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过瘤胃蛋氨酸对牦牛半腱肌肉品质、挥发性风味物质及脂肪酸组成的影响

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畜牧兽医学报 2024年第3期55卷 1102-1114页

作者：左子珍王海波柴志欣符健慧张翔飞罗晓林钟金城青藏高原动物遗传资源保护与利用四川省重点实验室成都610225 四川省青藏高原草食家畜工程技术中心成都610225 四川省草原科学研究院成都611731

旨在探究过瘤胃蛋氨酸对牦牛半腱肌肉品质、挥发性风味物质及脂肪酸组成的影响。选用4岁、体重为(252.79±15.95)kg的健康麦洼公牦牛24头,将其随机分为4组:基础日粮(CON)、基础日粮加5 g·d^(-1)过瘤胃蛋氨酸(RPM1)、基础日粮加10 g·d^... 详细信息

旨在探究过瘤胃蛋氨酸对牦牛半腱肌肉品质、挥发性风味物质及脂肪酸组成的影响。选用4岁、体重为(252.79±15.95)kg的健康麦洼公牦牛24头,将其随机分为4组:基础日粮(CON)、基础日粮加5 g·d^(-1)过瘤胃蛋氨酸(RPM1)、基础日粮加10 g·d^(-1)过瘤胃蛋氨酸(RPM2)和基础日粮加15 g·d^(-1)过瘤胃蛋氨酸(RPM3),预饲10 d,舍饲70 d后屠宰。结果表明,RPM3组脂肪含量显著高于RPM1组与RPM2组(P0.05)。综上所述,日粮添加10 g·d^(-1)的过瘤胃蛋氨酸组牦牛半腱肌中风味丰富度与挥发性风味物质含量最高;日粮添加5 g·d^(-1)过瘤胃蛋氨酸组牦牛半腱肌中脂肪酸含量最高,且分布合理。

关键词：过瘤胃蛋氨酸牦牛半腱肌肉品质挥发性风味物质脂肪酸

TNNI1、TNNI3在麦洼牦牛横纹肌中的表达分析

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华北农学报 2022年第6期37卷 210-218页

作者：向娅钟金城武志娟柴志欣青藏高原动物遗传资源保护与利用四川省、教育部重点实验室四川成都610041

为探索TNNI1、TNNI3在麦洼牦牛横纹肌中的表达模式,选取不同年龄麦洼牦牛臀肌、心肌组织,观察其形态学变化,开展了不同年龄麦洼牦牛TNNI1基因在臀肌组织中的表达趋势及与肌纤维性状的关联分析,同时对TNNI1、TNNI3在心肌中的mRNA和蛋白... 详细信息

为探索TNNI1、TNNI3在麦洼牦牛横纹肌中的表达模式,选取不同年龄麦洼牦牛臀肌、心肌组织,观察其形态学变化,开展了不同年龄麦洼牦牛TNNI1基因在臀肌组织中的表达趋势及与肌纤维性状的关联分析,同时对TNNI1、TNNI3在心肌中的mRNA和蛋白差异表达及蛋白定位进行了相关性分析。结果表明,随着牦牛年龄增长,肌纤维直径及密度存在一定特征性变化,其中肌纤维直径随年龄的增长显著增加,肌纤维密度则发生相反的变化。成年牦牛TNNI1基因在臀肌组织中的mRNA表达水平显著高于犊牛及断奶犊牛,变化趋势具体为成年牛>犊牛>断奶犊牛;且臀肌中TNNI1 mRNA表达水平与肌纤维直径极显著正相关,与肌纤维密度显著负相关。TNNI1在心肌中的mRNA表达水平随牦牛年龄的增大而降低,而TNNI3则表现为先升高后降低的趋势,且TNNI1在犊牛期mRNA表达水平最高,TNNI3则随年龄增长呈上调趋势。TNNI1、TNNI3蛋白在心肌组织中的表达量随牦牛年龄的增长逐渐减小,且TNNI3 mRNA表达量随牦牛年龄的增长逐渐降低,与蛋白表达趋势一致。TNNI1、TNNI3对不同年龄麦洼牦牛肌肉组织的生长发育具有显著调控作用,且在不同年龄牦牛肌肉组织中的表达水平存在差异。

关键词：牦牛 TNNI1 TNNI3 横纹肌 Western Blot 免疫组织化学

检验医学科“四生”临床技能培训模式改革探析

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检验医学与临床 2023年第13期20卷 1975-1977页

作者：柴志欣芮勇宇郑磊陈晶南方医科大学南方医院检验医学科广东广州510515

南方医科大学南方医院对检验医学科“四生”(实习生、进修生、专业型硕士/博士、规范化培训医师)临床技能培训模式进行改革,建设“助学型”微课平台、常用仪器虚拟仿真平台,开展标准化教学、翻转课堂式教学,完善考试题库、签字式考核表... 详细信息

南方医科大学南方医院对检验医学科“四生”(实习生、进修生、专业型硕士/博士、规范化培训医师)临床技能培训模式进行改革,建设“助学型”微课平台、常用仪器虚拟仿真平台,开展标准化教学、翻转课堂式教学,完善考试题库、签字式考核表格及考核方式,通过上述教学改革显著提高了“四生”的实习效果。

关键词：检验医学科四生实习教学改革

过瘤胃蛋氨酸对牦牛半腱肌肉品质、挥发性风味物质及脂肪酸组成的影响

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畜牧兽医学报 2023年

作者：左子珍王海波柴志欣符健慧张翔飞罗晓林钟金城青藏高原动物遗传资源保护与利用四川省重点实验室四川省青藏高原草食家畜工程技术中心四川省草原科学研究院

旨在探究过瘤胃蛋氨酸对牦牛半腱肌肉品质、挥发性风味物质及脂肪酸组成的影响。选用4岁、体重为(252.79 ± 15.95)kg的健康麦洼公牦牛24头，将其随机分为4组：基础日粮(CON)、基础日粮加5 g·d－1过瘤胃蛋氨酸(RPM1)、基础日粮加10 g·... 详细信息

旨在探究过瘤胃蛋氨酸对牦牛半腱肌肉品质、挥发性风味物质及脂肪酸组成的影响。选用4岁、体重为(252.79 ± 15.95)kg的健康麦洼公牦牛24头，将其随机分为4组：基础日粮(CON)、基础日粮加5 g·d－1过瘤胃蛋氨酸(RPM1)、基础日粮加10 g·d－1过瘤胃蛋氨酸(RPM2)和基础日粮加15 g·d－1过瘤胃蛋氨酸(RPM3)，预饲10 d，舍饲70 d屠宰。结果表明，RPM3组脂肪含量显著高于RPM1组与RPM2组(P＜0.05)；RPM1组、RPM2组、RPM3组的粗蛋白含量均显著高于CON组(P＜0.05)。牦牛半腱肌样品中共检验出42种挥发性风味物质，通过相对气味活度值计算发现，CON组、RPM1组、RPM2组和RPM3组关键挥发性风味物质分别有9种、11种、9种和10种，关键挥发性风味物质为牦牛半腱肌提供了独特的肉香与油脂香等；CON组、RPM1组与RPM2组的主要挥发性风味物质为壬醛，而RPM3组的主要挥发性物质为1-辛烯-3-醇；RPM1组的醛类物质含量最高，且具有独特的水果香味与坚果味，RPM2组的醇类与烃类物质的种类最多。四组半腱肌样品中共检测出18种脂肪酸。半腱肌CON组饱和脂肪酸总量显著低于RPM1组和RPM2组(P＜0.05)，其中RPM1组与RPM2组棕榈酸含量显著高于其他组(P＜0.05)，RPM1组二十二碳酸含量显著高于CON组和RPM3组(P＜0.05)；RPM1组单不饱和脂肪酸总量著高于RPM2组与RPM3组(P＜0.05)，其中RPM1组肉豆蔻油酸含量显著低于其他组(P＜0.05)，CON组十七碳烯酸含量显著高于其他组(P＜0.05)，RPM1组二十四碳烯酸含量显著高于RPM2组(P＜0.05)；半腱肌各组间多不饱和脂肪酸总量无差异(P＞0.05)。综上所述，日粮添加10 g·d－1的过瘤胃蛋氨酸组风味丰富度与挥发性风味物质含量最高；日粮添加5 g·d－1过瘤胃蛋氨酸组脂肪酸含量最高，且分布合理。

关键词：过瘤胃蛋氨酸牦牛半腱肌肉品质挥发性风味物质脂肪酸

基于mtDNA COX3基因对西藏特色牦牛群体遗传结构的分析

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草业学报 2023年第9期32卷 231-240页

作者：者玉琦武志娟王吉坤钟金城柴志欣信金伟青藏高原动物遗传资源保护与利用四川省重点实验室四川成都610225 省部共建青稞和牦牛种质资源与遗传改良国家重点实验室西藏拉萨850000 四川省青藏高原草食家畜工程技术中心四川成都610225

为探究西藏特色牦牛群体的遗传多样性、系统进化及亲缘关系,本研究利用PCR和直接测序法分别测定了西藏帕里牦牛、嘉黎牦牛、类乌齐牦牛、工布江达牦牛、斯布牦牛、桑日牦牛、江达牦牛7个群体共140头个体的mtDNA COX3基因蛋白质编码区(C... 详细信息

为探究西藏特色牦牛群体的遗传多样性、系统进化及亲缘关系,本研究利用PCR和直接测序法分别测定了西藏帕里牦牛、嘉黎牦牛、类乌齐牦牛、工布江达牦牛、斯布牦牛、桑日牦牛、江达牦牛7个群体共140头个体的mtDNA COX3基因蛋白质编码区(CDS)序列,利用DNAMAN、DNASP 5.1、MEGA 7.0软件分析了其序列多态性、单倍体多样性,并构建了系统发育树。结果表明,西藏牦牛群体的COX3基因CDS序列长度均为781 bp,共检测获得55个变异位点。在140头个体中共检测出11种单倍型,平均单倍型多样性(H_(d))及核苷酸多样性(P_(i))分别为0.665和0.00480,说明西藏牦牛具有丰富的遗传多样性。西藏7个牦牛群体可分为2大类,类乌齐牦牛单独聚为一类,其余牦牛群体为一类。此外,11种单倍型可分为2个聚类簇,说明西藏牦牛可能存在两个母系起源。西藏7个牦牛群体可划分到家牦牛、原牛和普通牛三大单倍型群体中,其中Hap_2、Hap_3、Hap_4、Hap_6、Hap_7、Hap_8、Hap_10、Hap_11这8个单倍型属于家牦牛支系,Hap_5和Hap_9属于原牛和普通牛支系,Hap_1属于野牦牛支系,说明家牦牛、原牛和普通牛是西藏牦牛的混合母系起源,但受家牦牛影响较大。研究结果旨在为西藏牦牛的演化、遗传多样性以及遗传资源保护和利用提供理论依据。

关键词：西藏牦牛 COX3基因遗传多样性系统进化

miR-138靶向PGC-1α调控牦牛肌内前体脂肪细胞增殖及分化

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畜牧兽医学报 2022年第10期53卷 3434-3447页

作者：冉宏标王会柴志欣王嘉博张明蔡欣钟金城西南民族大学青藏高原动物遗传资源保护与利用四川省/教育部重点实验室成都610041 西南民族大学青藏高原研究院成都610041

旨在分析miR-138在牦牛前体脂肪细胞分化过程中的调控作用。本研究设计合成miR-138 mimics和inhibitor以对细胞进行miR-138过表达及抑制表达,并通过油红O染色分析miR-138对牦牛肌内前体脂肪细胞脂质沉积的影响;利用CCK-8、划痕和流式细... 详细信息

旨在分析miR-138在牦牛前体脂肪细胞分化过程中的调控作用。本研究设计合成miR-138 mimics和inhibitor以对细胞进行miR-138过表达及抑制表达,并通过油红O染色分析miR-138对牦牛肌内前体脂肪细胞脂质沉积的影响;利用CCK-8、划痕和流式细胞技术分析miR-138对细胞增殖的影响;通过对bta-miR-138进行生物信息学分析,筛选其在脂质沉积过程中的相关潜在靶基因;利用RT-qPCR测定miR-138潜在靶基因mRNA表达水平,并通过双荧光素酶报告试验确定靶向关系。结果显示,过表达miR-138后,细胞内脂滴沉积水平显著低于对照(NC)组(P<0.01),而抑制miR-138表达则显著增强脂肪细胞脂质沉积(P<0.01);RT-qPCR结果表明,过表达miR-138可显著抑制脂肪分化标志基因PPARγ和c/EBPα的表达(P<0.01),抑制miR-138则上调PPARγ和c/EBPα表达水平(P<0.05);此外,过表达miR-138后,潜在靶基因PTPN11、CREB1和ADCYAP1R1表达水平显著下调(P<0.05),而PGC-1α和SNAP25表达极显著下调(P<0.01);抑制miR-138后MXLIP和SNAP25表达显著上调(P<0.05),PGC-1α和PTPN11表达极显著上调(P<0.01);CCK-8和划痕试验结果表明,过表达miR-138后24~36 h,细胞增殖活性显著低于对照组(P<0.05),而抑制miR-138则表现为细胞增殖活性增强;流式分析结果显示过表达miR-138后,细胞出现G1-S期阻滞,细胞周期相关基因CCND1、CCNB1和增殖标志基因Ki67的mRNA表达显著降低;生物信息学分析预测获得263个miR-138公共靶基因,KEGG富集结果显示靶基因主要参与“轴突导引”、“胰岛素抵抗”、“胰岛素分泌”及“RNA降解”等通路,GO分析主要富集于“RNA聚合酶Ⅱ启动子对转录的正向调控”、“核染色质”、“染色质DNA结合”和“I型肺细胞分化”等功能;双荧光素酶报告试验结果显示,共转染miR-138 mimics和PGC-1α-Wt-PGL3-basic可显著降低细胞荧光强度(P<0.01)。以上结果表明,miR-138可通过靶向结合PGC-1α3′UTR序列,降低PGC-1α的mRNA表达水平,抑制牦牛肌内前体脂肪细胞分化和脂质沉积,降低细胞增殖活性。本研究为阐明牦牛肉质性状的潜在分子机制提供参考。

关键词：牦牛 miR-138 PGC-1α 前体脂肪细胞增殖分化

西藏特色牦牛mtDNA ND1遗传多样性及系统进化分析

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华北农学报 2023年第6期38卷 201-210页

作者：者玉琦柴志欣武志娟姜辉钟金城信金伟青藏高原动物遗传资源保护与利用四川省重点实验室四川成都610225 西藏自治区农牧科学院畜牧兽医研究所省部共建青稞和牦牛种质资源与遗传改良国家重点实验室西藏拉萨850000 四川省青藏高原草食家畜工程技术中心四川成都610225

旨在通过mtDNA ND1探究6个西藏特色牦牛群体的遗传多样性、系统进化及亲缘关系,为西藏牦牛的遗传多样性、历史演化以及遗传资源保护与利用等提供理论依据。利用PCR和直接测序法分别测定了西藏帕里牦牛、嘉黎牦牛、工布江达牦牛、斯布牦... 详细信息

旨在通过mtDNA ND1探究6个西藏特色牦牛群体的遗传多样性、系统进化及亲缘关系,为西藏牦牛的遗传多样性、历史演化以及遗传资源保护与利用等提供理论依据。利用PCR和直接测序法分别测定了西藏帕里牦牛、嘉黎牦牛、工布江达牦牛、斯布牦牛、江达牦牛、类乌齐牦牛6个群体共95头个体ND1基因蛋白质编码区(CDS)序列,利用DNAMAN、DNASP 5.1、Mega 7.0、Arlequin 3.5.2等软件分析其序列多态性、单倍型多样性、遗传距离等,并构建单倍型网络图及系统发育树。结果表明,西藏牦牛群体ND1基因CDS区序列长度均为956 bp,共检测获得78个变异位点和16种单倍型,平均单倍型多样性(Hd)及核苷酸多样性(Pi)分别为0.670和0.00421,Tajima′s D均为负值;根据群体遗传差异的分子方差分析可知,西藏牦牛群体内的变异程度大于群体间变异;斯布牦牛与嘉黎牦牛之间的分化程度较大,其余大部分群体间的分化程度为中等或较弱。此外,通过聚类分析发现,类乌齐牦牛单独聚为一类,而嘉黎牦牛、工布江达牦牛、斯布牦牛、江达牦牛先聚为一类,然后再与帕里牦牛聚为一大类;16种单倍型可分为2个聚类簇,说明西藏牦牛可能存在2个母系起源;与其他牛种进行聚类分析,发现家牦牛、爪哇野牛和普通牛可能是西藏牦牛的混合母系起源。西藏牦牛遗传多样性十分丰富,其中类乌齐牦牛遗传多样性最丰富,6个牦牛群体存在2个母系起源。

关键词：西藏牦牛 ND1基因遗传多样性系统进化遗传分化

西藏牦牛RAPD遗传多样性和麦洼牦牛几个功能基因的研究

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西藏牦牛RAPD遗传多样性和麦洼牦牛几个功能基因的研究

作者：柴志欣西南民族大学

学位级别：硕士

本研究用RAPD分子遗传标记研究了巴青牦牛、丁青牦牛、斯布牦牛、桑日牦牛、康布牦牛、嘉黎牦牛、桑桑牦牛、帕里牦牛、江达牦牛、类乌齐牦牛、工布江达牦牛等11个西藏地方牦牛类群的遗传多样性和系统进化关系。同时，研究了麦洼牦牛（... 详细信息

本研究用RAPD分子遗传标记研究了巴青牦牛、丁青牦牛、斯布牦牛、桑日牦牛、康布牦牛、嘉黎牦牛、桑桑牦牛、帕里牦牛、江达牦牛、类乌齐牦牛、工布江达牦牛等11个西藏地方牦牛类群的遗传多样性和系统进化关系。同时，研究了麦洼牦牛（纯黑和粉嘴两品系）的H-FABP、HSL、MC4R等3个功能基因的PCR-SSCP多态性及其与体尺性状的相关性，并对H-FABP、MC4R基因进行了克隆和序列分析。（1）对西藏11个牦牛类群进行的RAPD分析结果表明：①西藏牦牛类群的遗传多样性指数变异范围在0.1857～0.4053之间，其中帕里牦牛最小（0.1857），显示相对较纯，群体较整齐;而工布江达牦牛最大（0.4053），该群体内部具有较多的遗传变异。②在11个类群中，其遗传多样性指数大小分别为：工布江达牦牛（0.4053）＞江达牦牛（0.3536）＞斯布牦牛（0.3448）＞康布牦牛（0.3428）＞嘉黎牦牛（0.3323）＞桑日牦牛（0.2823）＞巴青牦牛（0.2793）＞桑桑牦牛（0.2698）＞丁青牦牛（0.2597）＞类乌齐牦牛（0.2241）＞帕里牦牛（0.1857），具有西藏东部牦牛类群遗传多样性相对较高，而西部牦牛类群遗传多样性相对较低的趋势，预示着西藏东部可能是牦牛的起源地之一。③根据遗传距离构建的分子聚类关系图表明：西藏11个牦牛类群可分为两大类，帕里牦牛（PL）为一类，其余10个牦牛类群为另一类。（2）采用PCR-SSCP方法对麦洼牦牛的H-FABP、HSL和MC4R基因的外显子区域进行SNP检测，并将SNP检测结果与生长性状进行相关性分析。结果表明：①在H-FABP基因外显子4区域的扩增片段中存在三种基因型（CC、CD、DD），在序列的7339bp处发生了T→C突变。②MC4R基因引物6上存在EE和EF两种基因型，在1172bp处发生了C→T突变，导致氨基酸由丝氨酸（S）变为苯丙氨酸（F）。③HSL基因外显子7中存在MM、MN、NN三种基因型，在6816bp处发生A→G突变，相应氨基酸由天冬氨酸（D）转变为甘氨酸（G），6883bp处均发生G→C转换，相应氨基酸并未发生变化仍为精氨酸（R），以及6950bp处发生G→A突变，相应氨基酸由缬氨酸（V）变为甲硫氨酸（M）;而外显子8中的GG型和HH型在对应序列10183bp处发生A→G碱基突变，相应氨基酸由半胱氨酸（C）变为甘氨酸（G）。经χ2适合性检验，上述除引物HSL-8（1）外，其余突变位点均不符Hardy-Weinberg平衡状态，说明麦洼牦牛受到较强的人工选择和自然选择的影响。（3）牦牛的H-FABP基因全长440bp，其中编码区为401bp，编码133个氨基酸;MC4R基因全长1434bp，其中编码区999bp，编码332个氨基酸。牦牛H-FABP和MC4R基因核苷酸序列与普通牛、绵羊、猪、人和小鼠的核苷酸比较，其一致性分别在83%～99%、85%～99%，其中与普通牛的最高（99%、99%），其次是绵羊（96%、95%），与小鼠的最低;表明在不同物种中，这两个基因是属于直系同源的基因。研究还发现，H-FABP和MC4R蛋白均为疏水性蛋白，属于结构蛋白。本研究首次对西藏11个牦牛类群的RAPD分析，显示西藏牦牛具有丰富的遗传多样性且类群内的遗传分化显著，以及对麦洼牦牛的H-FABP、MC4R、HSL基因研究。为将来培育牦牛新品种和进一步揭示这些基因的功能、探讨其与生产性状之间的联系提供了重要的理论依据。

关键词：西藏牦牛麦洼牦牛 RAPD 遗传多样性 SNP 克隆多态性分析

基于DNA自组装放大系统的mcr-1耐药基因电化学传感检测技术的方法学研究

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基于DNA自组装放大系统的mcr-1耐药基因电化学传感检测技术的方法...

作者：柴志欣南方医科大学

学位级别：硕士

多粘菌素是从多粘杆菌的培养液中分离得到的多肽类抗生素,对多数革兰氏阴性需氧菌有杀灭作用,但因其显著的肾毒性和神经毒性,在过去很少用于临床。但是,随着近些年来超级细菌等多重耐药菌的不断涌现,大多数抗菌药物束手无策,而多粘菌素... 详细信息

多粘菌素是从多粘杆菌的培养液中分离得到的多肽类抗生素,对多数革兰氏阴性需氧菌有杀灭作用,但因其显著的肾毒性和神经毒性,在过去很少用于临床。但是,随着近些年来超级细菌等多重耐药菌的不断涌现,大多数抗菌药物束手无策,而多粘菌素的药敏试验结果是“敏感”,故又重回医务、科研人员的视野。然而,2015年11月,在柳叶刀上华南农业大学的刘健华等首次报道了在中国的动物和人类中出现了由质粒介导的、能够水平传播的抗黏菌素的耐药基因mcr-1（mobile colistin resistance）。此后,陆续有美国、法国、英国等发现并报道了mcr-1基因,并且分离得到的mcr-1基因不仅仅出现在猪、鸡等动物身上,从食品、水、蔬菜等中也分离出了mcr-1基因。由于其突破了抗生素最后一道防线,mcr-1耐药基因的全球传播逐渐引起人们的密切关注。电化学DNA生物传感技术是以单链DNA或双链DNA为敏感元件,将核酸分子相互作用产生的生物学信号转变成可以检测的电信号,从而实现对DNA的定性或定量检测。基于黏菌素耐药基因mcr-1的广泛传播,以及临床治疗形势的严峻性,我们初步探讨利用电化学DNA传感技术检测mcr-1,为质粒介导黏菌素耐药基因的便携式快速检测打下理论及初步实践基础,也为临床其它常见耐药基因的检测提供通用技术平台。首先,设计5’端修饰有巯基（HS-）的ssDNA,通过金硫键将其固定在金电极表面,用巯基己醇封闭空白位点,以减免非特异性吸附。HS-ssDNA在金电极表面自组装成稳定的单分子层后,在适宜的条件（如温度、pH、离子强度等）下,特异性识别质粒DNA的酶切产物,通过电化学工作站检测电信号的变化,从而成功检测到mcr-1耐药基因片段;并且通过对其特异性、线性范围、检测限等指标进行评价,证明了采用电化学生物传感器技术检测质粒介导的大肠埃希菌耐黏菌素mcr-1耐药基因的可行性。其次,为了解决普通金电极操作复杂、耗时耗力且检测灵敏度不足等问题,我们构建了基于teohold介导杂交链式反应（HCR）和丝网印刷金电极的无酶无标记液相生物传感检测技术平台。设计含有粘性末端的茎环状DNA探针（toehold probe）,当靶基因mcr-1基因片段存在于溶液中时,通过toehold介导的杂交链式反应使茎环状DNA探针的茎部打开,暴露出杂交链式反应（HCR）的引发链,引发链启动toehold介导的HCR反应,最终形成超长的双链结构。结合可插入dsDNA双螺旋结构内的电化学指示剂亚甲基蓝（MB）,构建无酶无标记的DNA自组装放大系统。与游离MB相比,MB/dsDNA复合物中MB的扩散速率明显降低,所以MB与dsDNA的结合能大幅度降低MB在均相溶液中的反应电流,在丝网印刷金电极上检测电流减弱的变化和程度。实验结果证明,在10nM到1μtM的范围内,构建的检测体系的△ip与mcr-1 gene的浓度呈线性正相关的关系,且通过对检测体系的碱基错配能力的考察,构建的体系具备了较好的特异性,从而实现对mcr-1耐药基因更加简便、快捷的检测。

关键词：多粘菌素 mcr-1 电化学传感器自组装 HCR信号放大系统