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福尔马林处理对石斑拟合片盘虫和斜带石斑鱼的影响(英文)

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中山大学学报（自然科学版） 2003年第4期42卷 59-63页

作者：杨廷宝林蠡陈勇智刘升发中山大学水生经济动物研究所厦门大学生物系福建厦门361005

20 0 0年 4月研究了斜带石斑 Epinepheluscoioides寄生拟合片盘虫Pseudorhabdosynochusepinepheli的防治方法。海水福尔马林对拟合盘虫的作用表现为 :2 5min处理的半致死浓度为 2 5 0× 10 - 6 ,5 0min处理的半致死浓度为 5 0× 10 - 6... 详细信息

20 0 0年 4月研究了斜带石斑 Epinepheluscoioides寄生拟合片盘虫Pseudorhabdosynochusepinepheli的防治方法。海水福尔马林对拟合盘虫的作用表现为 :2 5min处理的半致死浓度为 2 5 0× 10 - 6 ,5 0min处理的半致死浓度为 5 0× 10 - 6 。淡水福尔马林的效果为 :3min的半致死浓度为 83× 10 - 6 ,纯淡水处理的半致死时间为 2 1min。海水福尔马林对斜带石斑的毒性表现为 :30min和 4 5min的半致死浓度分别为 94 0× 10 - 6 和 6 4 5× 10 - 6 。淡水福尔马林对斜带石斑的毒性表现为 :5min和 10min的半致死浓度分别为 130 0× 10 - 6 和 5 0 0× 10 - 6 。福尔马林处理海水中的斜带石斑半致死浓度介于 6 0 0× 10 - 6 ～ 10 0 0× 10 - 6 ,淡水处理对斜带石斑半致死浓度介于 95× 10 - 6 ～ 115×10 - 6 。淡水中斜带石斑的半麻醉和半致死时间分别为 95min和 115min。以上结果表明 :海水和淡水福尔马林对石斑拟合片盘虫的致死浓度 ,处于斜带石斑的安全范围之内。

关键词：斜带石斑石斑拟合片盘防治方法

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养殖克氏原螯虾体内白斑综合征病毒的绝对定量分析

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水产学报 2016年第3期40卷 318-325页

作者：兰江风代云佳林蠡华中农业大学水产学院农业部淡水生物繁育重点实验室

近年来克氏原螯虾的养殖受到WSSV的威胁,病毒在宿主组织中的绝对定量对于了解病毒的致病性具有重要意义,但克氏原螯虾组织中WSSV的绝对定量分布还有待研究。实验调查了湖北省5个主养区克氏原螯虾WSSV的感染率,结果表明80%以上克氏原螯... 详细信息

近年来克氏原螯虾的养殖受到WSSV的威胁,病毒在宿主组织中的绝对定量对于了解病毒的致病性具有重要意义,但克氏原螯虾组织中WSSV的绝对定量分布还有待研究。实验调查了湖北省5个主养区克氏原螯虾WSSV的感染率,结果表明80%以上克氏原螯虾都携带有WSSV。采用WSSV-VP28蛋白特异性抗体对克氏原螯虾提取蛋白进行Western Blot检测,在WSSV-PCR阳性样品中可检测到VP28特异性条带,在WSSV-PCR阴性样品中没有检测到相应条带。采用实验室建立的WSSV绝对定量PCR方法,对携带病毒的克氏原螯虾6个组织(鳃、胃、肠、血淋巴细胞、肝胰腺和心脏)进行检测。结果表明,在鳃、胃和肠可检测到较多病毒量(约108拷贝/mg),其次是血淋巴细胞(107拷贝/mg)、肝胰腺(106拷贝/mg),在心脏中病毒的含量最低(103拷贝/mg),表明病毒的复制存在组织特异性。结果显示WSSV主要存在于消化系统中,预示着克氏原螯虾可能主要在摄食过程中感染WSSV;不同地区克氏原螯虾组织病毒携带量表现出一定差异,预示着WSSV感染可能受到环境因素的影响。

关键词：克氏原螯虾白斑综合征病毒感染率组织分布

miRNA在乌鳢水泡病毒感染月鳢细胞(SSN-1)中的表达变化及其调控作用

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水产学报 2019年第5期43卷 1288-1297页

作者：伊丽竹徐镇林蠡涂加钢华中农业大学水产学院仲恺农业工程学院动物科技学院

为了探究microRNA(miRNA)对乌鳢水泡病毒(snakehead vesiculovirus, SHVV)感染月鳢细胞(striped snakehead cell, SSN-1)的影响,本研究对SHVV感染的SSN-1细胞及未感染的细胞进行miRNA高通量测序。分别用U6、β-actin和5S rRNA作为内参基因研究SHVV感染对细胞内22个高丰度(transcripts per million, TPM≥1 000) miRNA表达水平的影响,结果显示,U6基因作为内参时,SHVV感染对β-actin没有显著影响,但是5S rRNA显著上调表达,说明U6和β-actin基因适合作为内参基因研究SHVV感染对miRNA表达水平的影响。此外,我们研究了14种miRNA对SHVV增殖的影响。结果发现,miR-27a-3p、miR-26a-5p、miR-30e-3p等11种miRNA显著促进SHVV增殖,miR-150和miR-216b显著抑制SHVV增殖。进一步研究发现高丰度的miR-100-5p在SHVV感染SSN-1细胞早期上调表达,晚期下调表达。过表达miR-100-5p可以显著抑制SHVV的增殖,而抑制表达miR-100-5p可以显著促进SHVV的增殖。本研究为开发抗SHVV的核酸药物提供了理论基础。

关键词：乌鳢水泡病毒 SSN-1细胞 miR-100-5p 抗病毒

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草鱼打印病的防治

中国水产 1996年第6期 25-26页

作者：林蠡孟帆黄创良林建志广东省西江水产资源增值中心

1994年9月我场9号塘草鱼亲鱼发生打印病,发病率达100%。我们采用注射、涂抹、泼洒三种综合施药方法,取得满意效果。一、病因分析我场7月份搞完鱼花生产后,将草鱼亲鱼饲养于9号塘。鱼放养前,9号塘没有用生石灰消毒塘。亲鱼入塘后,冲入... 详细信息

1994年9月我场9号塘草鱼亲鱼发生打印病,发病率达100%。我们采用注射、涂抹、泼洒三种综合施药方法,取得满意效果。一、病因分析我场7月份搞完鱼花生产后,将草鱼亲鱼饲养于9号塘。鱼放养前,9号塘没有用生石灰消毒塘。亲鱼入塘后,冲入新水少,另外塘水质偏酸偏软。因此,我们认为发生此病的原因是:亲鱼催产过程中有外伤,产完卵后,体质较差,加上水质不好,便感染了此病。

关键词：打印病草鱼亲鱼

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黄颡鱼甘露糖受体基因的克隆和功能分析

水产学报 2017年第7期41卷 1036-1043页

作者：刘小玲王虹樊启学兰江风林蠡华中农业大学水产学院水生动物医学系华中农业大学水产学院淡水水产健康养殖湖北省协同创新中心华中农业大学水产学院池塘健康养殖湖北省工程实验室华中农业大学水产学院农业部淡水生物繁育重点实验室

甘露糖受体(MR)隶属凝集素超家族,主要表达于巨噬细胞和未成熟的树突状细胞表面。MR不仅在先天免疫防御中发挥重要作用,还通过参与抗原呈递,激活T淋巴细胞,启动获得性免疫应答过程。本研究采用同源克隆技术获得黄颡鱼甘露糖受体(pf MR)... 详细信息

甘露糖受体(MR)隶属凝集素超家族,主要表达于巨噬细胞和未成熟的树突状细胞表面。MR不仅在先天免疫防御中发挥重要作用,还通过参与抗原呈递,激活T淋巴细胞,启动获得性免疫应答过程。本研究采用同源克隆技术获得黄颡鱼甘露糖受体(pf MR)基因,采用荧光定量PCR技术检测MR在正常黄颡鱼体内的分布情况,采用鲖爱德华菌感染黄颡鱼头肾巨噬细胞和甘露聚糖封闭MR方法研究黄颡鱼MR在抗细菌感染中的作用。结果显示,pf MR同团头鲂、草鱼、斑马鱼和尼罗罗非鱼的MR聚为一支。pf MR在所检测的12个组织中均有分布,其在肾脏、脾脏和肌肉组织中表达量较高,在血液中表达量较少。鲖爱德华菌感染黄颡鱼头肾巨噬细胞后,pf MR、IL-1β和TNF-a均被细菌诱导表达,超氧阴离子和一氧化氮的含量也上升,超氧阴离子在感染30 min后即显著上升,一氧化氮在感染12 h后才显著上升。甘露聚糖竞争结合MR,显著抑制巨噬细胞内化GFP标签的鲖爱德华菌,加入EDTA减少内化的荧光强度,加入Ca2+使内化的荧光强度回升。研究表明,黄颡鱼头肾巨噬细胞MR参与鲖爱德华菌的识别和内吞过程,而且依赖Ca2+。

关键词：黄颡鱼甘露糖受体鲖爱德华菌超氧阴离子一氧化氮

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蛙病毒PCR检测方法的建立与比较分析

水产学报 2023年第8期47卷 157-165页

作者：李亚男刘春林华剑秦真东林蠡仲恺农业工程学院动物科技学院广州市水产病害与水禽养殖重点实验室广东省动物疫病预防控制中心

为了进一步丰富蛙虹彩病毒检测方法，实验针对蛙病毒3型(frog virus 3,FV3)核衣壳蛋白(major capsid protein,MCP)基因保守区设计一对特异性引物，并选取另外2种蛙病毒PCR检测方法进行对比实验，通过反应体系的优化、反应特异性和敏感... 详细信息

为了进一步丰富蛙虹彩病毒检测方法，实验针对蛙病毒3型(frog virus 3,FV3)核衣壳蛋白(major capsid protein,MCP)基因保守区设计一对特异性引物，并选取另外2种蛙病毒PCR检测方法进行对比实验，通过反应体系的优化、反应特异性和敏感性实验，建立了一种针对FV3的PCR检测方法。结果显示，该方法最低检测限可达1.2个拷贝数的病毒粒子，与神经坏死病毒、虾血细胞虹彩病毒、大口黑鲈虹彩病毒、锦鲤疱疹病毒、鲤浮肿病毒、传染性脾肾坏死病毒、加州鲈弹状病毒等常见水产动物致病毒株无交叉反应。临床样品检测表明，该方法所获得的检测结果与另外2种方法一致，结果可靠。本研究所建立的FV3 PCR检测方法，具有简便、快速、敏感度好、特异性高、低成本等特点，可用于FV3蛙病毒的快速诊断和分子流行病学调研。

关键词：蛙病毒虹彩病毒蛙病毒3型(FV3) PCR

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饲料鳜的驯化和养殖技术

科学养鱼 2024年第8期 76-77页

作者：熊悦林蠡仲恺农业工程学院动物科技学院广东广州510222

鳜是我国特有的传统淡水名贵经济鱼,又名桂花鱼等,属鲈形目,科,包括鳜属、少鳞鳜属。鳜属中的翘嘴鳜、斑鳜在养殖中较为常见,其次是大眼鳜。目前,活饵料鱼的养殖制约着鳜产业的发展以及产量的提升。相比之下,饲料鳜的养殖具有占地面积小... 详细信息

鳜是我国特有的传统淡水名贵经济鱼,又名桂花鱼等,属鲈形目,科,包括鳜属、少鳞鳜属。鳜属中的翘嘴鳜、斑鳜在养殖中较为常见,其次是大眼鳜。目前,活饵料鱼的养殖制约着鳜产业的发展以及产量的提升。相比之下,饲料鳜的养殖具有占地面积小(无需额外养殖饵料鱼)、成本低、投喂简单、推广范围广等特点。因此,发展饲料鳜的养殖成为近年来行业的新趋势。饲料鳜养殖中存在鱼苗驯化难度大、营养代谢障碍、养殖成功率低等问题,选育易驯食的鳜新品种(系)、优化饲料配制、实现鳜的人工饲料大规模集约化养殖是推动鳜产业可持续健康发展的关键。

关键词：占地面积饲料配制桂花鱼人工饲料集约化养殖饵料鱼翘嘴鳜

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蛙病毒PCR检测方法的建立与比较分析

水产学报 2021年

作者：李亚男刘春林华剑秦真东林蠡仲恺农业工程学院动物科技学院广州市水产病害与水禽养殖重点实验室广东省动物疫病预防控制中心

为了进一步丰富蛙虹彩病毒检测方法，实验针对蛙病毒3型（frog virus 3，FV3）核衣壳蛋白（major capsid protein，MCP）基因保守区设计一对特异性引物，并选取另外2种蛙病毒PCR检测方法进行对比实验，通过反应体系的优化、反应特异性... 详细信息

为了进一步丰富蛙虹彩病毒检测方法，实验针对蛙病毒3型（frog virus 3，FV3）核衣壳蛋白（major capsid protein，MCP）基因保守区设计一对特异性引物，并选取另外2种蛙病毒PCR检测方法进行对比实验，通过反应体系的优化、反应特异性和敏感性实验，建立了一种针对FV3的PCR检测方法。结果显示，该方法最低检测限可达1.2 个拷贝数的病毒粒子，与神经坏死病毒、虾血细胞虹彩病毒、大口黑鲈虹彩病毒、锦鲤疱疹病毒、鲤浮肿病毒、传染性脾肾坏死病毒、加州鲈弹状病毒等常见水产动物致病毒株无交叉反应。临床样品检测表明，该方法所获得的检测结果与另外2种方法一致，结果可靠。本研究所建立的FV3 PCR检测方法，具有简便、快速、敏感度好、特异性高、低成本等特点，可用于FV3 蛙病毒的快速诊断和分子流行病学调研。

关键词：蛙病毒虹彩病毒 FV3 PCR

鳜亲环蛋白A在传染性脾肾坏死病毒增殖中的作用

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水产学报 2016年第1期40卷 100-109页

作者：胡先勤付小哲董星星涂加钢赵丽娟林强李宁求林蠡华中农业大学水产学院淡水水产健康养殖湖北省协同创新中心武汉轻工大学动物科学与营养工程学院中国水产科学研究院珠江水产研究所农业部渔用药物创制重点实验室广东省水产动物免疫技术重点实验室

为研究鳜亲环蛋白(CypA)在传染性脾肾坏死病毒(ISKNV)感染中的作用,通过RT-PCR克隆了CypA全长开放读码框(SC-CypA)。结果表明SC-CypA基因全长495 bp,编码164个氨基酸,分子量为17.59 ku。通过Blast比对和同源性进化分析,发现其与人、鼠... 详细信息

为研究鳜亲环蛋白(CypA)在传染性脾肾坏死病毒(ISKNV)感染中的作用,通过RT-PCR克隆了CypA全长开放读码框(SC-CypA)。结果表明SC-CypA基因全长495 bp,编码164个氨基酸,分子量为17.59 ku。通过Blast比对和同源性进化分析,发现其与人、鼠、原鸡和斑点鲖等物种的CypA具有高度相似性,表明SC-CypA属于CypA家族的成员。环孢素A(CsA)具有免疫抑制作用,是CypA的抑制剂。结果发现,CsA浓度与ISKNV增殖具有一定的剂量依赖关系;CsA作用不同时间对ISKNV均有抑制效果;CsA对ISKNV感染诱导的细胞因子的表达具有调节作用,能抑制IL-1β、IL-8、IL-18和ISG15的表达。研究表明,宿主的CypA对ISKNV的增殖起着重要的作用,通过添加其抑制剂CsA能有效抑制病毒的增殖。

关键词：鳜亲环蛋白A 传染性脾肾坏死病毒环孢素A 基因克隆病毒增殖