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斑马鱼周期蛋白C与早期胚胎发育相关研究

斑马鱼周期蛋白C与早期胚胎发育相关研究

作者：林爱福华东师范大学

学位级别：硕士

个体发育从受精卵开始，经过卵裂阶段的细胞增殖后，进入到胚层分化、组织和器官形成阶段。卵裂阶段的胚胎细胞呈现同步化的分裂节律，鲜有基因转录活动，其发育由源自卵母细胞发生期间合成的蛋白质和mRNAs调控。进一步的发育需要启动... 详细信息

个体发育从受精卵开始，经过卵裂阶段的细胞增殖后，进入到胚层分化、组织和器官形成阶段。卵裂阶段的胚胎细胞呈现同步化的分裂节律，鲜有基因转录活动，其发育由源自卵母细胞发生期间合成的蛋白质和mRNAs调控。进一步的发育需要启动合子型基因的表达才能进行。鱼类和两栖类由母型调控向合子型调控过渡发生在中囊胚形成阶段，称为中囊胚过渡(midblastula transition，MBT)，胚胎细胞周期时相的组成在此期间发生变化，首次出现G1期，周期时限延长，细胞分裂的同步性丧失，大批合子型基因活化转录也在此时开始。目前对这一早胚发育的重要事件的分子机制还缺乏了解。高等真核生物的周期蛋白C(cyclin C)的mRNA和蛋白质水平在G1早期达到最高，而且用周期蛋白C基因来转化不能产生G1期周期蛋白(CLNs)的酵母突变株，能够使该突变株恢复生长，说明周期蛋白C对细胞在G1期的行为具有调控作用。此外，cyclin C与其依赖性激酶形成的cyclin C／Cdk3复合体细胞从G0期(静止期)进入G1期起到关键的调控作用。cyclin C与另一依赖性激酶cdk8形成的cyclin C／Cdk8复合体除通过磷酸化作用于通用转录因子外，还是构成RNA聚合酶Ⅱ的碳末端(CTD)区域亚基之一，RNA聚合酶Ⅱ大亚基CTD磷酸化是转录启始的关键性调控因素。周期蛋白C联系着细胞周期调控和转录调控两个方面，而这两方面的结合正是揭示中囊胚过渡机制的关键。在斑马鱼中，周期蛋白C在胚胎发育早期表达的时空特征及其在早期发育乃至中囊胚过渡中的作用尚未被研究过。实验室在斑马鱼中获得并提交了周期蛋白C cDNA序列(GeneBank登陆号：AY450302)，本研究经过斑马鱼周期蛋白C经序列分析，表明它和人类有很高的同源性，同时在核苷酸水平和蛋白质水平都相当保守，从侧面说明该基因的重要性。Northern和整胚原位杂交实验表明该基因既有母型表达又有合子型表达，在早期胚胎发育过程中，这个基因的转录本都是普遍性表达，其表达初始是分散分布的，之后集中在头部和躯干部。在1-4细胞过表达cyclin C，发现过表达导致头部和尾部发育畸形;同时在蛋白水平上检测到部分外源蛋白在中囊胚转换后有降解现象产生。表明cyclin C在斑马鱼早期胚胎发育中是一个必需的基因，参与了早期发育机制。

关键词：斑马鱼周期蛋白C 中囊胚转换整体原位杂交

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五种江蓠切段离体培养的研究

福建水产 1987年第2期9卷 19-24页

作者：陈昌生章景荣林爱福厦门水产学院

江蓠是重要的经济红藻，是目前制造琼胶的主要原料之一。近年来，由于琼胶在工、农、医药等方面的用途日益广泛，特别是农业上作为细菌肥料和医药上作为微生物培养基，对江蓠的需求量日益增多。随着琼胶制造业的迅速发展，引起了人们对... 详细信息

江蓠是重要的经济红藻，是目前制造琼胶的主要原料之一。近年来，由于琼胶在工、农、医药等方面的用途日益广泛，特别是农业上作为细菌肥料和医药上作为微生物培养基，对江蓠的需求量日益增多。随着琼胶制造业的迅速发展，引起了人们对江蓠养殖的重视，同时也大大促进了江蓠养殖业的发展。

关键词：江蓠离体培养切段细菌肥料琼胶养殖红藻需求量制造业农业

斑马鱼Cyclin C的cDNA克隆及其在发育过程中的表达

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华东师范大学学报（自然科学版） 2008年第2期 71-77页

作者：林爱福贾方钧郑福军王群严缘昌李逸平华东师范大学生命科学学院中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所上海200031 中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所中国科学院上海生命科学研究院生命科学信息中心上海200031 上海高校模式生物E-研究院上海200031

细胞周期蛋白C(cyclin C)与细胞周期依赖性蛋白激酶cdk8结合,通过磷酸化RNA聚合酶Ⅱ和TFIIH调控转录.在脊椎动物胚胎发育过程中有关细胞周期蛋白C合子型转录激活机制尚知甚少.本研究克隆了斑马鱼细胞周期蛋白C基因,并用Northern杂交和... 详细信息

细胞周期蛋白C(cyclin C)与细胞周期依赖性蛋白激酶cdk8结合,通过磷酸化RNA聚合酶Ⅱ和TFIIH调控转录.在脊椎动物胚胎发育过程中有关细胞周期蛋白C合子型转录激活机制尚知甚少.本研究克隆了斑马鱼细胞周期蛋白C基因,并用Northern杂交和整体原位杂交技术检测其在胚胎发育过程中的表达状态.结果显示,斑马鱼细胞周期蛋白C高度保守,与人细胞周期蛋白C有88%的蛋白序列同源;斑马鱼细胞周期蛋白C在母型期开始表达,其表达伴随中囊胚转换时期的合子型转录激活以及整个胚胎发育过程.

关键词：周期蛋白C 表达斑马鱼胚胎发育

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兔血清白蛋白和IgG的分离纯化与鉴定

华夏医学 2007年第3期20卷 424-426页

作者：韦莹珏彭灿张敏孙敏林爱福李艳东桂林医学院生物技术学院广西桂林541004 华东师范大学生命科学学院上海200062

目的:以兔血清白蛋白和IgG的分离纯化与鉴定实验为例,阐述了血清蛋白制备与分析的过程。方法:使用了硫酸铵分级沉淀、凝胶过滤层析、DEAE离子交换层析、亲和层析、醋酸纤维薄膜电泳、SDS-PAGE、HPLC等分离纯化鉴定蛋白质的方法。结果:... 详细信息

目的:以兔血清白蛋白和IgG的分离纯化与鉴定实验为例,阐述了血清蛋白制备与分析的过程。方法:使用了硫酸铵分级沉淀、凝胶过滤层析、DEAE离子交换层析、亲和层析、醋酸纤维薄膜电泳、SDS-PAGE、HPLC等分离纯化鉴定蛋白质的方法。结果:制备了兔血清白蛋白和γ-球蛋白(IgG),测定被分离物质的相对分子量,鉴定纯化产品的均一性。结论:该实验作为一门生物综合性大型实验,非常有利于培养学生掌握蛋白质制备与分析的综合技能。

关键词：分离纯化白蛋白 γ-球蛋白实验

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斑节对虾摄食量与生长率的研究

台湾海峡 1994年第1期13卷 37-42页

作者：林元烧曹文清曾文德林爱福厦门大学海洋系厦门361005 福建海洋研究所

本文在室内条件（水温24～28℃，盐度28～33．5）下以缢蛏鲜肉为饵料，对不同体长组斑节对虾的摄食量、生长速率等问题进行研究，得出斑节对虾体长（L）、体重（W）与摄食量（F）、摄食率（Ri）、生长率（Rg）和增重量（ΔW）的关系如下... 详细信息

本文在室内条件（水温24～28℃，盐度28～33．5）下以缢蛏鲜肉为饵料，对不同体长组斑节对虾的摄食量、生长速率等问题进行研究，得出斑节对虾体长（L）、体重（W）与摄食量（F）、摄食率（Ri）、生长率（Rg）和增重量（ΔW）的关系如下：W＝0．0112L3．1148F＝0．5625W0．1266Ri＝56．24W－0．2731Rg＝14．18W－0．5352ΔW＝0．0956W0．5552文中分析了对虾养殖池的生态特点，讨论了对虾中后期养殖管理过程中的某些对策问题。

关键词：斑节对虾摄食量生长率

动物叙事在初中语文群文阅读教学中的应用研究

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作者：林银爱闽南师范大学

学位级别：硕士

SIRT1介导的铁死亡在小鼠术后认知功能障碍中的作用

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解放军医学杂志 2024年

作者：刘宝林曹维福南阳市第一人民医院麻醉科

目的探讨沉默信息调节因子1(SIRT1)对七氟烷(SEV)麻醉老年小鼠术后认知功能障碍(POCD)的影响及其作用机制。方法 (1)将雄性C57BL/6老年小鼠随机分为对照组(n=8)和七氟烷组(SEV组，n=24)，采用Western blotting检测小鼠2%SEV暴露后1 d、... 详细信息

目的探讨沉默信息调节因子1(SIRT1)对七氟烷(SEV)麻醉老年小鼠术后认知功能障碍(POCD)的影响及其作用机制。方法 (1)将雄性C57BL/6老年小鼠随机分为对照组(n=8)和七氟烷组(SEV组，n=24)，采用Western blotting检测小鼠2%SEV暴露后1 d、3 d、7 d海马组织SIRT1的表达水平。(2)将15个月龄的雄性C57BL/6小鼠随机分为AAV-GFP组、AAV-SIRT1组、SEV+AAV-GFP组和SEV+AAV-SIRT1组，每组20只。将AAV-SIRT1载体和对照载体AAV-GFP分别转染至相应组别小鼠脑内；5 d后，相应组别小鼠在2%SEV中暴露5h。采用Morris水迷宫实验评估小鼠SEV暴露前后的空间记忆功能，TUNEL染色分析海马神经元凋亡情况，Western blotting检测海马组织中SIRT1、胱氨酸转运蛋白SLC7A11(xCT)和谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)的表达水平。(3)将小鼠海马神经元分为对照组、AAV-SIRT1组、Fer-1组、SEV组、SEV+AAV-SIRT1组和SEV+Fer-1组。SEV组、SEV+AAV-SIRT1组和SEV+Fer-1组神经元暴露在5%SEV中4h,SEV+AAV-SIRT1组和SEV+Fer-1组在SEV暴露前分别进行AAV-SIRT1转染或铁死亡抑制剂亚铁素-1(Fer-1)处理。采用碘化丙啶(PI)染色评估细胞死亡情况，ELISA法检测丙二醛(MDA)和铁含量，荧光探针检测活性氧(ROS)水平。结果 (1)Western blotting检测结果显示，与对照组比较，SEV组小鼠海马SIRT1蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。(2)水迷宫实验结果显示，与AAV-GFP组比较，SEV+AAV-GFP组和SEV+AAV-SIRT1组逃逸潜伏期明显延长(P<0.05)，穿越原始平台的次数明显减少(P<0.05)；与SEV+AAV-GFP组比较，SEV+AAV-SIRT1组逃逸潜伏期明显缩短(P<0.05)，在第7天穿越原始平台的次数明显增多(P<0.05)。TUNEL染色、Western blotting和免疫组化检测结果显示，与AAV-GFP组比较，SEV+AAV-GFP组和SEV+AAV-SIRT1组小鼠海马神经元凋亡增多，cleaved-caspase-3和Bax蛋白表达水平升高(P<0.05),Bcl-2、GPX4、x CT蛋白表达水平降低(P<0.05)；与SEV+AAV-GFP组比较，SEV+AAV-SIRT1组小鼠海马神经元凋亡减少，cleaved-caspase3和Bax蛋白表达水平降低(P<0.05),Bcl-2、GPX4、xCT蛋白表达水平升高(P<0.05)。(3)体外细胞实验中PI染色和ELISA检测结果显示，与对照组比较，SEV组小鼠海马神经元PI阳性率、MDA水平和相对铁含量均明显增高(P<0.01)；与SEV组比较，SEV+AAV-SIRT1组小鼠海马神经元PI染色阳性率、MDA水平、相对铁含量和ROS水平均明显降低(P<0.05)。结论 SEV麻醉可降低老年小鼠海马组织和神经元中SIRT1表达水平；SIRT1上调可减轻SEV暴露诱导的神经元死亡和铁死亡。

关键词：沉默信息调节因子1 铁死亡老年小鼠七氟烷认知功能

2022年黄河调水调沙对下游有机物和营养盐年内变化的影响

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海洋科学进展 2024年

作者：高书铭姚爱林明玥王宪业高磊国家海洋环境监测中心国家环境保护海洋生态环境整治修复重点实验室华东师范大学河口海岸学国家重点实验室

2021年11月至2022年10月，在黄河下游泺口站进行了为期一年、每月一次的采样，测定了河水中溶解有机碳(dissolved organic matter,DOC)、有色溶解有机物(chromophoric dissolved organic matter,CDOM)、荧光溶解有机物(fluorescent dissolved organic matter,FDOM)、营养盐，以及悬浮颗粒态(suspended particulate matter,SPM)中颗粒有机碳(particulate organic carbon,POC)占比(POC占SPM的质量百分比，POC%)、δ13C和δ15N等生源要素相关指标。结果表明，调水调沙已经成为控制黄河下游多种生源要素在一年之中变化格局的关键因素，决定着其全年变化范围的上限和下限。在调水调沙的调水阶段，脉冲式激增的径流量通过稀释作用使得DOC浓度、CDOM浓度、FDOM中的类腐殖质组分含量，以及SPM中δ13C和δ15N达到全年的最低值，而CDOM光谱斜率(S275-295)达到最高值。在调水调沙的排沙阶段，上述指标则在相反方向上达到全年的极值。最近20年间，在调水调沙、流域生态环境保护、气候变化等一系列措施的影响下，黄河下游营养盐和DOC浓度呈现明显的下降趋势，而POC%的上升迹象也初步显现。黄河下游生源要素浓度、组成、性质、输出通量正经历着复杂而深刻的变化，将直接影响到黄河口的海洋生态环境。本研究有助于进一步理解在人类活动背景下大河生源要素的响应特征和反馈机制及其对邻近海洋生态环境的潜在影响。

关键词：黄河调水调沙溶解有机碳颗粒有机碳有色溶解有机物荧光溶解有机物营养盐

sigw与rsiw失活对沙福芽孢杆菌ST7耐锰能力的影响

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微生物学通报 2024年

作者：方争林王嘉福冉雪琴牛熙贵州大学生命科学学院贵州大学农业生物工程研究院山地植物资源保护与种质创新教育部重点实验室贵州大学动物科学学院

【背景】前期转录组学研究提示RNA聚合酶σ因子w(RNA polymerase sigma factor， sigw)和反σ因子w(anti-sigma-W factor， rsiw)可能参与沙福芽孢杆菌锰胁迫应激途径。【目的】研究sigw和rsiw基因缺失对沙福芽孢杆菌(Bacillus safensis... 详细信息

【背景】前期转录组学研究提示RNA聚合酶σ因子w(RNA polymerase sigma factor， sigw)和反σ因子w(anti-sigma-W factor， rsiw)可能参与沙福芽孢杆菌锰胁迫应激途径。【目的】研究sigw和rsiw基因缺失对沙福芽孢杆菌(Bacillus safensis)ST7的运动能力、生物膜形成能力和锰氧化能力的影响。【方法】以沙福芽孢杆菌ST7为研究对象，使用同源重组敲除技术构建沙福芽孢杆菌ST7的sigw和rsiw缺失突变株，检测野生株与突变株在运动能力、生物膜形成能力和锰氧化能力方面的差异，比较鞭毛形成相关基因的表达变化。【结果】在非锰胁迫培养条件下sigw和rsiw基因缺失对ST7突变株的生长没有明显影响；锰胁迫培养条件下sigw和rsiw基因缺失迟滞突变株的生长。相较于野生株，sigw突变株的运动能力和锰氧化能力减弱，生物膜形成能力增强；rsiw突变株的运动能力减弱，生物膜形成能力和锰氧化能力增强。并且sigw和rsiw突变株中与鞭毛合成相关基因flim、flgd、flii的表达量下降。【结论】sigw和rsiw基因可促进沙福芽孢杆菌的鞭毛合成和运动能力，促进细菌的生长，共同调控菌株的锰氧化能力。

关键词：沙福芽孢杆菌 sigw和rsiw基因敲除鞭毛运动性生物膜锰氧化