检索结果-南通市图书馆

组蛋白去乙酰化酶3参与调控Hippo信号通路

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

复旦学报（自然科学版） 2022年第4期61卷 395-404页

作者：张伉冯颖林鑫华戚昀复旦大学生命科学学院上海200438 温州医科大学眼视光学院附属眼视光医院浙江温州325027 温州医科大学眼视光学和视觉科学国家重点实验室浙江温州325027

Hippo信号通路在器官大小、组织再生和肿瘤发生发展等方面发挥重要作用,且它在进化上高度保守。Hippo信号通路的失调和多种癌症密切相关。果蝇中Hippo信号通路上游的级联激酶通过磷酸化效应因子Yki,进而调控Yki和转录因子Sd的结合以及... 详细信息

Hippo信号通路在器官大小、组织再生和肿瘤发生发展等方面发挥重要作用,且它在进化上高度保守。Hippo信号通路的失调和多种癌症密切相关。果蝇中Hippo信号通路上游的级联激酶通过磷酸化效应因子Yki,进而调控Yki和转录因子Sd的结合以及下游靶基因的表达。为了寻找Hippo信号通路新的调控因子,我们以过表达Yki造成果蝇眼睛过度增生的表型为基础,进行修饰因子筛选。通过筛选,我们发现组蛋白去乙酰化酶3(HDAC3)参与调控Hippo信号通路,敲除HDAC3特异性地抑制由过表达Yki引起的组织增生,导致果蝇眼睛变小。之后我们通过免疫荧光染色发现HDAC3的缺失激活了Hippo信号通路,进而影响器官发育。进一步地,我们利用遗传学实验和双萤光素酶报告系统分析探究到HDAC3作用于Sd上游,在体外条件下HDAC3的失活能够显著抑制Sd-Yki转录复合体的转录活性。这为探索Hippo信号通路新的调控机制奠定基础,也为HDAC3抑制剂的抗肿瘤治疗提供新的理论支持。

关键词： Hippo Yki 修饰因子筛选组蛋白去乙酰化酶3(HDAC3) 抑制因子

果蝇Golgin-84在发育中的表达和功能研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国细胞生物学学报 2013年第5期35卷 622-629页

作者：侯国丽林鑫华吴一卉刁爱坡天津科技大学生物工程学院天津300457 中国科学院动物研究所生物膜与膜生物工程国家重点实验室北京100101

高尔基体形态和结构的维持与真核细胞内的物质运输和细胞正常功能密切相关,高尔基体蛋白Golgin-84对维持高尔基体形态发挥了重要作用,但其在发育中的功能尚不清楚。为了研究Golgin-84在果蝇发育中的作用,成功制备并纯化了抗果蝇Golgin-8... 详细信息

高尔基体形态和结构的维持与真核细胞内的物质运输和细胞正常功能密切相关,高尔基体蛋白Golgin-84对维持高尔基体形态发挥了重要作用,但其在发育中的功能尚不清楚。为了研究Golgin-84在果蝇发育中的作用,成功制备并纯化了抗果蝇Golgin-84的多克隆抗体并成功构建了UAS-golgin-84-V5过表达和golgin-84 RNAi转基因果蝇,并对golgin-84在果蝇发育中的作用作了初步分析。蛋白免疫印迹和免疫荧光染色实验表明:制备的Golgin-84抗体能特异性识别重组和内源Golgin-84蛋白;Golgin-84与高尔基体蛋白GM130共定位;Golgin-84在果蝇不同发育阶段的各组织中广泛表达,在睾丸中表达较高。另外发现,选择性地在果蝇翅膀中抑制Golgin-84表达使得翅脉发育异常;过表达Golgin-84导致果蝇翅膀生长图式出现缺陷。该实验成功制备了果蝇Golgin-84抗体,获得了golgin-84转基因果蝇,并对golgin-84的功能作了初步的分析,为进一步阐明Golgin-84的作用机制奠定了基础。

关键词： Golgin-84 黑腹果蝇抗体制备过表达

人血小板衍生生长因子A链(PDGF-A)反义RNA表达克隆的构建

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

细胞生物学杂志 1990年第1期12卷 33-37页

作者：林鑫华李文裕中国科学院上海细胞生物学研究所

利用DNA重组技术,我们将PDGF-A第一个外显子DNA片段和PDGF-A cDNA反向克隆到pSV_2 neo中,构建成两种PDGF-A反义RNA表达克隆。该两种PDGP-A反义RNA表达克隆可用于PDGF-A功能的研究以及肿瘤细胞生长阻断的探索。

关键词： PDGF-A 反义RNA 表达克隆

甲胎蛋白基因的DNase Ⅰ敏感性和超敏感区与基因表达的关系

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

实验生物学报 1989年第2期22卷 205-211页

作者：林鑫华李文裕中国科学院上海细胞生物学研究所

我们用大鼠AFP基因cDNA pRAF 87和5'端基因克隆片段为探针,分别探测了AFP基因活跃表达的胚肝组织、具表达潜能的成年肝组织以及不表达的肾组织AFP基因转录区和调控区的DNase Ⅰ敏感性和超敏感区。结果表明;胚肝组织和成年肝组织AFP基因... 详细信息

我们用大鼠AFP基因cDNA pRAF 87和5'端基因克隆片段为探针,分别探测了AFP基因活跃表达的胚肝组织、具表达潜能的成年肝组织以及不表达的肾组织AFP基因转录区和调控区的DNase Ⅰ敏感性和超敏感区。结果表明;胚肝组织和成年肝组织AFP基因在转录区和5'端调控区都显示出较高的DNase Ⅰ敏感性,而肾组织则不敏感。胚肝组织AFP基因存在三个DNase Ⅰ超敏感区:基因转录起始区,离转录起始区上游约-3 kb左右区域,另一超敏感区位于基因内部4.1 kb EcoR Ⅰ片段内。成年肝组织在转录起始区也存在一超敏感区,在基因内部4.1 kb EcoR Ⅰ片段显示较高的DNase Ⅰ敏感性。推测AFP基因上游-3 kb区域(1.5 kb HindⅢ片段区)DNase Ⅰ超敏感区可能与增强基因转录活性相关,而转录起始区超敏感区可能是维持细胞组织专一性表达所必需,基因转录区域内部DNase Ⅰ超敏感区可能与AFP基因维持具活跃表达或潜能表达的染色质空间结构相关。

关键词：甲胎蛋白基因 DNase I 基因表达

E3泛素连接酶基因CG4911敲除和功能的初步研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国细胞生物学学报 2012年第5期34卷 439-446页

作者：叶晓蕾樊晓兰王爽爽张岩金龙金林鑫华温州医学院眼视光学院温州325027 中国科学院动物研究所生物膜与膜生物工程国家重点实验室干细胞与发育生物学重点实验室北京100101 温州医学院检验医学院生命科学学院温州325035

蛋白质的泛素化是一种重要的翻译后修饰过程,参与调控细胞周期、基因转录、信号转导、炎症反应和干细胞的维持等过程。泛素连接酶E3(ubiqutin ligase)是泛素化过程中关键酶。但许多E3基因在发育中的功能和作用机制还不明确。该研究以黑... 详细信息

蛋白质的泛素化是一种重要的翻译后修饰过程,参与调控细胞周期、基因转录、信号转导、炎症反应和干细胞的维持等过程。泛素连接酶E3(ubiqutin ligase)是泛素化过程中关键酶。但许多E3基因在发育中的功能和作用机制还不明确。该研究以黑腹果蝇为模式动物,研究泛素连接酶家族一个重要基因CG4911的功能及分子机制。获得CG4911基因敲除果蝇,CG4911敲除果蝇纯合子可活。原位杂交结果显示,CG4911在胚胎发育早期表达。通过构建CG4911-pUAST-3HA重组子转染Hela细胞,确定CG4911定位于细胞质中,其表达并无修饰作用,并且过表达基因CG4911可导致背板发育缺陷。该研究首次获得了CG4911基因敲除果蝇和CG4911转基因果蝇,并初步探索了F-box基因CG4911的功能,为进一步阐明泛素连接酶的功能及分子机制提供了科学依据。

关键词：泛素连接酶基因 RNA干扰原位杂交果蝇

果蝇新型碱性磷酸酶相关基因CG6236的敲除及表型分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国细胞生物学学报 2012年第5期34卷 424-431页

作者：缪海锋方可欣黄爽爽金龙金林鑫华吴一卉温州医学院眼视光学院温州325027 温州医学院检验医学院生命科学学院温州325035 中国科学院动物研究所生物膜与膜生物工程国家重点实验室北京100101

碱性磷酸酶广泛存在于人体各器官中,其水平异常与一系列疾病有关,但其在发育中的具体作用机制尚不明确。该文以果蝇为模式生物,研究一个新型碱性磷酸酶样蛋白基因CG6236在发育中的功能。利用P-因子介导的不精确剪切获得CG6236缺失突变... 详细信息

碱性磷酸酶广泛存在于人体各器官中,其水平异常与一系列疾病有关,但其在发育中的具体作用机制尚不明确。该文以果蝇为模式生物,研究一个新型碱性磷酸酶样蛋白基因CG6236在发育中的功能。利用P-因子介导的不精确剪切获得CG6236缺失突变体果蝇品系,发现CG6236纯合突变体半致死,存活的幼虫及成蝇腹部出现黑色素瘤样表型。在细胞中表达CG6236融合蛋白,发现其定位于细胞质中。另外,缺失或过表达CG6236均不影响Wingless和Hedgehog信号通路。综上,该研究首次获得CG6236基因缺失突变和转基因果蝇品系,并观察了缺失CG6236果蝇的表型,为进一步阐明基因CG6236的功能及作用机制奠定了基础。

关键词： CG6236 碱性磷酸酶基因缺失黑色素瘤果蝇

镉对果蝇肠道上皮细胞损伤和调控中肠干细胞增殖、分化机制的研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国细胞生物学学报 2013年第5期35卷 602-608页

作者：楼哲丰曹琼洁冯钰淇蔡慧敏段银波张岩林鑫华金龙金温州医学院检验医学院生命科学学院浙江省医学遗传学重点实验室温州325035 中国科学院动物研究所生物膜与膜生物工程国家重点实验室北京100101

重金属元素镉具有较强的生物毒性,是威胁人类健康的重要环境污染物质。为探索镉的过量摄入对生物消化系统的潜在影响,以果蝇中肠系统为实验模型,以不同浓度的氯化镉作为处理因素,探讨其对肠道细胞的损伤作用和调控中肠干细胞增殖、分化... 详细信息

重金属元素镉具有较强的生物毒性,是威胁人类健康的重要环境污染物质。为探索镉的过量摄入对生物消化系统的潜在影响,以果蝇中肠系统为实验模型,以不同浓度的氯化镉作为处理因素,探讨其对肠道细胞的损伤作用和调控中肠干细胞增殖、分化的相应机制。通过透射电镜观察,发现镉对果蝇中肠上皮细胞超微结构具有损伤作用,并且损伤程度具有显著的浓度依赖性;免疫荧光结果证实,镉的过量摄入对中肠干细胞(intestinal stem cell,ISC)、成肠细胞(enteroblast,EB)和肠上皮细胞(enterocyte,EC)的数量和比例能够产生影响,且显著促进中肠干细胞的增殖;Real-time RT-PCR检测结果表明,肠道组织中表皮生长因子受体(epidermal growth factor recep-tor,EGFR)和JAK/STAT信号通路配体基因的转录水平显著提高,JAK/STAT信号通路同时被大幅度活化。结果显示:高浓度镉的摄入对果蝇中肠上皮细胞核膜、线粒体和微绒毛等超微结构造成损伤,该类损伤能够诱使果蝇肠道组织上调表达相关配体蛋白,从而激活干细胞的EGFR和JAK/STAT信号通路,从而促进ISC的增殖与分化能力,继而实现对肠道损伤组织进行及时的修复。然而,中肠干细胞增殖信号通路的持续激活以及干细胞的过度增殖同样具有诱发肠道肿瘤发生的潜在可能。

关键词：镉果蝇超微结构损伤中肠干细胞

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

吃掉自己：细胞自噬的历史与展望

科学 2017年第1期69卷 12-14页

作者：刘晗戚昀林鑫华复旦大学生命科学学院遗传学研究所遗传工程国家重点实验室遗传与发育协同创新中心上海200438

2016年度的诺贝尔生理学或医学奖颁发给日本的分子生物学家大隅良典，以表彰他在“细胞自噬机制发现”方面做出的贡献。自噬参与生物体的众多生理机能，是细胞质量控制的重要组成部分，也是人类很多疾病发生发展的重要风险因子。

关键词：自噬诺贝尔生理学或医学奖大隅良典

果蝇组蛋白去乙酰化酶HDAC1和HDAC3选择性调控形态发生素靶基因转录

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国细胞生物学学报 2015年第6期37卷 772-779页

作者：曹俊李民石伟杰黄勤竹林鑫华温州医科大学眼视光学院温州325027

在真核细胞中,组蛋白的乙酰化状态对于基因转录的正常进行具有重要的调控作用。组蛋白的乙酰化修饰由组蛋白乙酰转移酶(histone acetyltransferases,HATs)执行,这种修饰是动态的、可逆的,负责去乙酰化修饰的酶是组蛋白去乙酰化酶(histon... 详细信息

在真核细胞中,组蛋白的乙酰化状态对于基因转录的正常进行具有重要的调控作用。组蛋白的乙酰化修饰由组蛋白乙酰转移酶(histone acetyltransferases,HATs)执行,这种修饰是动态的、可逆的,负责去乙酰化修饰的酶是组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylases,HDACs),推测HDACs可能通过影响组蛋白的乙酰化状态在基因的转录过程中发挥调控作用。该文以组蛋白去乙酰化酶HDAC1和HDAC3为对象,研究了它们在果蝇翅膀发育过程中对Wg(Wingless)、Hh(Hedgehog)以及Dpp(Decapentaplegic)信号通路下游靶基因转录的调控作用。结果发现,HDAC1功能缺失可导致Dpp下游靶基因Omb(optomotor-blind)和Hh下游靶基因Ptc(patched)的表达上调。Real-time quantitative PCR(RT-q PCR)结果显示,在HDAC1基因敲除的果蝇中,Ptc、Ci(cubitus interruptus)以及Omb的转录水平增加。HDAC3缺失导致Sal(spalt)的表达上调。RT-q PCR结果证实了HDAC3基因敲除果蝇的Sal转录增加,同时发现Vg(vestigial)的转录下降。而过表达HDAC1或HDAC3对下游靶基因的表达则没有影响。综上所述,该研究表明,HDAC1和HDAC3可以选择性地调控形态发生素下游靶基因的转录。

关键词：果蝇 HDAC1 HDAC3 形态发生素基因转录