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云南文山铁皮石斛居群的初步评价

时珍国医国药 2012年第2期23卷 468-470页

作者：曾淑华萧凤回查应洪文国松杨生超段承俐云南农业大学中药材研究所云南省中药材规范化种植技术指导中心云南昆明650201 浙江林学院林业与生物技术学院浙江杭州311300 云南省屏边县科技局云南屏边661200

目的初步评价云南省文山州8个铁皮石斛居群的遗传多样性,主要植物学性状和多糖含量。方法采用ISSR技术,对各铁皮石斛居群进行DNA指纹图谱检测;调查各居群铁皮石斛的主要植物学性状以及测定多糖含量。结果筛选出10条引物,共扩增50条DNA片... 详细信息

目的初步评价云南省文山州8个铁皮石斛居群的遗传多样性,主要植物学性状和多糖含量。方法采用ISSR技术,对各铁皮石斛居群进行DNA指纹图谱检测;调查各居群铁皮石斛的主要植物学性状以及测定多糖含量。结果筛选出10条引物,共扩增50条DNA片段,其大小在0.1～3.0 kb之间,其中37条谱带具有遗传多态性,占74.0%。Shannonindex居群平均水平为0.164 1,物种水平为0.366 1。Nei'S genetic identity居群平均水平为0.1045,物种水平为0.240 9。居群遗传一致度和遗传距离的变化范围分别为0.696 8～0.967 5和0.033 0～0.361 2,居群间基因分化系数为0.562 6。各铁皮石斛居群的主要植物学性状存在明显的差别,P3、P5和P6居群的株高和节距明显高于其他居群。多糖含量测定结果表明各居群的含量变化范围为20.55%～25.23%,其中P9、P6和P2居群的多糖含量显著高于P3居群,其他居群间无明显差异。结论云南省文山州各铁皮石斛居群间的遗传多样性较小,主要植物学性状存在明显差别,多糖含量变化不大。

关键词：铁皮石斛 ISSR 遗传变异植物学性状多糖含量

铁皮石斛蔗糖磷酸合成酶基因的克隆与原核表达

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西北植物学报 2013年第4期33卷 692-696页

作者：孟衡玲杨生超查应洪文国松云南农业大学云南省中药材规范化种植技术指导中心昆明650201 红河学院生命科学与技术学院云南蒙自661100 云南红河群鑫石斛种植有限公司云南屏边661200

应用同源序列克隆法克隆了铁皮石斛蔗糖磷酸合成酶(SPS)基因cDNA全长,并进行了原核表达分析,为进一步研究该基因的时空表达、功能分析及多糖合成机理提供理论依据。结果表明:(1)铁皮石斛SPS基因cDNA全长3 502bp,编码区3 186bp,GenBank... 详细信息

应用同源序列克隆法克隆了铁皮石斛蔗糖磷酸合成酶(SPS)基因cDNA全长,并进行了原核表达分析,为进一步研究该基因的时空表达、功能分析及多糖合成机理提供理论依据。结果表明:(1)铁皮石斛SPS基因cDNA全长3 502bp,编码区3 186bp,GenBank登录号JF423929。该基因编码1 061个氨基酸,与文心兰的SPS基因氨基酸序列的一致性最高为93%,与其他科植物SPS基因的氨基酸序列的一致性均高于60%。(2)原核诱导表达结果显示,SPS基因在大肠杆菌中的重组蛋白分子质量约为118.7kD,其表达与序列分析推测的结论一致。(3)生物信息学分析表明,铁皮石斛SPS基因的二级结构包括了螺旋、β-折叠和无规则卷曲,是非跨膜结构的亲水性不稳定蛋白,有2个功能结构域,分别是蔗糖合成功能域及糖基转移功能域。

关键词：铁皮石斛蔗糖磷酸合成酶基因克隆原核表达

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药用植物台湾金线莲快繁技术研究

安徽农业科学 2008年第6期36卷 2272-2272页

作者：孔琼袁盛勇张庭香查应洪张薇云南红河学院生物系云南红河学院农学系云南农业大学园林园艺学院云南省屏边县组培育苗有限公司

[目的]为台湾金线莲的深入研究提供种源。[方法]以带腋芽的台湾金线莲茎段为外植体,用不同培养基诱导丛生芽,并进行生根诱导,建立一套快速繁殖体系。[结果]单独加入1.0;.0 mg/L6-BA的培养基使台湾金线莲丛生芽的增殖倍数从2.3增至4.5;... 详细信息

[目的]为台湾金线莲的深入研究提供种源。[方法]以带腋芽的台湾金线莲茎段为外植体,用不同培养基诱导丛生芽,并进行生根诱导,建立一套快速繁殖体系。[结果]单独加入1.0;.0 mg/L6-BA的培养基使台湾金线莲丛生芽的增殖倍数从2.3增至4.5;同时添加6-BA和2,4-D时,丛生芽的增殖倍数明显增加,6-BA和2,4-D浓度分别为2.0、0.4 mg/L时,丛生芽的增殖倍数达8.1。1/10 MS培养基较适宜生根诱导。活性炭浓度小于0.1%有利于组培苗的生根及生长,生根所需时间较短,平均生根数有所增加,植株生长健壮,经过10;0 d的炼苗,移栽成活率达95%以上。[结论]台湾金线莲丛生芽诱导的适宜培养基为MS+1.0 mg/L KT+0.2 mg/L NAA+2.0mg/L6-BA+0.4 mg/L2,4-D,生根诱导的适宜培养基为1/10 MS+0.5 mg/L NAA+5%香蕉泥+0.05%活性炭。

关键词：金线莲丛生芽生根诱导

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ITS2条形码对白及属植物的初步分析研究

云南农业大学学报（自然科学版） 2017年第1期32卷 95-100页

作者：宋爽周洋帆黄丽杨娟文国松徐绍忠查应洪赵明富赵昶灵云南农业大学农学与生物技术学院云南昆明650201 红河群鑫石斛种植有限公司云南红河661200

本研究通过ITS2条形码对云南白及本地种的分布情况初步了解,并对药用白及和云南本地种进行分析研究。选取滇东南、滇东北、滇西北、滇西的材料,进行DNA提取、PCR、测序,MEGA 5.1软件进行序列比对、NJ系统聚类树构建,并预测ITS2二级结构... 详细信息

本研究通过ITS2条形码对云南白及本地种的分布情况初步了解,并对药用白及和云南本地种进行分析研究。选取滇东南、滇东北、滇西北、滇西的材料,进行DNA提取、PCR、测序,MEGA 5.1软件进行序列比对、NJ系统聚类树构建,并预测ITS2二级结构。结果表明:药用白及和本地种ITS2序列之间存在明显差异,在NJ树上分别聚为两类。ITS2可以区分药用白及和本地种,且可以作为初步分析药用白及真伪的潜在条形码。

关键词：白及 ITS2 物种鉴定

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两种铁皮石斛总RNA提取方法的比较研究

云南农业大学学报（自然科学版） 2012年第5期27卷 703-707页

作者：容天聚文国松钱雄查应洪徐绍忠云南农业大学云南省中药材规范化种植技术指导中心云南昆明650201 红河群鑫石斛种植有限公司云南屏边661200

铁皮石斛是我国重点保护药材,因其富含多糖及次生代谢物,用普通的方法难以从叶中提取到能满足构建全长cDNA文库等分子生物学实验对高质量RNA需要的总RNA。分别通过对异硫氰酸胍法和CTAB法进行改良。异硫氰酸胍法:往裂解液中加入PVP,通过... 详细信息

铁皮石斛是我国重点保护药材,因其富含多糖及次生代谢物,用普通的方法难以从叶中提取到能满足构建全长cDNA文库等分子生物学实验对高质量RNA需要的总RNA。分别通过对异硫氰酸胍法和CTAB法进行改良。异硫氰酸胍法:往裂解液中加入PVP,通过PVP去除多酚;用56℃热水水浴5min加速组织细胞裂解;抽提时间由原来15 min缩短为5min;根据材料多糖多酚的多寡情况适当增加裂解液。CTAB法:根据材料多糖多酚的多寡情况适当增加CTAB裂解液;用LiCl对RNA进行选择性过夜沉淀;灵活处理,适当增大LiCl浓度。结果表明用改良后的2种方法均可提取到总RNA,经对比发现,改良CTAB法提取效果更好,可重复性强,抽取到的RNA更适合于后续的分子生物学实验。

关键词：铁皮石斛多糖总RNA提取异硫氰酸胍法 CTAB法

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不同铁皮石斛红鑫品种品质的对比研究

食品工业科技 2020年第12期41卷 41-46,55页

作者：钟淳菲陈燕兰任运红黎攀查应洪杜冰华南农业大学食品学院广东广州510642 红河群鑫石斛种植有限公司云南红河661200

本研究比较不同铁皮石斛红鑫品种(红鑫1号青杆、红鑫1号红杆、红鑫5号)的品质,对比了三种红鑫铁皮石斛的硬度、剪切力和剪切位移、粘度和稠度、感官评分、色差值;多糖含量、分子量、单糖组分,黄酮类物质含量和生物碱含量,同时探究了打... 详细信息

本研究比较不同铁皮石斛红鑫品种(红鑫1号青杆、红鑫1号红杆、红鑫5号)的品质,对比了三种红鑫铁皮石斛的硬度、剪切力和剪切位移、粘度和稠度、感官评分、色差值;多糖含量、分子量、单糖组分,黄酮类物质含量和生物碱含量,同时探究了打浆前后石斛品质与质构的关系。结果表明:三种石斛样品的硬度、剪切力、多糖分子量,打浆后稠度、色差值有显著性差异。多糖为非均一组分,是杂多糖,其中红鑫1号红杆多糖含量最高,其次是红鑫1号青杆、红鑫5号。多糖的单糖组成基本相同,主要由4种六碳糖(甘露糖、葡萄糖、半乳糖、鼠李糖)和3种五碳糖(核糖、阿拉伯糖、木糖)组成,其中甘露糖和葡萄糖含量最高,其次是阿拉伯糖,但相对含量有所不同。其中红鑫1号红杆的甘露糖相对含量最高,含量为46.71%,红鑫1号青杆是36.52%,最小的是红鑫5号为35.92%。三种石斛样品的水分含量、剪切位移、感官评分等无显著差异。打浆前干品石斛多糖的含量与其质构(硬度、剪切力、剪切位移)呈正相关,而石斛浆多糖含量与其稠度呈正相关。表明同产地、同系列、不同红鑫品种的铁皮石斛品质存在显著性差异,红鑫1号红杆在感官综合评分、多糖含量、单糖组成上优于红鑫1号青杆、红鑫5号,研究结果为铁皮石斛优良种源的选育及科学评价提供参考。

关键词：红鑫系列铁皮石斛品质差异

铁皮石斛可溶性糖含量与蔗糖代谢酶活性的相关性研究

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西部林业科学 2012年第2期41卷 62-67页

作者：杨骏孟衡玲杨生超张薇查应洪文国松云南农业大学/云南省优势中药材规范化种植工程研究中心云南昆明650201 红河学院云南省高校农作物优质高效栽培与安全控制重点实验室云南蒙自661100 云南红河群鑫石斛种植有限公司云南屏边661200

通过对F型及H型铁皮石斛不同时期可溶性糖含量与蔗糖代谢酶活性的测定,并对其相关性进行分析,分析了可溶性糖的合成与蔗糖代谢酶活性间的关系。结果表明,移栽后F型和H型铁皮石斛叶片中蔗糖磷酸合成酶的活性与季节性变化趋势一致,但F型较... 详细信息

通过对F型及H型铁皮石斛不同时期可溶性糖含量与蔗糖代谢酶活性的测定,并对其相关性进行分析,分析了可溶性糖的合成与蔗糖代谢酶活性间的关系。结果表明,移栽后F型和H型铁皮石斛叶片中蔗糖磷酸合成酶的活性与季节性变化趋势一致,但F型较H型高;蔗糖降解酶与可溶性糖含量及其还原糖间存在相关关系,达到显著水平。对可溶性糖和相关因子进行偏相关分析和通径分析可知,还原糖的直接通径系数最大为1.015,酸性转化酶的直接通径系数为负值(-0.356),与可溶性糖呈负相关关系,4个因子对可溶性糖含量的直接作用大小顺序为还原糖>酸性转化酶>中性转化酶>蔗糖。

关键词：铁皮石斛可溶性糖蔗糖代谢酶相关性分析

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快速测定石斛多糖含量方法的优化

西南农业学报 2014年第2期27卷 595-600页

作者：刘莉钱均祥萧凤回查应洪段承俐杨生超肖丹吴丽华李智敏张庭潘俊王翰墨李晚谊云南省农业科学院药用植物研究所云南昆明650223 云南农业大学云南省中药材规范化种植指导中心云南昆明650201 云南群鑫石斛种植有限公司云南屏边661200

通过取样量、超声时间、浸提剂量、粒径等4个石斛多糖的超声提取影响因素的正交和单因素试验。结果表明,石斛多糖含量超声提取测定的最佳参数为25.0 mg的取样量、80目的粒径、40 min的超声时间、浸提试剂体积与取样量之比为220。该方法... 详细信息

通过取样量、超声时间、浸提剂量、粒径等4个石斛多糖的超声提取影响因素的正交和单因素试验。结果表明,石斛多糖含量超声提取测定的最佳参数为25.0 mg的取样量、80目的粒径、40 min的超声时间、浸提试剂体积与取样量之比为220。该方法具有样品前期处理时间短,测定仪器操作简便,测定速度快、样品用量少的特点,能在较短时间内对大量单株个体进行检测鉴定,为石斛的品质育种提供了有效途径和手段。

关键词：石斛超声提取多糖含量

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快速测定铁皮石斛总生物碱含量方法的优化

西南农业学报 2015年第2期28卷 575-579页

通过取样量、超声时间、浸提剂量、粒径等4个石斛生物碱的超声提取影响因素的正交和单因素试验。结果表明,石斛生物碱含量超声提取测定的最佳参数:0.050 g的取样量、60目的粒径、50 min的超声时间、60的浸提试剂用量与取样量比。该方法... 详细信息

通过取样量、超声时间、浸提剂量、粒径等4个石斛生物碱的超声提取影响因素的正交和单因素试验。结果表明,石斛生物碱含量超声提取测定的最佳参数:0.050 g的取样量、60目的粒径、50 min的超声时间、60的浸提试剂用量与取样量比。该方法具有样品前期处理时间短,测定仪器操作简便,测定速度快、样品用量少的特点,能在较短时间内对大量单株个体进行检测鉴定,为石斛的品质育种提供了有效途径和手段。

关键词：石斛超声提取总生物碱含量