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Sphingomonas sp.ZUTE03产辅酶Q10发酵提取新工艺研究

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Sphingomonas sp.ZUTE03产辅酶Q10发酵提取新工艺研究

作者：柳华贵浙江工业大学

学位级别：硕士

辅酶Q(Coenzyme Q,简写为CoQ),又称泛醌,本质上是一种类维生素类物质,脂溶性苯的衍生物。其在自然界中分布广泛,主要存在于酵母、植物叶子和种子及动物的心脏、肝脏和肾脏中。辅酶Q是细胞呼吸链上的一种递氢体,是细胞自身产生的天然抗... 详细信息

辅酶Q(Coenzyme Q,简写为CoQ),又称泛醌,本质上是一种类维生素类物质,脂溶性苯的衍生物。其在自然界中分布广泛,主要存在于酵母、植物叶子和种子及动物的心脏、肝脏和肾脏中。辅酶Q是细胞呼吸链上的一种递氢体,是细胞自身产生的天然抗氧化剂、细胞代谢激活剂。本论文对辅酶Q的同步皂化提取工艺、发酵萃取耦合产辅酶Q较佳工艺条件、对羟基苯甲酸等前体物质、无机盐添加对发酵产辅酶Q的影响,以及产物的纯化进行了研究。本文对自行筛选获得的鞘氨醇单胞菌(Sphingomonas sp.ZUTE03)发酵产辅酶Q的皂化提取工艺进行了改进,设计了同步皂化提取新工艺,进行菌体中辅酶Q的提取,通过正交方法确定了辅酶Q高提取得率的条件为:皂化温度90℃,皂化时间60min,提取溶剂体积30mL。该工艺提取溶剂回收率均达到50%以上。并对提取样品进行了纯化分离和定性分析。无水乙醇为洗脱液的硅胶柱层析可以初步分离纯化提取样品,通过TLC、HPLC、显色反应的检验鉴定,以及全波长扫描的佐证,可以初步确定该菌发酵合成产物为氧化型辅酶Q。探索了发酵萃取耦合工艺对Sphingomonas sp.ZUTE03产辅酶Q的影响。发现该工艺可以显著提高鞘氨醇单胞菌(Sphingomonas sp.ZUTE03)的辅酶Q产量。单因子试验确定了该工艺的较佳工艺条件为:2%豆油为细胞通透剂并在发酵起始时加入培养液,以30mL正己烷为萃取溶剂并在发酵30h后加入培养液,发酵萃取8h,最终辅酶Q的产量可达32.51mg/L。考察了对羟基苯甲酸添加对Sphingomonas sp.ZUTE03菌辅酶Q合成的影响。该前体的添加对菌体中辅酶Q合成有较为显著的促进作用,并确定了其较佳添加条件为:以水为溶解体系,于发酵培养基中摇床培养6h后,加入对羟基苯甲酸溶液,终浓度为15mg/L,继续发酵培养18h,进行前体转化反应,实验结果能达到最高产值69.91mg/L。考察了添加甘油、Fe和Mg对Sphingomonas sp.ZUTE03菌产辅酶Q的影响。甘油的添加对辅酶Q的合成有一定的促进作用,其添加浓度为1%时,产量可达15.83mg/L,相对空白对照提高了140%;当Fe添加的较佳浓度为2mmol/L时,Mg添加的较佳浓度为1mmol/L,Sphingomonas sp.ZUTE03菌体生长量以及辅酶Q的产量都能达到较理想值。

关键词： Sphingomonas sp.ZUTE03 辅酶Q10 发酵提取

茄尼醇转化高产辅酶Q10菌株的分离鉴定与发酵条件的研究

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微生物学报 2008年第2期48卷 157-163页

作者：柳华贵方建军金凌钟卫鸿叶紫娟浙江工业大学生物与环境工程学院杭州310032 杭州利群环保纸业有限公司杭州310018

采用以异戊二烯为唯一碳源的选择性平板筛选模型,从钱塘江沿岸杭州市九堡段土壤中新筛选到一株产辅酶Q_(10)的细菌菌株E03,经形态、生理生化、Biolog碳源利用试验和16S rDNA序列分析,确定E03属于鞘氨醇属(Sphingomonas sp.),命名为Sphin... 详细信息

采用以异戊二烯为唯一碳源的选择性平板筛选模型,从钱塘江沿岸杭州市九堡段土壤中新筛选到一株产辅酶Q_(10)的细菌菌株E03,经形态、生理生化、Biolog碳源利用试验和16S rDNA序列分析,确定E03属于鞘氨醇属(Sphingomonas sp.),命名为Sphingomonas sp.ZUTE03。摇瓶试验确定了该菌发酵生产辅酶Q_(10)的最佳碳源为葡萄糖15 g/L,氮源为硫酸铵10 g/L,初始pH8.0,发酵温度25℃,并考察了该菌转化茄尼醇产辅酶Q_(10)的发酵工艺,以合适溶剂为溶解体系,于发酵培养基中摇床培养12 h后,加入终浓度为0.75 g/L的茄尼醇粗品,转化12 h,辅酶Q_(10)产值可达96.88 mg/L。

关键词：辅酶Q10,16S rDNA,鞘氨醇菌,发酵

融合议题活动的大单元复习策略——以“崇尚法治精神”为例

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中学政治教学参考 2024年第14期 21-23页

作者：张柳华海南省海口实验中学

融合议题活动的大单元教学是促进教、学、评有效衔接,落实核心素养培养要求的重要途径,在新授课、复习课中都具有较高的教学价值。融合议题活动开展大单元复习,需要教师解读教材文本,提炼单元议题,解决“学什么”的问题;巧设议题活动,... 详细信息

融合议题活动的大单元教学是促进教、学、评有效衔接,落实核心素养培养要求的重要途径,在新授课、复习课中都具有较高的教学价值。融合议题活动开展大单元复习,需要教师解读教材文本,提炼单元议题,解决“学什么”的问题;巧设议题活动,推进深度学习,解决“怎么学”的问题;实施科学评价,实现目标可评可测,解决“何以学会”的问题。

关键词：大单元教学议题活动文本评价

以学科公共平台为依托的教育实践能力培养体系构建探索

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中国教育学刊 2015年第S1期 32-33页

作者：魏秀珍柳华贵陈金媛浙江工业大学生物与环境工程学院

专业学位硕士“工程化”实践能力的提升一直是专业学位硕士培养过程中面临的主要问题。以专业学位硕士教育为具体对象,以浙江工业大学“环境工程”领域专业学位硕士培养为例,通过对已毕业专业学位硕士的调查,分析了目前专业学位硕士培... 详细信息

专业学位硕士“工程化”实践能力的提升一直是专业学位硕士培养过程中面临的主要问题。以专业学位硕士教育为具体对象,以浙江工业大学“环境工程”领域专业学位硕士培养为例,通过对已毕业专业学位硕士的调查,分析了目前专业学位硕士培养过程中存在的问题,提出了构建提升专业学位硕士“工程化”实践能力培养体系的构想,以期创建富有特色的全日制专业学位硕士培养模式。

关键词：全日制专业学位环境工程实践基地

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引发全尾砂料浆触变特征的临界粒径研究

中国有色金属学报 2024年第3期34卷 970-983页

作者：杨柳华李金仓焦华喆尹升华寇云鹏洪紫杰河南理工大学土木工程学院焦作454000 河南理工大学河南省地下工程与灾变防控重点实验室焦作454000 北京科技大学土木与资源工程学院北京100083 山东黄金集团有限公司充填工程实验室莱州261441

细粒径尾砂颗粒絮凝−分解是充填料浆产生触变性的根本原因,然而目前对引发充填料浆触变性的临界粒径研究极少。通过对不同粒径尾砂制备的充填料浆开展触变试验与微观结构的演化测试,结合Patwardhan提出的非牛顿流体理论分析尾砂颗粒间... 详细信息

细粒径尾砂颗粒絮凝−分解是充填料浆产生触变性的根本原因,然而目前对引发充填料浆触变性的临界粒径研究极少。通过对不同粒径尾砂制备的充填料浆开展触变试验与微观结构的演化测试,结合Patwardhan提出的非牛顿流体理论分析尾砂颗粒间相互作用力,推导引发全尾砂料浆触变性能临界粒径的理论值,最终建立了充填料浆触变性模型。结果表明:充填料浆触变性能与剪切速率、质量分数、尾砂细颗粒含量呈正相关,通过理论推导得出引发充填料浆触变性能的临界值为45μm。由此可以认为,当充填料浆中含有粒径<45μm颗粒,且质量分数≥6%时,充填浆料则具有触变效应;反之,充填浆料则不具备触变性。基于实验结果采用Hattori−Lzumi理论构建触变性模型,并结合流变测试结果拟合得到了充填料浆触变性系数。

关键词：充填料浆触变特征临界粒径触变性模型

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人为什么会有异常怕冷、怕热?

中老年保健 2024年第1期 8-10页

作者：黄柳华中日医院中医老年病科

在日常生活中,常可见到有人特别怕冷,有人又特别怕热,还有人是既怕冷又怕热。这些人测量体温时大多正常,但也有超过37.5℃或低于35℃的,这种体温的变化与季节、气温有时有关,有时也无关。他们为此感到痛苦,甚则给生活带来诸多不便.

关键词：日常生活怕热怕冷

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女性生殖系统中肾样腺癌2例

中华妇产科杂志 2024年第2期59卷 156-159页

作者：柳华陈洁宇凌静娴朱湘虹周怀君南京大学医学院附属鼓楼医院妇产科南京210008 南京大学医学院附属鼓楼医院病理科南京210008

中肾样腺癌(MLA)是发生于子宫和卵巢的罕见肿瘤,诊断困难,侵袭性强,易复发及远处转移,预后差。本文报道2例MLA,其中1例卵巢MLA患者,63岁,无症状,体检发现,外院行子宫全切除+双侧附件切除术,术后本院病理会诊证实为卵巢MLAⅠa期,予紫杉醇... 详细信息

中肾样腺癌(MLA)是发生于子宫和卵巢的罕见肿瘤,诊断困难,侵袭性强,易复发及远处转移,预后差。本文报道2例MLA,其中1例卵巢MLA患者,63岁,无症状,体检发现,外院行子宫全切除+双侧附件切除术,术后本院病理会诊证实为卵巢MLAⅠa期,予紫杉醇+卡铂方案化疗6个疗程,现无瘤存活18个月;1例子宫MLA患者,71岁,表现为绝经后阴道流血伴全腹胀痛,行经腹筋膜外子宫切除+双侧附件切除+大网膜切除+腹膜活检术,术后病理检查提示子宫MLAⅣb期,患者拒绝术后辅助治疗,现术后2个月,恶液质状态带瘤存活中。MLA的确诊均依赖于特征性免疫组化检测,表现为GATA结合蛋白3(GATA3)、配对盒基因2(PAX2)、甲状腺核转录因子1(TTF-1)、CD 10、野生型p53阳性表达,雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、Wilms瘤基因1(WT-1)等阴性表达。因女性生殖系统MLA罕见,具有高度侵袭性,故对其进行准确的病理诊断至关重要,需借助于免疫组化及分子检测。目前,MLA尚无标准的治疗方案,以手术联合术后放化疗为主,对于早期患者术后也倾向于积极的辅助治疗。

关键词：女性生殖系统子宫全切除恶液质双侧附件切除病理会诊腹膜活检大网膜切除无症状

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104例产前死胎原因的临床分析与探讨

实用妇产科杂志 2024年第6期 486-489页

作者：王链链杨玲顾宁柳华王志群戴毅敏南京大学医学院附属鼓楼医院妇产科

目的:分析产前死胎原因的临床资料，以增加对死胎原因的认识。方法:收集2018年1月至2022年12月在南京大学医学院附属鼓楼医院终止妊娠的产前死胎病例，分析其临床资料的分布特征及死胎原因分布，采用美国死胎协作网络(SCRN)开发的标准... 详细信息

目的:分析产前死胎原因的临床资料，以增加对死胎原因的认识。方法:收集2018年1月至2022年12月在南京大学医学院附属鼓楼医院终止妊娠的产前死胎病例，分析其临床资料的分布特征及死胎原因分布，采用美国死胎协作网络(SCRN)开发的标准进行死因归类，并分为死因明确组和死因不明组，比较分析两组人群的不同特征。结果:研究期间共有产前死胎210例，符合纳入标准者共104例。其中有尸检结果的为33例(31.7%),39例(37.5%)有遗传学结果，具有胎盘病理学检查的有75例(72.1%)。经SCRN标准归类分级后，死因归入很可能有关者55例(52.9%),可能有关者33例(31.7%),可能无关者13例(12.5%),还有3例(2.9%)不能归因，即死因明确组占84.6%(88例),死因不明组占15.4%(16例)。死因明确组与死因不明组相比，前者胎盘病理学检查率显著增高(78.4%)。死因分类中，胎盘病理性改变占比最多，占26.9%(28例),其次是妊娠合并症占比25.0%(26例),有15.4%的死胎原因仍是不明原因。结论:胎盘病理学检查对明确死胎原因有重要意义，采用SCRN的死胎病因分类分级法具有可行性，胎盘病理性改变在死胎原因分类中占比较高，建议每一例死胎胎盘都要进行病理学检查。

关键词：死胎死胎原因尸检遗传学诊断胎盘病理学

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小学语文群文阅读教学刍议

新课程研究 2024年第2期 89-91页

作者：柳华郭文唐甘肃省古浪县西靖教育工作站甘肃省古浪县县幼儿园

小学语文群文阅读是学生提升阅读能力的关键，但当前学生的群文阅读效果并不理想。对此，文章在分析制约小学语文群文阅读有效性的因素的基础上，提出了具体的提升有效性的方法，如精心选择主题、科学组合文本、注重课堂互动、借助信息... 详细信息

小学语文群文阅读是学生提升阅读能力的关键，但当前学生的群文阅读效果并不理想。对此，文章在分析制约小学语文群文阅读有效性的因素的基础上，提出了具体的提升有效性的方法，如精心选择主题、科学组合文本、注重课堂互动、借助信息技术。

关键词：小学语文群文阅读教学有效性文本组合信息技术