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高转移潜能细胞外泌体对肝癌细胞迁移侵袭影响及其机制

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中华肿瘤防治杂志 2023年第13期30卷 782-792页

作者：魏思佳柳诗雅马亮亮孙立新冉宇靓孙力超国家癌症中心·国家肿瘤临床医学研究中心·中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院分子肿瘤学国家重点实验室北京100021

目的探讨高转移潜能肝癌细胞来源的外泌体对肝癌细胞的迁移侵袭能力、干性特征及上皮-间质转化等恶性表型的影响及其可能的作用机制。方法差速离心法提取高转移潜能肝癌细胞HCCLM3的外泌体,采用透射电镜(TEM)、蛋白质印迹、纳米颗粒跟... 详细信息

目的探讨高转移潜能肝癌细胞来源的外泌体对肝癌细胞的迁移侵袭能力、干性特征及上皮-间质转化等恶性表型的影响及其可能的作用机制。方法差速离心法提取高转移潜能肝癌细胞HCCLM3的外泌体,采用透射电镜(TEM)、蛋白质印迹、纳米颗粒跟踪分析(NTA)实验对外泌体进行鉴定,免疫荧光实验检测高转移肝癌细胞外泌体可以被肝癌细胞内吞而发挥作用;分别采用无血清成球实验、Transwell实验、CCK-8实验、克隆形成实验检测高转移肝癌细胞外泌体对肝癌细胞的自我更新、迁移侵袭和增殖能力的影响;蛋白质印迹实验检测高转移肝癌细胞外泌体处理后肝癌细胞中干性相关标志物以及PI3K/AKT/mTOR信号通路蛋白表达量的变化。结果高转移潜能细胞条件培养基(CM)促进肝癌细胞的迁移侵袭和自我更新能力。在MHCC97L细胞中,迁移结果显示,高转移条件培养基组迁移数(92.33±5.03)明显高于正常培养基组(57.66±4.04)和移除外泌体条件培养基组(32.33±3.05),F=160.10,P<0.001;侵袭结果显示,高转移条件培养基组迁移数(105.33±12.58)高于正常培养基组(65.33±9.01)和移除外泌体条件培养基组(26.00±4.35),F=54.75,P<0.001。在Bel-7402细胞中,迁移结果显示,高转移条件培养基组迁移数(143.66±23.00)明显高于正常培养基组(73.33±12.58)和移除外泌体条件培养基组(38.00±6.08),F=35.94,P<0.001;侵袭结果显示,高转移条件培养基组迁移数(155.33±6.65)也显著高于正常培养基组(75.33±10.21)和移除外泌体培养基组(38.00±3.61),F=200.00,P<0.001。无血清成球结果显示,在MHCC97L细胞中,高转移条件培养基组成球个数(165.66±19.21)高于正常培养基组(113.0±14.17)和移除外泌体条件培养基组(74.33±7.76),F=29.99,P<0.001;在Bel-7402细胞中,高转移条件培养组(165.66±28.02)也显著高于正常培养基组(99.66±11.67)及移除外泌体条件培养基组(63.00±7.21),F=25.02,P<0.01。成功提取高转移潜能肝癌细胞HCCLM3的外泌体,透射电镜下细胞的外泌体呈双层囊泡样结构并且表达外泌体的分子标志物CD63、CD81和TSG101。Nanogsight纳米粒径分析仪显示,外泌体颗粒呈现无规则的布朗运动,直径在40~150 nm HCCLM3细胞的外泌体直径最高峰为132 nm;经HCCLM3细胞外泌体处理48 h后,肝癌细胞MHCC97L、Bel-7402增殖能力显著增强,在MHCC97L中,对照组和外泌体组克隆形成数分别为278.80±33.47和354.00±47.18,t=3.183,P<0.01;在Bel-7402细胞中,对照组和外泌体组克隆形成数分别为205.83±29.86和290.20±53.38,t=3.377,P<0.01;迁移、侵袭能力也显著增强,在MHCC97L中,对照组和加入外泌体组迁移数分别为37.67±8.32和81.00±12.77,t=4.924,P<0.01;侵袭数分别为24.67±5.85和63.00±9.00,t=6.182,P<0.01。在Bel-7402中,对照组和加入外泌体组迁移数分别为62.00±8.54和113.33±11.50,t=6.205,P<0.01;侵袭数分别为47.00±9.16和175.00±20.66,t=9.808,P<0.001。自我更新能力也显著增强,在MHCC97L中,对照组和外泌体组成球数分别为22.67±4.51和42.00±5.00,t=4.973,P<0.01;在Bel-7402中,对照组和外泌体组成球数分别16.66±4.04和31.33±4.04,t=4.445,P<0.05。蛋白质印迹实验结果显示,MHCC97L和Bel-7402外泌体组和对照组相比,干性相关标志物OCT4、SOX2表达含量升高,均P<0.05;上皮-间质转化蛋白E-cadherin含量下降(P<0.05),Vimentin、Snail蛋白含量增高(均P<0.05);2组细胞加入外泌体处理后,PI3K、AKT、mTOR磷酸化水平升高,均P<0.05。结论高转移潜能肝癌细胞外泌体可以增强肝癌细胞的干性和上皮-间质转化能力来促进其转移,同时可以通过激活PI3K/AKT/mTOR信号通路来发挥其作用。

关键词：肝癌细胞外泌体干性特性迁移侵袭上皮-间质转化能力

2型糖尿病患者血糖控制水平与血清S-100β、神经元特异性烯醇化酶、神经胶质纤维酸性蛋白水平的相关性

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临床检验杂志 2021年第7期39卷 504-506页

作者：柳诗雅王攀周剑锁王天成崔丽艳北京大学第三医院检验科北京100191

目的评价2型糖尿病(T2DM)患者血糖控制水平与血清中S-100β、神经元特异性烯醇化酶(NSE)和神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)水平的相关性。方法选取2020年9月至2021年1月北京大学第三医院130例T2DM患者和66例健康对照者,将T2DM患者分为血糖... 详细信息

目的评价2型糖尿病(T2DM)患者血糖控制水平与血清中S-100β、神经元特异性烯醇化酶(NSE)和神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)水平的相关性。方法选取2020年9月至2021年1月北京大学第三医院130例T2DM患者和66例健康对照者,将T2DM患者分为血糖控制较好组(65例,6.5%9.0%),分析三组的临床资料,检测血清S-100β、NSE、GFAP水平,分析血糖控制水平与上述蛋白质的相关性。结果血糖控制较差组[S-100β:(0.137±0.047)ng/mL;NSE:(13.73±1.87)ng/mL;GFAP:(5.22±0.40)ng/mL]、血糖控制较好组[S-100β:(0.087±0.017)ng/mL;NSE:(10.74±0.86)ng/mL;GFAP:(5.03±0.38)ng/mL]和健康人对照组[S-100β:(0.053±0.005)ng/mL;NSE:(9.36±0.30)ng/mL;GFAP:(3.37±0.13)ng/mL]3组之间比较,血清中S-100β、NSE水平差异有统计学意义(P<0.05),而GFAP差异不明显。其中血糖控制较差组与健康人对照组相比,血清中S-100β、NSE水平明显升高,且差异有统计学意义(P<0.05);血糖控制较好组与健康人对照组相比,血清中S-100β、NSE水平均有升高,仅S-100β升高差异有统计学意义(P<0.05)。Spearman相关性分析显示,血清S-100β、NSE、GFAP水平与血糖呈正相关(P<0.05),多元线性回归分析显示,在控制其他因素相同的条件时上述蛋白质水平仍与血糖呈正相关(P<0.05)。结论T2DM患者血糖水平与S-100β、NSE、GFAP水平呈正相关,与NSE和GFAP相比,S-100β更能反映血糖控制水平。

关键词： 2型糖尿病 S-100β蛋白神经元特异性烯醇化酶神经胶质纤维酸性蛋白神经认知功能损伤

骨架蛋白MYH9和Palladin在肺癌发生发展中的联合作用和临床价值

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癌变．畸变．突变 2024年第5期36卷 333-341页

作者：柳诗雅陈梦申改改曹渊婷孙立新冉宇靓国家癌症中心/国家肿瘤临床医学研究中心/中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院分子肿瘤学国家重点实验室北京100021

目的:研究骨架蛋白MYH9和Palladin对肺癌患者预后和恶性表型的联合作用及临床价值。方法:从癌症基因组图谱(TCGA)数据库下载肺癌转录组数据以及相关临床信息。利用生物信息学方法,分析MYH9和Palladin对肺癌患者预后及其与临床病理特征... 详细信息

目的:研究骨架蛋白MYH9和Palladin对肺癌患者预后和恶性表型的联合作用及临床价值。方法:从癌症基因组图谱(TCGA)数据库下载肺癌转录组数据以及相关临床信息。利用生物信息学方法,分析MYH9和Palladin对肺癌患者预后及其与临床病理特征的关系,进一步分析两者对肺癌预后的联合作用。同时构建双分子敲降和单分子敲降的NCI-H460细胞,分别采用CCK-8法检测双分子敲降对肺癌细胞增殖和耐药的影响,Transwell实验检测双分子联合敲降对肺癌细胞迁移和侵袭的影响,甲基纤维素成球实验检测双分子敲降对肺癌细胞自我更新的作用。最后通过组织芯片进一步验证MYH9和Palladin联合在肺癌中的表达及其对患者预后的影响。结果:生物信息学分析结果显示MYH9和Palladin在肺癌组织中均呈现高表达,相比于低表达组患者,MYH9和Palladin高表达组患者的预后以及临床分期更差,其中双分子均高表达组肺癌患者的预后最差(P<0.01)。细胞生物学实验结果表明双分子敲降组肺癌细胞增殖、耐药性、迁移、侵袭及自我更新能力均明显低于单分子敲降组和对照组细胞(P<0.01)。组织芯片结果进一步证实了相比于癌旁组织,MYH9和Palladin在肺癌组织中均呈现高表达,与低表达组相比,MYH9和Palladin高表达组的肺癌患者预后更差(P<0.01),且双分子均高表达组肺癌患者的临床预后最差。结论:MYH9和Palladin的联合作用对肺癌细胞干性相关特征的影响显著高于其单独作用,MYH9和Palladin双分子联合对肺癌的临床预后作用更显著,这表明MYH9和Palladin有可能成为靶向非小细胞肺癌的联合靶标分子。

关键词： MYH9 Palladin 肺癌干性特征联合作用

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审计师能识别企业的策略性数字化转型行为吗?——基于“言”和“行”双维度的实证分析

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吉首大学学报(社会科学版) 2025年

作者：代彬闵诗尧四川外国语大学国际工商管理学院重庆大学经济与工商管理学院

企业数字化转型行为呈现形式上迎合而实质上保守的特点。本文从“言”和“行”两个角度考察企业策略性数字化转型对审计风险识别的影响。研究发现:企业在数字化转型方面的“多言寡行”不仅降低关键审计事项语调的积极性,而且提升审计收... 详细信息

企业数字化转型行为呈现形式上迎合而实质上保守的特点。本文从“言”和“行”两个角度考察企业策略性数字化转型对审计风险识别的影响。研究发现:企业在数字化转型方面的“多言寡行”不仅降低关键审计事项语调的积极性,而且提升审计收费与审计投入;企业生产效率的提升是策略性数字化转型行为影响审计师风险识别的重要渠道;在国有企业、审计师能力较弱和内部控制质量较高的企业中,策略性数字化转型对关键审计事项语调的负向影响更为明显,而在非国有企业和审计师能力较强的企业中,策略性数字化转型对审计投入和审计收费的正向影响更显著,同时在内部控制质量较高的企业中,策略性数字化转型对审计收费的负向影响更显著。信息披露的真实、准确与完整是资本市场稳健运行的基石。针对上市公司数字化转型目标与实际操作脱节的问题,审计师需制定个性化的审计策略,提升专业技能,以确保非财务信息的可靠性和透明度。此外,监管机构应完善相关法规,加强监督与培训,多方合力共同促进资本市场的健康发展。

关键词：策略性数字化转型关键审计事项语调审计师决策审计风险识别

镜像疗法联合运动贴扎对乳腺癌治疗后持续性疼痛及生存质量的影响

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中国康复医学杂志 2025年第01期 25-31页

作者：陈旦蒋柳雅蔡亚运贾杰上海市静安区中心医院康复医学科复旦大学附属华山医院康复医学科

目的：探讨镜像疗法（mirror therapy,MT）联合运动贴扎（kinesio taping,KT）对乳腺癌治疗后持续性疼痛及生存质量的影响。方法：招募2022年1月—2022年12月就诊于上海市静安区中心医院康复医学科的乳腺癌治疗后持续性疼痛患者，经随... 详细信息

目的：探讨镜像疗法（mirror therapy,MT）联合运动贴扎（kinesio taping,KT）对乳腺癌治疗后持续性疼痛及生存质量的影响。方法：招募2022年1月—2022年12月就诊于上海市静安区中心医院康复医学科的乳腺癌治疗后持续性疼痛患者，经随机分组，22例受试者参与联合组（MT+KT）,21例受试者参与运动贴扎组（KT）。两组患者均进行常规物理康复治疗，KT组在此基础上进行运动贴扎和假镜像治疗，联合组进行运动贴扎和镜像治疗。在治疗前和治疗4周后，使用数字评分法（numerical rating scales,NRSs）对疼痛进行评估，使用握力计测试双侧握力，使用量角器测试肩关节活动度，使用简明健康调查简表SF-36(short form,SF-36)调查受试者的生存质量。结果：两组患者治疗前NRSs评分、握力差、肩关节前屈、外展差值和SF-36各维度评分均无显著性差异（P>0.05）。干预4周后，联合组的NRSs评分、肩前屈和肩外展角度均较治疗前有显著改善（P0.05）。干预4周后，联合组SF-36中的生理功能、一般健康、情感职能的评分较KT组有显著提高（P<0.05）。结论：相对于单一的KT,MT+KT能够进一步改善乳腺癌治疗后持续性疼痛及部分生存质量。

关键词：乳腺癌持续性疼痛镜像疗法运动贴扎技术生存质量

加州大学洛杉矶分校“本科生发起教育”项目的实施与特点

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黑龙江高教研究 2025年第2期 81-87页

作者：高芳祎王思诗华东理工大学

美国加州大学洛杉矶分校(UCLA)的“本科生发起教育”(USIE)项目，是一项选择优秀的高年级本科生，让他们在导师指导下，围绕自己选择的某个主题开设课程并开展教学的革新项目。该项目从学生倡议提出到最终成为UCLA的永久教育项目，经过... 详细信息

美国加州大学洛杉矶分校(UCLA)的“本科生发起教育”(USIE)项目，是一项选择优秀的高年级本科生，让他们在导师指导下，围绕自己选择的某个主题开设课程并开展教学的革新项目。该项目从学生倡议提出到最终成为UCLA的永久教育项目，经过严格论证和长期试验，历时十年之久，是比较成功的“以学生为中心”课程革新项目。从“学生中心生态系统”(SCE)视角审视，USIE的成功离不开其在课程权力分享、教学支持提供、项目质量保障、管理制度融入、政策文化重塑等方面表现出的多维统一特点。我国在“以学生为中心”的一流本科课程建设过程中，应注意整合兼顾课程开发、教学支持、质量保障、管理制度和政策文化等层面系统化推进课程革新，特别要加强学生赋权，强化组织治理，注重质量监测，推动文化再造，使以学生为中心的变革不停留在理念口号、角色转变、关系重建等单一要素或维度，而是成为一种弥散于整个大学机体的文化精神。

关键词：本科生发起教育学生中心生态系统特点

G60科创走廊高质量发展的空间关联结构及影响因素

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浙江师范大学学报（自然科学版） 2025年第1期48卷 68-77页

作者：柳诗易张俊马远军王泽东浙江师范大学地理与环境科学学院浙江金华321004

综合多要素探讨城市空间关联结构对于推进区域高质量一体化发展意义重大.利用修正引力模型和社会网络分析法对G60科创走廊沿线城市高质量发展的空间关联结构及其影响因素进行了分析.结果表明:1)区域整体高质量发展水平不断提升且非均衡... 详细信息

综合多要素探讨城市空间关联结构对于推进区域高质量一体化发展意义重大.利用修正引力模型和社会网络分析法对G60科创走廊沿线城市高质量发展的空间关联结构及其影响因素进行了分析.结果表明:1)区域整体高质量发展水平不断提升且非均衡性不断减弱,沿线城市高质量发展多维度得分差异明显,在空间分布上,高质量发展水平上海最高且向苏浙皖方向逐渐递减,苏州、杭州是区域高质量发展的次核心城市.2)高质量发展空间关联强度呈现稳定的“东高西低”特征,高值关联有向西北纵深发展的趋势;网络关联数、网络密度波动上升;网络关联度、网络等级度、网络效率先呈现“N”型发展趋势,而后表现出阶梯式的上升过程.3)点出度、中介中心度高值区由多点集聚演变至单极格局;点入度始终呈现以杭州、嘉兴、湖州为高值中心的“核心—边缘”结构,接近中心度空间分异最稳定且城市差异最小,高值区不断向西拓展.4)城市邻接、信息关联、创新合作是影响城市高质量空间关联的重要因素,产业结构相似性、交通基础设施差异的影响不显著.研究结论可为推进G60科创走廊一体化高质量发展提供参考.

关键词：高质量发展 G60科创走廊社会网络分析空间关联结构影响因素

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上海城市近自然林更新个体数量差异及其与叶功能性状的联系

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生态学杂志 2025年

作者：石传祺龙诗怡宋坤华东师范大学生态与环境科学学院

叶功能性状反映植物的生活史策略，影响着物种林下更新个体的数量。为从叶功能性状角度理解近自然林植被恢复进程中林下更新机制，本研究以华东师范大学闵行校区生态岛的近自然林为对象，调查其林冠层和更新层，并测定两层中主要物种的... 详细信息

叶功能性状反映植物的生活史策略，影响着物种林下更新个体的数量。为从叶功能性状角度理解近自然林植被恢复进程中林下更新机制，本研究以华东师范大学闵行校区生态岛的近自然林为对象，调查其林冠层和更新层，并测定两层中主要物种的9个叶功能性状，通过回归分析和主成分分析探讨了林下更新个体数量的种间差异及其与叶功能性状的联系。结果表明：生态岛林冠层为常绿落叶混交，且常绿树种的林下更新个体数量远多于落叶树种。林冠层植物中，具有更新层个体的物种与没有更新层个体的物种相比，叶碳氮比和叶碳磷比更大，而比叶面积、叶氮含量和叶磷含量更小。更新层不同物种的密度和优势度与其比叶面积和叶磷含量呈显著负相关；与叶碳磷比呈显著正相关。更新层植物的叶性状主成分分析的第一主成分得分反映了叶经济谱，其得分与密度和优势度呈显著负相关，表明越偏向缓慢投资-收益策略的物种其密度和优势度越高。综上，叶片经济学性状可有效地预测城市近自然林林下更新物种的个体数量，可为城市森林近自然化改造中物种的选择提供科学依据。

关键词：城市森林林下更新叶经济谱植被恢复

中国蓝藻新记录种--纤细双色藻(Cyanobium gracile)

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湖泊科学 2025年第1期37卷 229-237页

作者：刘洋委雅菲李效宇张榜军河南省水生态毒理与健康防护国际联合实验室新乡453007 河南师范大学生命科学学院新乡453007 河南省丹江口水库水域生态系统野外科学观测研究站南阳474450

随着基因测序技术的发展,环境中一些微藻不断被发现,超微蓝藻便是其中之一,但关于超微蓝藻的多相分类学研究在我国报道较少。本研究首次在某自来水厂分离纯化获得了一株超微蓝藻藻株Cyanobium gracile HNU001,并对其形态学、超微结构和... 详细信息

随着基因测序技术的发展,环境中一些微藻不断被发现,超微蓝藻便是其中之一,但关于超微蓝藻的多相分类学研究在我国报道较少。本研究首次在某自来水厂分离纯化获得了一株超微蓝藻藻株Cyanobium gracile HNU001,并对其形态学、超微结构和分子特征进行了研究。形态学研究发现,其藻细胞呈椭圆形或椭球形,在分裂过程中平行于短的细胞轴对称存在;超微结构显示了细胞二分裂繁殖以及类囊体膜平行于细胞膜排列;16S rRNA基因序列显示,该藻株与双色藻属Cyanobium的序列相似性大于99.9%,分子系统树聚为一束;该藻株与Cyanobium gracile PCC 6307的D1-D1′、Box-B螺旋结构一致。综合以上结果,将其命名为纤细双色藻(Cyanobium gracile),是在我国的首次报道。

关键词：蓝藻超微蓝藻双色藻分类分子系统