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基于真核表达塞内卡病毒A VP2蛋白的间接ELISA检测方法

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中国兽医杂志 2025年第1期61卷 65-74页

作者：裴宗飞于凯蓝安欣娜陈俊雯张永宁中国农业大学动物医学院北京海淀100193 山东省农业生态与资源保护总站(山东省绿色食品发展中心) 山东济南250131

为建立检测塞内卡病毒A(SVA)抗体的间接酶联免疫吸附试验(ELISA),本试验利用昆虫杆状病毒表达系统表达SVA的主要结构蛋白和保护性抗原VP2,通过间接免疫荧光试验(IFA)验证VP2的免疫反应性,并使用氨基三乙酸镍(NiNTA)树脂亲和纯化重组VP2... 详细信息

为建立检测塞内卡病毒A(SVA)抗体的间接酶联免疫吸附试验(ELISA),本试验利用昆虫杆状病毒表达系统表达SVA的主要结构蛋白和保护性抗原VP2,通过间接免疫荧光试验(IFA)验证VP2的免疫反应性,并使用氨基三乙酸镍(NiNTA)树脂亲和纯化重组VP2蛋白。以纯化的VP2蛋白为包被抗原,利用棋盘滴定法确定最优的抗原包被浓度和待检血清稀释度,通过优化反应条件和确定临界值,建立了检测SVA抗体的间接ELISA检测方法,并评估了其特异性、敏感性、重复性及与IFA的检测符合率。结果显示,重组VP2蛋白在杆状病毒感染的Sf9细胞内呈现可溶性表达,能够被SVA VP2特异性单克隆抗体2F5识别;经Ni-NTA纯化后,获得了分子量约31 kDa的重组VP2蛋白;间接ELISA的最佳抗原包被浓度为2μg/mL,最佳血清稀释度为1∶100,最佳酶标二抗稀释度为1∶10000;阴阳性临界值为0.287;与口蹄疫病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪流行性腹泻病毒、猪丁型冠状病毒、伪狂犬病毒和猪圆环病毒2型抗血清无交叉反应;批内与批间变异系数均低于10%。利用建立的间接ELISA检测了实验室保存的52份猪血清样本,与IFA的检测符合率为96.15%(50/52)。综上,本试验间接ELISA的成功建立为SVA抗体检测和流行病学调查提供了有力工具。

关键词：塞内卡病毒A(SVA) VP2蛋白昆虫杆状病毒表达系统间接ELISA 抗体

常规治疗联合认知行为干预强化治疗在残疾精神障碍患者中的应用效果

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医学理论与实践 2025年第1期38卷 160-163页

作者：徐国进卢睿袁琪雯广东省江门市第三人民医院精神科 529000

目的:探讨常规治疗联合认知行为干预强化治疗在残疾精神障碍患者中的应用效果。方法:选取2022年8月—2023年8月本院收治的残疾精神障碍患者76例,按照掷硬币法随机分为对照组和研究组,每组38例。对照组采用常规治疗,研究组在常规治疗的... 详细信息

目的:探讨常规治疗联合认知行为干预强化治疗在残疾精神障碍患者中的应用效果。方法:选取2022年8月—2023年8月本院收治的残疾精神障碍患者76例,按照掷硬币法随机分为对照组和研究组,每组38例。对照组采用常规治疗,研究组在常规治疗的基础上增加认知行为干预强化治疗。采用简明精神病评定量表(BPRS)、威斯康星卡片分类测验(WCST)、世界卫生组织生活质量量表(WHOQOL-BREF)、社会适应自评量表(SASS)、世界卫生组织残疾评定量表(WHODAS)等评估工具,评价并比较两组患者的精神症状、认知功能、生活质量、社会适应能力、残疾等级等指标。结果:治疗后研究组的BPRS总分降低幅度明显大于对照组,而WCST错误数降低幅度及WCST完成数升高幅度明显大于对照组(P<0.05);治疗后研究组的WHOQOL-BREF、SASS总分升高幅度及WHODAS总分降低幅度均明显大于对照组(P<0.05)。结论:常规治疗联合认知行为干预强化治疗在残疾精神障碍患者中具有显著疗效,能明显改善患者的精神症状,提高认知功能和生活质量,增强社会适应能力,并有助于降低残疾等级。

关键词：残疾精神障碍常规治疗认知行为干预强化治疗效果评估

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中文学习新生态及未来研究思考

语言与文化研究

语言与文化研究 2025年第1期33卷 73-77页

作者：张茜雯张林洁广西外国语学院文学院南宁530001 山东教育出版社有限公司济南250002

全球新科技革命、新经济发展、中国特色社会主义进入新时代背景下,国际中文教育学科内涵发展、学科肩负新使命,中文学习社区空间延展,中文学习者来源结构多元,中文学习观念及需求转变,从宏观、中观、微观层面共同构成了中文学习新生态... 详细信息

全球新科技革命、新经济发展、中国特色社会主义进入新时代背景下,国际中文教育学科内涵发展、学科肩负新使命,中文学习社区空间延展,中文学习者来源结构多元,中文学习观念及需求转变,从宏观、中观、微观层面共同构成了中文学习新生态。本研究基于中文学习新生态的逐层剖析,提出未来国际教育领域中文学习研究应当拓宽中文学习研究视野,在微观共时研究基础上发展微观历时研究,转变中文学习者研究理念,平衡中文学习者“体验”与研究者“经验”,关注各个层次学习者的需求,鼓励多元学习观念,为国际中文教育学科基础建设贡献力量。

关键词：国际中文教育中文学习者语言生态中文学习生态

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非负随机变量函数的期望的另一公式及其应用

南阳师范学院学报 2025年第1期24卷 35-37页

作者：王霞马晓雯北京工业大学数学统计学与力学学院北京100124 齐鲁师范学院数学学院山东济南250200

探讨了随机变量函数的数学期望问题,特别是考虑了随机变量非负且函数在非负实数区间上严格单调递增的正的一阶可导函数的情况。提出了一个新的公式来计算这类函数的数学期望,该公式的积分表达式与非负随机变量的尾概率和函数的导数有关... 详细信息

探讨了随机变量函数的数学期望问题,特别是考虑了随机变量非负且函数在非负实数区间上严格单调递增的正的一阶可导函数的情况。提出了一个新的公式来计算这类函数的数学期望,该公式的积分表达式与非负随机变量的尾概率和函数的导数有关。通过Fubini定理和变量替换方法给出了两个计算期望的公式,然后提供了两个应用实例,通过实例展示了如何将定理应用于具体的函数。

关键词：非负随机变量随机变量的函数数学期望

从邪、虚、瘀辨治下肢周围血管病及淋巴管病验案4则

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江苏中医药 2025年第1期57卷 57-60页

作者：乔楠丁晓雯杨旭方勇南京中医药大学南通附属医院南通市中医院江苏南通226001

周围血管病及淋巴管病为临床常见病,多发于下肢,因具有病情复杂、迁延难愈、易反复等特点,属临床疑难病。本病可归属于中医学“脉管病”范畴。“瘀”为脉管病之重要病机,贯穿始终。若与“邪”“虚”互结,则复杂难治。临床可根据不同疾... 详细信息

周围血管病及淋巴管病为临床常见病,多发于下肢,因具有病情复杂、迁延难愈、易反复等特点,属临床疑难病。本病可归属于中医学“脉管病”范畴。“瘀”为脉管病之重要病机,贯穿始终。若与“邪”“虚”互结,则复杂难治。临床可根据不同疾病的病因病机特点,从邪、虚、瘀辨治丹毒、青蛇毒、脱疽、象皮腿等周围血管病及淋巴管病,以经方四妙丸、四妙勇安汤、五苓散组合化裁,或选用自拟方。内治先祛湿后治血,或先清热滋阴后治血,或血水并治;外治尊外科“正宗派”之特色,灵活运用清热解毒、箍围消肿、去腐生肌法。内治、外治法同用,临床疗效显著。

关键词：淋巴管炎血栓性浅静脉炎糖尿病足淋巴水肿下肢四妙丸四妙勇安汤验案

南瓜籽饼粕可溶性膳食纤维的提取及其结构与功能特性分析

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食品工业科技 2025年

作者：卓思雨梁颖康欧成成江运秋吕慕雯周爱梅华南农业大学食品学院纽斯葆广赛生物科技股份有限公司

南瓜籽提取油和蛋白质后会产生大量废弃饼粕，而膳食纤维是南瓜籽饼粕的主要活性成分之一。为减少资源浪费并充分挖掘其利用价值，本研究以提取油和蛋白质后的南瓜籽饼粕为原料，采用超微粉碎-高温蒸煮辅助酶法提取南瓜籽可溶性膳食纤维... 详细信息

南瓜籽提取油和蛋白质后会产生大量废弃饼粕，而膳食纤维是南瓜籽饼粕的主要活性成分之一。为减少资源浪费并充分挖掘其利用价值，本研究以提取油和蛋白质后的南瓜籽饼粕为原料，采用超微粉碎-高温蒸煮辅助酶法提取南瓜籽可溶性膳食纤维（Soluble Dietary Fiber，SDF）。首先以平均粒径为指标确定超微粉碎最佳时间，并考察酶解时间、酶解温度和pH值对SDF得率的影响，确定酶解最佳工艺条件，进一步利用扫描电镜、离子色谱仪、X射线衍射仪、高效液相色谱仪和傅里叶红外光谱仪对SDF结构进行分析，最后以吸附性能、酶活性抑制和抗氧化能力为指标分析其功能特性。结果表明，南瓜籽饼粕SDF的最佳提取工艺条件为：超微粉碎时间10 min，酶解温度53 ℃、酶解时间58 min、酶解pH 4.3，在此条件下SDF的得率达到13.07%±0.33%。在结构方面，南瓜籽饼粕SDF表面结构疏松多孔，分子量主要分布在11.97 kDa，单糖组成主要包括鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、木糖和半乳糖醛酸，具有纤维素Ⅰ型晶体结构和纤维多糖典型特征峰。在功能特性方面，南瓜籽饼粕SDF的胆酸盐和胆固醇吸附能力分别为6.34 mg/g和10.61 mg/g（pH=7），α-淀粉酶和胰脂肪酶活性抑制率的IC50值分别为13.999 mg/mL和9.263 mg/mL，DPPH和ABTS自由基清除率的IC50值分别为3.470 mg/mL和3.006 mg/mL。综上所示，采用超微粉碎-高温蒸煮辅助酶法可以获得得率较高且具有一定降血糖、降血脂和抗氧化活性的南瓜籽饼粕SDF，研究结果可为南瓜籽饼粕资源的高值化利用提供一定的理论基础。

关键词：南瓜籽可溶性膳食纤维提取超微粉碎-高温蒸煮辅助酶法结构功能特性

间充质干细胞来源外泌体分离、鉴定技术及应用

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中国组织工程研究 2025年

作者：刘宇龚森怡杨丽华李伟风胡玉雯闫钦彪郭美锦华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室华东理工大学商学院

背景：间充质干细胞外泌体因低免疫原性和靶向递送效果在细胞通讯和表观遗传调控中发挥重要作用，已在疾病的治疗中临床应用。目的：综述间充质干细胞外泌体的分离纯化、鉴定方法及应用进展，促进间充质干细胞外泌体大规模制备技术的开... 详细信息

背景：间充质干细胞外泌体因低免疫原性和靶向递送效果在细胞通讯和表观遗传调控中发挥重要作用，已在疾病的治疗中临床应用。目的：综述间充质干细胞外泌体的分离纯化、鉴定方法及应用进展，促进间充质干细胞外泌体大规模制备技术的开发与临床转化。方法：以“外泌体，间充质干细胞，分离纯化，表征，临床应用”为中文检索词，“exosome,extracellular vesicles,mesenchymal stem cells,isolation,characterization,application”为英文检索词，检索中国知网、PubMed和Web of Science数据库于2024年9月之前发表的文献，排除与主题相关性较差、年代久远及重复的文章，最后纳入109篇文献进行综述。结果与结论：(1)综述了近年来外泌体分离纯化方法，根据原理的不同比较了超速离心法、超滤法、尺寸排阻色谱法、聚合物沉淀法、免疫亲和法、微流控法及其他新方法的特点；(2)外泌体的鉴定方法可以分为物理与生化分析，从外泌体的形状大小及特征蛋白等方面进行表征；(3)间充质干细胞外泌体因具有免疫调节、跨越生物屏障等能力在医疗美容、损伤修复、癌症治疗等多个领域具有广泛应用；(4)外泌体由于自身结构复杂、缺少通用分离技术、稳定性较差等缺点而难以在短时间内实现临床转化。

关键词：间充质干细胞外泌体细胞外囊泡分离纯化制备工艺特征鉴定临床应用疾病治疗工程化外泌体

基于波动光学模型的光谱共焦色散物镜像差分析及校正

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光电子·激光 2025年

作者：李春艳武少杰刘继红付雯雯王泞淋任凯利西安邮电大学电子工程学院

基于波动光学模型分析了像差存在时光谱共焦系统的光谱响应，并提出了像差校正方法。首先，介绍了系统的工作原理和色散物镜的色散模型，并建立了基于波动光学模型的光谱响应模型，研究并分析了像差对轴向光谱响应的影响；仿真结果表明... 详细信息

基于波动光学模型分析了像差存在时光谱共焦系统的光谱响应，并提出了像差校正方法。首先，介绍了系统的工作原理和色散物镜的色散模型，并建立了基于波动光学模型的光谱响应模型，研究并分析了像差对轴向光谱响应的影响；仿真结果表明，球差、彗差及像散会引起峰值高度降低；球差和像散会引起峰值波长发生偏移；而像散会使信号产生次峰现象，且导致边缘信号产生畸变。其次，基于计算像差理论，提出了对像差影响的峰值误差校正方法。最后，利用光谱响应信号的半高全宽验证了像差校正方法的有效性。结果表明，校正后的光谱响应峰值位置更加准确，信号更集中，分辨率提高。本文的研究内容对提高光谱共焦系统的测量精度和分辨率有一定的指导意义。

关键词：像差校正色散物镜波动光学光谱响应光谱共焦

铁刀木幼苗生长及不同器官非结构性碳水化合物、氮、磷对磷添加的响应

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福建农林大学学报(自然科学版) 2025年

作者：张少纯何至杭曾婷婷饶雯青王艺颖莫其锋华南农业大学林学与风景园林学院广东鹅凰嶂野外科学观测研究站

【目的】探究华南地区常见树种铁刀木幼苗的生长以及各器官的非结构性碳水化合物（NSC）、氮（N）、磷（P）对不同水平磷添加的响应，揭示铁刀木生长对土壤磷素变化的响应规律。【方法】以铁刀木幼苗为研究对象，设置对照（不加磷）、低... 详细信息

【目的】探究华南地区常见树种铁刀木幼苗的生长以及各器官的非结构性碳水化合物（NSC）、氮（N）、磷（P）对不同水平磷添加的响应，揭示铁刀木生长对土壤磷素变化的响应规律。【方法】以铁刀木幼苗为研究对象，设置对照（不加磷）、低磷(加50 kg·hm-2·a-1)和高磷(加100 kg·hm-2·a-1)3种处理，探究不同水平磷添加处理对幼苗生长及叶、枝、茎、粗根和细根等器官NSC、氮、磷含量的影响。【结果】（1）高磷处理显著提高了铁刀木幼苗的苗高和地径的相对生长速率；低磷处理显著提高了地径的相对生长速率，同时显著增加了叶、枝、茎的生物量和总生物量；两种磷添加水平处理下，茎的生物量占比均最大。（2）高磷处理下，茎的可溶性糖含量显著高于低磷处理；与对照相比，低磷处理下细根的淀粉含量显著增加，高磷处理下叶片的淀粉含量显著增加。对照和低磷处理下，叶的可溶性糖占比最大；对照和高磷处理下，淀粉和NSC在粗根中的占比最大。低磷处理提高了叶、枝的NSC及其组分占比；两种磷添加水平处理降低了粗根、细根的NSC及其组分占比。（3）3种处理下，叶、枝的磷含量均表现为高磷>低磷>对照；与对照相比，低磷处理下枝的氮含量显著增加，低磷和高磷处理下枝的磷含量显著增加；除粗根外，其他器官的氮磷比呈下降趋势；对照和低磷处理下，叶的氮、磷含量最高，氮、磷在各器官的占比表现为叶>枝>茎>粗根>细根。（4）叶、枝、细根的生物量分别与对应器官的NSC及其组分含量呈显著正相关；叶、枝的NSC及其组分含量分别与对应器官的氮、磷含量呈显著正相关；茎的可溶性糖和NSC含量分别与氮、磷含量呈显著正相关。【结论】一定水平的磷添加有利于铁刀木幼苗的生长，苗木通过调节NSC、氮、磷在各器官的分配比例，达到最优资源配置，以适应土壤磷素的变化。

关键词：磷添加铁刀木非结构性碳水化合物氮磷分配格局