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The effects of glucose, insulin and oxidized low density lipoprotein on apoptosis in vascular endothelial cells

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Chinese Medical Journal 2000年第10期113卷 39-42页

作者：柴伟栋陈家伟王华沈捷马立隽马向华 Department of Endocrinology First Affiliated HospitalNanjing Medical University

Obejctive To study the effects of high concentrations of glucose, insulin and oxidized low density lipoprotein (ox LDL) on apoptosis in cultured bovine aortic endothelial cells (ECs) Methods For qualitative determination of EC apoptosis, acridine orange (AO)/ethidium bromide (EB) staining and DNA agarose gels electrophoresis were used Cellular DNA fragmentation ELISA measured apoptosis by quantitating the fragmentation of 5 bromo 2' deoxyuridine labeled DNA Results High concentrations of glucose (20?mmol/L, 40?mmol/L), insulin (3000?μU/ml) and ox LDL (50?μg/ml, 100?μg/ml) induced concentration and time dependent apoptosis in ECs They had a synergetic effect on EC apoptosis The combined effect of high concentration of glucose, insulin and ox LDL was greater than any two of them; the effect of two was greater than one alone Low concentration of insulin (30?μU/ml) decreased apoptosis in ECs induced by high concentrations of glucose (40? mmol/L), but no similar effect occurred with ox LDL (100?μg/ml) Conclusion High ambient glucose, insulin and ox LDL can induce excessive apoptosis in cultured ECs, and low ambient insulin can prevent EC apoptosis Excessive EC apoptosis induced by the separate or synergetic effect of hyperglycemia, hyperinsulinemia and hyperlipidemia may be one of the reasons for loss of endothelial integrity, dysfunction of the vascular endothelium and increased plasma membrane permeability, which are all involved in the development of diabetic macrovascular complications

关键词： endothelial cell apoptosis diabetes mellitus

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胰高血糖素瘤一例报告

中华内分泌代谢杂志 2003年第1期19卷 67-68页

作者：柴伟栋陈家伟杨涛苗毅毕志刚南京医科大学第一附属医院内分泌科 210029 南京医科大学第一附属医院普外科 210029 南京医科大学第一附属医院皮肤科 210029

胰高血糖素瘤临床上极为罕见，年发病率约为0.01/百万～0.1/百万。因此，临床医师对此症的认识甚少，极易发生误诊。现报告一例因误诊半年最后剖腹探查而确诊为胰高糖素瘤的病例。

关键词：胰高血糖素瘤诊断治疗转移

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乳腺癌患者B7-CD28共刺激通路的研究

中华普通外科杂志 2003年第3期18卷 162-164页

作者：范萍王水刘晓武正炎柴伟栋南京医科大学第一附属医院普外科 210029 南京医科大学第一附属医院内分泌科 210029

目的探讨乳腺癌患者外周血中CD2 8表达阳性的T细胞数量和患者乳腺癌原代细胞表面B7 1(CD80 )、B7 2 (CD86 )的表达水平 ,以探讨乳腺癌患者共刺激通路是否异常。方法采用流式细胞技术检测乳腺癌患者外周血中CD2 8阳性T细胞与乳腺癌患者... 详细信息

目的探讨乳腺癌患者外周血中CD2 8表达阳性的T细胞数量和患者乳腺癌原代细胞表面B7 1(CD80 )、B7 2 (CD86 )的表达水平 ,以探讨乳腺癌患者共刺激通路是否异常。方法采用流式细胞技术检测乳腺癌患者外周血中CD2 8阳性T细胞与乳腺癌患者原代细胞B7分子的表达 ,并与乳腺良性疾病作比较。结果乳腺癌患者CD2 8阳性的T细胞数明显低于对照组 (t =2 879,P <0 0 5 ) ,特别是CD4/CD2 8双阳性T细胞数更低于对照组 (t=3 0 17,P <0 0 0 1)。乳腺癌患者原代细胞表面B7 1和B7 2表达水平都低于对照组。结论乳腺癌患者外周血中T细胞低表达CD2 8分子 ,乳腺癌细胞低表达B7分子 ,从而影响B7 CD2 8共刺激通路 ,使T细胞不能有效地清除肿瘤细胞。

关键词：乳腺癌 B7-CD28 共刺激通路研究

不同浓度葡萄糖和氧化低密度脂蛋白对血管内皮细胞生长的影响

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南京医科大学学报（自然科学版） 2001年第3期21卷 196-198页

作者：柴伟栋崔毓桂沈捷陈家伟南京医科大学第一附属医院内分泌科江苏南京210029

目的 :通过对动脉内皮细胞的培养 ,研究高浓度氧化低密度脂蛋白 (ox- L DL )和葡萄糖在糖尿病 (DM)大血管并发症发生中的作用。方法 :采用 3H- Td R标记法 ,四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色 (MTT)法和锥虫蓝染色法。结果 :1高浓度 ox- L D... 详细信息

目的 :通过对动脉内皮细胞的培养 ,研究高浓度氧化低密度脂蛋白 (ox- L DL )和葡萄糖在糖尿病 (DM)大血管并发症发生中的作用。方法 :采用 3H- Td R标记法 ,四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色 (MTT)法和锥虫蓝染色法。结果 :1高浓度 ox- L DL和高浓度葡萄糖抑制内皮细胞的增殖、促进内皮细胞死亡 ,并且呈浓度依赖性 ;2高浓度葡萄糖增强 ox- L DL对内皮细胞的增殖抑制及促进其死亡的作用。结论 :在高浓度葡萄糖情况下 ox- L DL致血管内皮细胞损伤的作用加强 ,提示 DM高血糖促进了脂质异常对血管内皮的损伤 ,促进 DM大血管病变的发生、发展。

关键词：内皮细胞氧化低密度脂蛋白葡萄糖糖尿病大血管并发症

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葡萄糖及胰岛素对牛血管内皮细胞凋亡的影响

中华内分泌代谢杂志 1999年第2期15卷 100-103页

作者：柴伟栋陈家伟汪承亚南京医科大学第一附属医院内分泌科

目的通过对牛血管内皮细胞（ＥＣ）的体外培养研究糖尿病（ＤＭ）状况下葡萄糖（Ｇｌｕ）、胰岛素（Ｉｎｓ）对ＥＣ凋亡的影响。方法吖啶橙／溴乙锭（ＡＯ／ＥＢ）荧光染色及ＤＮＡ片段的琼脂糖凝胶电泳对ＥＣ凋亡定性，ＥＬＩＳＡ方法... 详细信息

目的通过对牛血管内皮细胞（ＥＣ）的体外培养研究糖尿病（ＤＭ）状况下葡萄糖（Ｇｌｕ）、胰岛素（Ｉｎｓ）对ＥＣ凋亡的影响。方法吖啶橙／溴乙锭（ＡＯ／ＥＢ）荧光染色及ＤＮＡ片段的琼脂糖凝胶电泳对ＥＣ凋亡定性，ＥＬＩＳＡ方法测定ＤＮＡ片段定量ＥＣ凋亡。结果高浓度Ｇｌｕ（２０ｍｍｏｌ／Ｌ、４０ｍｍｏｌ／Ｌ）和Ｉｎｓ（３００ｍＵ／Ｌ、３０００ｍＵ／Ｌ）能够诱发ＥＣ发生凋亡。ＥＣ凋亡与Ｇｌｕ和Ｉｎｓ浓度成正比，并且为时间依赖性。低浓度Ｉｎｓ（３０ｍＵ／Ｌ）明显改善Ｇｌｕ４０ｍｍｏｌ／Ｌ下所致ＥＣ的凋亡，但高浓度Ｉｎｓ与Ｇｌｕ有正性协同作用，增加ＥＣ凋亡。高浓度甘露醇（Ｍａｎ２０ｍｍｏｌ／Ｌ、４０ｍｍｏｌ／Ｌ）不引起ＥＣ明显凋亡。结论ＤＭ环境下高血糖、高Ｉｎｓ血症能诱发ＥＣ凋亡，促进ＤＭ血管并发症的发生。

关键词：葡萄糖胰岛素内皮细胞糖尿病血管并发症

葡萄糖、胰岛素对内皮细胞一氧化氮和内皮素1分泌影响的对比研究

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中华内分泌代谢杂志 2004年第2期20卷 170-171页

作者：柴伟栋陈家伟沈捷崔毓桂马向华倪黎汪承亚南京医科大学第一附属医院内分泌科 210029 南京医科大学第一附属医院中心实验室 210029

牛主动脉内皮细胞体外培养时 ,高浓度葡萄糖和胰岛素促使内皮素 1水平升高而降低一氧化氮水平 ,提示这些变化能促进糖尿病性高血压的发生发展。

关键词：葡萄糖胰岛素内皮细胞一氧化氮内皮素1 分泌对比研究糖尿病高血压

胰岛素介导的内皮依赖性血管舒张功能与高血糖关系的实验研究

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中华内分泌代谢杂志 2002年第1期18卷 59-62页

作者：柴伟栋陈家伟汪承亚倪黎崔毓桂沈捷马向华王华南京医科大学第一附属医院内分泌科 210029 南京医科大学第一附属医院中心实验室 210029

目的　研究不同浓度胰岛素、葡萄糖对培养血管内皮细胞一氧化氮 (NO)产生的影响 ,探讨糖尿病时内皮依赖性血管舒张异常的作用机制。方法　用放免法测定内皮细胞cGMP水平来反映NO的量 ;半定量RT PCR检测NO合酶 (eNOS)mRNA水平。结果　胰... 详细信息

目的　研究不同浓度胰岛素、葡萄糖对培养血管内皮细胞一氧化氮 (NO)产生的影响 ,探讨糖尿病时内皮依赖性血管舒张异常的作用机制。方法　用放免法测定内皮细胞cGMP水平来反映NO的量 ;半定量RT PCR检测NO合酶 (eNOS)mRNA水平。结果　胰岛素 (0 .18～ 6 .0nmol/L)、葡萄糖 (2 0mmol/L ,40mmol/L)能增加内皮细胞cGMP产量 ,并呈浓度和时间依赖性 ;高浓度葡萄糖上调eNOSmRNA水平 ,而胰岛素对其无影响 ;在高浓度葡萄糖下 ,胰岛素 (6 .0nmol/L)刺激NO的生成作用明显降低。结论　胰岛素介导的内皮依赖性血管扩张与胰岛素刺激内皮细胞NO合成有关 ;血管内皮对胰岛素的敏感性减低是胰岛素抵抗的一部分 ;高浓度葡萄糖可能会抑制胰岛素介导的内皮依赖性血管舒张。

关键词：一氧化氮糖尿病内皮依赖性血管舒张

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临床医学教学改革的思考

南京医科大学学报（社会科学版） 2000年第1期1卷 73-74页

作者：柴伟栋范萍南京医科大学第一附属医院内分泌科江苏南京210029

长期以来，临床医学教学模式中普遍存在着灌输式教学、基础和临床脱节以及医学生缺乏学习的积极性和创造性等弊端。教师们常常面对这样难以接受的事实，即医学生们经过5～6年、甚至8年的艰苦学习后，仍难以将学到的知识应用到临床实践... 详细信息

长期以来，临床医学教学模式中普遍存在着灌输式教学、基础和临床脱节以及医学生缺乏学习的积极性和创造性等弊端。教师们常常面对这样难以接受的事实，即医学生们经过5～6年、甚至8年的艰苦学习后，仍难以将学到的知识应用到临床实践中，较熟练地对病人进行临床诊治。如何提高医学生的临床处理问题的能力已成为医学教育改革的焦点。

关键词：临床医学教学改革

β_3肾上腺能受体基因与肥胖、糖尿病、胰岛素抵抗关系的群体水平研究

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江苏医药 2004年第9期30卷 647-649页

作者：马向华沈捷柴伟栋陈家伟林媛豪李康南京医科大学第一附属医院内分泌科 210029 宁夏医学院附属医院内分泌科

目的研究单纯性肥胖、2型糖尿病(T2DM)、胰岛素抵抗与β3-肾上腺能受体(β3-AR)基因之间的关系。方法运用多聚酶链反应-限制性片段多态性分析(PCR-RFLP)技术分析了53例正常对照者、105例单纯性肥胖患者、63例T2DM非肥胖患音和114例T2D... 详细信息

目的研究单纯性肥胖、2型糖尿病(T2DM)、胰岛素抵抗与β3-肾上腺能受体(β3-AR)基因之间的关系。方法运用多聚酶链反应-限制性片段多态性分析(PCR-RFLP)技术分析了53例正常对照者、105例单纯性肥胖患者、63例T2DM非肥胖患音和114例T2DM伴肥胖患者的β3-AR甚因外显子64位色氨酸(Trp)、精氨酸(Arg)的多态性。结果具有Arg等位基因者,其腰臀围比(WHR)、平均血压(MBP)、收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、空腹血糖(FBS)、餐后血糖(PBS)、空腹胰岛素(FINS)、餐后胰岛素(PINS)、空腹C肽(FCP)、餐后C肽(PCP)均比Trp纯合组显著增加,而胰岛素敏感指数(ISI)明显降低;在非T2DM,伴有高胰岛素血症的肥胖亚组的Arg等位基因频率明显升高。结论Trp/Arg多态性的改变导致了胰岛素抵抗、肥胖、T2DM的发生。β3-AR基因是中国汉族人群胰岛素抵抗、肥胖、T2DM的候选基因。

关键词：肥胖胰岛素抵抗 T2DM 肾上腺能受体等位基因频率 AR 餐后外显子多态性中国汉族人群