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基因免疫制备抗人BLyS单克隆抗体及单抗特性分析

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中国病理生理杂志 2002年第6期18卷 625-629页

作者：张志方张春艳潘敬运林学颜中山大学中山医学院生理学教研室广东广州510089 中山大学中山医学院免疫学教研室广东广州510089

目的 :基因免疫制备抗人BLyS单克隆抗体并分析其免疫学特性。方法 :将人BLyS基因克隆到真核表达载体pcDNA3,构建重组质粒pcDNA3/hBLyS ,用其免疫BALB/c鼠 ,取鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合 ,用ELISA法筛选阳性克隆 ,用免疫印迹和流式细胞技... 详细信息

目的 :基因免疫制备抗人BLyS单克隆抗体并分析其免疫学特性。方法 :将人BLyS基因克隆到真核表达载体pcDNA3,构建重组质粒pcDNA3/hBLyS ,用其免疫BALB/c鼠 ,取鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合 ,用ELISA法筛选阳性克隆 ,用免疫印迹和流式细胞技术进一步鉴定抗体的特异性 ,用双向免疫扩散鉴定单克隆抗体的类别。结果 :重组质粒双酶切结果和DNA序列测定结果表明 ,pcDNA3/hBLyS重组质粒含有目的基因 ;ELISA、免疫印迹、流式细胞仪和双向免疫扩散等实验结果表明 ,9c10杂交瘤细胞株产生的单克隆抗体可以特异性结合IFN -γ激活的人T淋巴细胞膜表面BLyS蛋白的膜外区 ,属于IgG1亚类。结论 :获得了能够特异性结合人T淋巴细胞上BLyS蛋白膜外区的单克隆抗体。

关键词：基因免疫制备 B淋巴细胞激活因子质粒单克隆抗体自身免疫性疾病

单克隆抗体免疫结合物治疗裸鼠CEM T-淋巴瘤的研究

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中国生物制品学杂志 1993年第3期6卷 101-103页

作者：张玲丁洪波林学颜中山医科大学肿瘤研究所广州510060 珠海市丽宝生化制药公司中山医科大学微生物学与免疫学教研室

应用抗CDT抗原决定簇的单克隆抗体3A1与抗癌药Adriamycin交联成免疫结合物(免疫导向药物),在人T淋巴瘤裸鼠模型体内进行治疗试验,结果显示2.0mg/kg单抗免疫结合物为最佳治疗剂量,可作为治疗T淋巴瘤的一种有效制剂。

关键词：单克隆抗体免疫结合物 CEMT淋巴瘤

特异性抗原致敏的DC-CIK细胞对肿瘤细胞的杀伤效应

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中国生物制品学杂志 2007年第5期20卷 343-345页

作者：何跃谢新波秦文珍林学颜湛海伦高新广州市金航生物科技有限公司广州510665 中山大学附属第三医院泌尿外科广州510630

目的检测特异性抗原致敏的DC-CIK细胞对恶性肿瘤细胞的杀伤效应。方法采用肿瘤抗原致敏的DC与CIK细胞共培养,分析其免疫表型,并用MTT染色法检测其对肿瘤细胞的杀伤力。结果所获得DC-CIK细胞的CD3异质性T细胞群,对肾透明细胞癌786-0和前... 详细信息

目的检测特异性抗原致敏的DC-CIK细胞对恶性肿瘤细胞的杀伤效应。方法采用肿瘤抗原致敏的DC与CIK细胞共培养,分析其免疫表型,并用MTT染色法检测其对肿瘤细胞的杀伤力。结果所获得DC-CIK细胞的CD3异质性T细胞群,对肾透明细胞癌786-0和前列腺癌PC-3细胞的杀伤率分别为70.64%和65.65%。结论DC-CIK细胞对肾透明细胞癌786-0细胞和前列腺癌PC-3细胞具有较强的杀伤效应。

关键词：树突状细胞细胞因子诱导的杀伤细胞杀伤效应

^(131)I-BAC_5在荷瘤裸鼠体内分布及放射免疫显像研究

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中华核医学杂志 1996年第2期16卷 92-94页

作者：任均田李峰迟文谢春霖陈德剑林学颜解放军157医院医学实验科广州510510

研究^(131)I标记抗低分化鼻咽癌单克隆抗体BAC_5在荷瘤裸鼠体内分布,并进行放射免疫显像,为临床应用提供依据。BAC_5用^(131)I Iodogen法标记后,尾静脉注入荷瘤裸鼠体内,24小时后进行放射免疫显像。并于48、96、144小时分批处死实验裸鼠... 详细信息

研究^(131)I标记抗低分化鼻咽癌单克隆抗体BAC_5在荷瘤裸鼠体内分布,并进行放射免疫显像,为临床应用提供依据。BAC_5用^(131)I Iodogen法标记后,尾静脉注入荷瘤裸鼠体内,24小时后进行放射免疫显像。并于48、96、144小时分批处死实验裸鼠,测定肝脏等12种脏器和肿瘤组织的单位重量放射性比值(T/NT)、各组织摄取百分数(%ID/g)及定位指数(LI)。结果^(131)I-BAC_5尾静脉注射后48小时内以全身分布为主,72小时肿瘤部位显像,并呈高度特异性浓集。γ显像结果与体内分布结果一致,SPECT图像质量与T/NT值有关。BAC_5可特异地与鼻咽癌细胞结合,具有导向鼻咽癌的作用。

关键词：鼻咽肿瘤放射免疫法碘131

3A1-柔红霉素对急性T细胞白血病的效果与安全性初探

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中山医科大学学报 1996年第1期17卷 9-11,15页

作者：林学颜石磊闭兰汪东海中山医科大学免疫学教研室卫生部武汉生物制品研究所

应用单克隆抗体３Ａ１－柔红霉素结合物（３Ａ１－ＤＭ）临床治疗８例急性Ｔ淋巴细胞白血病患者。经初步验证，鼠源性单克隆抗体制备的导向药物输入人体内未发生严重过敏反应与毒副作用。疗程完毕后，以骨髓象为标准评价临床治疗效果，... 详细信息

应用单克隆抗体３Ａ１－柔红霉素结合物（３Ａ１－ＤＭ）临床治疗８例急性Ｔ淋巴细胞白血病患者。经初步验证，鼠源性单克隆抗体制备的导向药物输入人体内未发生严重过敏反应与毒副作用。疗程完毕后，以骨髓象为标准评价临床治疗效果，获完全缓解者３／８例（３７．５％），部分缓解４／８例（５０％），无效１／８例（１２．５％）例，总有效率达８７．５％。初步验证了微量导向药物在临床治疗中的效果。

关键词： T细胞白血病柔红霉素疗效安全性

GST-hBLyS融合蛋白基因的构建及其在大肠杆菌中的表达

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中山大学学报（自然科学版） 2002年第3期41卷 72-75页

作者：张志方张春艳付涌水林学颜潘敬运中山大学中山医学院广东广州510089 广州血液中心广东广州510095

根据hBLyS (humanBlymphocytestimulator)基因序列设计合成特异性引物 ,用RT_PCR从人外周血淋巴细胞扩增出 85 8bp的hBLyS基因 ,并将其插入到融合蛋白原核表达载体 pGEX_4T_1中 ,得到重组表达质粒pGEX_4T_1/hBLyS。把此重组质粒转化大... 详细信息

根据hBLyS (humanBlymphocytestimulator)基因序列设计合成特异性引物 ,用RT_PCR从人外周血淋巴细胞扩增出 85 8bp的hBLyS基因 ,并将其插入到融合蛋白原核表达载体 pGEX_4T_1中 ,得到重组表达质粒pGEX_4T_1/hBLyS。把此重组质粒转化大肠杆菌BL2 1,经用IPTG诱导 ,表达出了GST_hBLyS融合蛋白。

关键词： GST-hBTLyS融合蛋白基因大肠杆菌人BLyS 基因表达肿瘤坏死因子自身免疫性疾病重组质粒

激活T细胞的培养上清液对肝癌细胞毒性作用的电镜观察

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细胞生物学杂志 1987年第4期 186-188页

作者：林学颜卫生部武汉生物制品研究所细胞工程室

外周血液E-玫瑰花环阳性的淋巴细胞由PHA-P刺激而产生无白细胞介素-1(Interleukin-1)的培养上清液,在体外对大鼠肝癌细胞的杀伤效应敏感,通过光学显微镜观察,激活T细胞培养上清液引起肝癌细胞胞浆的收缩、分离。电子显微镜观察这些细胞... 详细信息

外周血液E-玫瑰花环阳性的淋巴细胞由PHA-P刺激而产生无白细胞介素-1(Interleukin-1)的培养上清液,在体外对大鼠肝癌细胞的杀伤效应敏感,通过光学显微镜观察,激活T细胞培养上清液引起肝癌细胞胞浆的收缩、分离。电子显微镜观察这些细胞显示出溶酶体残留的致密小体形成和线粒体肿胀,细胞浆内以及贴邻的细胞膜之间出现大量空泡。这种现象提示了激活T细胞培养上清液有侵袭肝癌细胞的特性,导致细胞溶解。

关键词：细胞毒细胞培养胞毒效应电镜 PHA 毒素培养(生物) 电子显微镜培养上清液肝癌细胞

单抗导向药物3A1-Dextran-DM对白血病CEM细胞特异性杀伤效应的观察

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中国生物制品学杂志 1992年第4期5卷 145-146页

作者：林学颜石磊中山医科大学广州510089 卫生部武汉生物制品研究所

抗T淋巴母细胞单克隆抗体与柔红霉素的结合物,在体外对T淋巴母细胞CEM显示出选择性杀伤作用,而对K562、Raji、SP2/0等非T淋巴细胞则无杀伤效应。由此证实单抗3Al-柔红霉素免疫结合物具有导向杀伤癌细胞的性能,为临床特异性治疗肿瘤带来... 详细信息

抗T淋巴母细胞单克隆抗体与柔红霉素的结合物,在体外对T淋巴母细胞CEM显示出选择性杀伤作用,而对K562、Raji、SP2/0等非T淋巴细胞则无杀伤效应。由此证实单抗3Al-柔红霉素免疫结合物具有导向杀伤癌细胞的性能,为临床特异性治疗肿瘤带来了新的希望。

关键词：导向药物生物导弹单抗免疫结合物

双分沁功能IgM、IgG2a单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立与鉴定

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单克隆抗体通讯 1990年第4期6卷 50-53页

作者：林学颜陈晓松钮泽春卫生部武汉生物制品研究所细胞工程研究室武汉430060

应用HB_sA_g采取两种不同的免疫方法免疫小鼠后。取免疫的脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞Sp2/0融合,筛选出两株抗HB_s的单克隆抗体杂交瘤细胞株。常规免疫方法获得的细胞株为WHB_s1,分泌IgG1。脾内免疫方法获得的细胞株WHB_s2,分泌IgM和IgG_(2a... 详细信息

应用HB_sA_g采取两种不同的免疫方法免疫小鼠后。取免疫的脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞Sp2/0融合,筛选出两株抗HB_s的单克隆抗体杂交瘤细胞株。常规免疫方法获得的细胞株为WHB_s1,分泌IgG1。脾内免疫方法获得的细胞株WHB_s2,分泌IgM和IgG_(2a)抗体。经过3个月的连续培养,能稳定分泌效价高,特异性强的单克隆抗体。

关键词：双分泌乙型肝炎表面抗原单克隆抗体