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用于乳腺蛋白标志基因检测的DNA电化学生物传感器的研究

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用于乳腺蛋白标志基因检测的DNA电化学生物传感器的研究

作者：林启凰福建医科大学

学位级别：硕士

乳腺癌是一种严重危害女性身心健康的常见恶性肿瘤,其发病率每年快速递增,而乳腺癌的侵袭转移是导致乳腺癌病人死亡的主要原因。乳腺癌侵袭转移诊断的特异性标记物为乳腺蛋白标志基因,通过对其诊断可为临床乳腺癌转移早期监测、治疗提... 详细信息

乳腺癌是一种严重危害女性身心健康的常见恶性肿瘤,其发病率每年快速递增,而乳腺癌的侵袭转移是导致乳腺癌病人死亡的主要原因。乳腺癌侵袭转移诊断的特异性标记物为乳腺蛋白标志基因,通过对其诊断可为临床乳腺癌转移早期监测、治疗提供科学的研究基础,具有十分重要的学术创新性和临床应用前景。DNA电化学生物传感器是当前生物基因检测技术的前沿研究,具有快速、灵敏、准确、简便经济等特点,在分子生物学和生物工程医学等领域有广泛的应用前景。本论文利用基于偶联活化剂技术的共价键合法,将乳腺蛋白标志单链DNA序列探针固定到电极表面,再利用电化学交流阻抗检测技术进行DNA杂交前后电信号的检测,并对检测的实验条件进行了优化,构建了基于DNA电化学生物传感器的乳腺蛋白基因检测新方法。实验结果表明,用十二烷基磺酸钠(SDS)作为非特异性吸附去除剂,能够有效的去除单或双链DNA在电极表面的非特异性吸附。在SDS的最佳洗脱时间为3 min,探针固定最佳时间为30min,杂交最佳的温度和时间分别为37℃和20min的优化实验条件下,利用电化学交流阻抗检测技术测得乳腺蛋白标志基因在1.0×10～2.0×10mol/L的浓度范围内与检测响应信号呈良好的线性关系(r=0.9992),检测限为5×10(S/N=3),从而实现对乳腺蛋白标志基因的准确灵敏测定, 此外,该方法对临床乳腺癌实际样本进行了初步实验,并与传统检测乳腺蛋白标志基因的PCR凝胶电泳方法进行对照试验研究。从临床实际阳性样本中提取的mRNA,再转录成cDNA,以转录cDNA为模板进行RT-PCR扩增,获得扩增产物。利用所建新方法,在优化的实验条件下,将扩增产物稀释100倍后进行检测,并进行了回收实验与阴性样本检测的考察,与传统凝胶电泳法进行对照,结果表明该方法检测灵敏、准确度高,为进一步临床实际样品直接检测提供科学实验依据,将为最终应用于临床早期乳腺癌的侵袭转移诊断奠定研究基础。

关键词：乳腺蛋白标志基因(MG) DNA电化学生物传感器交流阻抗技术实际样品

UPLC-MS/MS法分析通奶草乙酸乙酯部位成分及其体外抗菌活性

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中成药 2020年第7期42卷 1931-1935页

作者：林启凰鲍红娟张岗厦门医学院厦门市海洋天然产物资源重点实验室福建厦门361023 厦门医学院闽台青草药研究室福建厦门361023

目的建立UPLC-MS/MS法分析通奶草乙酸乙酯部位成分及其体外抗菌活性。方法通奶草地上部分75%甲醇提取液乙酸乙酯部位的分析采用Agilent Eclipse Plus C_(18)色谱柱(100 mm×4.6 mm,3.5μm);柱温25℃;流动相乙腈(A)-0.1%甲酸(B),梯度洗脱... 详细信息

目的建立UPLC-MS/MS法分析通奶草乙酸乙酯部位成分及其体外抗菌活性。方法通奶草地上部分75%甲醇提取液乙酸乙酯部位的分析采用Agilent Eclipse Plus C_(18)色谱柱(100 mm×4.6 mm,3.5μm);柱温25℃;流动相乙腈(A)-0.1%甲酸(B),梯度洗脱;体积流量0.4 mL/min;全波长扫描。根据准分子离子和碎片离子信息,结合对照品比对和文献数据鉴定化合物结构。采用纸片扩散法初步评价提取物抗菌活性,96孔板法测定最低抑菌浓度(MIC)。结果共鉴定出21种成分,包括3种有机酸、8种可水解鞣质、10种黄酮,除鞣花酸和槲皮素外,均首次从该植物中鉴定。通奶草乙酸乙酯萃取物对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌具有一定的抑制作用。结论通奶草乙酸乙酯萃取部位具有一定的抗菌活性,其成分以可水解鞣质和黄酮为主。

关键词：通奶草化学成分鉴定抗菌活性 UPLC-MS/MS

基于二维码技术构建高校实验室危险化学品的新型管理模式

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化工管理 2023年第19期 116-119页

作者：林启凰林聪炜陈仲巍张娜张岗厦门医学院药学系福建厦门361000 厦门弘爱医院福建厦门361000

高校实验室使用的危险化学品存在使用量大、存放部位多、涉及面广、接触人员多等问题,其中危险化学品在使用、存储过程是事故高发的环节。因此危险化学品的安全管理是高校实验室建设的重点。基于二维码技术,建立高校危险化学品三级库管... 详细信息

高校实验室使用的危险化学品存在使用量大、存放部位多、涉及面广、接触人员多等问题,其中危险化学品在使用、存储过程是事故高发的环节。因此危险化学品的安全管理是高校实验室建设的重点。基于二维码技术,建立高校危险化学品三级库管理体系,构建新的危险化学品管理模式,严控管理实验室危险化学品的每个环节,提升并加强高校危化品的安全性,有效地降低实验室意外发生的几率。

关键词：危险化学品二维码技术三级库管理实验室安全

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辛伐他汀致不良反应的研究分析

临床合理用药杂志 2014年第24期7卷 70-71页

作者：林启凰厦门医学高等专科学校福建省厦门市361008

通过对中国知网期刊全文数据库(1999—2012)检索,共收集到国内公开发表的医药期刊中有关辛伐他汀的不良反应病案个例报道25例,并进行统计、分析,得出辛伐他汀的不良反应主要以横纹肌溶解、肝功能损害等为主,其他肌痛、肌炎等也有发生。

关键词：辛伐他汀不良反应数据收集

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红桑叶化学成分研究

中药材 2020年第6期43卷 1364-1367页

作者：林启凰张娜陈仲巍张岗厦门医学院药学系福建厦门361000

目的:研究红桑Acalypha wikesiana ***.叶的化学成分。方法:综合利用MCI凝胶色谱、反相ODS色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱以及半制备高效液相色谱等手段,对化学成分进行分离;利用质谱(MS)、核磁共振波谱(NMR)等鉴定技术,结合文献数据,... 详细信息

目的:研究红桑Acalypha wikesiana ***.叶的化学成分。方法:综合利用MCI凝胶色谱、反相ODS色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱以及半制备高效液相色谱等手段,对化学成分进行分离;利用质谱(MS)、核磁共振波谱(NMR)等鉴定技术,结合文献数据,鉴定化合物结构。结果:从红桑叶50%甲醇提取物中分离鉴定了15个化合物,分别为:没食子酸(1)、5-羟甲基-2-呋喃甲醛(2)、没食子酸甲酯(3)、原儿茶酸(4)、顺式咖啡酸(5)、反式咖啡酸(6)、槲皮素(7)、山柰酚(8)、3,4,8,9,10-五羟基二苯并[b, d]吡喃-6-酮(9)、短叶苏木酚酸(10)、金丝桃苷(11)、异槲皮苷(12)、紫云英苷(13)、矢车菊素-3-O-(2″-没食子酰基)-β-D-吡喃半乳糖苷(14)、矢车菊素-3-O-β-D-吡喃半乳糖苷(15)。结论:其中,化合物2、9、13、15为首次从铁苋菜属植物中分离得到,化合物5、6、10、12为首次从该植物中分离得到。

关键词：红桑化学成分结构鉴定多酚

新型DNA电化学生物传感器用于乳腺癌转移基因的研究及应用

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基因组学与应用生物学 2019年第9期38卷 4377-4382页

作者：林启凰林聪炜叶廷秀张岗陈丹陈仲巍厦门医学院药学系厦门361000 解放军第一七四医院厦门361000

乳腺癌是危害女性健康的最常见的恶性肿瘤,其每年发病率及死亡率不断升高,其中乳腺癌转移是乳腺癌患者致死的主要原因。新型DNA电化学生物传感器,具有灵敏度高、重现性好、易于操作、准确性好等诸多优点,能够较好地应用于临床上常规检... 详细信息

乳腺癌是危害女性健康的最常见的恶性肿瘤,其每年发病率及死亡率不断升高,其中乳腺癌转移是乳腺癌患者致死的主要原因。新型DNA电化学生物传感器,具有灵敏度高、重现性好、易于操作、准确性好等诸多优点,能够较好地应用于临床上常规检查难以发现的乳腺癌早期转移标志基因及序列的检测,为下一步乳腺癌病人实际样品的检测奠定坚实的实验基础,从而有效降低了乳腺癌死亡率,并且改善乳腺癌患者生存。因此研究一种新型的DNA电化学生物传感器能够快速、灵敏并准确的检测出乳腺癌转移标志基因对于乳腺癌的早期诊断和治疗具有重要的意义。

关键词：乳腺癌乳腺癌标志基因 DNA电化学生物传感器

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亚胺培南西司他丁钠不良反应的研究分析

海峡药学 2019年第1期31卷 266-268页

作者：林启凰林聪炜厦门医学院厦门361000 厦门市解放军第174医院厦门361003

通过对中国知网期刊全文数据库(2000～2017)检索,共收集到国内公开发表的医药期刊中有关亚胺培南西司他丁钠的不良反应病案个例报到,共计39例,并进行统计、分析。结果亚胺培南西司他丁钠常见的不良反应主要表现为括过敏反应、消化系统... 详细信息

通过对中国知网期刊全文数据库(2000～2017)检索,共收集到国内公开发表的医药期刊中有关亚胺培南西司他丁钠的不良反应病案个例报到,共计39例,并进行统计、分析。结果亚胺培南西司他丁钠常见的不良反应主要表现为括过敏反应、消化系统、神经系统或精神疾病以及血液系统异常等。

关键词：亚胺培南西司他丁钠不良反应分析

响应面优化天胡荽多酚超声波辅助提取工艺及其抗氧化性

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分子植物育种 2018年第10期16卷 3361-3368页

作者：林启凰陈仲巍林聪炜叶廷秀纪美茹张岗厦门医学院药学系厦门361000 解放军第一七四医院药剂科厦门361000

本研究的主旨在于优化天胡荽多酚的提取工艺,以天胡荽为原料,多酚提取率为响应值,对影响天胡荽多酚提取率的4个因素(乙醇浓度,超声时间,液料比和超声温度)进行考察,并进行Box-Behnken实验设计与优化,以对羟自由基的清除率来评价其抗氧... 详细信息

本研究的主旨在于优化天胡荽多酚的提取工艺,以天胡荽为原料,多酚提取率为响应值,对影响天胡荽多酚提取率的4个因素(乙醇浓度,超声时间,液料比和超声温度)进行考察,并进行Box-Behnken实验设计与优化,以对羟自由基的清除率来评价其抗氧化能力。结果表明天胡荽多酚的最佳提取工艺为:乙醇浓度64%、超声时间34 min、液料比23 mL/g、提取温度76℃,提取率为37.94 mg/g,与模型预测值(38.14 mg/g)相比,其相对误差为0.52%,说明该模型有效、可靠。天胡荽多酚具有一定的抗氧化能力,其抗氧化能力与浓度存在正相关关系,该工艺为天胡荽多酚的提取与开发提供科学依据。

关键词：天胡荽多酚响应面抗氧化

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天胡荽化学成分的研究

中成药 2020年第1期42卷 120-123页

作者：林启凰张娜叶廷秀陈仲巍张岗厦门医学院药学系

目的研究天胡荽Hydrocotyle sibthorpioides Lam.[*** Roxb.]的化学成分。方法天胡荽水提物采用硅胶、聚酰胺柱、ODS、Sephadex LH-20、半制备HPLC进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。结果从中分离得到7个化合物... 详细信息

目的研究天胡荽Hydrocotyle sibthorpioides Lam.[*** Roxb.]的化学成分。方法天胡荽水提物采用硅胶、聚酰胺柱、ODS、Sephadex LH-20、半制备HPLC进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。结果从中分离得到7个化合物,分别鉴定为原儿茶酸(1)、对羟基桂皮酸(2)、芹菜素(3)、山柰酚(4)、山柰苷(5)、槲皮素(6)、8-O-4-dehydrodiferulic acid (7)。结论化合物7首次从伞形科植物中分离得到,化合物5首次从天胡荽属植物中分离得到,化合物1~2首次从该植物中分离得到。

关键词：天胡荽化学成分分离鉴定