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甲型肝炎病毒减毒株cDNA的分子克隆

科学通报 1991年第2期36卷 147-150页

作者：杨能宇陈勇柴少爱洪艳毛江森浙江省医学科学院病毒病研究所杭州310013

毛江森等成功地研制了甲型肝炎病毒(HAV)减毒株(H2株),动物试验及人体接种观察均证明甲型肝炎病毒H2株是一株对人免疫效果良好的减毒活疫苗毒株。为阐明H2减毒株在分子水平的减毒机理,我们对H2减毒株进行cDNA克隆及序列分析。本文报道H2... 详细信息

毛江森等成功地研制了甲型肝炎病毒(HAV)减毒株(H2株),动物试验及人体接种观察均证明甲型肝炎病毒H2株是一株对人免疫效果良好的减毒活疫苗毒株。为阐明H2减毒株在分子水平的减毒机理,我们对H2减毒株进行cDNA克隆及序列分析。本文报道H2株cDNA的分子克隆。

关键词：甲型肝炎病毒减毒株分子克隆

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甲型肝炎病毒H2减毒株的某些生物学性质

病毒学报 1989年第1期5卷 95-98页

作者：柴少爱张杭春余佩华戈静毛江森浙江省医学科学院

猕猴试验表明,甲型肝炎病毒H2M20K5是一株减毒株。本文研究了该株在KMB17人胚肺二倍体细胞中的增殖动态、繁殖部位、病毒颗粒在氯化铯(CsCl)溶液中的浮力密度,以及该病毒的耐温性等生物学性质。一、H2减毒株在KMB17细胞内的增殖动态 ... 详细信息

猕猴试验表明,甲型肝炎病毒H2M20K5是一株减毒株。本文研究了该株在KMB17人胚肺二倍体细胞中的增殖动态、繁殖部位、病毒颗粒在氯化铯(CsCl)溶液中的浮力密度,以及该病毒的耐温性等生物学性质。一、H2减毒株在KMB17细胞内的增殖动态取50μl相当于7log感染滴度(荧光检测法)的H2减毒株,用适量含有2％新生牛血清的细胞培养液稀释,感染长成单层的KMB17细胞(4.5×10cm培养方瓶),35℃恒温培养,在不同培养天数(0,3,7,10,14,21,28天)各收获10瓶细胞。

关键词：甲肝病毒 H2减毒株生物学性质

甲型肝炎病毒活疫苗H_2减毒株全基因文库的建立

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中华医学杂志 1996年第5期76卷 342-344页

作者：陈勇杨能宇洪艳倪崖罗永能柴少爱毛江森浙江省医学科学院生物工程研究所

探讨甲型肝炎（甲肝）病毒减毒活疫苗株的分子生物学作用机制。方法运用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术，参考国外报道的甲肝病毒ｃＤＮＡ序列，进行ｃＤＮＡ的合成扩增和分子克隆，并以７种限制性内切酶进行酶谱分析。结果... 详细信息

探讨甲型肝炎（甲肝）病毒减毒活疫苗株的分子生物学作用机制。方法运用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术，参考国外报道的甲肝病毒ｃＤＮＡ序列，进行ｃＤＮＡ的合成扩增和分子克隆，并以７种限制性内切酶进行酶谱分析。结果获得了甲肝病毒活疫苗Ｈ２减毒株的ｃＤＮＡ片段；经分子克隆，得到了贯穿Ｈ２减毒株全基因组的１０组相互重叠基因片段的ｃＤＮＡ克隆，经过酶谱分析，建立了Ｈ２减毒株的全基因文库。结论全基因文库的建立，为进行ｃＤＮＡ全序列分析，为甲肝病毒减毒机理的研究打下良好基础。

关键词：甲型肝炎病毒减毒疫苗基因库

甲肝病毒减毒活疫苗（H2株）的cDNA克隆及序列分析

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浙江省医学科学院学报 1995年第1期6卷 3-14页

作者：陈勇柴少爱

本文通过ｍＲＮＡ提取，逆转灵（ＲＴ）－聚合酶链反应（ＰＣＲ），获得甲肝病毒减毒活疫苗株（Ｈ２减毒株）的ｃＤＮＡ片段，再经分子克隆，从而得到贯穿甲肝病毒（ＨＡＶ）全基因组的１０个相互重叠基因片段的ｃＤＮＡ克隆。经双脱氧... 详细信息

本文通过ｍＲＮＡ提取，逆转灵（ＲＴ）－聚合酶链反应（ＰＣＲ），获得甲肝病毒减毒活疫苗株（Ｈ２减毒株）的ｃＤＮＡ片段，再经分子克隆，从而得到贯穿甲肝病毒（ＨＡＶ）全基因组的１０个相互重叠基因片段的ｃＤＮＡ克隆。经双脱氧末端终止法进行核苷酸序列分析，得到了长度为７４７３ｂｐ的甲肝病毒减毒活疫苗株（Ｈ２减毒株）ｃＤＮＡ全序列。计算机分析表明，该株与野毒株ＨＭ１７５的核苷酸和氨基酸同源性分别为９９．

关键词：减毒株 cDNA克隆核苷酸序列分析甲型肝炎病毒

甲型肝炎减毒活疫苗（H2减毒株）口服免疫反应的研究

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浙江省医学科学院学报 1995年第1期6卷 15-16页

作者：柴少爱陈军

选自５个幼儿园和１个小学１０个班级ＳＧＰＴ值正常，抗甲肝病毒（ＨＡＶ）抗体阴性３－９岁儿童１９３名，进行８个不同批号的甲肝减毒活疫苗（Ｈ２减毒株），疫苗剂量为１０６．５ＴＣＩＤ５０，口服途径和皮下注射途径免疫的比较，... 详细信息

选自５个幼儿园和１个小学１０个班级ＳＧＰＴ值正常，抗甲肝病毒（ＨＡＶ）抗体阴性３－９岁儿童１９３名，进行８个不同批号的甲肝减毒活疫苗（Ｈ２减毒株），疫苗剂量为１０６．５ＴＣＩＤ５０，口服途径和皮下注射途径免疫的比较，８周血清检测结果表明：口服途径免疫组１０１名儿童全部未检测到甲肝抗体。皮下注射免疫组的９２名儿童中８８名（９５．５％）有甲肝抗体反应。１９３名儿童８周ＳＧ－ＰＴ值全部正常。

关键词：甲型肝炎病毒减毒活疫苗口服免疫

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甲型肝炎病毒H2减毒株的某些遗传特征

浙江省医学科学院学报 1992年第4期3卷 4-6页

作者：柴少爱张杭春

甲型肝炎减毒活疫苗病毒(H_2株)人群水平传播的能力

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中华传染病杂志 2006年第3期24卷 168-171页

作者：毛子安黄海鹰钱汶陈念良张淑雅施世锋柴少爱浙江省医学科学院病毒研究所杭州310013 杭州市疾病控制中心

目的观察甲型肝炎(甲肝)减毒活疫苗(H_2减毒株)接种后病毒在密切接触者中是否传播。方法分别于1987年5月对浙江省医学科学院职工和家属5例、1988年4月对杭州市某小学2(2)班学生15例及1989年3月对同一所小学1(1)班、1(3)班学生42例,共62... 详细信息

目的观察甲型肝炎(甲肝)减毒活疫苗(H_2减毒株)接种后病毒在密切接触者中是否传播。方法分别于1987年5月对浙江省医学科学院职工和家属5例、1988年4月对杭州市某小学2(2)班学生15例及1989年3月对同一所小学1(1)班、1(3)班学生42例,共62例志愿者进行甲肝减毒活疫苗(H_2减毒株)接种。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测接种者血清甲肝IgM抗体及总抗体,采用ELISA双夹心捕捉抗原法和细胞培养法检测5名志愿者接种后的粪便。甲肝的诊断依据临床表现、转氨酶升高和甲肝IgM抗体等标准。结果4例志愿者接种后的31份粪便用ELISA双夹心法检测甲肝抗原全部阴性。取上述其中8份标本接种人胚肺二倍体细胞(KMB17),经二次传代有3例接种者在8～21 d时检测到甲肝病毒(HAV)。与42例接种者抗体全部阳转不同,在免疫接种后的10～11个月,作为密切接触者的24名同班同学,甲肝抗体阴性。在部分接种甲肝减毒活疫苗的班级中观察了经历一次自然甲肝野毒流行后的免疫反应。50名学生中,15名接种者甲肝抗体全部阳性,未接种者中30名甲肝抗体阴性,5名甲肝IgM抗体阳性。结论甲肝减毒活疫苗(H_2减毒株)接种后,有少量HAV疫苗病毒在粪便中排出,但目前未观察到在人群中引起水平传播。

关键词：肝炎病毒,甲型疾病传播疫苗,减毒病毒性肝炎疫苗

冻干甲型肝炎减毒活疫苗诱导的人体特异性免疫应答

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中国生物制品学杂志 2009年第2期22卷 180-182页

作者：忻亚娟庄昉成姜立民钱汶唐彩华陈悦青吴洁柴少爱浙江省医学科学院病毒病研究所杭州310013

目的观察人体接种冻干甲型肝炎减毒活疫苗(H2株)后产生的特异性免疫应答。方法选择16名血清甲型肝炎抗体阴性的健康志愿者,接种1针冻干甲型肝炎减毒活疫苗,接种前和接种后2、4、8、12、156周(3年)采血,采用ELISA检测血清抗HAVIgG抗体;... 详细信息

目的观察人体接种冻干甲型肝炎减毒活疫苗(H2株)后产生的特异性免疫应答。方法选择16名血清甲型肝炎抗体阴性的健康志愿者,接种1针冻干甲型肝炎减毒活疫苗,接种前和接种后2、4、8、12、156周(3年)采血,采用ELISA检测血清抗HAVIgG抗体;采用流式细胞术检测全血各淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+的百分率及表达细胞因子IFN-γ和IL-4的阳性细胞百分率;采用ELISPOT法检测外周血淋巴细胞分泌IFN-γ的斑点形成细胞(SFC)。结果接种疫苗后2周,表达IL-4的阳性细胞百分率与接种前相比显著升高;接种后4周,CD4+淋巴细胞亚群百分率与接种前相比显著升高;接种后8周,抗体100%阳转;接种后3年,抗体和分泌IFN-γ的SFC有一项以上阳性者占85.7%(12/14)。结论接种冻干甲型肝炎减毒活疫苗,能诱导机体产生良好的体液免疫和细胞免疫应答。

关键词：冻干甲型肝炎减毒活疫苗(H2株) 体液免疫细胞免疫

甲型肝炎减毒活疫苗(H_2株)10年流行病学效果观察

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中华流行病学杂志 2001年第3期22卷 188-190页

作者：庄昉成姜器龚岳平莫世华忻亚娟钱汶陈念良张淑雅柴少爱毛江森浙江省医学科学院病毒病研究所杭州310013 台州市椒江区卫生防疫站嵊泗县卫生防疫站浙江省卫生防疫站

目的　观察在甲型肝炎 (甲肝 )高发县、区用甲肝减毒活疫苗 (H2 株 )大面积接种后长期的流行病学保护效果。方法　选择浙江省嵊泗县和椒江区二个试点。二组小学生定群研究 ,观察 4年。试点内 1～ 15岁儿童普遍接种甲肝活疫苗。部分研究... 详细信息

目的　观察在甲型肝炎 (甲肝 )高发县、区用甲肝减毒活疫苗 (H2 株 )大面积接种后长期的流行病学保护效果。方法　选择浙江省嵊泗县和椒江区二个试点。二组小学生定群研究 ,观察 4年。试点内 1～ 15岁儿童普遍接种甲肝活疫苗。部分研究对象作血清中和试验、免疫回忆反应及免后 10年抗体检测。结果　接种组与未接种组甲肝发病率差别具有显著性 (P <0 .0 1) ,疫苗保护率为10 0 %。疫苗接种率与甲肝发病率二者具有明显负相关。全人口甲肝发病率分别下降了 94.5 %和90 .3% ,1～ 15岁儿童组发病专率分别下降了 96 .9%和 97.9% ,10年期间没有发生甲肝流行。血清学检测结果 :免后阴性血清 ,用体外中和法验证有 6 3.8%仍有中和作用 ,加强免疫 1针后回忆反应明显。免后 10年抗 HAV IgG的阳性率为 80 .2 %。结论　甲肝减毒活疫苗 (H2 株 )长期的流行病学效果明显。通过普遍接种甲肝活疫苗。

关键词：甲型肝炎流行病学甲肝减毒活疫苗