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棉花抗枯萎病相关ERF-B3亚组转录因子的克隆与表达

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西北植物学报 2013年第12期33卷 2375-2381页

作者：何兰兰柴蒙亮韩泽刚赵曾强张薇石河子大学农学院新疆石河子832000 石河子大学生命科学学院新疆石河子832000

以拟南芥ERF-B3亚组转录因子的AP2/ERF结构域为探针,利用NCBI中的棉花(Gossypium hirsutum)EST数据库,通过电子克隆结合RT-PCR方法,从枯萎病菌诱导后的高抗枯萎病品种‘中棉所12’克隆到1个与抗枯萎病相关的ERF-B3亚组转录因子基因GhB30... 详细信息

以拟南芥ERF-B3亚组转录因子的AP2/ERF结构域为探针,利用NCBI中的棉花(Gossypium hirsutum)EST数据库,通过电子克隆结合RT-PCR方法,从枯萎病菌诱导后的高抗枯萎病品种‘中棉所12’克隆到1个与抗枯萎病相关的ERF-B3亚组转录因子基因GhB301。序列分析结果显示,GhB301基因cDNA全长593bp,开放阅读框384bp,编码127个氨基酸,含有一个保守的AP2/ERF结构域。实时荧光定量PCR检测该基因的表达显示,枯萎病菌诱导后,GhB301基因在棉花根中、抗病品种中优势表达;在乙烯、水杨酸、干旱、低温及高盐的诱导下表达量均发生变化。研究结果表明,GhB301基因可能参与了棉花对病原菌、激素及非生物胁迫的应答反应。

关键词：棉花 ERF—B3转录因子枯萎病菌基因克隆表达分析

枯萎病菌诱导感、抗陆地棉品种的转录因子表达变化

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作物学报 2015年第2期41卷 228-239页

作者：韩泽刚赵曾强何兰兰柴蒙亮李会会张薇石河子大学农学院新疆石河子832000 石河子大学生命科学学院新疆石河子832000

以陆地棉抗病品种中棉所12和感病品种新陆早7号为材料,利用Solexa高通量测序技术调查枯萎病菌诱导后不同时间感、抗陆地棉品种转录因子家族及转录因子的表达情况。结果表明,枯萎病菌诱导后,抗病品种中棉所12有39个转录因子家族的433个... 详细信息

以陆地棉抗病品种中棉所12和感病品种新陆早7号为材料,利用Solexa高通量测序技术调查枯萎病菌诱导后不同时间感、抗陆地棉品种转录因子家族及转录因子的表达情况。结果表明,枯萎病菌诱导后,抗病品种中棉所12有39个转录因子家族的433个转录因子在至少一个比对组中表达活性发生变化;感病品种新陆早7号则有52个转录因子家族的588个转录因子在至少一个比对组中表达活性发生变化。新陆早7号对枯萎病菌响应的转录因子及转录因子家族的数目明显多于中棉所12,且2个品种的下调基因数目均多于上调基因。随着枯萎病菌诱导后时间延长,两品种对枯萎病菌诱导响应的转录因子家族及转录因子数量均呈现先增加后降低的变化趋势,中棉所12在枯萎病菌诱导后6 h达最多,而新陆早7号在诱导后3 h达最多。在6个比对组中,表达活性均发生变化的重叠转录因子,中棉所12中有9个,隶属于6个转录因子家族;新陆早7号中有31个,隶属于17个转录因子家族。不同抗病性品种对枯萎病的响应有较强的品种特异性,除37个共有的转录因子家族外,2个转录因子家族是中棉所12所特有,15个转录因子家族是新陆早7号所特有。

关键词：陆地棉枯萎病 Solexa测序转录因子

应用Solexa测序技术分析棉花不同抗病品种的数字表达谱

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核农学报 2015年第4期29卷 651-662页

作者：韩泽刚赵曾强何兰兰柴蒙亮李会会张薇石河子大学农学院新疆石河子832000 石河子大学生命科学学院新疆石河子832000

棉花枯萎病是一种危害严重的世界性病害,构建棉花枯萎病不同抗病品种的基因表达谱将为进一步研究棉花抗枯萎病的分子调控机制及筛选抗枯萎病相关基因奠定基础。本研究选用高抗枯萎病的陆地棉品种中棉所12和高感枯萎病的陆地棉品种新陆早... 详细信息

棉花枯萎病是一种危害严重的世界性病害,构建棉花枯萎病不同抗病品种的基因表达谱将为进一步研究棉花抗枯萎病的分子调控机制及筛选抗枯萎病相关基因奠定基础。本研究选用高抗枯萎病的陆地棉品种中棉所12和高感枯萎病的陆地棉品种新陆早7号为材料,利用Solexa高通量测序技术分析棉花幼苗根部组织中的基因表达情况。Solexa高通量测序后构建了多达350万个reads的标签文库,根据已知序列信息,显著差异表达基因1 080个,其中上调基因302个,下调基因778个。基因功能分析表明,已注释的显著差异表达基因可划分为分子功能、生物过程和细胞组件3个功能注释本体,并进一步细分为37个功能类别。鉴定出112条代谢通路,注释了1 238个显著差异表达基因,共涉及氨基酸代谢、多糖的生物合成和代谢、脂类代谢、能量代谢及信号转导等方面。在植物激素信号转导通路分析中,涉及到26个已知功能基因,4个基因编码AP2/ERF转录因子,4个基因与LRR类受体丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶或蛋白激酶有关,5个基因与蛋白磷酸酶2C有关,而这些基因都参与植物的抗病反应。随机抽取5个基因进行实时荧光定量PCR验证,其结果与测序结果一致。本研究初步揭示了棉花枯萎病抗感品种在转录组水平上的表达差异,获得了大量差异表达基因。

关键词：陆地棉枯萎病 Solexa 基因表达谱

棉花抗枯萎病相关GhB301基因对烟草的遗传转化及功能分析

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新疆农业科学 2015年第4期52卷 589-594页

作者：何兰兰柴蒙亮韩泽刚赵曾强张薇石河子大学农学院新疆石河子832000 石河子大学生命科学学院新疆石河子832000

【目的】ERF是乙烯信号传导途径中的重要转录因子,在植物与病原菌互作中发挥着重要的调控作用。棉花抗枯萎病相关Gh B301基因是从棉花中获得的ERF-B3亚组基因,探索该基因在烟草异位表达后的功能,为进一步研究其在棉花抗枯萎病中的功能... 详细信息

【目的】ERF是乙烯信号传导途径中的重要转录因子,在植物与病原菌互作中发挥着重要的调控作用。棉花抗枯萎病相关Gh B301基因是从棉花中获得的ERF-B3亚组基因,探索该基因在烟草异位表达后的功能,为进一步研究其在棉花抗枯萎病中的功能奠定基础。【方法】以p PZP35S表达载体为基础,构建Gh B301的过表达载体;采用农杆菌介导法转化烟草并获得转基因植株。【结果】经卡那霉素筛选、PCR和RT-PCR检测,获得3株转基因阳性植株;q PCR分析显示,转基因阳性植株中部分病程相关蛋白基因的表达量较野生型明显升高。【结论】棉花抗枯萎病相关基因Gh B301在烟草中异位表达后可能会通过增强部分病程相关蛋白基因的表达来提高植株抗病性。

关键词： GhB301基因遗传转化病程相关蛋白基因实时荧光定量PCR

海岛棉抗枯萎病相关GbNPR1基因的克隆及其表达分析

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生物技术 2014年第2期24卷 5-11页

作者：柴蒙亮何兰兰韩泽刚赵曾强张薇石河子大学生命科学学院新疆石河子832003 石河子大学农学院新疆石河子832003

目的:克隆海岛棉GbNPR1基因并研究该基因在抗病及抗病信号传导中的功能。方法:根据已报道的棉花NPR1基因序列设计1对特异引物,利用RT-PCR从新海21号克隆GbNPR1基因并对其序列进行生物信息学分析;通过实时定量PCR技术检测海岛棉经枯萎病... 详细信息

目的:克隆海岛棉GbNPR1基因并研究该基因在抗病及抗病信号传导中的功能。方法:根据已报道的棉花NPR1基因序列设计1对特异引物,利用RT-PCR从新海21号克隆GbNPR1基因并对其序列进行生物信息学分析;通过实时定量PCR技术检测海岛棉经枯萎病菌侵染、水杨酸和乙烯诱导后该基因的表达特性。结果:GbNPR1基因编码587个氨基酸,与可可树中NPR1基因编码的氨基酸同源性最高(89.61%),其蛋白含有保守的BTB/POZ、ANK和NPR1_like_C结构域;枯萎病菌侵染,水杨酸和乙烯诱导均可使GbNPR1明显上调表达,枯萎病菌侵染3h,水杨酸和乙烯诱导2h表达量最高。结论:GbNPR1基因在棉花抵御枯萎病菌侵染及植物抗病信号转导过程中起一定作用。

关键词：海岛棉 GbNPR1 枯萎病菌基因克隆实时定量PCR

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不同群体血液标本乙肝检测结果分析

卫生职业教育 2021年第2期39卷 124-125页

作者：柴蒙亮王小许吕震江岑岑韩冬皖西卫生职业学院安徽六安237000 六安市红十字中心血站安徽六安232000

目的分析2017—2018年六安市无偿献血者乙肝感染情况,确定低危献血人群,提高血液质量,确保输血安全。方法对2017—2018年六安市52 620名无偿献血者乙肝检测结果进行回顾性分析,并对其性别、婚姻状况、职业及教育程度等资料进行分析。结... 详细信息

目的分析2017—2018年六安市无偿献血者乙肝感染情况,确定低危献血人群,提高血液质量,确保输血安全。方法对2017—2018年六安市52 620名无偿献血者乙肝检测结果进行回顾性分析,并对其性别、婚姻状况、职业及教育程度等资料进行分析。结果六安市52 620人份血液标本共检出270份乙肝阳性,阳性率0.51%。已婚与未婚、不同职业、不同受教育程度的乙肝阳性率均有显著性差异(P<0.05)。结论 2017—2018年六安市无偿献血者乙肝阳性率呈下降趋势,已婚高于未婚,学生阳性率最低,农民工阳性率最高,教育程度越高阳性率越低。

关键词：六安市无偿献血者乙肝阳性率血液标本

2011～2013年六安市无偿献血者梅毒检测结果分析

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临床输血与检验 2015年第3期17卷 268-269页

作者：徐曙光高绪芝柴蒙亮安徽省六安市红十字中心血站 237000

梅毒是由梅毒螺旋体（Treponema pallidum,TP）感染引起的一种慢性、全身性的传染病,是我国法定报告传染病及重点监测性病之一,主要经性接触、血液传播和垂直传播,危害性极大。据WHO估计,全球每年约有1200万新发病例,主要集中在南亚、... 详细信息

梅毒是由梅毒螺旋体（Treponema pallidum,TP）感染引起的一种慢性、全身性的传染病,是我国法定报告传染病及重点监测性病之一,主要经性接触、血液传播和垂直传播,危害性极大。据WHO估计,全球每年约有1200万新发病例,主要集中在南亚、东南亚和非洲。近些年来,我国梅毒的发生率也逐渐上升,发病地区不断扩大,危害日益严重。

关键词：六安市无偿献血者梅毒阳性率

棉花抗枯萎病相关转录因子基因GhERFB101的克隆与表达分析

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华北农学报 2015年第1期30卷 66-72页

作者：韩泽刚赵曾强何兰兰柴蒙亮李会会张薇石河子大学农学院新疆石河子832000 石河子大学生命科学学院新疆石河子832000

为了探究ERF转录因子家族与棉花枯萎病抗性之间的关系,也为海岛抗枯萎病品种的选育工作提供新的基因资源,从Solexa高通量测序技术建立的棉花基因表达谱中筛选探针序列,通过电子克隆结合RT-PCR技术从高抗枯萎病的棉花品种中棉所12中克隆... 详细信息

为了探究ERF转录因子家族与棉花枯萎病抗性之间的关系,也为海岛抗枯萎病品种的选育工作提供新的基因资源,从Solexa高通量测序技术建立的棉花基因表达谱中筛选探针序列,通过电子克隆结合RT-PCR技术从高抗枯萎病的棉花品种中棉所12中克隆到一个新的ERF-B1亚组转录因子基因,命名为Gh ERFB101(Gen Bank:KF850521)。序列分析表明,该基因开放阅读框738 bp,编码245个氨基酸,含有一个保守的AP2/ERF结构域,在进化上与拟南芥At ERF11的亲缘关系最近。实时荧光定量PCR分析显示,枯萎病菌诱导后,Gh ERFB101基因在抗病品种根中的表达量呈现下降趋势;而在感病品种中,该基因呈上调表达,随着病菌处理后时间延长,其表达量呈现先增加后降低的变化趋势,在病菌处理后12 h表达量达到最大,在48 h下降到最低。乙烯和茉莉酸诱导后,该基因表达量均呈现明显的先增加后降低的变化趋势,在乙烯处理后2 h基因的表达量达到最大;茉莉酸则在处理后1 h基因的表达量达到最大;而水杨酸诱导后基因的变化幅度不大;推测该基因可能通过茉莉酸、乙烯信号传导途径参与对枯萎病菌的防御反应。

关键词：棉花 ERF-B1转录因子枯萎病菌基因克隆表达分析

后疫情时代我国卫生人力资源供求预测的实证研究

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成都师范学院学报 2020年第8期36卷 109-116页

作者：王小许蔡文伯柴蒙亮皖西卫生职业学院思政部安徽六安237000 皖西卫生职业学院临床医学系安徽六安237000 石河子大学师范学院新疆石河子832000

加快补齐卫生人力资源供求中的短板和弱项是我国在后疫情时代的主要战略举措。采用灰色预测模型预测我国医学院校毕业生规模和我国卫生技术人员规模,可以探明2021-2030年我国卫生人才资源的供求状况,为制定卫生人才队伍培养发展规划提... 详细信息

加快补齐卫生人力资源供求中的短板和弱项是我国在后疫情时代的主要战略举措。采用灰色预测模型预测我国医学院校毕业生规模和我国卫生技术人员规模,可以探明2021-2030年我国卫生人才资源的供求状况,为制定卫生人才队伍培养发展规划提供依据。研究显示:从总供给和有效供给角度来看,2021-2030年我国卫生人力资源供给与需求不匹配,人才过剩与人才缺口并存,存在“假过剩”现象。后疫情时代我国卫生人力资源工作的重点不应放在扩大医学院校招生规模上,而应全力延续疫情期间“尊医重卫、回归专业”的医教研环境,不断完善我国卫生人才培养体系,确保卫生人才质量,调整专业结构、培养层次,并着重完善我国医疗行业人才流动机制,引进人才、留住人才,全面提高医疗机构工作人员的整体质量。

关键词：人才供求人才预测卫生人力资源后疫情时代