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血细胞分析参考方法的建立与应用

血细胞分析参考方法的建立与应用

作者：林海标广州中医药大学

学位级别：硕士

血细胞分析俗称血常规检查,是临床上最基础的检查之一。主要项目包括白细胞计数、红细胞计数、血红蛋白浓度、红细胞比容、血小板计数、白细胞分类和网织红细胞等。血细胞分析结果可以发现许多全身性疾病的迹象,可以为临床判断贫血、感... 详细信息

血细胞分析俗称血常规检查,是临床上最基础的检查之一。主要项目包括白细胞计数、红细胞计数、血红蛋白浓度、红细胞比容、血小板计数、白细胞分类和网织红细胞等。血细胞分析结果可以发现许多全身性疾病的迹象,可以为临床判断贫血、感染、血液系统疾病、骨髓造血功能疾病等提供证据。其测量结果的准确性直接影响临床对疾病病情的判断。目前临床实验室血细胞分析均由自动化仪器进行检测,但不同品牌、不同型号仪器或不同实验室检测可造成同一份样本得到结果存在差异,进而对疾病的诊断、治疗和预后可能造成影响等,因此,要实现血细胞分析测量结果的可比和准确性,血细胞分析的标准化研究就具有很重要的意义。目前国际血液学标准化委员会（ICSH）和世界卫生组织（WHO）发布了血细胞分析参考方法,包括白细胞计数、红细胞计数、血红蛋A浓度.红细胞压积及血小板计数,我国也发布相应的卫生行业标准,旨在促进血细胞分析测量结果的标准化进程,实现不同场所、不同设备测量结果的准确性和可比性。从卫生健康委临床检验中心数据可知我国临床实验室使用血细胞分析仪厂商超过150家,其中国产近140家.如何实现测量结果的标准化是目前血细胞分析测量发展的瓶颈,本研究通过建立血细胞参考方法,探讨使用新鲜血液样本在区域内验证检验结果的正确度和在厂商实现量值溯源中的应用。目的:通过建立血细胞分析参考方法,探讨血细胞分析测量结果的最值溯源,实现测最结果的标准化。应用建立的参考方法在区域内进行正确度验证调查.评价区域内血细胞分析参考方法测量结果的准确性。为国产厂商提供血细胞分析量值溯源服务,节约资源。方法:根据国际血液学标准化委员会（ICSH）和世界卫生组织（WHO）推荐的血细胞分析参考方法文件,并结合我国卫生行业标准要求,建立血细胞分析参考方法,评价其精密度、正确度、线性范围、携带污染和稳定性等分析性能,并评定其不确定度。应用研究方法:1.使用具有互通性的新鲜全血作为检测样本,进行区域内的正确度验证计划,探讨建立区域内医疗机构之间检测系统测量结果标准化的质量管理模式。2.通过建立血细胞分析参考系统,与血细胞分析检测系统生产厂商合作,为其提供新鲜全血的赋值服务和校准服务,探讨第三方实验室为厂商提供量值溯源服务的可能性。结果:1.性能评价 5个血细胞分析测量项目（WBC,RBC,PLT,Hct,Hb）的分析性能均满足参考方法的要求,评定不确定度分别为:RBC:（4.17±0.07）×1012/L（k=2）;WBC:（9.11±0.22）X109/L（k=2）;PLT:（204±5.3）×109/L（k=2）;Hb:（148.6±0.96）g/L（k=2）;Hct:（38.04±0.0061）%（k=2）,在本实验室成功建立血细胞分析参考方法。2.应用研究①根据卫健委临床检验中心评价标准判断:1号样本有2台设备超出允许范围;4号样本Hct有一台设备超出允许范围,总合格率为99.5%（657/660）。参照CLSI推荐标准进行判断,WBC项目有不合格数量为14台次,RBC项目有不合格数量为19台次,HGB项目有不合格数量为3台次,Hct项目有不合格数量为32台次,PLT项目有不合格数量为2台次,总合格率为89.4%（590/660）;大部分项目不同品牌的仪器测量结果之间比较,差异有统计学意义。②应用新鲜全血样本对国产某公司的Z3和Z5全自动血细胞分析仪进行校准并进行校准验证,结果满意。结论:在本实验室成功建立了血细胞分析参考方法,且性能符合要求,该参考方法的建立有助于建立地区间临床实验室血细胞分析测量正确度验证计划,并可为血细胞分析仪生产厂商提供量值溯源服务。

关键词：血细胞分析参考方法不确定度量值溯源

冰冻人血清尿素和肌酐国家二级标准物质的研制

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中华检验医学杂志 2023年第8期46卷 845-852页

作者：张鹏伟王建兵韩丽乔林海标展敏张乔轩严君庄俊华黄宪章广州中医药大学第二附属医院检验医学部广州510120

目的联合使用同位素稀释液相色谱串联质谱及酶学参考方法研制冰冻人血清尿素、肌酐国家二级标准物质,作为量值溯源的载体。方法参照JJF1343-2012《标准物质定值的通用原则及统计学原理》和JJF 1006-1994《一级标准物质技术规范》的要求... 详细信息

目的联合使用同位素稀释液相色谱串联质谱及酶学参考方法研制冰冻人血清尿素、肌酐国家二级标准物质,作为量值溯源的载体。方法参照JJF1343-2012《标准物质定值的通用原则及统计学原理》和JJF 1006-1994《一级标准物质技术规范》的要求对候选物质进行均匀性、稳定性、互换性评价;联合广东省中医院、北京航天总医院、深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司、迈克生物股份有限公司、北京利德曼生化股份有限公司、浙江美康生物科技股份有限公司的6家参考实验室采用国际检验医学溯源联合委员会推荐的同位素稀释液相色谱串联质谱法及酶学参考方法共同对标准物质进行定值,计算不确定度。结果所研制标准物质均匀性的方差分析结果为P>0.05,稳定性评价t值小于t(0.05)查表时的t值,互换性评价结果位于4个常规检测系统测量值95%置信区间内,最终定值结果为尿素:14.7 mmol/L,扩展不确定度0.3 mmol/L(k=2),肌酐:313.9μmol/L,扩展不确定度14.5μmol/L(k=2)。结论成功研制的冰冻人血清尿素、肌酐二级标准物质标示值可靠,均匀性、稳定性较好,不同检测系统间具有良好互换性。

关键词：尿素肌酐同位素稀释液相色谱串联质谱标准物质均匀性稳定性互换性

铜绿假单胞菌获得性金属β-内酰胺酶及其相关基因研究

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重庆医学 2010年第23期39卷 3155-3157页

作者：蓝锴陈茶庞雪云张文林海标广东省中医院检验科广州510120

目的了解该院铜绿假单胞菌(Pae)金属酶的产生及其相关基因携带情况。方法采用多种方法进行Pae金属酶初筛、确证试验,并检测4种金属酶基因。结果产金属酶菌株初筛阳性率为53.5%,用头孢他啶(CAZ)/乙二胺四乙酸(EDTA)、CAZ/2-巯基丙酸(2-M... 详细信息

目的了解该院铜绿假单胞菌(Pae)金属酶的产生及其相关基因携带情况。方法采用多种方法进行Pae金属酶初筛、确证试验,并检测4种金属酶基因。结果产金属酶菌株初筛阳性率为53.5%,用头孢他啶(CAZ)/乙二胺四乙酸(EDTA)、CAZ/2-巯基丙酸(2-MPA)、亚胺培南(IMP)/EDTA、IMP/2-MPA检测阳性率分别为13.95%、15.12%、17.44%、18.60%。PCR扩增结果仅IMP-1出现阳性,阳性率达16.28%,其余3种金属酶基因均为阴性。结论不同方法对金属酶检测结果不尽相同;携带IMP-1金属酶基因是该院Pae耐碳青霉烯类等多种药物的主要原因。

关键词：铜绿假单胞菌金属酶耐药基因

翻转课堂应用于《临床生物化学检验技术》教学中的初步探索

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检验医学与临床 2022年第8期19卷 1140-1142页

作者：石文林海标万泽民王建兵黄宪章广州中医药大学第二临床医学院检验医学部广东广州510105

该文主要通过课前预习、课堂教学、随堂检测、教学评估等方面对临床生物化学检验技术的理论知识进行学习和综合应用,将新教学模式翻转课堂应用于《临床生物化学检验技术》教学中,并与传统教学进行比较,对翻转课堂的优点以及现阶段存在... 详细信息

该文主要通过课前预习、课堂教学、随堂检测、教学评估等方面对临床生物化学检验技术的理论知识进行学习和综合应用,将新教学模式翻转课堂应用于《临床生物化学检验技术》教学中,并与传统教学进行比较,对翻转课堂的优点以及现阶段存在的问题进行分析,有效提高了医学检验技术专业本科生的理论水平和教学认可度。

关键词：翻转课堂慕课传统教学

医学检验技术专业实习生临床基础检验岗位带教工作模式探索

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检验医学与临床 2022年第8期19卷 1142-1144页

作者：王会敏林海标罗福东陈林林莉刘冬冬黄宪章广州中医药大学第二临床医学院检验科广东广州510105

确保医学检验技术实习带教工作的同质化管理,提高教学团队整体的临床带教水平,满足“新医科”背景下对医学检验技术专业教育教学改革的要求。本文通过为学生制订培训计划、改变传统带教模式、激发学生纵向思维的方式,在教学过程中引入... 详细信息

确保医学检验技术实习带教工作的同质化管理,提高教学团队整体的临床带教水平,满足“新医科”背景下对医学检验技术专业教育教学改革的要求。本文通过为学生制订培训计划、改变传统带教模式、激发学生纵向思维的方式,在教学过程中引入翻转课堂、案例引导和问题导向等教学理念,充分激发学生在实习过程中的主观能动性,将日复一日的枯燥重复工作转化成积极有动力、有创造性、有成就感的岗前培训,进而提升其实习的质量与效率。

关键词：医学检验技术专业实习生培训计划教学模式

血β-羟丁酸诊断2型糖尿病酮症酸中毒阈值的建立

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南方医科大学学报 2014年第10期34卷 1507-1510页

作者：柯培锋周海涛万泽民吴晓宾林海标黄宪章广东省中医院检验科广东广州510120

目的探索建立血β-羟丁酸(βOHB)诊断2型糖尿病酮症酸中毒(DKA)的阈值及βOHB水平与DKA严重程度的关系。方法对急症科收治的2型糖尿病患者的血βOHB与[HCO3-]进行相关分析,同时利用回归方程计算出[HCO3-]为18.0、15.0、10.0 mmol/L时的... 详细信息

目的探索建立血β-羟丁酸(βOHB)诊断2型糖尿病酮症酸中毒(DKA)的阈值及βOHB水平与DKA严重程度的关系。方法对急症科收治的2型糖尿病患者的血βOHB与[HCO3-]进行相关分析,同时利用回归方程计算出[HCO3-]为18.0、15.0、10.0 mmol/L时的βOHB值,并以与[HCO3-]为18.0 mmol/L对应的βOHB值作为DKA诊断的阈值,并结合临床评估其诊断性能。结果血βOHB水平与[HCO3-]浓度具有良好的相关性,R2=0.7023,P标。

关键词： β-羟丁酸糖尿病酮症酸中毒阈值

关于国际化工程人才队伍建设的实践与思考——以某央企设计院的国际化工程人才队伍建设为例

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珠江水运 2019年第12期 63-65页

作者：林海标袁杰中交第四航务工程勘察设计院有限公司

在“一带一路”战略背景下,中国工程企业在“走出去”的过程中面临一系列的风险和挑战。本文以某央企设计院为例,重点阐述了为应对这些风险和挑战,在国际化工程人才队伍建设的人才选拔、培养和留住人才等方面采取的创新性举措。

关键词：一带一路国际化工程人才选、育、留幸福

IL-22诱导类风湿关节炎患者滑膜成纤维细胞分泌 IL-6促进 Th17细胞分化的研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2014年第7期34卷 541-545页

作者：彭桉平卢欣沂何敏林海标张成刘瑞萍庄俊华广州中医药大学第二临床医学院检验科 510120

目的：探讨白细胞介素-22（IL-22）刺激类风湿关节炎滑膜成纤维细胞（RASF）产生白细胞介素-6（IL-6）的水平，及间接调控IL-17＋CD4＋T（Th17）细胞分化的能力。方法分离RASF 6例，建立体外培养体系，IL-22刺激RASF，qRT-PCR及ELISA检... 详细信息

目的：探讨白细胞介素-22（IL-22）刺激类风湿关节炎滑膜成纤维细胞（RASF）产生白细胞介素-6（IL-6）的水平，及间接调控IL-17＋CD4＋T（Th17）细胞分化的能力。方法分离RASF 6例，建立体外培养体系，IL-22刺激RASF，qRT-PCR及ELISA检测IL-6的表达；IL-22R1封闭抗体及抑制剂实验检测IL-6产生所涉及的特异性受体及其下游信号通路；建立RASF与健康志愿者CD4＋T细胞共培养体系和Transwell 体系，流式细胞术检测体系中各组 Th17细胞比例。结果 IL-22刺激RASF呈时间和剂量依赖性产生IL-6（P＜0．05），且IL-6产生依赖于IL-22R1及其下游的p38和JAK2通路（P＜0．05）；共培养体系和Transwell体系中发现IL-22预刺激RASF组较未刺激组Th17细胞比例增加，阻断IL-22R1或IL-6均能降低Th17细胞比例。结论 IL-22刺激RASF产生IL-6，进而促进Th17细胞分化，中和IL-22是RA治疗的有效策略。

关键词： IL-22 Th17细胞分化 IL-6 滑膜成纤维细胞类风湿关节炎

尿素参考方法的建立及其在正确度评价中的应用

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实用医学杂志 2014年第3期30卷 474-476页

作者：柯培锋王建兵陈炜烨林海标黄宪章郑松柏广东省中医院检验科广州市510120

目的:建立血清尿素参考方法,评价不同检测系统尿素测量结果的正确性。方法:根据美国CDC推荐尿素参考方法复现本实验室参考方法,与5个尿素测量常规检测系统进行方法间比对,运用改良的Blant-Altman图形法评价各常规系统与参考方法测量结... 详细信息

目的:建立血清尿素参考方法,评价不同检测系统尿素测量结果的正确性。方法:根据美国CDC推荐尿素参考方法复现本实验室参考方法,与5个尿素测量常规检测系统进行方法间比对,运用改良的Blant-Altman图形法评价各常规系统与参考方法测量结果的一致性。结果 :参考方法总不精密度0.999 8),各常规系统与参考方法测量结果的回归方程分别为:Y=1.011 4X-0.037 5,Y=0.982 9X+0.008 1,Y=0.995 9X-0.011 9,Y=0.932 2+0.071 7,Y=0.953 1X-0.043 3,其中X和Y分别代表参考方法与常规系统的测量结果。与参考方法比较,干式生化系统(系统4、5)表现出较明显的负偏倚,而其他系统与参考方法结果一致。结论:尿素参考方法在实验室已复现且性能符合要求,应重视干式生化系统尿素测定结果与参考方法间存在的差异。

关键词：尿素参考方法正确度检测系统