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芦可替尼在血液系统疾病中的应用

江苏医药 2024年第09期 954-958页

作者：汤鸿浩林赠华南通大学附属医院血液内科

Janus激酶(JAK)1/JAK2抑制剂芦可替尼是一种针对JAK-信号传导和转录激活蛋白信号通路的靶向药物，最早被应用于治疗骨髓纤维化，显著改善患者的症状、缩小脾脏及延长生存期。芦可替尼已经广泛运用于多种血液系统疾病的基础和临床研究，... 详细信息

Janus激酶(JAK)1/JAK2抑制剂芦可替尼是一种针对JAK-信号传导和转录激活蛋白信号通路的靶向药物，最早被应用于治疗骨髓纤维化，显著改善患者的症状、缩小脾脏及延长生存期。芦可替尼已经广泛运用于多种血液系统疾病的基础和临床研究，如骨髓增殖性肿瘤、急性淋巴细胞白血病、移植物抗宿主病、噬血细胞综合征、再生障碍性贫血、多发性骨髓瘤等，本文综述芦可替尼在以上血液系统疾病中的应用。

关键词：芦可替尼血液系统疾病骨髓增殖性肿瘤移植物抗宿主病噬血细胞综合征

免疫介导的再生障碍性贫血模型小鼠巨噬细胞归巢及特征分析

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中华血液学杂志 2024年第6期45卷 594-598页

作者：孙玮林赠华王晗贾惠童来根张志鹏李玟周诚程刘红南通大学医学院南通226001 南通大学附属医院南通226001 宜兴市人民医院宜兴214200

研究免疫介导的再生障碍性贫血(AA)模型小鼠体内巨噬细胞在不同器官的动态归巢过程、特征。通过磁珠分选出供鼠淋巴结中巨噬细胞并用PKH67荧光标记,参照AA模型制备方法造模后,分析小鼠血常规、骨髓活检及HE染色结果,验证造模效果。在造... 详细信息

研究免疫介导的再生障碍性贫血(AA)模型小鼠体内巨噬细胞在不同器官的动态归巢过程、特征。通过磁珠分选出供鼠淋巴结中巨噬细胞并用PKH67荧光标记,参照AA模型制备方法造模后,分析小鼠血常规、骨髓活检及HE染色结果,验证造模效果。在造模的第4、8、12天,收集骨髓、脾脏和淋巴结单个核细胞,通过流式细胞术分析PKH67荧光标志供鼠巨噬细胞的动态变化。探究PKH67荧光标志的巨噬细胞,在AA模型小鼠发病过程中的动态变化,观测到供鼠巨噬细胞归巢到淋巴结并扩增分化,最终转运至骨髓和脾脏。通过蛋白组学质谱分析,初步揭示了巨噬细胞参与AA骨髓微环境激活后的相关免疫炎症反应通路,为病理性巨噬细胞参与AA模型小鼠的发病提供了依据。

关键词：骨髓微环境免疫介导鼠巨噬细胞骨髓活检模型小鼠再生障碍性贫血免疫炎症反应归巢

CAR-T细胞治疗复发难治性弥漫大B细胞淋巴瘤1例报告并文献复习

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当代医学 2024年第1期30卷 120-123页

作者：吕悦杨力黄红铭刘红林赠华南通大学附属医院血液内科江苏南通226001

1例复发难治性弥漫大B细胞淋巴瘤(R/RDLBCL)患者在接受多线治疗后,疾病仍进展,后采用嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)治疗。该患者在输注CAR-T细胞后第1天出现3级细胞因子释放综合征,经治疗后缓解,目前处于部分缓解状态。证实CAR-T可被视为治... 详细信息

1例复发难治性弥漫大B细胞淋巴瘤(R/RDLBCL)患者在接受多线治疗后,疾病仍进展,后采用嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)治疗。该患者在输注CAR-T细胞后第1天出现3级细胞因子释放综合征,经治疗后缓解,目前处于部分缓解状态。证实CAR-T可被视为治疗R/RDLBCL的有效选择。

关键词：复发难治性弥漫大B细胞淋巴瘤嵌合抗原受体T细胞细胞因子释放综合征

免疫介导的再生障碍性贫血小鼠模型的研制及应用

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中华医学杂志 2019年第26期99卷 2007-2010页

作者：林赠华刘红南通大学附属医院血液内科南通226001

再生障碍性贫血(AA)的发病机制主要是免疫异常,免疫介导的AA小鼠模型的建立有利于AA发病机制的深入研究.制备免疫介导的AA小鼠模型有病毒感染、异基因淋巴细胞输注、全身辐照(TBI)加异基因淋巴细胞输注等方法.我们分别以干扰素-γ(IFN-Y... 详细信息

再生障碍性贫血(AA)的发病机制主要是免疫异常,免疫介导的AA小鼠模型的建立有利于AA发病机制的深入研究.制备免疫介导的AA小鼠模型有病毒感染、异基因淋巴细胞输注、全身辐照(TBI)加异基因淋巴细胞输注等方法.我们分别以干扰素-γ(IFN-Y)与白消安合用及TBI加异基因淋巴结细胞输注方法成功制备了两种AA小鼠模型,检测结果显示这两种模型更接近人类AA的特点,其中改良的杂交一代(F1)AA小鼠的制备方法在国内实验条件下易于操作,更适合用于推广,有望成为新的AA基础研究平台.

关键词：再生障碍性贫血小鼠模型免疫介导

中药“神经方”对硼替佐米所致周围神经病变治疗作用的实验研究

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中华血液学杂志 2015年第9期36卷 796-798页

作者：郭丽丽刘红林赠华南通大学附属医院血液科 226001

大量临床试验证实硼替佐米对多发性骨髓瘤（multiplemyeloma，MM）具有显著治疗作用，其最常见和最影响患者生存质量的不良反应为周围神经病变（Bortezomib—inducedperipheralneuropathy，BIPN）。

关键词：周围神经病变治疗作用硼替佐米实验研究经方中药多发性骨髓瘤临床试验

初诊重型再生障碍性贫血患者外周血中CD4^+CD25^+调节性T细胞凋亡的变化

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广东医学 2017年第23期38卷 3633-3635页

作者：朱丽林赠华刘红南通市肿瘤医院肿瘤内科江苏南通226361 南通大学附属医院血液内科江苏南通226001

目的通过研究CD4^+CD25^+调节性T细胞(Treg)在重型再生障碍性贫血(SAA)患者中凋亡的变化,探讨Treg过度凋亡在SAA的发病过程中的作用。方法免疫磁珠分选SAA患者和正常对照者外周血中Treg,应用流式细胞术检测Treg凋亡和Foxp3的表达情况。... 详细信息

目的通过研究CD4^+CD25^+调节性T细胞(Treg)在重型再生障碍性贫血(SAA)患者中凋亡的变化,探讨Treg过度凋亡在SAA的发病过程中的作用。方法免疫磁珠分选SAA患者和正常对照者外周血中Treg,应用流式细胞术检测Treg凋亡和Foxp3的表达情况。结果 SAA患者外周血中Treg凋亡率较对照组升高,差异有统计学意义(P<0.05),外周血CD4^+CD25^+Foxp3+~占CD4^+CD25^+细胞中比例及CD4^+CD25^+Foxp3+~占CD4+~细胞比例均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 SAA患者外周血中Treg可能通过降低Foxp3表达从而促进细胞凋亡,且CD4^+CD25^+Treg凋亡的增加可能参与SAA免疫发病机制。

关键词：贫血再生障碍性调节性T细胞凋亡叉状头转录因子3

靶向沉默独立生长因子1基因对不典型慢性髓细胞白血病细胞生长和增殖的影响

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中华肿瘤杂志 2016年第8期38卷 572-577页

作者：杨熙刘红林赠华钱娟徐新润南通大学附属医院血液科 226000 南通大学公共卫生学院 226000

目的分析siRNA介导独立生长因子1（GFI-1）基因沉默对不典型慢性髓细胞白血病（aCML）NT1细胞生长和增殖的影响。方法采用细胞转染试剂Lipofectamine 2000，将siRNA导入对数生长期的NT1细胞，实验分为空白对照组（加入PBS和脂质体复... 详细信息

目的分析siRNA介导独立生长因子1（GFI-1）基因沉默对不典型慢性髓细胞白血病（aCML）NT1细胞生长和增殖的影响。方法采用细胞转染试剂Lipofectamine 2000，将siRNA导入对数生长期的NT1细胞，实验分为空白对照组（加入PBS和脂质体复合物）、阴性对照组（加入阴性干扰序列和脂质体复合物）和GFI-1基因干扰组（加入针对GFI-1的干扰序列和脂质体复合物）。采用实时荧光定量PCR法检测GFI-1 mRNA的表达水平，Western blot法检测GFI-1蛋白的表达水平，四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测GFI-1 siRNA对NT1细胞增殖的影响，流式细胞仪检测GFI-1 siRNA对NT1细胞周期的影响。裸鼠移植瘤实验检测GFI-1 siRNA对裸鼠成瘤的影响。结果实时荧光定量PCR检测显示，空白对照组、阴性对照组和基因干扰组的GFI-1 mRNA表达水平分别为1.010±0.005、0.918±0.006和0.367±0.017，基因干扰组与空白对照组和阴性对照组的差异有统计学意义（P〈0.05）。Western blot检测显示，基因干扰组的GFI-1蛋白表达水平明显低于空白对照组和阴性对照组（P〈0.05）。MTT法检测显示，空白对照组、阴性对照组和基因干扰组的A值分别为1.193±0.064、1.096±0.049和0.667±0.059，基因干扰组的细胞增殖能力明显低于空白对照组和阴性对照组（P＝0.023）。流式细胞仪检测显示，空白对照组、阴性对照组和基因干扰组的G0/G1期细胞比例分别为（48.6±3.2）%、（53.3±4.5）%和（66.7±3.8）%，基因干扰组与空白对照组和阴性对照组的差异有统计学意义（P〈0.05）。空白对照组、阴性对照组和基因干扰组的sub-G1期细胞比例分别为（2.0±3.6）%、（1.9±1.3）%和（8.2±2.5）%，基因干扰组与空白对照组和阴性对照组的差异有统计学意义（P〈0.05）。裸鼠移植瘤实验显示，空白对照组、阴性对照组和基因干扰组裸鼠的肿瘤重量分别为（0.92±0.04）g、（0.83±0.06）g和（0.37±0.02）g，基因干扰组裸鼠的肿瘤重量明显小于空白对照组和阴性对照组（P〈0.05）。结论 siRNA介导GFI-1基因沉默可抑制NT1细胞生长与增殖，可能为aCML的治疗提供新的靶点。

关键词：白血病髓样细胞 GFI-1 细胞增殖 RNA 小分子干扰

免疫介导的再生障碍性贫血小鼠模型造模过程中病理性T细胞的特征分析

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中华血液学杂志 2022年第7期43卷 587-593页

作者：贾惠林赠华李玟张志鹏刘红南通大学医学院南通大学附属医院南通226001

目的通过DsRed小鼠淋巴细胞输注加全身辐照(TBI)建立免疫介导的再生障碍性贫血(AA)C.B10-H2b/LilMcd (C.B10)小鼠模型, 分析C.B10 AA小鼠模型中病理性T细胞在不同器官的动态归巢过程及特征。方法通过异体淋巴细胞输注加TBI建立AA小鼠模... 详细信息

目的通过DsRed小鼠淋巴细胞输注加全身辐照(TBI)建立免疫介导的再生障碍性贫血(AA)C.B10-H2b/LilMcd (C.B10)小鼠模型, 分析C.B10 AA小鼠模型中病理性T细胞在不同器官的动态归巢过程及特征。方法通过异体淋巴细胞输注加TBI建立AA小鼠模型, 以TBI组为对照, 分析外周血细胞和骨髓单个核细胞数, 验证造模效果。在造模的第3、6、9、12天, 处死小鼠并收集骨髓、脾脏、淋巴结和胸腺单个核细胞, 流式细胞术分析DsRed+ T细胞的动态变化及效应记忆T细胞(TEM)、中央记忆T细胞(TCM)、初始T细胞(na?ve T)和效应T细胞(TEFF)的比例。PCR Array分析AA小鼠不同组织内DsRed+病理性T细胞活化相关基因的表达谱。结果与TBI组相比, AA组小鼠在造模第9、12天出现严重骨髓衰竭, 第12天时骨髓有核细胞数、外周血细胞数均显著减少(P值均0.05)。第9、12天, AA组小鼠骨髓中几乎所有的DsRed+CD4+ T或DsRed+CD8+ T细胞均为TEM, 而淋巴结中包括TEM、TCM以及na?ve T。PCR Array结果显示:骨髓中DsRed+CD4+或DsRed+CD8+ T细胞中CD38、IFN-γ、LAG3、CSF1、SPP1及TNFSF13B表达增高, 但DsRed+CD4+ T细胞中FOXP3、CTLA4表达降低。结论 DsRed小鼠淋巴细胞输注可导致C.B10小鼠发生骨髓衰竭, 并可以在该AA模型小鼠中追踪DsRed+病理性T细胞。在C.B10 AA模型小鼠体内, DsRed+CD8+和DsRed+CD4+ T细胞先归巢到脾脏与淋巴结, 在其中扩增分化, 最终转运至骨髓并转化为TEM。胸腺对异体T细胞的归巢过程更具抵抗性, 提示胸腺在免疫介导AA模型的骨髓衰竭过程中可能是一个免疫豁免部位。在C.B10 AA模型小鼠的骨髓衰竭形成过程中, 归巢到骨髓的DsRed+病理性T细胞较迁移到脾脏与淋巴结的细胞具有更强的免疫活性, 而免疫抑制活性则减弱。

关键词：贫血再生障碍性小鼠模型病理性T细胞归巢特征

间充质干细胞对再生障碍性贫血患者血清诱导32D细胞凋亡的影响及其机制

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中华血液学杂志 2014年第1期35卷 58-61页

作者：胡成俊刘红林赠华张亚平南通大学附属医院血液内科 226001

骨髓间充质干细胞（Msc）功能异常在再生障碍性贫血（AA）发病中起着重要作用，MSC移植治疗AA已成为研究热点。我们以前的研究证实，AA患者血清可促进正常小鼠骨髓多能造血干／祖细胞系32D细胞凋亡，同时AA患者血清可上调32D细胞Star3... 详细信息

骨髓间充质干细胞（Msc）功能异常在再生障碍性贫血（AA）发病中起着重要作用，MSC移植治疗AA已成为研究热点。我们以前的研究证实，AA患者血清可促进正常小鼠骨髓多能造血干／祖细胞系32D细胞凋亡，同时AA患者血清可上调32D细胞Star3蛋白磷酸化水平。但有关MSC对AA患者血清诱导32D细胞过度凋亡过程中的作用机制尚未明了。因此，我们以小鼠MSC联合AA患者血清处理32D细胞，并检测在此过程中32D细胞Star3磷酸化水平的变化，探讨MSC对AA患者血清诱导32D细胞凋亡的影响及机制。

关键词：再生障碍性贫血患者骨髓间充质干细胞血清诱导细胞凋亡磷酸化水平 Star3 小鼠骨髓 D细胞