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Spred-2与Rab11相互作用影响大鼠肾上腺髓质嗜铬瘤细胞PC12分化

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Spred-2与Rab11相互作用影响大鼠肾上腺髓质嗜铬瘤细胞PC12分化

作者：林贵斌扬州大学

学位级别：硕士

Spred (Sprouty related with EVH1 domain)蛋白家族是一类酪氨酸激酶结合蛋白。Spred蛋白由三个结构域组成,分别为：N端EVH-1结构域,中央KBD结构域和C端SPR结构域。目前哺乳动物中发现的Spred蛋白家族成员主要为Spred-1、Spred-2、Spre... 详细信息

Spred (Sprouty related with EVH1 domain)蛋白家族是一类酪氨酸激酶结合蛋白。Spred蛋白由三个结构域组成,分别为：N端EVH-1结构域,中央KBD结构域和C端SPR结构域。目前哺乳动物中发现的Spred蛋白家族成员主要为Spred-1、Spred-2、Spred-3和Eve-3。 Spred-3缺少KBD结构域,Eve-3仅含有EVH-1结构域。Spred特异性抑制多种生长因子诱导的Ras/Raf/Erk信号通路活化,抑制细胞分化,但具体机制复杂,有待进一步阐明。Spred2在不同腺体和分泌组织中均有较高表达,主要定位于细胞内囊泡状结构,与循环内吞体标志蛋白Rab11共定位。Rab11参与细胞内囊泡运输,促进神经突生长。我们之前的研究及其他研究均表明,Spred-2抑制大鼠肾上腺髓质嗜铬瘤细胞PC12分化,但机制不明。我们推测Rab11可能参与Spred-2调控的PC12细胞分化。本研究发现Spred-2与Rabll相互作用,并且与自噬标志蛋白LC3存在共定位。研究结果如下：1、免疫荧光检测HeLa细胞内源Spred-2与内源Rab11定位,结果表明二者在胞浆中存在聚点状的共定位;将Myc-Spred-2与HA-Rab11共转至293T细胞经Anti-Myc抗体免疫共沉淀,免疫印迹结果表明Spred-2与Rab1 1存在相互作用。2、将Myc-Spred-2野生型及其各个结构域缺失突变体,分别与HA-Rab11共转至293T细胞,以Anti-Myc抗体免疫共沉淀,免疫印迹结果表明Spred-2蛋白通过C端的KBD与SPR结构域与Rabll相互作用。3、将Myc-Spred-2、DsRed-Rab11及绿色荧光蛋白标记的LC3(GFP-LC3)共同转染至HeLa细胞,免疫荧光结果表明Spred-2、Rab11及LC3三者在胞浆存在共定位。4、分别将Myc标签空载体,Myc-Spred-2野生型及SPR结构域缺失突变体与DsRed-Rab11和GFP-LC3,共转至HeLa细胞,免疫荧光结果表明Spred-2蛋白SPR结构域为Rab1 1与LC3共定位所必需。5、共转DsRed-Rabll与GFP-LC3至HeLa细胞,再分别使用雷帕霉素(Rapa)与氯喹(CQ)处理,免疫荧光结果表明Rapa促进Rab11与LC3共定位,而CQ抑制二者共定位。6、分别将Spred-2野生型及其突变体重组腺病毒感染PC12细胞,神经突触生长分析结果表明SPR结构域及其与LC3结合位点为Spred-2抑制PC12细胞分化所必需。综上所述,Spred-2抑制PC12细胞分化可能通过C端区域与Rab11相互作用,抑制Rab11l参与细胞分化的功能。Spred-2缺失SPR结构域,Rab11释放,并促进神经突生长。另外,Spred-2参与自噬,在自噬溶酶体形成后与Rab11及LC3形成蛋白复合体,从而抑制PC12细胞分化。

关键词： Spred-2 Rab11 PC12

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光学频率梳生成及其在WDM系统中应用研究

光学频率梳生成及其在WDM系统中应用研究

作者：林贵斌西安电子科技大学

学位级别：硕士

融合微波无线通信和光纤通信技术优势的微波光子学,可以实现微波信号的光学生成、处理、控制和传输,在下一代宽带无线通信和军事通信领域具有重要的应用前景。光学频率梳生成是微波光子学的关键技术之一,如何产生载波数目多、谱线间隔... 详细信息

融合微波无线通信和光纤通信技术优势的微波光子学,可以实现微波信号的光学生成、处理、控制和传输,在下一代宽带无线通信和军事通信领域具有重要的应用前景。光学频率梳生成是微波光子学的关键技术之一,如何产生载波数目多、谱线间隔大、带外抑制比高、平坦度好以及稳定性高的光学频率梳是目前的研究热点。本文重点关注基于电光调制器的光学频率梳生成技术,并将其应用在WDM系统中。本文在分析电光调制器的理论基础上,提出了两种基于强度调制器IM的新型光学频率梳生成方案。方案一基于两个级联的马赫–曾德尔强度调制器,通过设置射频信号幅值和直流偏置电压,实现3、5、9、15和25线的可调光学频率梳。方案二基于单个马赫–曾德尔强度调制器调制双音信号的结构,通过设置双音信号的幅值、频率和初始相位,并调节合适的直流偏置电压,实现单个IM产生9线平坦光学频率梳。分析和讨论了调制指数、直流偏置电压和初始相位等因素对这两种方案的光学频率梳平坦度的影响。鉴于光学频率梳的带宽受限于调制器的工作带宽,研究并提出两种扩展光学频率梳频谱的方案。方案一利用马赫–曾德尔强度调制器工作点不同,产生奇数阶或偶数阶光边带的原理,实现谱线间隔的扩展,最终产生了15线和20线光学频率梳。方案二设置双平行马赫–曾德尔调制器DPMZM的射频信号幅值和直流工作点,利用光载波抵消的思想,实现50线宽带光学频率梳的生成。分析和讨论了调制指数与所提方案光学频率梳性能的关系。利用VPI仿真软件和实际实验对上述方案进行了验证。最后,基于单个DPMZM产生5线光学频率梳作为光源,构建点到点WDM通信系统,利用VPI仿真实现单波10Gb/s数字信息经30千米标准单模光纤传输后,系统误码率BER较小。

关键词：微波光子学光学频率梳电光调制器 WDM系统

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特征系统实现算法的小波去噪方法研究

工程力学 2004年第6期21卷 91-96页

作者：林贵斌陆秋海郭铁能清华大学工程力学系北京100084

ERA/DC 利用脉冲响应数据构造 Hankel 矩阵时运用了相关技术,因此对信号中的白噪声有抑制效果,但实际数据所含的噪声中,除随机噪声外,还有尖脉冲噪声、漂移等其它噪声。为了获得理想的识别效果,利用小波算法对脉冲响应数据进行去噪处理... 详细信息

ERA/DC 利用脉冲响应数据构造 Hankel 矩阵时运用了相关技术,因此对信号中的白噪声有抑制效果,但实际数据所含的噪声中,除随机噪声外,还有尖脉冲噪声、漂移等其它噪声。为了获得理想的识别效果,利用小波算法对脉冲响应数据进行去噪处理,再用 ERA/DC 进行识别。两自由度的阻尼弹簧质量系统以及卫星缩尺模型的仿真结果表明,小波去噪方法对多种噪声形式均有抑制作用,能提高 ERA/DC 的识别精度,可用于 ERA/DC识别的信号去噪。

关键词：特征系统实现算法模态参数识别小波算法信号去噪脉冲响应数据

500m口径球面射电望远镜馈源支撑结构体系试验研究与理论分析

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建筑结构学报 2002年第3期23卷 63-68页

作者：王宏郭彦林任革学路英杰林贵斌清华大学土木工程系北京100084 清华大学工程力学系北京100084

为将来在中国建造世界上最大的射电望远镜(简称FAST),采用了索、塔及移动小车馈源支撑结构体系。本文对此结构体系进行了1/30缩尺模型试验研究和理论分析,获得了模型结构索中张力和结构动力特性沿馈源球冠的变化规律。理论分析结果和试... 详细信息

为将来在中国建造世界上最大的射电望远镜(简称FAST),采用了索、塔及移动小车馈源支撑结构体系。本文对此结构体系进行了1/30缩尺模型试验研究和理论分析,获得了模型结构索中张力和结构动力特性沿馈源球冠的变化规律。理论分析结果和试验结果二者吻合较好,说明本文的分析方法和分析过程是可行的,具有较高的计算精度。分析结果还表明,在进行结构动力反应分析中,小车的扭转振动不容忽视。

关键词：柔性索结构馈源球冠动力特性张力非线性分析试验

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新课标下以学生为本的初中物理教学新思路

中学课程辅导 2023年第18期 15-17页

作者：林贵斌福建省安溪金火完全中学

新课标要求教师在教学上要做出改进，形成以学生为本的教学新思路，使物理课堂充满活力。同时，新课标也较为注重学生核心素养的发展，要求教师围绕核心素养做好教学规划，让学生成为课堂的主人，并针对课堂教学中存在的问题进行解决和... 详细信息

新课标要求教师在教学上要做出改进，形成以学生为本的教学新思路，使物理课堂充满活力。同时，新课标也较为注重学生核心素养的发展，要求教师围绕核心素养做好教学规划，让学生成为课堂的主人，并针对课堂教学中存在的问题进行解决和调整。在教学的革新之下，学生对物理知识的学习有了全方位的认识。再者，以学生为本开创初中物理教学崭新思路，也能够让学生在拥有浓厚兴趣的同时提升自身的综合素养。教师要紧紧围绕新课标下以学生为本的思想，按照核心素养的培养视角探寻初中物理教学新思路。

关键词：新课标以学生为本初中物理教学新思路

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企业发展人为先

中国邮政 2012年第5期 42-43页

作者：林贵斌内蒙古自治区呼伦贝尔市邮政速递物流分公司

有一位企业家说过这样一句话：“你可以搬走我的机器、烧毁我的厂房，但你要留下我的员工，我就可以有再生的机会。”由此可见，人是企业生存发展的第一劳动生产力，是企业最宝贵的财富。

关键词：企业发展劳动生产力企业生存企业家

腰段脊柱多体动力学模型模拟脊柱关节手法力学分析研究

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中华中医药杂志 2016年第11期31卷 4707-4710页

作者：郭伟韩磊李艺闵亚青顾永鹏林贵斌周卫赵平空军总医院北京100142 清华大学北京100084 中国中医科学院望京医院北京100102

目的:通过构建包含肌肉和韧带的腰段脊柱多柔体动力学模型,并模拟手法的力学条件,为分析手法的软组织力学效应提供新方法。方法:包含主要肌肉韧带的新鲜尸体的脊柱标本进行CT和核磁扫描,获取标本骨骼和脊柱周围软组织信息,通过清华大学... 详细信息

目的:通过构建包含肌肉和韧带的腰段脊柱多柔体动力学模型,并模拟手法的力学条件,为分析手法的软组织力学效应提供新方法。方法:包含主要肌肉韧带的新鲜尸体的脊柱标本进行CT和核磁扫描,获取标本骨骼和脊柱周围软组织信息,通过清华大学多体动力学软件Thu Dynamics进行建模,基于以上研究数据,Open Sim软件人体数据库及参考文献,分别构建腰椎骨骼、肌肉、韧带、椎间盘、关节接触模型,模拟手法的力学条件,分析手法的力学效应。结果:仿真计算发现松动手法应力主要集中在后关节和深部肌肉,对椎间盘影响小。冲击手法对于深浅层肌群、后关节、椎间盘应力影响较大,在扭力中心有明显的扭力集中现象。腰椎多体动力学模型可以数字化说明脊柱在不同力学状态下、关节应力变化、椎间盘内压变化,为脊柱手法力学机制的研究提供了有力的工具和基础数据。结论:腰椎多体动力学模型可以真实模拟不同手法时,肌肉、关节、椎间盘的应力变化,为手法机制等基础研究提供力学数据,并且为脊柱力学相关研究提供科学便捷的研究技术和新的方法。

关键词：手法生物力学多体动力学模型腰椎仿真计算

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呼伦贝尔市减免邮车通行费用 002

苦参碱诱导K562细胞分化与STAT3基因表达水平研究

中国邮政报

作者：张辉林贵斌

本报讯（记者张辉通讯员林贵斌）从 5月下旬开始，内蒙古自治区呼伦贝尔市交通部门对全市邮政生产运输车辆在市内部分县道通行时的过路过桥费实行减半征收，营运费全部免收，两项合计每年约为邮政部门节省支出近 10余万元。　　　　...

本报讯（记者张辉通讯员林贵斌）从 5月下旬开始，内蒙古自治区呼伦贝尔市交通部门对全市邮政生产运输车辆在市内部分县道通行时的过路过桥费实行减半征收，营运费全部免收，两项合计每年约为邮政部门节省支出近 10余万元。　　　　今年以来，呼伦贝尔市邮政局多次向市政?

关键词：

来源： cnki报纸评论

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中国医学创新 2019年第7期16卷 22-27页

作者：王健林贵斌曹佳淋马玲娣广东省惠州市第三人民医院广东惠州516000

目的:观察苦参碱对人慢性粒细胞白血病K562细胞的体外增值情况,探索潜在的分子机制。方法:显微镜下查看苦参碱对K562细胞的影响,联苯胺染色测定K562细胞的分化趋向,采用MTT法测定K562细胞在用药后的增殖抑制效应,通过流式细胞术以及双... 详细信息

目的:观察苦参碱对人慢性粒细胞白血病K562细胞的体外增值情况,探索潜在的分子机制。方法:显微镜下查看苦参碱对K562细胞的影响,联苯胺染色测定K562细胞的分化趋向,采用MTT法测定K562细胞在用药后的增殖抑制效应,通过流式细胞术以及双标记法测定K562细胞的周期变化和凋亡作用。结果:相较于阴性对照组,当苦参碱为0.05、0.10和0.20 mg/mL,K562细胞均呈现红系分化趋势,以0.05 mg/mL最为突出。MTT结果表明0.2、0.5和1.0 mg/mL对K562细胞表现出的生长抑制率依次为26.15%、45.90%和63.52%(P<0.01),有效浓度0.6 mg/mL。苦参碱能够将K562细胞定格于S期,抑制有丝分裂,诱导K562细胞快速地凋亡,0.2、0.5和1.0 mg/mL,对K562细胞的凋亡率依次为5.30%、62.13%与56.73%,明显高于对照组细胞的1.67%(P<0.01)。结论:针对体外增殖的人慢粒K562细胞,苦参碱有明显的抑制效果,可诱导细胞红系分化,促进早期凋亡。

关键词：苦参碱慢性粒细胞白血病 K562细胞细胞分化细胞凋亡