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鲨鱼单域抗体融合蛋白的克隆表达、稳定性及检测性能研究

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食品安全质量检测学报 2024年第3期15卷 117-124页

作者：贾成雨刘畅林洪曹立民王凯强隋建新中国海洋大学食品科学与工程学院青岛266110

目的探究鲨鱼单域抗体融合蛋白的克隆表达及其性能。方法通过大肠杆菌表达系统高效表达鲨鱼单域抗体融合蛋白2E6-SUMO;以传统的免疫球蛋白G(immolunoglobulin G,IgG)抗体为对照,对其热稳定性及酸碱稳定性进行研究;并以2E6-SUMO为识别元... 详细信息

目的探究鲨鱼单域抗体融合蛋白的克隆表达及其性能。方法通过大肠杆菌表达系统高效表达鲨鱼单域抗体融合蛋白2E6-SUMO;以传统的免疫球蛋白G(immolunoglobulin G,IgG)抗体为对照,对其热稳定性及酸碱稳定性进行研究;并以2E6-SUMO为识别元件,建立间接竞争酶联免疫吸附法,并应用于水产品中恩诺沙星残留的检测。结果2E6-SUMO的可溶性表达量为1.67mg/L,与传统的IgG抗体相比,2E6-SUMO具有更好的热稳定性和酸碱稳定性;建立了基于2E6-SUMO检测恩诺沙星的间接竞争酶联免疫吸附法,半抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC_(50))为42.08ng/mL,检出限为3.84ng/mL,线性范围为9.94~376.17 ng/mL;鱼肉基质对2E6-SUMO没有显著干扰,加标样品的回收率在83.33%~123.06%之间。结论鲨鱼单域抗体融合蛋白实现了高效表达,表现出更好的稳定性,可作为一种新型特异性免疫元件用于水产品中药物残留的免疫检测。本研究为鲨鱼单域抗体融合蛋白的应用提供了参考。

关键词：单域抗体恩诺沙星稳定性酶联免疫吸附法水产品

林洪生“固本清源”理论指导下的中西医结合治疗恶性肿瘤学术经验

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世界中医药 2024年第1期19卷 39-42,46页

作者：毛启远尹炳驿刘艺黎雪蔡瑞娟原苏芮张楚楚李道睿林洪生王学谦中国中医科学院广安门医院肿瘤科北京100053 中国中医科学院中医药信息研究所北京100700

林洪生教授在继承“扶正培本”理论的基础上,广纳各家肿瘤治疗之所长,结合四十多年临床诊疗经验,凝练并提出了“固本清源”理论,丰富了中医治疗恶性肿瘤的学术体系。通过阐述“固本清源”理论的源流以及科学内涵,将基于“固本清源”理... 详细信息

林洪生教授在继承“扶正培本”理论的基础上,广纳各家肿瘤治疗之所长,结合四十多年临床诊疗经验,凝练并提出了“固本清源”理论,丰富了中医治疗恶性肿瘤的学术体系。通过阐述“固本清源”理论的源流以及科学内涵,将基于“固本清源”理论指导下的中医药应用于现代医学治疗肿瘤的各个阶段,较大程度上提高了临床疗效,丰富了中西医结合肿瘤防治的理论与方法。

关键词： @林洪生固本清源中西医结合恶性肿瘤中医理论治疗方法经验思想

基于LSTM+Attention模型的典型配电台区短期负荷预测方法

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微型电脑应用 2024年第8期40卷 88-91页

作者：黄朝凯林洪浩王柯成陈晓瑜卢海明广东电网有限责任公司汕头供电局广东汕头515041

为解决配电区短期负荷难预测,导致负荷调度不均匀问题,研究基于长短期记忆网络+注意力机制(LSTM+Attention)模型的典型配电台区短期负荷预测方法。考虑节假日、正常作息以及气温等不同变化因素导致的短期负荷变化,确定区域划分单元中各... 详细信息

为解决配电区短期负荷难预测,导致负荷调度不均匀问题,研究基于长短期记忆网络+注意力机制(LSTM+Attention)模型的典型配电台区短期负荷预测方法。考虑节假日、正常作息以及气温等不同变化因素导致的短期负荷变化,确定区域划分单元中各负载与影响因素间关系,集群分析负载抽样数据,根据不同成分特征向量的贡献率,统计负荷变化影响因素数量,利用长短期记忆网络充分存储历史信息,凭借注意力机制模型确定输入向量和网络中隐含层的实际状态值以及地区负载的主要参数,计算归一化后电力负载的实际概率密度,得出短期负荷预测结果。实验结果表明,所提方法响应速度快,预测准确度高,预测效果和拟合优度理想。

关键词：长短期记忆网络 Attention模型短期负荷负荷预测配用电信息

基于GEO数据库联合网络药理学研究川芎-赤芍药对治疗动脉粥样硬化的药理过程及分子机制

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中国医院用药评价与分析 2024年第6期24卷 655-661页

作者：陈启庭林洪陈利捷卓超林岳双冰金宇张淼深圳市第二人民医院中西医结合科广东深圳518000 广西中医药大学研究生院南宁530001

目的:探讨活血化瘀中药药对川芎-赤芍拮抗动脉粥样硬化的潜在分子机制及药理过程。方法:使用R语言Limma包分析GEO数据库GSE43292数据集,对有表达差异的动脉粥样硬化基因进行筛选和提取。川芎-赤芍药对所含的化学活性组分及靶点通过中药... 详细信息

目的:探讨活血化瘀中药药对川芎-赤芍拮抗动脉粥样硬化的潜在分子机制及药理过程。方法:使用R语言Limma包分析GEO数据库GSE43292数据集,对有表达差异的动脉粥样硬化基因进行筛选和提取。川芎-赤芍药对所含的化学活性组分及靶点通过中药系统药理学数据库与分析平台检索。合并差异基因和药物作用靶点以获得共同的靶点。利用在线分析工具STRING和Cytoscape构建药物和靶点的调控网络以及靶点间的蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络。然后利用R语言注释靶点基因的基因本体(GO)功能,分析京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路,再进行基因集富集分析(GSEA)以验证KEGG的通路和富集的情况,确定靶点基因的调控功能和参与基因调控功能的信号转导通道。结果:共筛选出动脉粥样硬化差异基因1244个,川芎-赤芍药对含36个生物活性成分,其中靶点为环加氧酶1、肾上腺素受体、过氧化物酶体增殖物激活受体-γ、激酶插入域受体、孕激素受体、基质金属蛋白酶9、CXC趋化因子配体8、蛋白激酶Cβ、白细胞介素6、CD14、二肽基肽酶-4、PIK3CG、肾上腺素受体α1B、微管相关蛋白2、尿激酶纤溶酶原激活剂和单胺氧化酶B。靶点在GO中主要富集在合成DNA过程的调控、DNA生物合成的过程、含胶原的细胞外基质、细胞外基质、蛋白酶结合、细胞迁移、血管形成过程、膜筏结构、转录的调节等与动脉粥样硬化炎症、脂肪代谢及血管生成相关的生物学注释。脂质与动脉粥样硬化通路和核因子κB信号通路与动脉粥样硬化关系最为密切,并且在KEGG信号通路和GSEA均显示出富集。结论:川芎-赤芍药对通过潜在的13个活性成分作用于可能的16个靶点调控相关信号转导通路,通过抗炎、调脂和保护血管等方式产生抗动脉粥样硬化的作用。

关键词：川芎-赤芍药对动脉粥样硬化 GEO数据库联合网络药理学信号通路

西黄丸抑制乳腺癌4T1荷瘤小鼠生长的作用及其机制

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现代肿瘤医学 2024年第20期32卷 3828-3833页

作者：樊慧婷祁鑫关念波裴迎霞张芸侯炜林洪生中国中医科学院广安门医院肿瘤科

目的:观察西黄丸抑制4T1荷瘤小鼠生长的作用及其免疫调控机制。方法:建立4T1小鼠乳腺癌模型，观察不同剂量西黄丸干预对肿瘤生长的抑制作用；流式细胞仪检测荷瘤小鼠外周血、脾脏、骨髓来源免疫抑制细胞（myeloid-derived suppressor ce... 详细信息

目的:观察西黄丸抑制4T1荷瘤小鼠生长的作用及其免疫调控机制。方法:建立4T1小鼠乳腺癌模型，观察不同剂量西黄丸干预对肿瘤生长的抑制作用；流式细胞仪检测荷瘤小鼠外周血、脾脏、骨髓来源免疫抑制细胞（myeloid-derived suppressor cells, MDSCs）比例，同时分离小鼠脾脏检测活性氧（reactive oxygen species, ROS）、CD3+T、CD8+T、CD8+T IFN-γ+细胞所占的比例；Luminex液相芯片技术检测荷瘤小鼠外周血白细胞介素-1β（interleukin-1β,IL-1β）、白细胞介素-6（interleukin-6,IL-6）、单核细胞趋化因子-1（monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1）的含量。结果:西黄丸0.9、0.6、0.3 g/kg各剂量治疗组均显示了一定的抑制肿瘤生长的作用（P<0.01或P<0.05）,其中以0.9 g/kg组抑制作用最为明显，抑瘤率达到40%。西黄丸可减少荷瘤小鼠外周血、骨髓、脾脏MDSCs比例以及脾脏细胞ROS水平，提高脾脏细胞CD3+T细胞、CD8+T以及CD8+T IFN-γ+细胞所占的比例，同时，西黄丸可显著减少小鼠外周血MDSCs生成密切相关细胞因子IL-6、IL-1β的表达。结论:西黄丸可通过减少MDSCs比例，增强荷瘤小鼠抗肿瘤免疫功能抑制小鼠4T1炎性乳腺癌的生长，降低IL-6、IL-1β可能是其调控MDSCs的机制之一，对于其深入的作用机制还需要进一步的探索。

关键词：西黄丸骨髓来源免疫抑制细胞肿瘤免疫细胞因子

代谢组学在肝细胞癌早筛早诊和中药网络药理学中的作用

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生命的化学 2024年第6期44卷 1017-1023页

作者：吴和孟林洪升韦巍罗玉珍卢琳李明芬广西中医药大学南宁530200 广西中医药大学第一附属医院检验科南宁530023

肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是我国常见的恶性肿瘤之一,具有起病隐匿、进展快和预后差等特点。HCC的早筛早诊是提高肝癌患者治疗效果和生存率的关键,但目前HCC的特异性诊断和有效治疗策略仍然缺乏。网络药理学使HCC的治疗... 详细信息

肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是我国常见的恶性肿瘤之一,具有起病隐匿、进展快和预后差等特点。HCC的早筛早诊是提高肝癌患者治疗效果和生存率的关键,但目前HCC的特异性诊断和有效治疗策略仍然缺乏。网络药理学使HCC的治疗研究开启了“药物-基因-靶点-疾病”多层次网络构建的新模式,从整体、系统的角度去探索药物与疾病间的关联性。代谢组学是系统生物学的重要组成部分,它利用色谱、质谱、核磁共振等技术对机体所有低相对分子质量代谢产物进行定性和定量分析,发现潜在的代谢标志物、治疗靶点等并探讨其机制和价值。本文针对近年来代谢组学在HCC的早期筛查、诊断和中药网络药理学的研究现状和进展进行综述。

关键词：肝细胞癌代谢组学网络药理学生物标志物

不同施氮量对间作体系木薯、花生产量和经济效益的影响

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热带农业科学 2024年第2期44卷 1-8页

作者：张志华林洪鑫袁展汽肖运萍汪瑞清吕丰娟江西省农业科学院土壤肥料与资源环境研究所/农业农村部长江中下游作物生理生态与耕作重点实验室/国家红壤改良工程技术研究中心江西南昌330200 井冈山红壤研究所(江西省农业科学院井冈山分院) 江西吉安343016

为明确木薯不同施氮量对间作体系木薯、花生产量和经济效益的影响,以木薯品种‘华南8号’、花生品种‘粤油256’为试验材料,在木薯间作花生种植模式下,设置5个木薯施氮水平(0、90、135、180、225 kg/hm^(2)),共5个处理,采用田间随机区... 详细信息

为明确木薯不同施氮量对间作体系木薯、花生产量和经济效益的影响,以木薯品种‘华南8号’、花生品种‘粤油256’为试验材料,在木薯间作花生种植模式下,设置5个木薯施氮水平(0、90、135、180、225 kg/hm^(2)),共5个处理,采用田间随机区组试验,研究不同施氮量对间作体系木薯、花生产量和经济效益的影响。结果表明,在木薯间作花生模式下,随着木薯施氮量的增加,木薯和花生的产量均表现为先增后减的趋势,且均以木薯施氮量135 kg/hm^(2)(N135)产量最高,分别为木薯鲜薯23.86 t/hm^(2)和花生荚果2027.5 kg/hm^(2),较N0分别增加了17.9%和23.9%,所有处理间产量无显著性差异(p>0.05);与N0相比,N135处理下木薯单株生物产量、株高、茎粗、薯数均表现为增加,花生单穴生物产量、百果重、百仁重也均表现为增加趋势;木薯间作花生模式下,木薯增施氮肥,花生饱果期的叶面积指数在3.72~4.64,表现为随施氮量增加而增加,透光率在7.09%~11.73%,其变化趋势与叶面积指数相反,表现为随施氮量增加呈下降趋势;木薯与花生间作的总产值和经济效益均表现为先增后减的趋势,且均以木薯施氮量135 kg/hm^(2)最高,与木薯不施氮肥相比,二者间作总产值和经济效益分别增加了4514.9元/hm^(2)和3634.4元/hm^(2),产投比表现为N135最高,达3.80,较N0增加了0.19,其余处理则表现为下降,处理间无显著性差异(p>0.05)。综上所述,木薯间作花生模式下,木薯增施氮肥可增加木薯、花生的产量和经济效益,同时改善木薯、花生的农艺性状,且在木薯施氮量为135 kg/hm^(2)时,木薯和花生的产量和经济效益均达到最高。

关键词：木薯间作花生氮肥产量经济效益

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异羟肟酸类化合物对突变型EGFR细胞的生物活性研究

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沈阳药科大学学报 2024年第8期41卷 1018-1025,1073页

作者：何林洪张洁曾宪霞凌珍谭凯丽周立正王闻楚广西医科大学药学院广西南宁530021 广西医科大学基础医学院广西南宁530021

目的设计并合成具有抗突变型表皮生长因子(epidermal growth factor receptor,EGFR)驱动的非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)活性的结构新颖的先导化合物。方法一系列异羟肟酸类衍生物由起始原料4-氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧... 详细信息

目的设计并合成具有抗突变型表皮生长因子(epidermal growth factor receptor,EGFR)驱动的非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)活性的结构新颖的先导化合物。方法一系列异羟肟酸类衍生物由起始原料4-氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶经7步化学反应合成而得,采用MTT法测定目标化合物在体外对野生型EGFR(H460和A549)和突变型EGFR(PC9、HCC827和H1975)细胞系的抗增殖活性。结果10个异羟肟酸类目标化合物结构由NMR和MS谱鉴定确证。活性研究表明,以直链烷基取代的异羟肟酸衍生物(A1、A2和A4-A6)能有效抑制突变型EGFR细胞系的增殖,而其他化合物如A3和B1-B4则无法有效抑制上述细胞的增殖。其中,化合物A4表现最优,不仅能高效抑制突变型EGFR细胞系PC9、HCC827和H1975细胞系的增殖,ID_(50)值小于7μmol·L^(-1),与阳性对照N′-羟基-N-苯基辛二酰胺(SAHA)生物活性相似,而且选择性较好,其抑制野生型EGFR细胞系H460和A549增殖的ID_(50)值大于32μmol·L^(-1)。结论化合物A4可作为突变型EGFR抑制剂的先导化合物进行深度开发。

关键词：异羟肟酸非小细胞肺癌表皮生长因子受体突变型选择性

两种分析冻干人用狂犬病疫苗(Vero细胞)原液及半成品疫苗颗粒含量方法的比较

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中国生物制品学杂志 2024年第7期37卷 866-872页

作者：杨雪张秋菊冯子祎林洪娟张颖刘畅孙宏亮长春生物制品研究所有限责任公司吉林长春130062

目的对两种测定冻干人用狂犬病疫苗(Vero细胞)原液及半成品疫苗颗粒含量的方法进行比较分析,为制定狂犬病疫苗制品颗粒含量和纯度标准检测方法提供实验依据。方法将样品进行疫苗颗粒裂解、BCA定量、体积排阻色谱-高效液相色谱法(size ... 详细信息

目的对两种测定冻干人用狂犬病疫苗(Vero细胞)原液及半成品疫苗颗粒含量的方法进行比较分析,为制定狂犬病疫苗制品颗粒含量和纯度标准检测方法提供实验依据。方法将样品进行疫苗颗粒裂解、BCA定量、体积排阻色谱-高效液相色谱法(size exclusion chromatograghy-high performance liquid chromatography,SEC-HPLC)分析,分别采用BCA-SEC相对面积法和BCA-SEC标准曲线法对冻干人用狂犬病疫苗(Vero细胞)原液及半成品总蛋白浓度进行检测,并对疫苗颗粒含量进行定量分析,对两种方法的检测结果进行对比分析。结果两种方法测定冻干人用狂犬病疫苗原液疫苗颗粒含量在256~305μg/mL之间,平均值在267~285μg/mL之间,方法间相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)在5.8%~10.2%之间,一致性良好。两种方法测定冻干人用狂犬病疫苗半成品疫苗颗粒含量在149~169μg/mL之间,平均值在152~164μg/mL之间,方法间RSD在0.9%~4.7%之间,一致性良好。结论BCA-SEC标准曲线法实测值与预期值偏离较小,更接近样品真实情况,推荐作为企业参考使用。

关键词：狂犬病疫苗疫苗原液半成品病毒颗粒批间一致性含量分析