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次苷酸查尔酮对LPS诱导的RAW264.7细胞iNOS和COX-2表达的影响

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中国药理学通报 2024年第2期40卷 397-399页

作者：王萌高盼微罗子娟常惠琳张玥袁庆柴丽娟天津中医药大学组分中药国家重点实验室方剂学教育部重点实验室天津市中药药理学重点实验室天津301617

补骨脂为豆科植物补骨脂(Psoraleacorylifolia L.)果实,具有温肾助阳、温脾止泻的功效[1],临床上被用于治疗皮肤病、肾炎、骨折等[2-3]。次苷酸查尔酮(corylifol A,CYA)是中药补骨脂的活性成分之一,是一种异黄酮类化合物,具有抗炎、抗... 详细信息

补骨脂为豆科植物补骨脂(Psoraleacorylifolia L.)果实,具有温肾助阳、温脾止泻的功效[1],临床上被用于治疗皮肤病、肾炎、骨折等[2-3]。次苷酸查尔酮(corylifol A,CYA)是中药补骨脂的活性成分之一,是一种异黄酮类化合物,具有抗炎、抗菌、抗氧化、抗骨质疏松的特性[4-5]。有研究表明,CYA能明显抑制破骨细胞的分化,且能明显降低LPS诱导的巨噬细胞一氧化氮(NO)的生成[6-7]。

关键词：次苷酸查尔酮 RAW264.7 脂多糖 iNOS COX-2 NO

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注射用丹参多酚酸联合血栓通对缺氧复氧损伤血脑屏障紧密连接蛋白表达的影响

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中国药理学通报 2024年第6期40卷 1199-1200页

作者：张彤李芮琳柴丽娟袁庆胡利民天津中医药大学组分中药国家重点实验室、天津市中药药理学重点实验室、方剂学教育部重点实验室天津301617

血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)通过精密控制血液与脑实质之间的物质交换维持脑内微环境,保证神经系统功能。脑微血管内皮细胞作为组成BBB的核心,通过细胞间紧密连接蛋白(tight junction protei,TJs)来维持BBB的屏障完整[1-2]。研... 详细信息

血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)通过精密控制血液与脑实质之间的物质交换维持脑内微环境,保证神经系统功能。脑微血管内皮细胞作为组成BBB的核心,通过细胞间紧密连接蛋白(tight junction protei,TJs)来维持BBB的屏障完整[1-2]。研究表明[3-4],BBB的破坏是造成缺血性卒中出血转化及加重脑损伤的重要因素。因此,维持BBB的完整可能是缺血性卒中的重要治疗策略。

关键词：丹参多酚酸血栓通血脑屏障紧密连接蛋白缺氧复氧内皮细胞

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瑞士乳杆菌与耐酸乳杆菌复合强化对液态发酵食醋风味的影响

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食品与发酵工业 2024年

作者：黄浩伦陆震鸣柴丽娟张晓娟许泓瑜李信史劲松许正宏江南大学生命科学与健康工程学院江南大学工业生物技术教育部重点实验室生物工程学院江苏恒顺醋业股份有限公司江南大学粮食发酵与食品生物制造国家工程研究中心

该研究将瑞士乳杆菌（Lactobacillus helveticus）与耐酸乳杆菌（L. acetotolerans）分阶段接种于液态发酵食醋的发酵过程中，以提升食醋品质。采用高效液相色谱、顶空固相微萃取-气质联用和电子舌等分析方法，对液态发酵食醋的有机酸... 详细信息

该研究将瑞士乳杆菌（Lactobacillus helveticus）与耐酸乳杆菌（L. acetotolerans）分阶段接种于液态发酵食醋的发酵过程中，以提升食醋品质。采用高效液相色谱、顶空固相微萃取-气质联用和电子舌等分析方法，对液态发酵食醋的有机酸含量、挥发性化合物含量进行分析并对其进行感官评价。结果表明，L. helveticus L-6与L. acetotolerans L-9复合强化后，液态发酵食醋总酸可达5.15 g/100 mL；还原糖残留量为3.41 g/L；乳酸、丙酮酸含量提升显著，其中乳酸含量提升幅度最大，可达12.8 g/L；复合强化可以显著提升乙酸乙酯、乳酸乙酯、苯乙酸等具有花果香、奶香和甜香风味的挥发性化合物含量；感官评价结果表明，两种乳酸菌分阶段复合强化发酵的食醋甜味和鲜味增加且酸味明显减弱，风味品质明显提升。该研究证实了在液态发酵食醋的发酵过程中进行L. helveticus L-6与L. acetotolerans L-9复合强化，有助于优化食醋有机酸组成，提升食醋的风味品质，为食醋的酿造工艺优化和产品创新提供参考。

关键词：乳酸菌液态发酵食醋生物强化有机酸风味

实时荧光定量PCR检测大曲中两种克罗彭施泰特氏菌的方法与应用

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应用与环境生物学报 2024年

作者：唐胜硕张晓娟柴丽娟史劲松王松涛张宿义沈才洪陆震鸣许正宏江南大学工业生物技术教育部重点实验室生物工程学院江南大学粮食发酵与食品生物制造国家工程研究中心江南大学生命科学与健康工程学院国家固态酿造工程技术研究中心四川大学轻工科学与工程学院

象牙色克罗彭施泰特氏菌（Kroppenstedtia eburnea）与血液克罗彭施泰特氏菌（K. sanguinis）是大曲细菌群落中核心功能物种。为实现对大曲中这两个物种的快速检测与定量，从K. eburnea与K. sanguinis基因组中筛选了特异性强的基因序列... 详细信息

象牙色克罗彭施泰特氏菌（Kroppenstedtia eburnea）与血液克罗彭施泰特氏菌（K. sanguinis）是大曲细菌群落中核心功能物种。为实现对大曲中这两个物种的快速检测与定量，从K. eburnea与K. sanguinis基因组中筛选了特异性强的基因序列作为模板设计特异性引物，通过近缘菌株和不同类型大曲样品分别验证引物的特异性与有效性并建立基于实时荧光定量PCR（RT-qPCR）的特异性检测方法。结果表明，以K. eburnea与K. sanguinis的DNA旋酶B亚单位基因（gyrB基因）为参考序列分别设计的引物KE-P-1与KS-P-1具有良好的特异性，其扩增目的片段长度分别为277 bp和287 bp。根据引物KE-P-1和KS-P-1建立的RT-qPCR方法特异性强、灵敏度高且准确性高，扩增效率分别为101.8%和97.70%，检测范围分别为2.089-9.089 lg(copies/μL)和1.088-9.088 lg(copies/μL)，成功应用于大曲样品中K. eburnea与K. sanguinis的检测。对高温大曲发酵过程的研究表明，高温大曲中的K. eburnea与K. sanguinis含量均表现出先增加后降低再增加的变化规律，发酵结束时含量分别为9.20 ± 0.11 lg(copies/g)和9.71 ± 0.22 lg(copies/g)。本研究表明所建立的RT-qPCR方法可对各类大曲发酵过程中K. eburnea与K. sanguinis进行特异性鉴定和快速定量。（图4 表4 参37）

关键词：大曲象牙色克罗彭施泰特氏菌血液克罗彭施泰特氏菌特异性引物 RT-qPCR

酱香型白酒堆积酒醅中象牙色克罗彭斯特德菌的分离筛选及其代谢特性解析

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微生物学报 2024年第7期 2502-2521页

作者：吴双全柴丽娟黄廷财时伟陆震鸣张晓娟王松涛沈才洪许正宏江南大学生物工程学院江南大学粮食发酵与食品生物制造国家工程研究中心国家固态酿造工程技术研究中心

【目的】高温堆积发酵是酱香型白酒生产中的关键工艺环节，克罗彭斯特德菌属(Kroppenstedtia)是堆积酒醅中的优势细菌属，研究其生长和代谢特征对于理解堆积发酵的关键作用至关重要。【方法】采用胰酪大豆蛋白胨(tryptic soy broth, TSB... 详细信息

【目的】高温堆积发酵是酱香型白酒生产中的关键工艺环节，克罗彭斯特德菌属(Kroppenstedtia)是堆积酒醅中的优势细菌属，研究其生长和代谢特征对于理解堆积发酵的关键作用至关重要。【方法】采用胰酪大豆蛋白胨(tryptic soy broth, TSB)培养基从酒醅中筛选克罗彭斯特德菌，通过形态学和16S rRNA基因测序确定其分类学地位，结合菌株纯培养及不同温度(45℃和50℃)下的高粱固态发酵实验，研究其生长和挥发性化合物代谢特征。【结果】从酱香型白酒堆积酒醅中分离筛选到3株克罗彭斯特德菌，经鉴定为象牙色克罗彭斯特德菌(Kroppenstedtia eburnea)。液态培养时菌株K. eburnea 1613促进吡嗪类物质的产生，为对照的2.66倍。在固态发酵高粱中检出的挥发性化合物主要为醇类和酸类，总含量随发酵时间的推移而逐渐增加。50℃发酵高粱有利于醇类、酸类和吡嗪类物质的积累，而45℃下酯类物质含量较高。3株菌以高粱为基质进行固态发酵时主要代谢产物是苯乙醇和异戊酸，其中K. eburnea 1615在50℃下发酵15 d时苯乙醇和异戊酸含量最高，为(31.17±0.14)μg/g和(16.75±0.76)μg/g。菌株K. eburnea 6E22在50℃下发酵15 d时2,5-二甲基吡嗪含量最高，为(1.67±0.14)μg/g。菌株K. eburnea 1613在发酵15 d时己酸含量最高，为(3.74±0.19)μg/g。50℃下发酵高粱自身中醛酮类物质积累明显。偏最小二乘判别分析(partial least squares discrimination analysis, PLS-DA)显示，温度和时间对3株菌发酵高粱中挥发性化合物的组成有显著影响。【结论】象牙色克罗彭斯特德菌有助于堆积发酵酒醅风味化合物的产生，特别是醇类、酸类和吡嗪类等酱香型白酒特征风味物质。

关键词：堆积发酵象牙色克罗彭斯特德菌固态发酵挥发性化合物

酱香型白酒堆积酒醅中象牙克罗彭斯特菌的分离筛选及其代谢特性解析

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微生物学报 2024年

作者：吴双全柴丽娟黄廷财时伟陆震鸣张晓娟王松涛沈才洪许正宏国家固态酿造工程技术研究中心江南大学生物工程学院江南大学粮食发酵与食品生物制造国家工程研究中心

【目的】高温堆积发酵是酱香型白酒生产中的关键工艺环节，克罗彭斯特菌属(Kroppenstedtia)是堆积酒醅中的优势细菌属，研究其生长和代谢特征对于理解堆积发酵的关键作用至关重要。【方法】采用胰酪大豆蛋白胨 (tryptic soy broth，TSB... 详细信息

【目的】高温堆积发酵是酱香型白酒生产中的关键工艺环节，克罗彭斯特菌属(Kroppenstedtia)是堆积酒醅中的优势细菌属，研究其生长和代谢特征对于理解堆积发酵的关键作用至关重要。【方法】采用胰酪大豆蛋白胨 (tryptic soy broth，TSB)培养基从酒醅中筛选克罗彭斯特菌，通过形态学和16S rRNA基因测序确定其分类学地位，结合菌株纯培养及不同温度(45、50 ℃)下的高粱固态发酵实验，研究其生长和挥发性化合物代谢特征。【结果】从酱香型白酒堆积酒醅中分离筛选到3株克罗彭斯特菌，经鉴定为象牙克罗彭斯特菌(Kroppenstedtia eburnea)。液态培养时菌株K. eburnea 1613促进吡嗪类物质的产生，为对照的2.66倍。在固态发酵高粱中检出的挥发性化合物主要为醇类和酸类，且总含量随发酵时间的推移而逐渐增加。50 ℃发酵高粱有利于醇类、酸类和吡嗪类物质的积累，而45 ℃下酯类物质含量较高。3株菌以高粱为基质进行固态发酵时主要代谢产物是苯乙醇和异戊酸，其中K. eburnea 1615在50 ℃下发酵15 d时苯乙醇和异戊酸含量最高，为(31.17±0.14) μg/g和(16.75±0.76) μg/g。50 ℃下菌株K. eburnea 6E22在发酵15 d时2，5-二甲基吡嗪含量最高，为(1.67±0.14) μg/g，菌株K. eburnea 1613在发酵15d时己酸含量最高，为(3.74±0.19) μg/g。50 ℃下发酵高粱自身中醛酮类物质积累明显。偏最小二乘判别分析(partial least squares discriminant analysis， PLS-DA)分析显示，温度和时间对3株菌发酵高粱中挥发性化合物的组成有显著影响。【结论】象牙克罗彭斯特菌有助于堆积发酵酒醅风味化合物的产生，特别是醇类、酸类和吡嗪类等酱香型白酒特征风味物质。

关键词：堆积发酵象牙克罗彭斯特菌固态发酵挥发性化合物

醋酸发酵阶段添加不同类型高温大曲对食醋风味品质的影响

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食品与发酵工业 2024年第5期50卷 100-107页

作者：马嘉艺黄浩伦刘孟春熊羊城张晓娟柴丽娟陆震鸣许正宏江南大学生物工程学院江苏无锡214122 江南大学粮食发酵与食品生物制造国家工程研究中心江苏无锡214122 贵州省仁怀市茅家村酱醋有限公司贵州遵义564500

该研究将白曲、黄曲、黑曲3种不同类型的高温大曲拌入醋醅进行醋酸发酵,制备固态发酵食醋。采用HPLC和顶空固相微萃取结合气相色谱质谱联用(headspace-solid phase microextraction-gas chromatography-mass spectrometry,HS-SPME-GC-MS)技术,结合正交偏最小二乘判别分析(orthogonal partial least squares-discriminant analysis,OPLS-DA)比较成品醋中有机酸和挥发性化合物的组成差异。结果表明,在醋酸发酵阶段添加3种不同类型的高温大曲均能够提高成品醋的总酸和有机酸含量,主要表现为乳酸和乙酸含量的提高,添加白曲的提升效果最佳;同时,HS-SPME-GC-MS显示3种不同类型高温大曲的添加均能丰富成品醋的挥发性风味,OPLS-DA筛选出38种具有重要差异的挥发性化合物,并且添加黄曲和黑曲的成品醋的挥发性化合物与对照组成品醋的差异更明显;此外,感官评价表明醋酸发酵阶段添加高温大曲能改善成品醋的风味品质,添加黄曲的效果最佳。该研究证实了在醋酸发酵阶段添加3种不同类型的高温大曲可以改善固态发酵食醋的风味品质,为食醋产品的开发和风味品质改良提供参考。

关键词：食醋高温大曲醋酸发酵有机酸挥发性化合物

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采用实时荧光定量PCR法检测大曲中的3种高温放线菌

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食品与发酵工业 2024年

作者：陈政柴丽娟张晓娟许泓瑜史劲松王松涛张宿义沈才洪许正宏陆震鸣四川大学轻工科学与工程学院国家固态酿造工程技术研究中心江南大学粮食发酵与食品生物制造国家工程研究中心江南大学生物工程学院江南大学生命科学与健康工程学院

建立实时荧光定量PCR（real-time fluorescence quantitative PCR， RT-qPCR）方法对大曲中3种高温放线菌（Thermoactinomyces vulgaris、T. intermedius和T. daqus）进行特异性定量检测。根据T. vulgaris、T. intermedius、T. daqus全基因组中特异性单拷贝核心基因recA、mdH、gyrA为参考序列分别设计了一对可扩增278、233、291 bp片段的引物；经特异性、有效性、准确性实验显示，在常见的13种白酒酿造微生物中，引物TV、TI、TD分别可特异性检测T. vulgaris、T. intermedius、T. daqus，检测范围为2.82～8.82 lg(copies/μL)，加标回收率95%～105%。进一步对大曲发酵过程样品检测，结果显示，T. vulgaris含量在呈现波动趋势，在第5天达到最高，为（6.06±0.02）lg(copies/g)；T. intermedius含量呈现先上升后下降的趋势，在第7天达到最高，为（6.33±0.13）lg(copies/g)；T. daqus含量在第0～12天呈现波动趋势，在第12～14天下降，随后一直上升，发酵结束时含量最高，为（7.62±0.02）lg(copies/g)。该研究建立的RT-qPCR方法可对大曲发酵过程中3种高温放线菌进行特异性鉴定和快速定量，为进一步监测高温放线菌在白酒酿造过程中的功能提供了方法。

关键词：大曲高温放线菌特异性引物 RT-qPCR

基于宏基因组解析中温大曲成熟前后的微生物群落功能差异

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生物工程学报 2024年第3期40卷 877-894页

作者：刘文虎刘光钱张芮郑蕾陆震鸣张晓娟王松涛沈才洪史劲松许正宏柴丽娟江南大学粮食发酵与食品生物制造国家工程研究中心江苏无锡214122 江南大学生物工程学院江苏无锡214122 泸州品创科技有限公司四川泸州646000 国家固态酿造工程技术研究中心四川泸州646000 江南大学生命科学与健康工程学院江苏无锡214122

大曲是白酒酿造中的糖化发酵剂和生香剂,其成熟过程是获得高品质大曲的重要步骤。前期研究探索了大曲成熟前后的微生物群落组成和多样性,但对微生物群落功能的变化缺乏深入研究。本文在分析中温大曲成熟前后酶活和挥发性化合物的基础上... 详细信息

大曲是白酒酿造中的糖化发酵剂和生香剂,其成熟过程是获得高品质大曲的重要步骤。前期研究探索了大曲成熟前后的微生物群落组成和多样性,但对微生物群落功能的变化缺乏深入研究。本文在分析中温大曲成熟前后酶活和挥发性化合物的基础上,采用宏基因组学解析微生物群落组成和潜在功能的差异,并探索酶活和重要挥发性化合物变化的微生物基础。结果显示,大曲成熟后,水分含量(P≤0.05)、淀粉含量、液化力、糖化力(P≤0.05)和发酵力降低,而酸度和酯化力(P≤0.05)升高;同时,其挥发性化合物组成变化显著(P=0.001),芳香醇类和芳香酯类物质含量显著降低,吡嗪类、酮类和高级脂肪醇类物质含量显著升高。成熟大曲中毛霉菌目(Mucorales,34.8%−23.0%)和散囊菌目(Eurotiales,34.3%−20.1%)等真菌相对丰度降低,功能分析表明这降低了α-淀粉酶、α-葡萄糖苷酶、乙醇脱氢酶和乙醇脱氢酶(NADP+)的基因丰度(P>0.05),导致大曲液化力(P>0.05)、糖化力(P≤0.05)、发酵力(P>0.05)和苯乙醇等芳香醇类物质含量降低(P≤0.05)。此外,酵母菌目(Saccharomycetales,2.9%−16.6%)、乳杆菌目(Lactobacillales,14.9%−23.6%)和芽孢杆菌目(Bacillales,0.8%−3.8%)等微生物的相对丰度升高,使得乙酰基转移酶、羧酸酯酶、乙酰乳酸脱羧酶、R-乙偶姻脱氢酶和S-乙偶姻脱氢酶的基因丰度显著升高(P≤0.05),进而显著提高了大曲的酯化力和吡嗪类物质含量(P≤0.05)。本文在基因水平解析了大曲成熟前后酶活和重要挥发性化合物变化的微生物基础,可为理性调控大曲生产提供理论支撑。

关键词：中温大曲成熟宏基因组学微生物群落结构与功能

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