性或超顺磁性对比剂,载体种类有单克隆抗体、受体蛋白、多肽、多聚糖、脂质体、细胞等,不同载体将对比剂靶向目的组织和器官后,呈现不同的病灶和实质器官的对比。本文主要综述肝脏、淋巴结、胰腺、神经组织、肿瘤等的MR靶向对比剂的应用研究。

关键词：靶向对比剂磁共振成像研究进展

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成人卵圆孔未闭超声检查及右心声学造影分析

中华医学杂志 2017年第43期97卷 3380-3383页

作者：孔学军柴青芬郭科赵艳方王玉恒解放军第三七一医院特诊科河南新乡453000 解放军第一五三医院特诊科

目的通过对成人卵圆孔未闭患者右心声学造影进行分析，了解卵圆孔未闭与隐源性卒中的关系。方法回顾性收集2012年3月至2017年3月解放军第三七一医院经食管超声诊断成人卵网孔未闭46例患者的临床资料，根据彩色多普勒分流束的方向及色彩... 详细信息

目的通过对成人卵圆孔未闭患者右心声学造影进行分析，了解卵圆孔未闭与隐源性卒中的关系。方法回顾性收集2012年3月至2017年3月解放军第三七一医院经食管超声诊断成人卵网孔未闭46例患者的临床资料，根据彩色多普勒分流束的方向及色彩明亮程度，分为明显左向右分流组（A组），微弱左向右分流组（B组）和双向分流组（C组）3组。采用10ml手振生理盐水方法行右心声学造影，计算右向左分流（RLS）的分级。结果A组17例，右心声学造影4例（23．5％）出现有向左分流，均为1级分流，13例（76．5％）无右向左分流；B组20例，全部（100％）出现右向左分流，其中5例（25％）1级分流，15例（75％）2—3级分流；C组9例，全部（100％）出现右向左分流，其中2例（22．2％）1级分流，7例（77．8％）2—3级分流。右心声学造影无右向左分流患者左心房前后径[（4．8±0．6）cm]比有右向左分流患者左心房[（3．6±0．5）cm]明显增大（P=0．000）。结论成人卵网孔未闭患者，彩色多普勒左向右分流明显、左心房增大者，声学造影右向左分流少；微弱左向有分流及双向分流、左心房不大者往往右向左分流较多，容易在一定条件下发生矛盾性栓塞，临床上更应该予以重视。

关键词：卵圆孔未闭超声检查造影脑卒中

主动脉无缘的房间隔缺损封堵术后封堵器形态改变的研究

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重庆医学 2014年第13期43卷 1552-1554页

作者：柴青芬殷利平阮伟丽韩芳芳河南平顶山解放军第一五二医院特检科 467000 河南省郑州市第三人民医院内科 450000

目的研究主动脉无缘的房间隔缺损在封堵器置入后随时间变化封堵器形状改变,以及对主动脉壁和心房的影响。方法对成功封堵的主动脉无缘的房间隔缺损患者85例,观察置入即刻、术后1、3、6个月大动脉短轴切面封堵器的形状,以及在主动脉侧、... 详细信息

目的研究主动脉无缘的房间隔缺损在封堵器置入后随时间变化封堵器形状改变,以及对主动脉壁和心房的影响。方法对成功封堵的主动脉无缘的房间隔缺损患者85例,观察置入即刻、术后1、3、6个月大动脉短轴切面封堵器的形状,以及在主动脉侧、中部和后部的厚度,左、右房伞对心房和主动脉壁的关系。结果封堵器在主动脉侧、中部和后部的厚度明显下降,分别从(18.97±4.70)mm、(15.62±4.22)mm、(15.92±3.90)mm下降至(13.80±2.20)mm、(12.36±2.30)mm、(12.29±2.38)mm,差异有统计学意义(P<0.01)。在置入即刻显示,主动脉侧封堵器形状呈张开形状,环抱主动脉壁;术后6个月,主动脉侧张开形状有32%(27/85)变为闭合形状,其余仍然为张开形状。10例伞盘与心房壁和主动脉壁以关系由刚置入时的偶尔接触型,变为间断压迫型,4例右盘伞对心房壁和主动脉壁从接触型变为间断压迫型。6例左盘伞对心房壁和主动脉壁从接触型到间断压迫型。结论封堵器随着厚度变薄,在主动脉侧形状由张开形状变为紧贴形状,可能造成主动脉和心房壁的压迫。

关键词：房间隔缺损超声心动描记术封堵

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房间隔膨出瘤的诊断与治疗现状

人民军医 2021年第10期64卷 1018-1020页

作者：刘超柴青芬梁栋联勤保障部队第988医院超声科河南郑州450042 联勤保障部队第988医院感染科河南郑州450042

房间隔膨出瘤(ASA)是一种少见的房间隔发育异常,人群发生率为1.0%~2.2%。根据其形成机制可将ASA分为原发性与继发性两种;按累及范围可分为Ⅰ型或Ⅱ型。ASA在儿童发病率相对较高,老年人发生ASA可能与房间隔结缔组织黏液样变性有关。ASA... 详细信息

房间隔膨出瘤(ASA)是一种少见的房间隔发育异常,人群发生率为1.0%~2.2%。根据其形成机制可将ASA分为原发性与继发性两种;按累及范围可分为Ⅰ型或Ⅱ型。ASA在儿童发病率相对较高,老年人发生ASA可能与房间隔结缔组织黏液样变性有关。ASA缺乏特征性的临床症状和体征,目前尚缺乏业内公认的诊断标准;其常规临床诊断方法主要为超声心动图。该文简要介绍了ASA的临床分型、诊断标准、诊断方法和治疗措施相关的研究进展。

关键词：房间隔膨出瘤卵圆孔未闭诊断治疗