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牡丹叶霉病菌LAMP检测方法的建立及防治药剂筛选研究

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牡丹叶霉病菌LAMP检测方法的建立及防治药剂筛选研究

作者：柴秋源河南科技大学

学位级别：硕士

叶霉病是牡丹上发病最严重的病害之一,常造成牡丹生长势减弱、花色衰退、牡丹籽油产量减少等,严重影响牡丹产业的快速发展。植物病害的早期诊断对于实施综合防治具有重要意义,因此,建立一种叶霉病菌(Cladosporium paeoniae)的快速检测方... 详细信息

叶霉病是牡丹上发病最严重的病害之一,常造成牡丹生长势减弱、花色衰退、牡丹籽油产量减少等,严重影响牡丹产业的快速发展。植物病害的早期诊断对于实施综合防治具有重要意义,因此,建立一种叶霉病菌(Cladosporium paeoniae)的快速检测方法,实现病害发生初期的早发现、早诊断,对于牡丹叶霉病的治理具有重要意义。本文以牡丹叶霉病菌的内转录间隔区(ITS)为靶标序列,建立能够快速、简单鉴定牡丹叶霉病菌的环介导等温扩增(LAMP)方法;通过涂布平板法和菌丝生长速率法开展7种杀菌剂对病菌生长发育各阶段的抑制活性,进一步采用喷雾法测定药剂对牡丹叶霉病的田间防效,为牡丹叶霉病的综合防治提供备选药剂。以牡丹叶霉病菌ITS序列中的特异性片段作为目的序列,设计出三组特异性引物,使用其中的一组F1/B1、FIP/BIP进行后续试验。建立的LAMP反应体系,能够特异性检测牡丹叶霉病菌。优化反应体系各个组分后,建立的叶霉病菌的LAMP反应检测最终体系(25μL)为:2.5μL 10×Thermo Pol Buffer、0.16 U/μL Bst DNA聚合酶、1 mmol/L d NTP、8 mmol/L Mg SO、0.2μmol/L F3/B3、0.6mol/L甜菜碱、1.6μmol/L FIP/BIP、0.15 mmol/L HNB、1μL模板DNA,dd HO补至25μL。反应温度设置为64℃,反应总时间是60 min。且该检测体系具有较高的灵敏度,可以检测到的DNA最低限度为1 pg,比普通PCR灵敏100倍。对于田间疑似病叶的检测中,LAMP检测结果与室内镜检结果相一致,表明本试验建立的LAMP体系具有较高的准确率。本LAMP检测体系可用于牡丹叶霉病的早期检测以及病害监测预警。室内进行7种杀菌剂对牡丹叶霉病菌生长的抑制作用。结果表明:7种杀菌剂对牡丹叶霉病菌四个发育阶段均有一定的抑制作用,但对病菌的抑制效果存在差异。咪鲜胺和氟唑菌酰羟胺对叶霉病菌的四个生长发育阶段均有极强的抑制作用,咪鲜胺对孢子萌发、芽管伸长、菌丝生长和产孢的EC分别为0.0176、0.0083、0.0756和0.0121μg/m L,氟唑菌酰羟胺对孢子萌发、芽管伸长、菌丝生长和产孢的EC分别为0.1134、0.0047、0.6990和0.0172μg/m L;氟啶胺对病菌芽管伸长和产孢的抑制作用较强,EC分别为0.0106、0.0183μg/m L,但对病菌的孢子萌发和菌丝生长阶段没有很好的抑制作用;戊唑醇对菌丝生长和产孢的抑制作用较强,EC分别为0.3166、0.0277μg/m L,但对其他阶段的抑制作用较差。氟吡菌酰胺、丙硫菌唑和异菌脲对叶霉病菌生长发育的四个阶段的抑制作用均较差。田间试验结果表明,7种药剂各浓度处理均对叶霉病有很好的田间防效,病情指数显著降低,其中氟唑菌酰羟胺对牡丹叶霉病的防治效果最好,对A地的防效均在50%以上,70 g/亩氟唑菌酰羟胺处理后对叶霉病的防效达到90.86%;戊唑醇对叶霉病的防治效果较好,8 g/亩和10 g/亩处理对叶霉病的防治效果也均在50%以上;咪鲜胺的防治效果也较好,各浓度处理下防效均大于45%。其他药剂对叶霉病均有一定的防治效果,且各药剂处理对牡丹叶片均无明显的损伤现象,说明药剂对牡丹叶片是安全的。

关键词：牡丹叶霉病牡丹叶霉病菌环介导等温扩增(LAMP) 毒力测定杀菌剂病害防治

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饲粮添加二甲酸钾对幼草鱼免疫功能的影响

饲粮添加二甲酸钾对幼草鱼免疫功能的影响

作者：柴秋萍四川农业大学

学位级别：硕士

本试验以幼草鱼为研究对象,旨在研究二甲酸钾对幼草鱼(Ctenopharyngodon idella)免疫功能的影响及其机制。选取均重为5.73±0.01 g的幼草鱼,随机分为6个处理,饲喂含有不同水平二甲酸钾(0.0、1.5、3.0、4.5、6.0和7.5 g/kg)饲粮70d后,各... 详细信息

本试验以幼草鱼为研究对象,旨在研究二甲酸钾对幼草鱼(Ctenopharyngodon idella)免疫功能的影响及其机制。选取均重为5.73±0.01 g的幼草鱼,随机分为6个处理,饲喂含有不同水平二甲酸钾(0.0、1.5、3.0、4.5、6.0和7.5 g/kg)饲粮70d后,各处理随机选取48尾鱼,其均重(g)与生长试验末重一致,分别为88.86±4.39、95.95±3.99、102.64±4.87、100.10±4.58、96.80±1.96和90.63±4.89,六个处理共计288尾鱼,进行为期6天的嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)攻毒试验,考察二甲酸钾对幼草鱼免疫功能的影响及其可能机制。结果发现:与对照组相比,饲粮中添加适宜水平的二甲酸钾降低了幼草鱼攻毒后肠炎发病率(P<0.05),这可能与二甲酸钾提高幼草鱼免疫功能有关。进一步研究发现:(1)适宜水平二甲酸钾能够提高幼草鱼肠道髓过氧化物酶(MPO)的活力,降低肠道活性氧(ROS)水平,并提高幼草鱼肠道、头肾和脾脏中免疫活性物质补体C3和C4含量,酸性磷酸酶(ACP)和溶菌酶(LZ)的活力(P<0.05);(2)适宜水平二甲酸钾下调了肠道中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)、干扰素γ2(IFN-γ2)、IL-1β、IL-8、IL-12P35、IL-22、IL-12P40、IL-17D的m RNA水平,与此同时上调了转化生长因子β(TGF-β1)、TGF-β2、IL-4/13A、IL-10和IL-4/13B的m RNA水平;进一步下调了核转录因子κB p65(NF-κB p65)、抑制蛋白κB激酶β(IKKβ)、IKKγ和e IF4E结合蛋白(4E-BP)的m RNA水平,上调核因子κB抑制因子α(IκBα)、雷帕毒素(TOR)和S6激酶1(S6K1)的m RNA水平缓解了炎症反应(P<0.05);同时,适宜水平二甲酸钾下调一氧化氮合酶(i NOS)、NADPH氧化酶2(NOX2)和双氧化酶1(DUOX1)的m RNA水平抑制了吞噬细胞呼吸爆发功能(P<0.05);上调ATP合成酶α亚基(ATP5A1)、ATP合成酶b亚基(ATP5F1)和线粒体细胞色素b(MT-CYB)的m RNA表达水平增强了线粒体氧化磷酸化功能,进而促进了鱼类肠道免疫功能;(3)适宜水平二甲酸钾能够下调头肾和脾脏中IL-2、IL-6、IL-8、IL-1β、IL-12P35、ROR相关孤儿受体γ1(RORγ1)和IL-12P40的m RNA水平,进一步下调了IKKγ,IKKβ和NF-κB p65的m RNA水平及NF-κB p65蛋白质水平,与此同时上调IκBαm RNA水平,缓解了炎症反应;适宜水平二甲酸钾能够下调Th1和Th17细胞分化相关基因T-bet、IFN-γ2、RORγ2、IL-22、TNF-α和IL-17D的m RNA水平,上调头肾和脾脏Th2和Treg细胞分化相关基因IL-4/13A、GATA3结合蛋白(GATA3)、IL-4/13B、TGF-β1、IL-10、TGF-β2和叉头盒蛋白P3(FOXP3)的m RNA水平,进一步下调信号转导和转录激活因子1(STAT1)和STAT4的m RNA水平,上调Janus激酶1(JAK1)、JAK2、JAK3、STAT3b1、STAT3b2、STAT5b和STAT6的m RNA水平以及p-STAT3的蛋白质水平(P<0.05),抑制Th1和Th17细胞的分化,增强了Th2和Treg细胞的分化及相关细胞因子的释放;进一步研究发现,适宜水平二甲酸钾上调了头肾和脾脏中免疫细胞活化基因CD4、组织相容性复合体α(MHCIIα)和MHCIIβ的m RNA的丰度和CD4的表达(P<0.05),促进了CD4免疫细胞活化,进而增强了头肾和脾脏的免疫功能。综上所述,饲粮中添加适宜水平的二甲酸钾能够降低幼草鱼肠炎发病率。疾病抵抗能力增强与二甲酸钾增强了幼草鱼肠道、头肾和脾脏的免疫功能有关。一方面,二甲酸钾通过抑制NF-κB和激活TOR信号途径下调促炎细胞因子和上调抗炎细胞因子的m RNA水平,同时促进线粒体功能和抑制巨噬细胞呼吸爆发功能,进而增强肠道免疫功能;另一方面,饲粮添加的二甲酸钾通过JAK-STATs和NF-κB信号途径影响T细胞分化介导的炎症反应,增强了头肾和脾脏免疫功能。在本试验的条件下,以肠炎发病率、肠道C3含量、头肾和脾脏ACP活力为标识,确定幼草鱼饲粮中二甲酸钾的适宜添加量为3.83、3.86、4.96和5.07 g/kg。

关键词：二甲酸钾幼草鱼免疫器官免疫功能

探究超声引导下臂丛神经阻滞在锁骨骨折治疗手术中的麻醉效果

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大医生 2022年第6期7卷 48-50页

作者：柴秋平单县东大医院山东菏泽274399

目的探讨超声引导下臂丛神经阻滞在锁骨骨折治疗手术中的临床应用效果。方法选取2019年9月至2020年9月单县东大医院收治的60例锁骨骨折患者为研究对象,进行前瞻性分析,按照随机数字表法分为对照组30例与研究组30例,对照组患者应用传统... 详细信息

目的探讨超声引导下臂丛神经阻滞在锁骨骨折治疗手术中的临床应用效果。方法选取2019年9月至2020年9月单县东大医院收治的60例锁骨骨折患者为研究对象,进行前瞻性分析,按照随机数字表法分为对照组30例与研究组30例,对照组患者应用传统臂丛神经盲探操作麻醉,研究组患者应用超声引导下臂丛神经阻滞麻醉,对比麻醉效果。结果研究组患者的麻醉优良率高于对照组,药物使用剂量、并发症发病率均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);研究组患者在手术结束时、气管插管拔管时的心率、收缩压均高于对照组,两组患者气管拔管时的收缩压较手术结束时更高,差异有统计学意义(P<0.05);研究组患者术后12、24 h认知功能评分高于对照组,对照组患者术后12 h、麻醉后24 h的认知功能评分较麻醉前更低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论锁骨骨折患者手术中实施超声引导下臂丛神经阻滞麻醉,有助于促进其血流动力学的指标改善,减少不良反应的发生情况,降低局麻药物使用剂量,改善麻醉效果,具有较好的应用价值。

关键词：神经阻滞麻醉臂丛神经盲探操作超声引导下神经阻滞

河控三角洲水下分流河道砂体储集层构型精细分析——以扶余油田探51区块为例

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石油勘探与开发 2013年第2期40卷 181-187页

作者：赵小庆鲍志东刘宗飞赵华柴秋会中国石油大学(北京)地球科学学院中国石油大学(北京)油气资源与探测国家重点实验室

基于'模式拟合、动态验证'的研究思路,结合密井网区10口取心井、257口井测井资料及近10年的生产动态资料,对松辽盆地扶余油田探51区块泉四段扶余油层三角洲前缘水下分流河道储集层进行分析,探究水下分流河道储集层内部构型单元的空间展... 详细信息

基于'模式拟合、动态验证'的研究思路,结合密井网区10口取心井、257口井测井资料及近10年的生产动态资料,对松辽盆地扶余油田探51区块泉四段扶余油层三角洲前缘水下分流河道储集层进行分析,探究水下分流河道储集层内部构型单元的空间展布特征及识别标志。结果表明:研究区目的层单河道砂体宽度为300～500 m,其识别标志分别为:河道间沉积、邻井砂体高程差异、河道砂体厚度差异、相邻砂体的'厚—薄—厚'组合;单河道砂体内部4级构型界面的倾角为0°～2°。明确了水下分流河道储集层中单河道砂体及单河道砂体内部增生体的测井响应特征及识别方法,建立了研究区目的层水下分流河道砂体的三维构型模型,为全区水下分流河道砂体解剖提供了定量、可靠的地质模式。

关键词：河控三角洲扶余油田储集层构型水下分流河道砂体隔层夹层

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420 kA铝电解槽电热场仿真及实测分析

有色金属设计 2023年第2期50卷 19-21,34页

作者：周小淞柴婉秋贵阳铝镁设计研究院有限公司贵州贵阳550081

文章以有限元分析软件ANSYS为平台,对某420 kA电解槽的电-热场进行了仿真,选取了合适的边界条件,建立了三维电-热场模型,进行模拟分析,并与实测工艺参数进行比对,进一步验证仿真结果,为电解槽内衬保温结构设计和优化电解工艺参数提供参考。

关键词： 420 kA电解槽电热场仿真实测

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对培养高职教师实践能力的思考

教育探索 2008年第12期 89-90页

作者：柴秋黑龙江建筑职业技术学院哈尔滨150001

加快"双师型"师资队伍的培养和建设,强化教师实践能力培养,是提高高职教育教学质量与效益的关键。培养高职教师的实践能力需要采取以下措施:制订规划,统筹安排;制定政策,建立机制;校企合作,共同培养,吸引一批行业和企业的优秀人才充实... 详细信息

加快"双师型"师资队伍的培养和建设,强化教师实践能力培养,是提高高职教育教学质量与效益的关键。培养高职教师的实践能力需要采取以下措施:制订规划,统筹安排;制定政策,建立机制;校企合作,共同培养,吸引一批行业和企业的优秀人才充实教师队伍;建立具有"双师"结构的教师队伍。

关键词：高职教师实践能力培养措施

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公立高校财务资源配置模式研究

山西财经大学学报 2015年第S2期37卷 31-32页

作者：刘辉柴秋艳北京石油化工学院计财处北京102617

目前,国家正逐步推进事业单位分类改革。对属于"公益二类"的公立高校,国家将不再承担全部的投入责任。走入市场,利用其智力资源开拓办学资金渠道是高校的必然选择。在这样的背景下,高校在财务资源的配置上将逐步由"集中"预算模式向"分级... 详细信息

目前,国家正逐步推进事业单位分类改革。对属于"公益二类"的公立高校,国家将不再承担全部的投入责任。走入市场,利用其智力资源开拓办学资金渠道是高校的必然选择。在这样的背景下,高校在财务资源的配置上将逐步由"集中"预算模式向"分级"预算模式过渡,以分解财务压力。

关键词：公立高校资源配置财务管理

肺部联合胃部超声评估等比通气对前列腺癌腔镜手术中喉罩通气的影响

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中国临床研究 2022年第12期35卷 1685-1688页

作者：谢力施韬刘晶晶张加永张勇柴秋琰南京医科大学第四附属医院麻醉科江苏南京210031 南京医科大学附属南京医院(南京市第一医院)麻醉科江苏南京210006

目的肺部超声(LUS)联合胃部超声评估腹腔镜前列腺癌根治术中使用等比通气(ERV)模式对患者肺形态学、胃部充气情况及喉罩通气的影响。方法前瞻性选取2021年6月至2022年5月于南京市第一医院行腹腔镜前列腺癌根治术患者60例,采用随机数字... 详细信息

目的肺部超声(LUS)联合胃部超声评估腹腔镜前列腺癌根治术中使用等比通气(ERV)模式对患者肺形态学、胃部充气情况及喉罩通气的影响。方法前瞻性选取2021年6月至2022年5月于南京市第一医院行腹腔镜前列腺癌根治术患者60例,采用随机数字表法分为ERV组(E组)和常规通气组(C组),每组30例。患者常规静脉麻醉诱导后置入喉罩行机械通气,E组吸气呼气比(I∶E)为1∶1;而C组I∶E为1∶2。观察记录两组患者在麻醉诱导后(T0)、手术30 min(T1)、手术60 min(T2)、手术结束后10 min(T3)的气道峰压(Ppeak)、气道平台压(Pplat)、气道平均压力(Pmean)、呼气末二氧化碳分压(P_(ET)CO_(2))和分钟通气量(MV);同时记录两组患者手术前后的LUS评分以及胃部超声胃窦、胃底横截面积及气道并发症的发生情况。结果E组T1、T2时Ppeak低于C组,Pmean高于C组(P0.05);E组患者LUS评分及肺不张的发生率低于C组(P0.05);两组气道并发症发生率差异无统计学意义(30.0%vs 32.1%,χ^(2)=0.031,P=0.860)。结论在腹腔镜前列腺癌根治术中使用ERV通气模式可降低Ppeak,减少喉罩漏气、肺不张以及LUS评分,同时并未增加胃部充气以及喉罩相关不良并发症的发生率。

关键词：肺部超声胃部超声前列腺癌等比通气喉罩通气

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打造两个基地争创四个一流

企业世界 2003年第4期 36-37页

作者：柴秋明浙江巨化氟化学有限公司企管科科长