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miRNAs参与ApoE(-/-)小鼠Toll样受体4免疫作用机制的干预研究

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miRNAs参与ApoE(-/-)小鼠Toll样受体4免疫作用机制的干预研究

作者：柳维林湖南师范大学

学位级别：硕士

研究目的：本研究以ApoE(-/-)小鼠为研究对象,采用中小强度的有氧运动和辛伐他汀药物干预手段。探讨动脉粥样硬化Toll样受体4(TLR4)信号转导通路及非编码基因nicroRNAs (miRNAs、miRs)的调控对其血管炎性损伤修复的影响及可能分子机制。... 详细信息

研究目的：本研究以ApoE(-/-)小鼠为研究对象,采用中小强度的有氧运动和辛伐他汀药物干预手段。探讨动脉粥样硬化Toll样受体4(TLR4)信号转导通路及非编码基因nicroRNAs (miRNAs、miRs)的调控对其血管炎性损伤修复的影响及可能分子机制。研究方法：应用ApoE基因敲除和高脂高胆固醇饲料诱发动脉粥样硬化小鼠(10周龄C57BL/6J),将其分为安静组(n=16)、运动组(n=16)、用药组(n=16);定期测定尾血清CHO、LDL、HDL含量以检验实验模型;酶联接免疫吸附反应法(ELISA)检测血清炎性因子IL-6、TNF-a、IL-10的含量及血管ET1、AngⅡ激素水平;胶原蛋白酶消化法收集血管内皮细胞;免疫组化法检测TLR4通路相关因子Toll样受体4(TLR4)、TRAF6、NF-Kb及内皮细胞EGF、TGF-β的蛋白水平;RT-PCR法检测CRP、MCP-1mRNA表达水平;Real time qPCR法检测miRNAs的表达;利用PicTar, TargetScan等数据库预测miRNA靶基因,并采用双荧光酶报告载体验证niRNA-146a的靶基因。研究结果： (1)HE染色显示：12周安静组ApoE(-/-)小鼠血管可见明显斑块组织;用药组内皮表层细胞肿胀呈泡沫样,运动组则未见以上组织改变。 (2)运动组与用药组小鼠血清IL-6、TNF-a含量较安静组降低(p<0.01),而IL-10的含量升高(p<0.01)。运动组与用药组血管组织ET1、Ang Ⅱ含量较安静组均升高(p<0.05)。 (3)运动与用药组AS小鼠血管组织中TLR4、TRAF6、NF-Kb的表达均下降(p<0.05),炎性反应因子CRP、MCP-1的表达均降低(p<0.05)。 (4)运动组小鼠血管内皮细胞EGF、TGF-β mRNA的表达均升高(p<0.01)。 (5)运动组与用药组小鼠内皮细胞miRNA-155表达下调(p<0.01),miRNA-146a、miRNA-126表达上调(p<0.01)。 (6)双荧光报告载体报告证明miRNA-146a结合TLR4通路下游基因TRAF63’UTR,并负调控其TRAF6mRNA和蛋白表达。结论： (1)中小强度有氧运动和辛伐他汀药物下调Toll样4通路TLR4、TRAF6及核转录因子-Kb的表达,同时促进内皮细胞生长因子分化与内皮素的分泌,以促进ApoE(-/-)小鼠血管损伤的修复。 (2)有氧运动介导介导miRNA-146a负调控TRAF6,从而阻断TLR4信号通路,也可能介导miRNA-155和miRNA-126的作用直接抑制炎性损伤,从而遏制ApoE(-/-)小鼠动脉粥样硬化发展过程。

关键词：动脉粥样硬化炎性损伤 TLR4信号通路 mircoRNA

电针对局灶性脑缺血再灌注大鼠缺血周围皮质与纹状体区波形蛋白表达的影响

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中国康复医学杂志 2016年第1期31卷 14-19页

作者：郑薏柳维林上官豪王鲜黄佳陶静福建中医药大学康复医学院福州350122 福建康复技术协同创新中心

目的:观察电针对局灶性脑缺血再灌注损伤后大鼠缺血周围皮质纹状体区波形蛋白(vimentin)的影响。方法:雄性SD大鼠36只,随机分为假手术组、模型组、电针组。采用改良线栓法制备大脑中动脉闭塞(MCAO)法建立大鼠局灶性脑缺血再灌注模型。... 详细信息

目的:观察电针对局灶性脑缺血再灌注损伤后大鼠缺血周围皮质纹状体区波形蛋白(vimentin)的影响。方法:雄性SD大鼠36只,随机分为假手术组、模型组、电针组。采用改良线栓法制备大脑中动脉闭塞(MCAO)法建立大鼠局灶性脑缺血再灌注模型。术后第1天开始电针大鼠患侧肢体"曲池"、"足三里"穴30min,1次/天,至动物处死。对各组大鼠在电针干预前后进行神经行为学评分,同时在电针干预第3天、第7天后,分别对3组大鼠进行CatWalk步态分析系统的运动行为学检测,免疫组化检测大鼠缺血周围皮质与纹状体区vimentin表达。结果:电针干预第3天、第7天后,与相同时间点模型组比较,电针组的神经功能缺损症状明显改善(P<0.05或P<0.01);Cat Walk步态分析系统结果显示,电针组运动速度增加,持续时间减少,差异均有显著性意义(P<0.05);在大鼠缺血周围皮质和纹状体区,电针组vimentin表达均显著增加(P<0.05)。结论:电针能明显促进局灶性脑缺血再灌注大鼠缺血周围皮质纹状体区vimentin的增殖,改善脑缺血大鼠的神经功能缺损及运动功能。

关键词：局灶性脑缺血电针波形蛋白胶质纤维酸性蛋白

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成人先天性巨结肠3例报告

山东医药 2010年第38期50卷 111-112页

作者：柳维林路云晶宗欣青岛市城阳人民医院山东青岛266109

先天性巨结肠成人发病者罕见.2003～2005年,我们收治发病年龄在60岁左右的成人先天性巨结肠患者3例.现报告如下.临床资料:例1:女,58岁.因腹胀、腹痛30 h入院.患者自20多岁时即出现腹胀、便秘.一般5～6 d,经按摩左下腹或服泻药后方能排便... 详细信息

先天性巨结肠成人发病者罕见.2003～2005年,我们收治发病年龄在60岁左右的成人先天性巨结肠患者3例.现报告如下.临床资料:例1:女,58岁.因腹胀、腹痛30 h入院.患者自20多岁时即出现腹胀、便秘.一般5～6 d,经按摩左下腹或服泻药后方能排便,每次排粪及排气量多,并常伴有阵发性腹痛,恶性、呕吐等症状,反复发作.

关键词：先天性巨结肠成人发病年龄

有氧运动对肥胖女大学生外周血瘦素水平及瘦素受体mRNA表达的影响

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北京体育大学学报 2011年第11期34卷 58-61页

作者：许之屏柳维林王萍秀胡煜金育强湖南师范大学体育学院湖南长沙410012 湖南女子学院体育教学部湖南长沙410004

目的:通过对肥胖女大学生实施12周有氧运动处方,检测受试者血浆瘦素水平及外周血单个核细胞瘦素受体mRNA的表达,探讨运动减肥的机理。方法:以60名肥胖女大学生作为受试者,实施有氧运动处方12周,分别在运动前、后对受试者的体重、体重指... 详细信息

目的:通过对肥胖女大学生实施12周有氧运动处方,检测受试者血浆瘦素水平及外周血单个核细胞瘦素受体mRNA的表达,探讨运动减肥的机理。方法:以60名肥胖女大学生作为受试者,实施有氧运动处方12周,分别在运动前、后对受试者的体重、体重指数、腰围和体脂含量进行测定;采用全自动生化分析仪测定血TG、TCH、HDL-C、LDL-C的含量及ELISA法检测血浆瘦素水平;应用RT-PCR法检测外周血单个核细胞瘦素长、短受体mRNA的表达。结果:运动后受试者体重、体重指数、腰围和体脂含量有明显减少,血TG、TCH、LDL-C含量降低,而HDL-C没有统计学意义的变化;血浆瘦素水平显著性降低;外周血单个核细胞瘦素长、短受体mRNA的表达均上调。结论:1)有氧运动导致血浆瘦素水平下降可能是机体为了维持自身体重稳定和能量代谢平衡的一种适应性反应,体内瘦素水平下降与体脂含量减少有密切关系。2)有氧运动促进体脂下降可能是通过长、短瘦素受体的表达上调来发挥生物学作用的。3)有氧大众健美操辅助力量练习可以作为一种有效的有氧运动处方,达到降低体脂的目的。

关键词：有氧运动处方肥胖瘦素瘦素受体mRNA

太极拳在老年人运动康复实践中的应用研究进展

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中国健康教育 2022年第10期38卷 939-941,959页

作者：杨磊柳维林福建中医药大学体育部福建福州350122 福建中医药大学康复产业研究院福建福州350122

老年人群体的健康维护、慢病康复是中国老龄化社会关注的重点。本文通过对太极拳在老年人运动康复实践中的成效和不足进行梳理后发现,太极拳在引导老年人健康生活方式和老年慢性病康复治疗中有独特优势,但也发现缺乏个性化和针对性的太... 详细信息

老年人群体的健康维护、慢病康复是中国老龄化社会关注的重点。本文通过对太极拳在老年人运动康复实践中的成效和不足进行梳理后发现,太极拳在引导老年人健康生活方式和老年慢性病康复治疗中有独特优势,但也发现缺乏个性化和针对性的太极拳运动处方方案,以及太极拳练习评估缺乏客观标准等问题。未来需要不断完善相关问题,更好地发挥太极拳在老年人运动康复实践中的作用与价值。

关键词：太极拳老年人运动康复

肠道微生物改变对缺血性脑卒中及运动功能障碍的影响与相关性研究

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中国康复医学杂志 2023年第5期38卷 706-711页

作者：柯晓华柳维林陈立典陶静福建中医药大学康复医学院福州市350122 同济大学附属上海市第四人民医院

脑卒中是一种急性脑血管病,主要由于脑血管突然破裂或阻塞导致血液不能供应大脑引起脑组织损伤的一组疾病,通常分为出血性和缺血性脑卒中[1]。因其高发病率、高死亡率和高致残率的特点致使该病已成为全球性的公共卫生问题[2]。

关键词：急性脑血管病运动功能障碍缺血性脑卒中脑组织损伤肠道微生物高死亡率公共卫生问题脑血管

电针对缺血性脑卒中大鼠运动功能CatWalk行为学的影响

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中国康复医学杂志 2016年第5期31卷 499-504页

作者：姚建宁上官豪王鲜郑薏柳维林黄佳陶静陈立典福建中医药大学康复医学院福州350122

目的:研究电针对缺血性脑卒中大鼠运动功能Cat Walk行为学相关参数的影响。方法:采用改良线栓法制备大鼠大脑中动脉闭塞再灌注模型。雄性SD大鼠随机分成3组:假手术组、模型组、电针组。对模型组、电针组大鼠在电针干预前后进行神经行为... 详细信息

目的:研究电针对缺血性脑卒中大鼠运动功能Cat Walk行为学相关参数的影响。方法:采用改良线栓法制备大鼠大脑中动脉闭塞再灌注模型。雄性SD大鼠随机分成3组:假手术组、模型组、电针组。对模型组、电针组大鼠在电针干预前后进行神经行为学评分;同时在电针干预7d后,分别对3组大鼠进行CatWalk步态分析系统的行为学检测。来探讨电针治疗缺血性脑卒中大鼠运动功能的有效性,以及Cat Walk步态分析系统可以作为评价电针改善运动功能的可行性。结果:电针治疗7d后,电针组与模型组的神经行为学评分有显著性差异(P<0.05);而Cat Walk步态分析系统结果显示从大鼠的运动速度、持续时间和每一只爪子的爪印面积、最大接触面积、最大压强、平均压强、步长等不同客观参数,显示了模型组与假手术组之间的差异(P<0.05),以及电针组与模型组之间的差异。结论:电针改善缺血性脑卒中大鼠运动功能Cat Walk行为学,促进脑功能恢复。Cat Walk步态分析系统可以精确、客观地反映出大鼠运动功能的变化,对于电针对大鼠行为学实验研究有重要意义。

关键词：电针缺血性脑卒中运动功能 CatWalk步态分析系统

电针激活大脑中动脉闭塞大鼠miRNA调控NF-κB信号通路的机制研究

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中国康复医学杂志 2016年第4期31卷 388-393页

作者：姚建宁王鲜柳维林上官豪郑薏黄佳陶静陈立典福建中医药大学康复医学院福州350122

目的:探讨电针通过NF-κB信号通路治疗局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠所产生的抗炎作用的mi RNA调控机制。方法:将54只SD大鼠随机分为假手术组、模型组及电针组,以大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)法建立大鼠局灶性... 详细信息

目的:探讨电针通过NF-κB信号通路治疗局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠所产生的抗炎作用的mi RNA调控机制。方法:将54只SD大鼠随机分为假手术组、模型组及电针组,以大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)法建立大鼠局灶性脑缺血再灌注模型。利用Target Scan预测mi R-9a的靶基因,并用双荧光素酶报告载体验证。运用HE染色及TTC染色观察脑缺血后大鼠皮质炎症反应及梗死面积;应用蛋白免疫印迹法和实时PCR检测缺血侧皮质组织中NF-κB,TNF-α及mi R-9a的表达情况。结果:电针曲池、足三里穴可明显改善MCAO大鼠的神经功能缺损症状,降低脑梗死范围,炎症反应明显缓解。可以提高缺血侧皮质mi R-9a的表达(P<0.05),降低炎症因子NF-κB,TNF-α的表达(P<0.05)。结论:电针调控NF-κB信号通路,抑制炎症因子分泌,来实现对脑缺血的治疗作用的机制可能与促进mi R-9a的表达上调相关。

关键词：电针脑缺血微小RNA-9a NF-κB信号通路

葡萄糖Warburg效应在阿尔兹海默病中的作用及AMPK的靶向治疗作用

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中华神经医学杂志 2020年第4期19卷 349-354页

作者：张冰雪柳维林梁胜祥陈立典福建中医药大学康复医学院福州350122 福建中医药大学康复医疗技术国家地方联合工程研究中心福州350122

脑葡萄糖代谢紊乱是阿尔茨海默病(AD)的病理生理学特征之一,其中葡萄糖代谢过程中的有氧糖酵解(Warburg效应)异常是AD早期认知功能障碍的重要原因,改善脑葡萄糖代谢已成为防治AD的重要策略。腺苷-磷酸(AMP)激活的蛋白激酶(AMPK)是感受... 详细信息

脑葡萄糖代谢紊乱是阿尔茨海默病(AD)的病理生理学特征之一,其中葡萄糖代谢过程中的有氧糖酵解(Warburg效应)异常是AD早期认知功能障碍的重要原因,改善脑葡萄糖代谢已成为防治AD的重要策略。腺苷-磷酸(AMP)激活的蛋白激酶(AMPK)是感受体内能量水平波动最敏感的分子化合物,调控葡萄糖代谢的中心枢纽。激活AMPK可影响Warburg效应及其关键限速酶活性,调节脑葡萄糖代谢,达到临床早期延缓AD进程和改善认知功能的目的。本综述从葡萄糖代谢中Warburg效应的角度阐述AD发病机制及AMPK的靶向作用。

关键词：阿尔兹海默病葡萄糖代谢 Warburg效应认知功能