检索结果-南通市图书馆

作者：林梨平福建医科大学

学位级别：硕士

背景与目的:幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)是定植于胃粘膜表面的革兰氏阴性、生长缓慢的螺旋状微需氧菌,是慢性胃炎、消化性溃疡的主要致病因子,并且与胃癌和胃粘膜相关淋巴样组织淋巴瘤的发生密切相关。Hp的致病性已得到公认,但... 详细信息

背景与目的:幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)是定植于胃粘膜表面的革兰氏阴性、生长缓慢的螺旋状微需氧菌,是慢性胃炎、消化性溃疡的主要致病因子,并且与胃癌和胃粘膜相关淋巴样组织淋巴瘤的发生密切相关。Hp的致病性已得到公认,但其致病的机制及感染结局的多样性的本质仍未阐明。近年来,人们开始将寻找Hp致病特异基因的目标投向其“可塑区”。jhp 947基因是位于J99可塑区上的基因,国外文献报告jhp 947基因是Hp的一种新的致病因子,与胃癌、消化性溃疡等疾病关系密切。因此,本研究通过比较jhp 947基因缺失突变株及其相应野生株J99菌株的主要毒力活性差异及其对宿主细胞增殖、凋亡和分泌细胞因子的影响,初步评价与Hp可塑区jhp 947基因相关的生物学作用及其在细胞水平的毒性以及对细胞因子IL-8、IL-12分泌的影响,为揭示jhp 947基因参与Hp致病过程的分子机制,探索其与消化性溃疡、胃癌的相关性提供实验依据。方法:1、jhp947基因缺失突变株J99-947△的主要毒力活性检测。1.1应用尿素酶试剂,检测947基因敲除突变株J99-947△与标准株J99的尿素酶活性差异。1.2采用0.3%半固体琼脂穿刺法比较突变株与标准株的移行能力差别。1.3采用体外细胞(GES-1细胞)粘附实验检测突变株与标准株的粘附作用差异。1.4突变株和标准株培养上清以不同滴度作用于GES-1细胞,镜下观察细胞空泡样变,并结合中性红摄入法定量检测各组空泡毒素活性。2、J99-947△对GES-1细胞增殖与凋亡的影响。2.1标准株、突变株分别与GES-1细胞共培养48h,倒置显微镜下观察细胞形态学变化。2.2 CCK-8比色法检测标准株、突变株与GES-1细胞共培养24h,对细胞增殖活性的影响。2.3流式细胞仪检测标准株、突变株与GES-1细胞共培养24h的细胞凋亡情况。3、J99-947△对细胞因子IL-8、IL-12分泌的影响。3.1标准株、突变株分别与AGS细胞共培养24h后,收集上清测定IL-8。3.2从正常人外周血中分离培养鉴定树突状细胞。3.3标准株、突变株分别与未成熟树突状细胞共培养48h后,收集上清测定IL-12。3.4标准株、突变株分别与THP-1单核细胞共培养24h后,收集上清测定IL-12。结果:1、jhp947基因缺失突变株J99-947△的主要毒力活性。1.1尿素酶活性标准株组和突变株组在细菌与尿素酶试剂作用后,即刻会引起明显的颜色变化,两组均在20min即分解完全尿素酶试剂达到最大吸光度值,两组在5-30min 4个时点的吸光度值均无明显差异(p>0.05),提示jhp 947基因缺失对Hp尿素酶活性没有影响。1.2 Hp移行能力在0.3%半固体布氏平板上培养3d后,标准株从穿刺位点处向周围区域扩散开(平均直径10.3士1.0mm),突变株形成菌落集群平均直径(9.5士1.3mm),二者差异无统计学意义(p>0.05),提示jhp 947基因缺失对Hp移行能力没有影响。1.3 J99和J99-947△均能粘附于GES-1细胞表面,在MOI为100:1,粘附2h后细胞周围粘附的细菌数分别为65±18、58±15,两者之间差异无统计学意义(P>0.05),提示jhp 947基因缺失对J99对细胞的粘附能力没有影响。1.4标准株J99组和突变株J99-947△组空泡试验阳性的滴度均为1:8,且空泡形成的特点相近。进一步结合中性红摄入法定量评价空泡毒素活性,结果发现,947基因敲除突变株与其亲本野生株的空泡毒素活性没有明显差别,提示947基因敲除并不影响VacA活性。2、J99-947△对胃上皮细胞株GES-1细胞增殖和凋亡的影响。2.1幽门螺杆菌标准株组J99对GES-1细胞具有损伤作用,随着作用时间的延长。GES-1细胞形态由贴壁的梭形变为圆形,细胞核染色质浓缩,呈新月形聚集于核缘,细胞质浓缩,可见空泡变性,死亡细胞逐渐增多。突变株组细胞也出现与标准株组类似的细胞形态学变化。2.2 CCK-8试验显示,Hp与细胞共培养24h后,MOI为2:1,4:1,标准株和突变株组均对GES-1细胞有促增殖作用,当MOI为4:1时,标准株和突变株组对GES-1细胞的促增殖作用最为明显,具有统计学意义(p0.05)。2.3流式细胞分析显示,在攻击细胞,标准株和

关键词：幽门螺杆菌可塑区基因 jhp947 基因功能

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幽门螺杆菌疫苗的研究进展

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检验医学与临床 2009年第12期6卷 1002-1005页

作者：林梨平佘菲菲福建医科大学基础医学院病原生物学系福州350004

幽门螺杆菌(Hp)于1983年被发现,是寄居在胃黏膜的一种非侵袭性的革兰阴性微需氧螺杆菌.它在人群中具有较高的感染率,一般发达国家在50%左右,发展中国家可高达80%以上,主要在儿童期感染.由于部分Hp感染者会发展为慢性胃炎、十二指肠肠炎... 详细信息

幽门螺杆菌(Hp)于1983年被发现,是寄居在胃黏膜的一种非侵袭性的革兰阴性微需氧螺杆菌.它在人群中具有较高的感染率,一般发达国家在50%左右,发展中国家可高达80%以上,主要在儿童期感染.由于部分Hp感染者会发展为慢性胃炎、十二指肠肠炎、消化性溃疡、胃癌、黏膜相关性淋巴瘤等疾病,世界卫生组织癌症中心于1994年宣布Hp为一类致癌原[1].目前推荐的治疗慢性Hp感染的方法是两种抗生素加质子泵抑制剂或铋剂的三联或四联疗法,但耐药株的迅速增加,降低了联合疗法的成功率.

关键词：幽门螺杆菌疫苗抗原佐剂免疫途径

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miR-29b-3p靶向调控STAT3对AML细胞增殖及凋亡的影响

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中国实验血液学杂志 2020年第6期28卷 1853-1858页

作者：林梨平张倩吴玮薛龑唐永金林东红福建医科大学医学技术与工程学院福建福州350004

目的:探讨miR-29b-3p通过靶向调控信号转导和转录激活因子3(STAT3)对急性髓系白血病(AML)细胞增殖及凋亡的影响。方法:TargetScan及miRanda在线数据库预测miR-29b-3p与STAT33'UTR区的结合位点,采用双荧光素酶报告基因实验检测二者的靶... 详细信息

目的:探讨miR-29b-3p通过靶向调控信号转导和转录激活因子3(STAT3)对急性髓系白血病(AML)细胞增殖及凋亡的影响。方法:TargetScan及miRanda在线数据库预测miR-29b-3p与STAT33'UTR区的结合位点,采用双荧光素酶报告基因实验检测二者的靶向关系。qPCR及Western blot检测慢病毒过表达miR-29b-3p后AML细胞miR-29b-3p与STAT3 mRNA及蛋白表达变化,采用MTS检测各组AML细胞增殖变化,流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果:STAT3的3'UTR区存在与miR-29b-3p的结合位点,双荧光素酶报告基因实验证实STAT3是miR-29b-3p的靶基因。慢病毒过表达miR-29b-3p后,STAT3 mRNA及蛋白表达降低,过表达组AML细胞增殖减缓且凋亡增加(P<0.05)。结论:miR-29b-3p可靶向下调STAT3从而抑制AML细胞增殖,诱导细胞凋亡。

关键词：急性髓系白血病 miR-29b-3p 信号转导和转录激活因子3 细胞增殖细胞凋亡

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《微生物耐药性》选修课的探索与实践

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福建医科大学学报（社会科学版） 2017年第1期18卷 48-51页

作者：李能林梨平杨渐福建医科大学基础医学院福建福州350122 福建医科大学医学技术与工程学院福建福州350122 福建医科大学药学院福建福州350122

在《微生物耐药性》课程建设实践中,引入PDCA循环理论,并运用于教学设计、教学实施、教学效果评价和教学反思四个环节;结合教学实践经验与学生反馈,提出改进规划,逐步探索完善课程体系。

关键词：微生物耐药性选修课

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强化临床微生物学检验实验教学改革的实践

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山西医科大学学报（基础医学教育版） 2008年第4期10卷 440-441页

作者：林梨平林旎傅冷西福建医科大学医学技术与工程学院检验系

临床微生物学检验是医学检验专业的一门重要专业课程，其实验教学对于培养学生的实践能力和创新精神起着重要的作用。根据临床微生物学检验的课程特点和实验教学实践，对如何提高临床微生物学检验实验课的教学效果以使之更贴近于临床作... 详细信息

临床微生物学检验是医学检验专业的一门重要专业课程，其实验教学对于培养学生的实践能力和创新精神起着重要的作用。根据临床微生物学检验的课程特点和实验教学实践，对如何提高临床微生物学检验实验课的教学效果以使之更贴近于临床作一些探讨。

关键词：临床微生物学检验实验教学教学改革

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临床微生物实验教学的实践与探索

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山西医科大学学报（基础医学教育版） 2008年第5期10卷 557-558页

作者：林旎林梨平傅冷西福建医科大学医学技术与工程学院

临床微生物学检验是一门操作性和实践性很强的学科，实验课教学占有相当重要的地位。就如何改进教学方法、开拓学生思维、提高学生操作技能等方面采取的措施和方法作一总结。

关键词：临床微生物实验教学教学方法

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应用RNAi技术探讨CAP10基因在新型隐球菌感染小鼠中对Th1-Th2型免疫的影响

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中国人兽共患病学报 2016年第10期32卷 893-897页

作者：吴赞艺林旎林梨平欧启水林东红陈敏徐建萍福建医科大学附属第一医院福州350004 福建医科大学福州350004

目的设计siRNA表达质粒干扰CAP10基因的合成,将siRNA干扰前与干扰后的新型隐球菌菌液经呼吸道感染小鼠分别建立动物模型,行组织病理学检查与细胞因子检测,探讨CAP10基因对Th1/Th2免疫应答的影响。方法建立小鼠吸入感染隐球菌模型,在感... 详细信息

目的设计siRNA表达质粒干扰CAP10基因的合成,将siRNA干扰前与干扰后的新型隐球菌菌液经呼吸道感染小鼠分别建立动物模型,行组织病理学检查与细胞因子检测,探讨CAP10基因对Th1/Th2免疫应答的影响。方法建立小鼠吸入感染隐球菌模型,在感染后第7d(急性期),PAS染色观察小鼠肺组织病理变化,并采用酶联免疫吸附试验定量检测小鼠血液中的Th1(IFN-γ、TNF-α)、Th2细胞因子(IL-10)水平。结果急性期小鼠血液内IFN-γ、TNF-α及IL-10浓度测定分别为:对照组(uninfected组)(19.24±1.31)pg/mL,(36.94±2.04)pg/mL及(18.32±3.00)pg/mL,新型隐球菌未干扰组(WT组)(14.34±1.26)pg/mL,(25.37±1.37)pg/mL及(72.96±8.83)pg/mL,新型隐球菌干扰组(siRNA-CAP10组)(14.63±0.95)pg/mL,(26.22±1.55)pg/mL及(38.73±4.61)pg/mL。与对照组相比,WT组和siRNA-CAP10组Th1因子IFN-γ及TNF-α水平明显降低(P平明显增高。WT组与siRNA-CAP10组相比,IFN-γ及TNF-α水平未见明显增高而IL-10水平明显增高(P平衡,在调节炎症反应方面有重要作用,有望成为新的分子治疗靶点。

关键词：新型隐球菌 CAP10基因 siRNA Th1Th2细胞因子

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