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来源于马赛菌(Massilia sp.)UMI-21的ACS_(MU)和PhaC_(MU)体外表达及功能研究

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微生物学报 2024年第4期64卷 1162-1174页

作者：王明李雪韩雪容吉林农业大学、吉林省菌物表型组学重点实验室吉林长春130118 长春理工大学生命科学技术学院吉林长春130022

【目的】构建马赛菌(Massilia sp.)UMI-21来源乙酰辅酶A合成酶ACS_(MU)和聚羟基脂肪酸酯(polyhydroxyalkanoate,PHA)合酶PhaC_(MU)的体外重组表达体系并过表达2种酶,利用体外合成体系确定2种酶在Massilia ***21聚3-羟基丁酸(polyhydroxybutyrate,PHB)合成途径中的主要功能。【方法】利用无缝克隆技术将来源于Massilia ***-21的乙酰辅酶A合成酶基因acsMU和PHA合酶基因phaC_(MU)扩增后与pQE-80L质粒连接,转导大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)构建2个基因的重组表达体系;利用6×His标签纯化蛋白ACS_(MU)和PhaC_(MU),并采用5,5′-二硫双(2-硝基苯甲酸)[5,5′-dithiobis-(2-nitrobenzoic acid),DTNB]法测定其活性;使用体外单相合成系统(one-phase reaction system,OPRS),以(R)-3HB为底物,验证ACS_(MU)和PhaC_(MU)这2种酶在合成PHB途径中的功能。【结果】成功构建了ACS_(MU)和PhaC_(MU)蛋白重组表达菌株BL21-pQE-80L-acsMU和BL21-pQE-80L-phaC_(MU),提纯得到过表达蛋白ACS_(MU)和PhaC_(MU)产率分别为24.8 mg/L和25.6 mg/L;ACS_(MU)酶比活力为(0.148±0.011)U/mg。PhaC_(MU)酶对(R)-3HBCoA的比活力为(0.102±0.011)U/mg;核磁共振氢谱(nuclear magnetic resonance hydrogen spectroscopy,^(1)H-NMR)分析结果表明,使用ACSPt-PCT_(CP)-PhaC_(Re)、ACS_(MU)-PCT_(CP)-PhaC_(Re)和ACS_(MU)-PCT_(CP)-PhaC_(MU)这3条OPRS途径均能合成PHB,产量分别为0.62、0.76和0.64 g/L。【结论】acsMU和phaC_(MU)基因可利用大肠杆菌表达体系过表达并可获得具有活性的可溶性蛋白;对比ACSPt-PCT_(CP)-PhaC_(Re)合成体系,ACS_(MU)替代ACSPt合成PHB产量增加22.58%,在聚合酶相同的情况下,PHB的合成产量依赖乙酰辅酶A合成酶(acetyl-CoA synthase,ACS)合成乙酰辅酶A的稳定性。使用PhaC_(MU)代替PhaC_(Re),对比ACS_(MU)-PCT_(CP)-PhaC_(Re)组合,合成PHB产量减少了15.79%。在聚合前体浓度相同的情况下,PHB合成量依赖聚合酶的活性。

关键词：马赛菌UMI-21 乙酰辅酶A合成酶(ACS) 聚羟基脂肪酸酯(PHA)合酶聚3-羟基丁酸(PHB)合成途径

“两个结合”视域下新时代价值观教育的守正创新之道

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民族教育研究 2024年第1期35卷 55-62页

作者：姜术容清华大学社会科学学院北京100084

“两个结合”是一种结合了中华文明突出特性的坚实价值立场。在打牢中华文化根基、拓展中华文化空间、巩固中华文化主体性的意义上,“两个结合”彰显出接续固本、创新包容、和谐统一的价值导向,从而为新时代价值观教育提供了守正创新之... 详细信息

“两个结合”是一种结合了中华文明突出特性的坚实价值立场。在打牢中华文化根基、拓展中华文化空间、巩固中华文化主体性的意义上,“两个结合”彰显出接续固本、创新包容、和谐统一的价值导向,从而为新时代价值观教育提供了守正创新之道。一方面,在守正要义上,依托“两个结合”的价值要求,新时代价值观教育需要对中华文明的优秀价值理想予以传承守护、对中华文明的美好价值意义予以精神守望、对中华文明的主导价值规范予以认同坚守,从而以更有理想、更有意义、更有原则的价值追求,化解现代人在价值虚无化、价值稀薄化、价值碎片化处境中面临的价值观困境。另一方面,在创新理路上,依照“两个结合”的价值取向,新时代价值观教育需要在愈加频繁的现代化交往实践和生活体验中,通过教育理念革新、教育生态营造以及教育机制建构,解决现代人在做什么样的人、为什么而活、应当怎样去活等方面存在的价值观难题。在“两个结合”的指引下,新时代价值观教育通过明确价值导向、改善价值处境、解决价值难题,以守正创新的方式,为中华文化传承发展、中华民族现代文明建设提供良好的价值支撑。

关键词： “两个结合” 价值立场价值观教育守正创新中华民族现代文明

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弱关联节点强化下网络泛洪攻击检测方法研究

现代电子技术 2024年第7期47卷 100-103页

作者：李晓粉张兆娟中国计量大学信息工程学院浙江杭州310018

由于网络中泛洪攻击生成的恶意流量常与正常流量在一定程度上具有相似性,使得传统方法将正常流量认定为恶意攻击,定位准确性较低。为此,研究弱关联节点强化下网络泛洪攻击检测方法。构建网络弱关联节点分布模型,结合已知节点和未知节点... 详细信息

由于网络中泛洪攻击生成的恶意流量常与正常流量在一定程度上具有相似性,使得传统方法将正常流量认定为恶意攻击,定位准确性较低。为此,研究弱关联节点强化下网络泛洪攻击检测方法。构建网络弱关联节点分布模型,结合已知节点和未知节点位置关系,建立弱关联节点快速定位方程,以定位节点位置;将弱关联节点接收报文的周期性作为特征,检测泛洪攻击;通过在检测到泛洪攻击的弱关联节点伪造报警包的方式强化节点,遵循泛洪攻击报文发送的路径回溯,完成泛洪攻击防御。实验结果表明,该方法定位弱关联节点测度指标值均高于0.9,可检测到泛洪攻击,并实现泛洪攻击防御。

关键词：弱关联节点网络泛洪攻击节点强化周期性攻击检测攻击防御通信速率

白头翁合理中汤加减通过调控AMPK/mTOR/p70S6K信号通路介导的自噬对小鼠溃疡性结肠炎的改善作用

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中成药 2024年

作者：张亚粉左振魁菅洪磊王琳刘天瑞任兰鑫河南中医药大学第二临床医学院河南省中医院肛肠科

目的研究白头翁合理中汤加减对小鼠溃疡性结肠炎（UC）的影响。方法用3%葡聚糖硫酸钠（DSS）诱导建立小鼠UC模型，C57BL/6小鼠随机分为空白组，模型组，白头翁合理中汤加减低、中、高剂量组（3、6、12 g/kg），柳氮磺吡啶组（300 mg/k... 详细信息

目的研究白头翁合理中汤加减对小鼠溃疡性结肠炎（UC）的影响。方法用3%葡聚糖硫酸钠（DSS）诱导建立小鼠UC模型，C57BL/6小鼠随机分为空白组，模型组，白头翁合理中汤加减低、中、高剂量组（3、6、12 g/kg），柳氮磺吡啶组（300 mg/kg），每组10只，灌胃给予相应药物，连续7 d。计算疾病活动指数（DAI）和结肠黏膜损伤指数（CMDI），测量结肠长度和单位结肠质量，HE染色观察结肠组织形态学变化，超氧化物阴离子荧光探针和试剂盒检测结肠组织ROS、MDA水平及GSH-Px、SOD活性，ELISA法检测TNF-α、IL-6、IL-1β水平，免疫荧光法检测结肠组织LC3表达，Western blot法检测结肠组织AMPK、mTOR、p70S6K蛋白表达。结果与空白组比较，模型组小鼠DAI评分、CMDI评分、单位结肠质量、病理学评分、ROS、MDA、TNF-α、IL-6、IL-1β水平，mTOR、p70S6K蛋白表达升高（P<0.01），结肠长度、GSH-Px、SOD活性、LC3水平、AMPK蛋白表达降低（P<0.01）；与模型组比较，白头翁合理中汤加减各剂量组和柳氮磺吡啶组小鼠DAI评分、CMDI评分、单位结肠质量、病理学评分、ROS、MDA、TNF-α、IL-6、IL-1β水平，mTOR、p70S6K蛋白表达降低（P<0.01），结肠长度、GSH-Px、SOD活性、LC3水平、AMPK蛋白表达升高（P<0.01），且相关的症状有明显改善。结论白头翁合理中汤加减可能通过调节AMPK/mTOR/p70S6K信号通路来减轻UC小鼠炎症反应和氧化损伤。

关键词：白头翁合理中汤溃疡性结肠炎 AMPK/mTOR/p70S6K信号通路自噬

激活MrgC受体抑制骨癌痛大鼠脊髓背角和背根神经节神经化学改变（英文）

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生理学报 2024年

作者：江剑平张科胡粉娟洪炎国福建师范大学生命科学学院福建省发育和神经生物学重点实验室

癌症疼痛是晚期癌症患者最常见的症状之一。本研究旨在探讨MrgC(Mas-related gene C)受体对骨癌痛的影响。将Walker 256乳腺癌细胞接种至成年Sprague-Dawley大鼠胫骨制备骨癌痛模型，以机械撤足阈值和热撤足阈值观察其痛觉超敏情况。在... 详细信息

癌症疼痛是晚期癌症患者最常见的症状之一。本研究旨在探讨MrgC(Mas-related gene C)受体对骨癌痛的影响。将Walker 256乳腺癌细胞接种至成年Sprague-Dawley大鼠胫骨制备骨癌痛模型，以机械撤足阈值和热撤足阈值观察其痛觉超敏情况。在第16天和第17天鞘内注射MrgC受体激动剂牛肾上腺髓质8-22 (bovine adrenal medulla 8-22, BAM8-22)，观察其对机械刺激和热刺激等伤害性行为的影响。用免疫荧光染色方法检测脊髓背角胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein, GFAP)阳性细胞以及背根神经节(dorsal root ganglia, DRG)中降钙素基因相关肽(calcitonin gene related peptide, CGRP)、神经元型一氧化氮合酶(neuronal nitric oxide synthase, nNOS)和IL-1β阳性神经元数量变化。用另一种MrgC受体激动剂(Tyr6)-γ2-MSH-6-12(MSH)同样处理后，通过蛋白质印迹法检测脊髓背角和DRG中n NOS和IL-1β蛋白的表达。结果显示，鞘内注射BAM8-22(30 nmol)减轻了大鼠骨癌痛模型中的机械痛阈，即时效果可持续约60 min，连续两天单次给药BAM8-22在第三天减少了约一半的机械痛阈。此外，脊髓背角中的GFAP阳性细胞以及DRG中CGRP、nNOS和IL-1β阳性神经元的数量也减少。同样，鞘内给予MSH (15 nmol)降低了脊髓背角和DRG中n NOS和IL-1β的表达。结果提示，激活MrgC受体有可能通过抑制脊髓背角星形胶质细胞的激活以及脊髓背角和/或DRG中CGRP、nNOS和IL-1β的表达来减轻骨癌痛。这些发现有望为骨癌痛的治疗提供新策略。

关键词： Mrg C受体痛觉超敏脊髓背角背根神经节神经化学骨癌痛

传承红色基因视域下高校图书馆红色资源数据库建设研究——以福建省本科高校图书馆为例

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图书馆工作与研究 2024年第8期 68-74页

作者：陈珍容福建理工大学图书馆

文章采用文献调研、网络调研和实地考察相结合的方法，梳理福建省本科高校红色资源概况及高校图书馆红色资源数据库建设现状，分析其存在的问题，并提出高校图书馆红色资源数据库建设路径，即强化红色资源数据库建设意识；拓宽红色资源... 详细信息

文章采用文献调研、网络调研和实地考察相结合的方法，梳理福建省本科高校红色资源概况及高校图书馆红色资源数据库建设现状，分析其存在的问题，并提出高校图书馆红色资源数据库建设路径，即强化红色资源数据库建设意识；拓宽红色资源数据库建设资金来源渠道；重视图书馆人才队伍建设；建立红色资源融入高校育人长效机制，推动红色资源数据库有效利用。

关键词：高校图书馆红色资源红色资源数据库高校红色基因

数字化赋能县域公共文化服务高质量发展的实践演进与逻辑

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图书馆 2024年第4期 1-8页

作者：熊春林贺容煜湖南农业大学公共管理与法学学院长沙410128

文章基于资源编排理论,采用单案例研究方法,以长沙县为例,深入探究数字化驱动公共文化服务高质量发展的实践演进和逻辑进路。研究发现该县公共文化服务数字化发展经历了基础建设、初级应用、深度应用、全面应用四个阶段,实现了从全覆盖... 详细信息

文章基于资源编排理论,采用单案例研究方法,以长沙县为例,深入探究数字化驱动公共文化服务高质量发展的实践演进和逻辑进路。研究发现该县公共文化服务数字化发展经历了基础建设、初级应用、深度应用、全面应用四个阶段,实现了从全覆盖到高精度再到广扩展三次跃升。通过夯实数字基础、整合数字资源、撬动数字边界等行动,适时适应民众需求新变化,赋能资源“全连接”“全场景”“全融合”,促进资源积累与部署、资源捆绑与协调、资源辐射与互补,提升资源集成能力、开发能力、联动能力,呈现出“数字赋能—资源获取—资源转化—价值传递”的高质量发展逻辑进路。文章提出,以民众文化需求为导向、分阶段有序推进、适时创新应用场景,是数字化促进县域公共文化服务高质量发展的实践路径。

关键词：数字化县域公共文化服务高质量发展实践逻辑资源编排理论

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燃烧室头部结构对燃料预混特性影响的研究

热能动力工程 2024年第10期 86-93页

作者：徐婉容刘凯沈阳航空航天大学航空发动机学院

采用Fluent软件对某贫燃预混燃烧室燃料与空气的掺混特性进行数值模拟，分析燃料喷口方向、喷口尺寸、旋流数对预混特性的影响。在不改变边界条件的情况下，针对燃烧室不同结构进行模拟计算。模拟结果表明：燃料射入方向对燃烧室流场有... 详细信息

采用Fluent软件对某贫燃预混燃烧室燃料与空气的掺混特性进行数值模拟，分析燃料喷口方向、喷口尺寸、旋流数对预混特性的影响。在不改变边界条件的情况下，针对燃烧室不同结构进行模拟计算。模拟结果表明：燃料射入方向对燃烧室流场有重要影响，逆向射流更有利于产生稳定的中心回流区，并且当喷嘴的喷口角度到达150°掺混均匀性最佳，均匀度值为0.987 2。随着喷口尺寸的增大，回流区面积先增大后减小，掺混均匀性逐渐降低，小尺寸喷嘴与中尺寸喷嘴的均匀性差距不大，但中尺寸喷嘴有更大的回流区，燃烧更加稳定。当旋流器旋流数在0.55～0.97区间，火焰筒头部均能产生较为稳定的回流区，随着旋流数的增大掺混均匀性逐渐提高，均匀度值由0.979 5增加至0.994 4;同时回流区面积逐渐减小并且有向前移动的趋势。当不同转角的喷嘴与旋流器组合时，180°喷嘴与0.97旋流数的旋流器组合掺混效果较好，掺混均匀性为0.991。

关键词：贫预混燃烧喷口方向喷口尺寸旋流数掺混均匀度

基于改进导向的学校课程质量评价指标体系建构

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课程．教材．教法 2024年第5期44卷 13-21页

作者：钟佳容谢翌广州大学教育学院广州510006

高质量课程是达成高质量教育的关键,建立系统科学的学校课程质量评价指标体系是促进课程高质量发展的长效机制。学校课程质量评价指标的维度不一与框架多变,如何对学校课程质量进行有效评价一直是个难题。对建构学校课程质量评价指标具... 详细信息

高质量课程是达成高质量教育的关键,建立系统科学的学校课程质量评价指标体系是促进课程高质量发展的长效机制。学校课程质量评价指标的维度不一与框架多变,如何对学校课程质量进行有效评价一直是个难题。对建构学校课程质量评价指标具有提供理论框架、激活全程育人思维、导向改进目标以及巧用适切方法的多元价值。根据育人导向、以质量为核心的建构理念,以CIPP模型为理论框架,采用访谈法、德尔菲法、层次分析法等建构基于改进导向的学校课程质量评价指标体系,以期促进课程高质量发展与加快课程治理现代化。

关键词：学校课程课程质量高质量发展评价指标体系