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可复制型DNA疫苗生产用工程菌的筛选

中国科技论文在线精品论文 2022年第3期15卷 311-317页

作者：柯尊阳孔垂占于继云王宇武汉大学药学院武汉430061 固安鼎泰海规生物科技有限公司河北廊坊065500

肿瘤治疗性DNA疫苗pSFVK1-NMM由于采用了基于塞姆利基森林病毒(semliki for estvirus,SFV)的复制子系统,使得其大小超过15 kb,所以需要对该疫苗生产用菌株进行筛选后才能建立三级种子库。本研究首先对不同构型的pSFVK1-NMM质粒进行了电... 详细信息

肿瘤治疗性DNA疫苗pSFVK1-NMM由于采用了基于塞姆利基森林病毒(semliki for estvirus,SFV)的复制子系统,使得其大小超过15 kb,所以需要对该疫苗生产用菌株进行筛选后才能建立三级种子库。本研究首先对不同构型的pSFVK1-NMM质粒进行了电泳分析,对该质粒的超螺旋构型、线性构型、开环构型和碱变性构型的电泳特征进行了描述。然后分别在37,34,30℃培养温度下对比该质粒结构稳定性的差异,发现30℃能提供该质粒稳定的复制环境,为工程菌合适的培养温度,同时也对因高温培养所产生的截短型DNA进行了电泳分析。最后通过30℃条件下的传代培养对21株含有质粒的重组大肠杆菌进行筛选,比较第5,10,15,20代的质粒电泳结果,获得1株能够稳定培养20代的菌株作为生产用工程菌,后续可用于三级种子库的建立。

关键词：生物工程 DNA疫苗菌株筛选连续传代

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mRNA技术及其在传染病疫苗研发中的应用

中华微生物学和免疫学杂志 2020年第9期40卷 661-667页

作者：柯尊阳王宇李忠明于继云固安鼎泰海规生物科技有限公司研发中心 065500 武汉大学药学院 430071

mRNA疫苗技术是近年逐渐发展起来的疫苗新技术之一,其在稳定性、高效投递等方面的技术日趋成熟。mRNA疫苗在细胞内表达抗原,通过刺激免疫系统产生B、T细胞免疫应答等多种效应机制,可达到预防传染病的作用。同时由于其是全合成制备,生产... 详细信息

mRNA疫苗技术是近年逐渐发展起来的疫苗新技术之一,其在稳定性、高效投递等方面的技术日趋成熟。mRNA疫苗在细胞内表达抗原,通过刺激免疫系统产生B、T细胞免疫应答等多种效应机制,可达到预防传染病的作用。同时由于其是全合成制备,生产工艺简单,具有快速应对诸如新型冠状病毒感染等突发传染病疫情的潜力。为了解传染病mRNA疫苗的开发与研究现状,本文重点对mRNA疫苗的结构特点、优势和挑战以及应用于传染病疫苗研究的现状进行了综述,为新型冠状病毒等传染病mRNA疫苗的研发提供一定借鉴。

关键词： mRNA技术传染病新型冠状病毒mRNA疫苗临床前研究临床试验

NMM肿瘤DNA疫苗乙二胺四乙酸二钠残留量高效液相色谱检测方法的建立及验证

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中国生物制品学杂志 2023年第7期36卷 855-861页

作者：孙澳郭润姿田园伊君梅柯尊阳宋卫卫邱创钧李忠明王宇于继云固安鼎泰海规生物科技有限公司河北廊坊065000

目的建立NMM肿瘤DNA疫苗原液中乙二胺四乙酸二钠(ethylenediaminetetraacetic acid disodium salt,EDTA-2Na)残留量高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)检测方法,并进行验证,用于DNA疫苗质量控制。方法将NMM肿瘤DNA疫苗原液与硫酸铜络合后,建立EDTA-2Na残留量HPLC检测方法:色谱柱为Agilent ZORBAX SB-C18(150 mm×4.6 mm,5μm);流动相为水-10%四丁基氢氧化铵-乙腈溶液(74.5∶0.5∶25);检测波长为254 nm;流速为0.8 mL/min;柱温为20℃;进样量为20μL。对方法的专属性、线性范围、检测限及定量限、溶液稳定性、耐用性、准确度、精密度进行验证。用建立的方法对多批次DNA疫苗原液中EDTA-2Na残留量进行检测。结果EDTA-2Na对照品及加入EDTA-2Na的DNA疫苗原液与硫酸铜反应后,在5.3 min附近出现吸收峰,而DNA疫苗原液与硫酸铜反应后未见吸收峰;对照品在4~400μg/mL范围内,与峰面积呈良好的线性关系,R^(2)=0.999 9;该方法检测限为10 ng/mL,定量限为40 ng/mL;对照品及供试品溶液放置12 h,溶液稳定性良好;方法检测条件发生微小变动时(不同流动相比例、不同流速、不同柱温),对检测结果的影响在可接受范围内;低、中、高浓度加标样品EDTA-2Na回收率均值为101.38%,RSD为0.39%;0.1 mg/mL对照品溶液连续进样6次,峰面积RSD为0.04%,6份供试品溶液均未检出EDTA-2Na,含EDTA-2Na的供试品溶液峰面积RSD为0.02%,中间精密度良好。多批次DNA疫苗原液均未检测出EDTA-2Na残留。结论建立的方法操作简便,准确可靠,专属性强,可用于DNA疫苗原液中EDTA-2Na残留量检测。

关键词： DNA疫苗肿瘤高效液相色谱法 EDTA-2Na残留量质量控制

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凝聚核粒子计数器关键技术研究与系统开发

凝聚核粒子计数器关键技术研究与系统开发

作者：蒋尊阳北方民族大学

学位级别：硕士

随着科学技术的进步,医疗、半导体等行业对空气中细微颗粒的物检测要求越来越严格。基于光散射原理的激光尘埃粒子计数器缺乏对粒径0.1μm及以下颗粒物的检测能力,已经不能满足相关行业的需求。为实现更小粒径颗粒物的检测,凝聚核粒子... 详细信息

随着科学技术的进步,医疗、半导体等行业对空气中细微颗粒的物检测要求越来越严格。基于光散射原理的激光尘埃粒子计数器缺乏对粒径0.1μm及以下颗粒物的检测能力,已经不能满足相关行业的需求。为实现更小粒径颗粒物的检测,凝聚核粒子计数器应运而生。凝聚核粒子计数器是检测气溶胶中亚微米及纳米量级颗粒物数量的仪器。该仪器依据过饱和蒸汽异质核化原理实现颗粒物的生长增大,便于光学粒子计数传感器对颗粒物检测。本文分析了凝聚核粒子计数器的基本原理,设计了凝聚核粒子计数器实验装置并开展了相关实验研究。论文主要研究内容包括:(1)生长装置是凝聚核粒子计数器的关键技术之一,其性能直接决定颗粒物生长的效果。本文依据多孔材料的毛细现象,设计了生长装置的多孔介质,使饱和腔中均匀分布充足的正丁醇蒸汽。基于过饱和蒸汽异质核化原理,设计了凝聚核粒子计数器的生长装置,实现了纳米级颗粒物的生长。(2)依据凝聚核粒子计数器的硬件性能需求,本文以STM32F407ZGT6为主控芯片进行硬件电路设计。针对整体电源需求及外围电路驱动,设计了多级电压的电源系统。针对微弱粒子信号抗干扰能力差和采集困难问题,设计了基于运算放大器与滞回比较器信号处理电路,提高了信号采集能力。针对流量与温度的调节,设计了脉冲宽度调制(Pulse Width Modulation,PWM)电路,实现了对气泵、制冷片、加热膜的控制。(3)根据软件功能需求,采用串口屏实现了人机交互界面设计,以方便用户进行操作和数据显示。使用比例积分微分(Proportional Integral Derivative,PID)算法进行闭环控制,实现1L/min流量控制。使用定时器外部触发(External Trigger,ETR)计数方式,实现对脉冲信号的计数。应用轻量型键值数据库,实现对历史数据查找、删除等操作。经过实验对比,本文设计的凝聚核粒子计数器,流量稳定性在2%以内,温度误差为±0.2℃,以TSI 3772型凝聚核粒子计数器为标准仪器的计数相对误差在±10%以内,达到了设计要求,满足行业规范。

关键词：凝聚核粒子计数器异质核化生长装置信号处理流量控制

基于正态变换的变样本容量Shewhart比例控制图设计

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计算机集成制造系统 2024年第2期30卷 610-622页

作者：周思阳张莹柯楚贤交通运输部水运科学研究所北京100088 武汉理工大学交通与物流工程学院湖北武汉430063

为了提高Shewhart型比例控制图的监控效率,将其与变样本容量策略结合,提出一种新的比例控制图(VSS Shewhart-RZ*控制图)来监控二元正态变量之比。基于正态变换方法设计了新的比例统计量Z*,以消除样本容量变化对比例控制图设计及使用的... 详细信息

为了提高Shewhart型比例控制图的监控效率,将其与变样本容量策略结合,提出一种新的比例控制图(VSS Shewhart-RZ*控制图)来监控二元正态变量之比。基于正态变换方法设计了新的比例统计量Z*,以消除样本容量变化对比例控制图设计及使用的不利影响。采用马尔科夫链方法计算了该控制图的平均运行长度和平均样本容量,给出该控制图的参数优化算法。通过仿真分析研究了该控制图的统计性能,并与Shewhart比例控制图进行比较,结果表明VSS Shewhart-RZ*控制图的性能明显优于传统固定样本容量Shewhart比例控制图。

关键词：变样本容量比例分布平均运行链长正态变换

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动力电池智能卷绕技术

储能科学与技术 2024年第4期13卷 1176-1187页

作者：柯奥阳如坤吴学科深圳吉阳智能科技有限公司广东深圳518100 清华大学工程师学院北京100084

在卷绕电芯质量的把控中,极耳对齐精度是一个极为复杂的影响因素,涉及多个工序的质量。为了解决电芯多极耳对齐精度差的问题,本文通过建立极耳位置模型,采用边缘闭环控制算法,对影响对齐精度的各项参数进行检测、矫正和控制闭环,为现有... 详细信息

在卷绕电芯质量的把控中,极耳对齐精度是一个极为复杂的影响因素,涉及多个工序的质量。为了解决电芯多极耳对齐精度差的问题,本文通过建立极耳位置模型,采用边缘闭环控制算法,对影响对齐精度的各项参数进行检测、矫正和控制闭环,为现有控制技术提供理论参考数据,实现极耳对齐精度的有效控制。同时,极耳位置模型可反映各项参数对极耳位置的影响方式以及极耳错位的表现方式,以便于研发人员理解各项参数对极耳错位的影响程度以及修正极耳错位的方式,并将其表现在控制方法中。仿真分析与实际控制工况的结合结果表明,所采取的控制方法对改善极耳位置有着较高的适应性,且模型也能准确反映出极耳位置的变化趋势。此外,本文进一步探讨了实现智能卷绕整体闭环的逻辑方法,进而优化整个卷绕工艺中的控制闭环,对最终实现卷绕工艺的质量闭环,提高电池性能质量以及生产效率的目标,有着重大的参考意义。

关键词：动力电池极耳错位智能卷绕边缘闭环整体闭环

基于多注意力机制的双通道模型对风机叶片表面目标识别

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复合材料科学与工程 2024年

作者：柯灿阳文传博上海电机学院电气学院

目前，风机叶片缺陷的识别主要依赖于望远镜和停机吊篮这两种方法，但这些方法存在准确率和安全性方面的问题。随着无人机技术的广泛应用，利用无人机进行风机叶片表面缺陷的目标识别成为备受瞩目的选择。本文采用计算机视觉的方法，提... 详细信息

目前，风机叶片缺陷的识别主要依赖于望远镜和停机吊篮这两种方法，但这些方法存在准确率和安全性方面的问题。随着无人机技术的广泛应用，利用无人机进行风机叶片表面缺陷的目标识别成为备受瞩目的选择。本文采用计算机视觉的方法，提出了一种结合Swin Transformer和轻量级神经网络两种不同架构的中量级网络对风机叶片表面目标进行识别。本文收集了华东某沿海风场的1275张叶片图像，并通过图像增强技术将数据扩充为原来的5倍。模型中，Swin Transformer为主特征提取器，轻量级神经网络为辅特征提取器，引入CBAM注意力机制增强模型对局部关键信息的聚焦能力，并采用CosineAnnealingWarmRestarts的学习率调整策略优化模型性能。实验结果表明：本文所提出的模型在风机叶片目标识别中准确率、F1分数分别达到97.8%和96.35%，均领先于同等量级的主流模型，为风机叶片表面目标识别提供了一种新的思路。

关键词：风机叶片复合材料图像识别 Swin Transformer 轻量级神经网络注意力机制

伸缩缝施工技术在市政道路桥梁施工中的应用分析

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中文科技期刊数据库（全文版）工程技术 2024年第7期 0051-0054页

作者：柯尊福四川康扬建设工程有限公司四川成都610043

随着我国城市化进程的加快,我国城市道路、桥梁等建设项目越来越多,它不仅代表着城市面貌的更新,也代表着城市交通的便捷与高效。然而桥梁作为动力荷载结构,在应用过程中不可避免地要经受温度变化、风载和车辆荷载等外部环境因素的影响... 详细信息

随着我国城市化进程的加快,我国城市道路、桥梁等建设项目越来越多,它不仅代表着城市面貌的更新,也代表着城市交通的便捷与高效。然而桥梁作为动力荷载结构,在应用过程中不可避免地要经受温度变化、风载和车辆荷载等外部环境因素的影响,从而引起结构变形,为保证桥梁的正常使用,延长其使用寿命,所以伸缩缝施工技术在市政道路桥梁建设中得到了广泛的应用。在桥梁结构中设置伸缩缝,以适应温度变化、交通荷载等外界因素的影响,降低应力集中造成的破坏,延长桥梁使用寿命。因此,加强对伸缩缝技术的研究与应用,对促进市政公路桥梁建设具有十分重要的意义。

关键词：伸缩缝施工市政道路去桥梁施工

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高精度管道漏风量测试仪的设计及实验研究

机电工程 2024年

作者：张白曹威蒋尊阳孔德超王胜南北方民族大学电气信息工程学院

现有的国产漏风量测试仪普遍存在测量精度低、自动化水平低的问题，为此，基于漏风量测试仪的原理，开展了漏风量测试仪的结构设计、系统设计及整机实验研究。首先，对漏风量的测量过程、喷嘴流量测量原理进行了研究，推导了喷嘴流量测... 详细信息

现有的国产漏风量测试仪普遍存在测量精度低、自动化水平低的问题，为此，基于漏风量测试仪的原理，开展了漏风量测试仪的结构设计、系统设计及整机实验研究。首先，对漏风量的测量过程、喷嘴流量测量原理进行了研究，推导了喷嘴流量测量公式，并根据相关标准设计了角接取压方式的喷嘴结构，基于仪器操作便捷性要求，对整机结构进行了设计；其次，采用空气密度补偿公式完成了高精度流量自适应测量，设计了基于自锁式电磁阀的换向调零电路，采用换向调零法对压差传感器零点漂移进行了补偿，使用小波阈值去噪算法消除了信号噪声，提高了流量的测量精度；采用抗饱和积分比例积分微分(PID)算法对流量进行了闭环控制；最后，研制了管道漏风量测试仪样机，开展了压差与流量测量精度与重复性实验。实验及研究结果表明：该高精度漏风量测试仪工作状态稳定，压差测量精度为±0.4%，流量测量精度为±2%；该漏风量测试仪的测量精度优于国内同类仪器，符合国家标准要求，具有良好的市场前景。

关键词：漏风量测试仪表喷嘴流量换向调零法小波阈值去噪算法压差测量精度比例-积分-微分