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GSK-3β抑制剂对糖尿病视网膜病变自噬相关蛋白表达的影响

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GSK-3β抑制剂对糖尿病视网膜病变自噬相关蛋白表达的影响

作者：林桂明济南大学

学位级别：硕士

研究目的:糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)是糖尿病(diabetes mellitus,DM)的常见并发症,是一种微血管病变,亦是DM患者致盲的主要原因之一,研究DR发病机制对预防和治疗糖尿病视网膜病变具有极其重要的意义。本课题通过检测GS... 详细信息

研究目的:糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)是糖尿病(diabetes mellitus,DM)的常见并发症,是一种微血管病变,亦是DM患者致盲的主要原因之一,研究DR发病机制对预防和治疗糖尿病视网膜病变具有极其重要的意义。本课题通过检测GSK-3β抑制剂对糖尿病大鼠视网膜病变自噬相关蛋白表达变化,探讨其调控机制,为糖尿病视网膜病变的治疗提供理论基础。研究方法:1.动物实验1.1 1型DM大鼠模型建立体重180-200g的雄性健康SD大鼠80只,适应性喂养1周后,按体重均衡的原则随机分为正常对照组(Control组,20只)、模型组(DM组,60只)。对模型组一次性腹腔注射1%链脲佐菌素(STZ,60 mg/kg,pH=4.4柠檬酸-柠檬酸三钠缓冲液)造模,注射前禁食16h,不禁水。对照组大鼠注射同体积柠檬酸-柠檬酸三钠缓冲液。72h后尾静脉采血,血糖试纸检测空腹血糖值(fasting blood glucose,FBG),以FBG≥11.1mmol/L,认为1型糖尿病大鼠模型成功。1.21型DM大鼠糖尿病视网膜病变以及自噬相关蛋白表达的变化研究造模成功大鼠按体重及血糖均衡原则随机分为4 wk模型组、8 wk模型组及4 wk甲异靛给药组和8 wk甲异靛给药组,每组15只。对照组分为4 wk对照组以及8 wk对照组,每组10只。分组完成后继续以普通饲料喂养,并对给药组每天灌胃甲异靛,按大鼠体重每100g给药1 mg。分别在给药4周及8周末对大鼠麻醉,腹主动脉取血,离心分离血清,ELISA检测各组大鼠血管内皮生长因子(VEGF)、大鼠低氧诱导因子-1α(HIF-1α)。取出眼球,清理干净眼球周边的肌肉组织,分离出视网膜,采用免疫组织化学法(immunohistochemical,IHC)检测各组大鼠视网膜GSK-3β、VEGF、LC3A/B、ATG5的表达变化,Western blotting(WB)检测各组大鼠视网膜内GSK-3β、LC3A/B、ATG5蛋白表达变化。2.细胞实验2.1.细胞培养及甲异靛对RMEC细胞增殖的影响取生长状态良好的RMEC,用0.25%胰蛋白消化酶制成单细胞悬液,调整细胞数为1×10·mL,接种于96孔板,每孔100μL,接种后放于CO培养箱中培养。当细胞生长至70%-90%融合时,加入不同浓度梯度甲异靛培养24h后,检测不同浓度甲异靛对大鼠RMEC细胞增殖的影响,确定甲异靛最适浓度。2.2 RMEC细胞高糖模型建立将对数期生长状态良好的RMEC细胞,用0.25%胰蛋白消化酶制成单细胞悬液,调整细胞数为1×10·mL,接种于6孔板,分为正常对照组、高糖(HG,33 mmol/L)组、高糖+甲异靛组(47μmol/L),作用48h。2.2.高糖培养RMEC细胞及GSK-3β蛋白以及自噬相关蛋白表达变化研究采用Western blotting(WB)检测各组GSK-3β、LC3A/B、ATG5蛋白表达的变化。实验结果:1.糖尿病大鼠一般状况与对照组比较,DM组大鼠逐渐出现精神萎靡,腥臊臭味加重和多饮、多食、多尿、体重降低等糖尿病症状。实验造模成功大鼠60只,分成DM组以及甲异靛给药组。DM组以及甲异靛给药组大鼠FBG明显升高。4wk DM组大鼠视网膜发生病变,且视网膜新生血管增多,视力下降,随着糖尿病病程的进展,8 wk DM组大鼠视网膜血管明显增多,角膜模糊,屈光质模糊出现异常;与DM组大鼠相比较给药组大鼠视网膜新生血管明显减少,视网膜病变减轻。DM组大鼠血清中VEGF、HIF-1α明显升高,与模型组大鼠比较给药组大鼠VEGF、HIF-1α有降低趋势。***组大鼠以及给药组大鼠视网膜内GSK-3β蛋白及自噬相关蛋白表达变化WB结果表明,与对照组大鼠比较,4wkDM组大鼠以及8wkDM组视网膜中GSK-3β表达明显升高(P0.05)。WB结果表明,与对照组相比,高糖组RMEC细胞GSK-3β蛋白及自噬相关蛋白表达明显增高。与高糖组相比,给药组GSK-3β蛋白及自噬蛋白ATG5、LC3A/B表达减少(P<0

关键词：糖尿病糖尿病视网膜病变 GSK-3β 甲异靛自噬

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毛竹竹篼配方施肥效果分析

福建林业科技 2014年第2期41卷 95-98,114页

作者：林桂明福建省南平市林业科技推广中心福建南平353000

以福建省南平市延平区大横镇溪源村毛竹低产林分为试材，进行竹蔸配方施肥试验，以不施肥为对照。经连续4a的观测结果表明：竹蔸施1＃竹篼宝＋尿素的新竹产量最高，4 a达44213.85 kg · hm^-2，比对照增长57.56％；新竹株数比对照增长23... 详细信息

以福建省南平市延平区大横镇溪源村毛竹低产林分为试材，进行竹蔸配方施肥试验，以不施肥为对照。经连续4a的观测结果表明：竹蔸施1＃竹篼宝＋尿素的新竹产量最高，4 a达44213.85 kg · hm^-2，比对照增长57.56％；新竹株数比对照增长23.45％。其次是施2＃竹篼宝＋1％EM溶液，4 a新竹产量37670.25 kg· hm^-2，均超过丰产林标准。竹蔸配方施肥均可加快竹蔸腐烂速度，采用施有机肥＋EM生物肥效果最好，4 a内竹蔸完全腐烂数达89％，比对照提高83％，施用1＃竹篼宝＋尿素次之，4 a内竹蔸完全腐烂数达81％，比对照提高75％。竹蔸配方施肥经济效益较高，投入产出比在1∶10.5-1∶11.9之间，以施用1＃竹篼宝＋尿素的投入产出比最高。

关键词：毛竹竹蔸施肥 EM肥专用肥

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毛竹混交林林分生长状况和结构特征研究

世界竹藤通讯 2012年第2期10卷 18-22,26页

作者：林桂明福建省南平市林业科技推广中心 353000

对福建省建阳交溪毛竹阔叶树混交林、毛竹杉木混交林、毛竹杉木阔叶树混交林及毛竹纯林等6种不同混交模式林分生长状况进行比较,结果表明:混交林毛竹个体生物量、毛竹胸径和竹高较大,不同模式林分间的胸径、竹高、冠幅等生长因子均达显... 详细信息

对福建省建阳交溪毛竹阔叶树混交林、毛竹杉木混交林、毛竹杉木阔叶树混交林及毛竹纯林等6种不同混交模式林分生长状况进行比较,结果表明:混交林毛竹个体生物量、毛竹胸径和竹高较大,不同模式林分间的胸径、竹高、冠幅等生长因子均达显著差异;竹阔混交林较有利于竹鞭孕芽发笋;各模式竹林结构综合评判为一般经营竹林;竹林竹鞭长、鞭径、鞭节生长以竹阔比例为5:5林分竹鞭较好。

关键词：毛竹阔叶树杉木混交林生长状况结构特征

中山市三乡镇1991～1994年疟疾流行情况分析

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广东卫生防疫 1996年第1期22卷 32-33页

作者：林桂明中山市三乡医院

中山市三乡镇１９９１～１９９４年疟疾流行情况分析林桂明三乡镇地处中山市南半部，四面环山，交通方便，有十六个管理区及一个圩镇。常住居民８３３３户，３１７４１人；外来流动人口３万８千多人，共约７万人。各类厂、场４００多间... 详细信息

中山市三乡镇１９９１～１９９４年疟疾流行情况分析林桂明三乡镇地处中山市南半部，四面环山，交通方便，有十六个管理区及一个圩镇。常住居民８３３３户，３１７４１人；外来流动人口３万８千多人，共约７万人。各类厂、场４００多间，其中石场２１个。三乡镇过去曾经是...

关键词：流行情况分析疟疾中山市外来流动人口居民乡镇

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室内空气中甲醛的概述

硅谷 2013年第18期 146-147页

作者：林桂明深圳市计量质量检测研究院

介绍甲醛的理化性质、室内空气中甲醛的主要来源及甲醛对人体的危害,并简要概述室内空气中甲醛的检测方法。

关键词：甲醛室内空气

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南平市生态公益林非木质利用试验初报

林业勘察设计 2012年第1期32卷 175-177页

作者：林桂明南平市林业局福建南平353000

通过5年来的南平市生态公益林非木质利用试验成效对比,总结分析当地生态公益林非木质利用的成功经验和失败原因,提出今后发展生态公益林非木质利用的有效途径。

关键词：生态公益林非木质利用试验初报有效途径

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中考中的几何应用

中学理科园地 2005年第2期1卷 34-35页

作者：林桂明永春县蓬壶中学

培养应用意识，提高解决问题的能力．本身就是新教材的一个目的，学生通过实习作业、探究性活动等实践．了解了一些生产过程，积累了一些经济常识、社会常识．开拓了视野，增强了用数学的意识．并通过身边的各种现象，如计量、经济、城... 详细信息

培养应用意识，提高解决问题的能力．本身就是新教材的一个目的，学生通过实习作业、探究性活动等实践．了解了一些生产过程，积累了一些经济常识、社会常识．开拓了视野，增强了用数学的意识．并通过身边的各种现象，如计量、经济、城市规划、材料设计、建筑模型、

关键词：应用意识几何中考生产过程城市规划材料设计建筑模型探究性

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用VB开发中职学校国家助学金管理软件

湖南科技学院学报 2010年第8期31卷 68-71页

作者：林桂明湛江财贸学校广东湛江524094

基于实际应用的需求,通过VB6.0开发平台,利用ADO对象访问ACCESS数据库技术,开发中职学校国家助学金管理软件。该软件具有三大功能模块:一是导入导出excel表格数据模块;二是数据维护与查询模块;三是统计模块。该软件可在Windows操作平台... 详细信息

基于实际应用的需求,通过VB6.0开发平台,利用ADO对象访问ACCESS数据库技术,开发中职学校国家助学金管理软件。该软件具有三大功能模块:一是导入导出excel表格数据模块;二是数据维护与查询模块;三是统计模块。该软件可在Windows操作平台下独立运行。软件界面友好,操作方便,运行可靠稳定。

关键词： VB6.0 ADO对象 ACCESS数据库 excel数据国家助学金

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复杂环境桩基成孔施工实践

运输经理世界 2021年第6期 87-88页

作者：林桂明福建第一公路工程集团有限公司福建泉州362000

随着经济发展,基础建设规模扩大,桥梁的应用已非常普及,孔桩的成孔工艺也已十分成熟;但在地形地貌复杂环境的限制下,工艺的选择会对整个工程的进度和造价造成很大的影响。在离公路近、流砂地质环境、施工场地小、嵌岩深度长、岩面斜度... 详细信息

随着经济发展,基础建设规模扩大,桥梁的应用已非常普及,孔桩的成孔工艺也已十分成熟;但在地形地貌复杂环境的限制下,工艺的选择会对整个工程的进度和造价造成很大的影响。在离公路近、流砂地质环境、施工场地小、嵌岩深度长、岩面斜度很大的复杂环境下,就桩基的成孔工艺进行对比探讨,并结合具体的工程实例,采用半竹片桩对扣施工技术和水磨取芯施工工艺相结合的人工挖孔工艺成孔,保证了工程质量,加快了工程的进度及降低了工程造价,可为相似工程施工提供参考与借鉴。

关键词：复杂环境复杂地质孔桩成孔工艺