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棕榈酸、油酸、亚油酸对3T3-L1脂肪细胞脂联素和PPARγ表达的调节研究

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棕榈酸、油酸、亚油酸对3T3-L1脂肪细胞脂联素和PPARγ表达的调节...

作者：林杰义南方医科大学

学位级别：硕士

研究目的脂联素(adiponectin)是对肥胖及相关代谢性疾病的防治极有价值的分子靶点,一直以来倍受关注。研究膳食脂肪酸的构成对肥胖及相关代谢性疾病(如：糖尿病及胰岛素抵抗)的影响也一直以来是医学界和营养学界关注的热点之一,现有研... 详细信息

研究目的脂联素(adiponectin)是对肥胖及相关代谢性疾病的防治极有价值的分子靶点,一直以来倍受关注。研究膳食脂肪酸的构成对肥胖及相关代谢性疾病(如：糖尿病及胰岛素抵抗)的影响也一直以来是医学界和营养学界关注的热点之一,现有研究也大多数支持改变膳食脂肪酸构成能够改善由肥胖引起的相关代谢性疾病,并且观察到总是伴随着体内脂联素水平的改变。现已知过氧化物酶体增殖物激活受体γ (peroxisome proliferator activa ted receptor,PPARγ)是体内脂肪酸的感受器,在调控脂肪细胞分化、调节糖脂代谢中起关键作用;现有研究证明在脂联素基因的启动子上存在PPARγ的反应元件;目前少见关于脂肪酸调节脂联素表达机制的研究,脂肪酸作为PPARγ的天然配体能否通过PPARγ来调节脂联素的表达是非常值得研究的问题。本实验拟通过体外细胞培养试验,从不同种类脂肪酸对脂联素表达的影响这一角度来展开研究,寻找能提高脂联素的表达的适宜脂肪酸种类和浓度,为日后研究不同脂肪酸构成比提供初步数据,并初步探讨不同脂肪酸调节脂联素表达的分子机理。其研究结果将为肥胖相关疾病的预防和治疗提供新的思路和科学依据,也为确定膳食中不同脂肪酸的适宜构成提供新的重要的参考依据,有重要的理论价值和现实意义。研究方法 1以体外培养并诱导分化成熟的3T3-L1脂肪细胞为研究对象,以棕榈酸(PA)、油酸(OA)、亚油酸(LA)为受试物,观察经一定浓度(25、50、100、200、400μmol/L)的不同脂肪酸处理后,3T3-L1脂肪细胞脂联素及PPARγ基因表达水平的变化(Realtime PCR相对定量法),观察各受试物是否通过PPARγ来影响脂联素的表达;2观察比较不同脂肪酸加抑制剂(GW9662:PPARy抑制剂)或不加抑制剂对脂肪细胞脂联素基因、PPARγ基因和脂联素蛋白表达水平的影响。 3所得数据采用平均数±标准差(x±s)表示,如果方差齐,组间比较采用单因素方差分析(One WayANOVA),两两比较采用LSD T-test或dunnett T-test,如果方差不齐,运用Welch法和Dunnett’s T3法分别进行组间比较和两两比较。相关性分析采用Pearson相关分析。研究结果 1. PA、OA、LA对脂联素及PPARγ mRNA表达的影响 1.1PA对脂联素及PPARγ mRNA表达的影响以不同浓度(25、50、100、200、400μmol/L)的PA分别处理3T3-L1成熟脂肪细胞24h,在浓度为25μmol/L时脂联素mRNA表达显著增加,比对照组增加54%(P=0.035);其余浓度脂联素mRNA表达均下降,在400μmol/L(?)寸显著降低,比对照组降低75%(P=0.001)。在浓度为25、50μmol/L时,PPARy mRNA表达显著增加,与对照组相比分别增加63%(P=0.006)和71%(P=0.002);其余浓度时表达均下降,在400μmol/L时,比对照组降低79%(P=0.001)。经Pearson相关分析,脂联素mRNA表达与PPARγ mRNA表达总体趋势存在显著正相关关系。相关系数r=0.882,P=0.000。 1.2OA对脂联素及PPARγ mRNA表达的影响以不同浓度(25、50、100、200、400μmol/L)的OA分别处理3T3-L1成熟脂肪细胞24h,在浓度为25、50、100μmol/L时,脂联素mRNA的表达均高于对照组,在50μmol/L时最为显著,比对照组增加80%(P=0.008);随着浓度的增加,脂联素mRNA表达下降,在400μmol/L时显著低于对照组,减少55%(P=0.007)。在浓度为25、50、100μmol/L时,PPARγ mRNA的表达增加,在50μmol/L显著增加,比对照组增加39%(P=0.014);随着浓度的继续增加,PPARγ mRNA表达均下降,在200、400μmol/L时,分别比对照组减少39%(P=0.013)和57%(P<0.05)。经Pearson相关分析,脂联素mRNA表达与PPARγ mRNA表达总体趋势存在显著正相关关系。相关系数r=0.971,P=0.000。 1.3LA对脂联素及PPARγ mRNA表达的影响以不同浓度(25、50、100、200、400μmol/L)的LA分别处理3T3-L1成熟脂肪细胞24h,在浓度为50、100μmol/L时脂联素mRNA的表达显著增加,分别比对照组增加199%(P<0.001)和118%(P<0.001);当浓度为400μmol/L时,表达显著下降,比对照组减少59%(P=0.006)。在浓度为25、50、100μmol/L时,PPARγ mRNA的表达增加并呈上升趋势,分别比对照组增加117%(P=0.001)、128%(P=0.001)、181%(

关键词：脂肪酸脂联素过氧化物酶体增殖物激活受体γ 脂肪细胞

不同脂肪酸对脂肪细胞脂联素及PPARγ基因表达影响

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中国公共卫生 2012年第4期28卷 493-495页

作者：林杰义张奕罗玮查龙应毛丽梅南方医科大学公共卫生与热带医学学院营养与食品卫生学系广东广州510515

目的用不同种类、不同浓度的脂肪酸处理体外培养的3T3-L1成熟脂肪细胞,观察处理前后脂联素(ad-iponectin)及过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)基因mRNA的表达水平,及两者之间是否存在相互关系。方法运用实时荧光定量PCR方法检测体... 详细信息

目的用不同种类、不同浓度的脂肪酸处理体外培养的3T3-L1成熟脂肪细胞,观察处理前后脂联素(ad-iponectin)及过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)基因mRNA的表达水平,及两者之间是否存在相互关系。方法运用实时荧光定量PCR方法检测体外培养并诱导分化成熟的3T3-L1脂肪细胞经一定浓度脂肪酸处理后,脂联素及PPARγ基因mRNA的表达水平。结果棕榈酸(PA)在低浓度(25μmol/L)时能明显上调脂联素及PPARγmRNA的表达,比对照组增加53%(P<0.05),其余浓度均呈表达下降;油酸(OA)和亚油酸(LA)则在浓度为25、50、100μmol/L时上调脂联素及PPARγmRNA的表达,在50μmol/L时上调作用最为明显,随着浓度的继续增加脂联素表达下降,呈剂量依赖关系,浓度越高,表达越低。结论油酸和亚油酸在一定浓度范围内上调3T3-L1脂肪细胞脂联素基因表达,棕榈酸则主要表现为抑制作用,但在很低浓度(25μmol/L)时也上调脂联素表达;脂联素基因表达与PPARγ基因表达相关。

关键词：脂肪酸脂联素过氧化物酶体增殖物激活受体γ 基因表达脂肪细胞

广州城郊妇女产褥期饮食行为及其影响因素分析

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中国妇幼保健 2011年第7期26卷 1053-1055页

作者：焦昌娅毛丽梅黄少明林杰义张奕楚心唯南方医科大学公共卫生与热带医学学院营养与食品卫生学系广东广州510515

目的:了解广州城郊妇女在产褥期的饮食行为状况并分析其影响因素。方法:采用分层抽样和整群抽样相结合的方法,抽取广州市城区和郊区经历过产褥期的妇女共2 040例作为研究对象,逐一进行回顾性问卷调查,回收有效问卷2 013份。结果:产褥期... 详细信息

目的:了解广州城郊妇女在产褥期的饮食行为状况并分析其影响因素。方法:采用分层抽样和整群抽样相结合的方法,抽取广州市城区和郊区经历过产褥期的妇女共2 040例作为研究对象,逐一进行回顾性问卷调查,回收有效问卷2 013份。结果:产褥期存在多种传统的饮食禁忌及膳食结构不合理现象,鸡蛋每日摄入超过150 g者占31.7%,肉禽类摄入超过300 g达到56.0%;大多数妇女产褥期完全不摄入虾蟹、坚果、大豆及豆制品(分别占84.7%、73.1%和62.8%),而不食用奶类和水果分别占40.0%和30.4%。Logistic回归分析结果显示,妇女产褥期传统的饮食观念是影响虾蟹类、水果类食物摄取的主要负面因素;妇女及其丈夫的文化程度高、接受过营养指导、知晓相关的营养知识是以上各类食物摄取的主要促进因素;另外,虾蟹类、奶类、大豆及其制品的摄取还受地域影响。结论:广州妇女产褥期饮食仍然存在一些值得注意的问题,建议有针对性的对产妇及其家人开展营养保健知识宣教活动。

关键词：产褥期饮食行为影响因素

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城郊妇女产褥期营养保健知识及影响因素分析

中国公共卫生 2012年第3期28卷 266-267页

作者：黄少明毛丽梅焦昌娅张奕林杰义孙素霞南方医科大学公共卫生与热带医学学院营养与食品卫生学系广东广州510515

目的了解广东省广州市城郊妇女产褥期营养保健知识水平及影响因素,以便提出有针对性的干预措施。方法抽取广州市2 013名有过产褥期经历的妇女进行问卷调查。结果营养知识均分为(9.30±2.67)分,及格率为66.9%,城市调查对象均分(9.82±2.... 详细信息

目的了解广东省广州市城郊妇女产褥期营养保健知识水平及影响因素,以便提出有针对性的干预措施。方法抽取广州市2 013名有过产褥期经历的妇女进行问卷调查。结果营养知识均分为(9.30±2.67)分,及格率为66.9%,城市调查对象均分(9.82±2.47)分,明显高于郊区的(8.78±2.75)分(P义。

关键词：产褥期营养保健知识影响因素

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广州城郊妇女产褥期生活行为及其影响因素

中国妇幼保健 2011年第13期26卷 1986-1988页

作者：焦昌娅毛丽梅黄少明林杰义张奕查龙应南方医科大学公共卫生与热带医学学院营养与食品卫生学系广东广州510515

目的:研究广州城郊妇女产褥期的生活行为状况及其影响因素。方法:采用分层抽样和整群抽样相结合的方法,抽取广州城郊经历过产褥期的妇女共2 040人作为研究对象,逐一进行回顾性问卷调查,获有效问卷2 013份。结果:研究对象产褥期存在一些... 详细信息

目的:研究广州城郊妇女产褥期的生活行为状况及其影响因素。方法:采用分层抽样和整群抽样相结合的方法,抽取广州城郊经历过产褥期的妇女共2 040人作为研究对象,逐一进行回顾性问卷调查,获有效问卷2 013份。结果:研究对象产褥期存在一些不良的生活卫生习惯:有16.8%的妇女产褥期每天睡眠不足8 h,而4.9%每天卧床达20 h以上,64.6%的妇女产后2天以内下床活动,但58.0%产褥期从不做保健操,31.9%从不到室外活动,产褥期从不晒太阳、从不洗头分别占15.2%和14.0%。Logistic回归分析显示,传统的禁忌观念是妨碍妇女产褥期合理休养的主要负面因素;妇女孕产期听保健课、知晓相关知识、接受过产后访视是产褥期有益生活行为的促进因素。另外,妇女产褥期生活行为还受地域影响。结论:广州妇女产褥期生活行为仍然存在一些值得注意的问题,应对产妇及家人有重点、有针对性的开展行之有效的健康教育,做好产后随访和指导工作,以促进产褥期妇女身心健康。

关键词：城郊妇女产褥期保健生活卫生习惯影响因素

二十二碳六烯酸对3T3-L1脂肪细胞脂联素mRNA的影响及其机制

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营养学报 2012年第2期34卷 128-131,134页

作者：张奕林杰义罗玮黄少明毛丽梅南方医科大学公共卫生与热带医学学院营养与食品卫生学系广州510515

目的探讨二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid,DHA)对3T3-L1脂肪细胞脂联素表达的影响及其机制。方法不同浓度DHA处理体外培养成熟的3T3-L1脂肪细胞,并选取一定浓度DHA加与不加过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)拮抗剂GW-9662处理... 详细信息

目的探讨二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid,DHA)对3T3-L1脂肪细胞脂联素表达的影响及其机制。方法不同浓度DHA处理体外培养成熟的3T3-L1脂肪细胞,并选取一定浓度DHA加与不加过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)拮抗剂GW-9662处理脂肪细胞,实时荧光定量PCR分析处理前后脂联素基因和PPARγmRNA表达水平的差异。结果与对照组相比,当DHA浓度为50、100 mol/L时,脂联素表达水平分别增加71.89%、106.23%(P<0.05),随着浓度的增加脂联素表达降低,当DHA浓度达到400 mol/L时,脂联素表达水平最低(P<0.05)。当DHA浓度为100 mol/L时,脂肪细胞PPARγmRNA表达增加70.24%(P<0.05)。与对照组相比,DHA中加GW-9662处理组脂联素和PPARγmRNA表达水平分别降低97.32%、90.90%(P<0.05)。结论在一定浓度范围内,DHA对脂联素表达的影响呈剂量依赖关系,推测DHA可能是通过PPARγ途径调控脂肪细胞的脂联素表达。

关键词：二十二碳六烯酸脂联素 3T3-L1脂肪细胞过氧化物酶体增殖物激活受体γ

n-6/n-3多不饱和脂肪酸对3T3-L1脂肪细胞脂联素及PPARγ表达的调节作用

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营养学报 2016年第2期38卷 152-156页

作者：吕玉珊罗玮宋佳张奕林杰义毛丽梅南方医科大学公共卫生与热带医学学院营养与食品卫生学系广州510515

目的探讨不同比例、不同浓度的n-6/n-3多不饱和脂肪酸（PUFA）对3T3-L1脂肪细胞脂联素及过氧化物酶体增殖物激活受体（PPARγ）表达的调节作用。方法用不同比例、不同浓度的n-6/n-3PUFA分别处理已诱导分化成熟的3T3-L1脂肪细胞,用实时定... 详细信息

目的探讨不同比例、不同浓度的n-6/n-3多不饱和脂肪酸（PUFA）对3T3-L1脂肪细胞脂联素及过氧化物酶体增殖物激活受体（PPARγ）表达的调节作用。方法用不同比例、不同浓度的n-6/n-3PUFA分别处理已诱导分化成熟的3T3-L1脂肪细胞,用实时定量PCR和Western-Blot法测定各处理组胞内脂联素、PPARγmRNA表达水平以及脂联素蛋白表达水平。结果与空白对照相比,n-6/n-3PUFA为1：1时,在25~200μmol/L范围内时显著促进脂联素mRNA表达;比例为5：1时25、50μmol/L浓度组及比例为10：1时50μmol/L浓度组均显著促进脂联素mRNA表达。比例为20：1及30：1时,各浓度组对脂联素mRNA表达主要起抑制作用。在脂肪酸浓度达到400μmol/L时,n-6/n-3PUFA无论何种构成比均抑制脂联素表达。胞内脂联素蛋白表达与脂联素mRNA表达基本一致。PPARγ表达与脂联素表达呈正相关。结论 n-6/n-3PUFA可能通过PPARγ途径,以剂量依赖方式调节脂联素表达。

关键词： 3T3-L1脂肪细胞 n-6/n-3PUFA 脂联素 PPARγ

二十二碳六烯酸对3T3-L1脂肪细胞脂联素表达的影响及其机制

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二十二碳六烯酸对3T3-L1脂肪细胞脂联素表达的影响及其机制

不同脂肪酸对3T3-L1脂肪细胞脂联素及PPARγ基因表达的影响

营养与老年代谢病——达能营养中心第十四届学术年会

作者：张奕林杰义罗玮黄少明毛丽梅南方医科大学公共卫生与热带医学学院营养与食品卫生学系

目的探讨二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid,DHA)对3T3-L1脂肪细胞脂联素表达的影响及其机制。方法不同浓度DHA处理体外培养成熟的3T3-L1脂肪细胞,并选取一定浓度DHA加与不加过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)拮抗剂GW-9662处理脂肪细胞,实时荧光定量PCR分析处理前后脂联素基因和PPARγmRNA表达水平的差异。结果与对照组相比,当DHA浓度为50μmol/L、100μmol/L时,脂联素表达水平分别增加71.89%、106.23%(P<0.05),随着浓度的增加脂联素表达降低,当DHA浓度达到400μmol/L时,脂联素表达水平最低(P<0.05)。当DHA浓度为100μmol/L时,脂肪细胞PPARγmRNA表达增加70.24%(P<0.05)。与对照组相比,DHA中加GW-9662处理组脂联素和PPARγmRNA表达水平分别降低97.32%、90.90%(P<0.05)。结论在一定浓度范围内,DHA对脂联素表达的影响呈剂量依赖关系,推测DHA可能是通过PPARγ途径调控脂肪细胞的脂联素表达。

关键词：二十二碳六烯酸脂联素 3T3-L1脂肪细胞过氧化物酶体增殖物激活受体γ

来源： cnki会议评论

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不同脂肪酸对3T3-L1脂肪细胞脂联素及PPARγ基因表达的影响