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清瘟败毒饮对脓毒症小鼠脾组织微小RNA表达的影响

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中国中西医结合急救杂志 2023年第1期30卷 18-21页

作者：林名瑞文丹乐道平李玮福建中医药大学附属人民医院重症医学科福州350004 福建中医药大学附属人民医院急诊科福州350004 宁德市医院重症医学科福建宁德352100

目的采用小RNA(sRNA)测序技术检测清瘟败毒饮干预的脓毒症小鼠24 h脾组织微小RNA(miRNA)的表达变化,从而从非编码基因层面分析清瘟败毒饮抗脓毒性脾功能损伤的可能机制。方法将45只SPF级健康BALB/C小鼠随机等分为对照组、脓毒症组和清... 详细信息

目的采用小RNA(sRNA)测序技术检测清瘟败毒饮干预的脓毒症小鼠24 h脾组织微小RNA(miRNA)的表达变化,从而从非编码基因层面分析清瘟败毒饮抗脓毒性脾功能损伤的可能机制。方法将45只SPF级健康BALB/C小鼠随机等分为对照组、脓毒症组和清瘟败毒饮组。清瘟败毒饮成分每剂含生石膏15 g、生地黄7.5 g、水牛角15 g、黄连2.5 g、栀子5 g、桔梗5 g、黄芩5 g、知母5 g、赤芍5 g、玄参5 g、连翘5 g、甘草5 g、丹皮5 g、竹叶5 g。脓毒症组和清瘟败毒饮组小鼠腹腔注射脂多糖(LPS)10 mg/kg构建脓毒症模型,对照组腹腔注射等量生理盐水。清瘟败毒饮组于制模前2 d开始给予清瘟败毒饮药液0.3 mL,每1 mL相当于生药1.5 g灌胃,术后继续胃饲,每日2次;对照组及脓毒症组给予等量生理盐水胃饲。术后24 h各组随机取5只小鼠脾组织,每组各取1只小鼠的脾组织于光镜下观察病理学改变,提取其余小鼠脾组织总RNA,采用sRNA测序技术进行miRNA检测,应用生物信息学软件分析脓毒症小鼠脾组织miRNA表达差异及靶基因的预测。结果光镜下显示,对照组小鼠脾组织结构正常;脓毒症组小鼠脾组织白髓总体结构稍紊乱,红白髓交界偏模糊,红髓充血明显;清瘟败毒饮组小鼠脾组织紊乱结构较前有所改善。与对照组比较,脓毒症组小鼠脾组织已知miRNA表达上调数为39个,下调数为16个;清瘟败毒饮组小鼠脾组织已知miRNA表达上调数为6个,下调数为24个。经LPS干预后,miR-217-5p、miR-200b-5p、miR-429、miR-148A-3p表达明显上调;经清瘟败毒饮干预后,miR-217-5p、miR-200b-5p、miR-429、miR-148A-3p表达出现一定程度下调。结论清瘟败毒饮可改善脓毒症小鼠脾组织结构改变,可能通过下调miR-217-5p、miR-200b-5p、miR-429、miR-148A-3p基因表达起到保护脓毒症小鼠脾损伤的作用,可为将来进一步研究提供思路。

关键词：脓毒症脂多糖小鼠清瘟败毒饮微小RNA

犀角地黄汤对脓毒症小鼠肝组织microRNA表达的影响

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中华急诊医学杂志 2022年第10期31卷 1341-1346页

作者：林名瑞张翠芳郑碧清陈怀宇郭小艳李玮福建中医药大学附属人民医院重症医学科福州350004 福州市第二医院检验科福州350007

目的基于转录组学探讨犀角地黄汤抗脓毒症性肝损伤的机制。方法将60只C57BL/6小鼠按随机数字表法等分为对照组、脓毒症组和脓毒症犀角地黄汤治疗组。采用脂多糖腹腔注射复制脓毒症小鼠模型;对照组予等量生理盐水腹腔注射。脓毒症犀角地... 详细信息

目的基于转录组学探讨犀角地黄汤抗脓毒症性肝损伤的机制。方法将60只C57BL/6小鼠按随机数字表法等分为对照组、脓毒症组和脓毒症犀角地黄汤治疗组。采用脂多糖腹腔注射复制脓毒症小鼠模型;对照组予等量生理盐水腹腔注射。脓毒症犀角地黄汤组于建模前2 d犀角地黄汤(生药187.5 mg)灌胃,2次/d,建模后继续胃饲(2次/d),对照组及脓毒症组予等量生理盐水胃饲。LPS干预后72 h每组随机取9只,麻醉后取部分肝脏做Small RNA及RNA-seq测序分析,部分肝脏做病理检查。结果犀角地黄汤有改善脓毒症小鼠肝组织病理学改变。缓解部分异常表达的microRNA(mmu-miR-292a-5p、mmu-miR-871-3p、mmu-miR-653-5p、mmu-miR-293-5p、mmu-miR-155-3p,mmu-miR-346-5p、mmu-miR-187-5p、mmu-miR-3090-3p)及其靶基因。结论犀角地黄汤可减少脓毒症小鼠肝组织病理学改变,其机制可能与犀角地黄汤调节mmu-miR-187-5p及其靶基因Adam8、Irak3、Pfkfb3等关键基因的表达有关。

关键词：犀角地黄汤脓毒症肝组织微小RNA

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乌司他丁对脓毒症大鼠脾组织基因表达的影响

乌司他丁对脓毒症大鼠脾组织基因表达的影响

作者：林名瑞福建医科大学

学位级别：硕士

目的：基于基因芯片技术，分析乌司他丁（UTI）预处理脓毒症大鼠脾组织基因表达谱的变化并推论其可能的作用机制。方法：45只雄性Wistar大鼠按随机数字表法等分为假手术组、脓毒症组和UTI组。采用盲肠结扎穿孔术（CLP）复制脓毒症大鼠模... 详细信息

目的：基于基因芯片技术，分析乌司他丁（UTI）预处理脓毒症大鼠脾组织基因表达谱的变化并推论其可能的作用机制。方法：45只雄性Wistar大鼠按随机数字表法等分为假手术组、脓毒症组和UTI组。采用盲肠结扎穿孔术（CLP）复制脓毒症大鼠模型;假手术组仅开腹、关腹，不行CLP。UTI组于制模前1h肌肉注射（肌注）UTI100kU/kg;脓毒症组及假手术组肌注平衡液5ml/kg。采用RatRef-12大鼠表达谱基因芯片进行检测，用计算机软件筛选并分析比较脓毒症组、UTI组与假手术组大鼠脾组织基因表达的变化，并初步分析脓毒症组和UTI组表达基因之间的差异。结果：在22523条基因中，与假手术组比较，脓毒症组大鼠脾组织差异表达基因共205条，占基因芯片总点数的0.910%;其中表达上调者98个，已知功能基因48个，仅在脓毒症组出现的32个;表达下调者107个，已知功能基因64个，仅在脓毒症组出现的34个。与假手术组比较，UTI组大鼠脾组织差异表达基因共197个，占基因芯片总点数的0.875%。其中表达上调者114个，已知功能基因35个，仅在UTI组出现的19个;表达下调者83个，已知功能基因49个,仅在UTI组出现的19个。结论：UTI预处理一定程度上纠正脓毒症大鼠过度炎症反应及免疫抑制所致脾组织基因表达异常，从基因水平上对脾组织起到保护作用;同时脓毒症时机体可能存在一定的自我调节能力而起到对脾组织的保护作用。

关键词：脓毒症乌司他丁脾基因表达谱基因芯片

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脓毒症大鼠脾组织基因表达变化

中华急诊医学杂志 2013年第3期22卷 266-271页

作者：林名瑞林建东肖雄箭福建中医药大学附属人民医院ICU 福州350004 福建医科大学附属第一医院ICU

目的基于基因芯片技术来研究脓毒症大鼠脾组织基因表达情况，并分析脓毒症时脾功能障碍的可能机制。方法30只雄性Wistar大鼠按随机数字表法等分为对照组和脓毒症组。采用盲肠结扎穿孔术（CLP）复制脓毒症大鼠模型；对照组仅开腹、关腹... 详细信息

目的基于基因芯片技术来研究脓毒症大鼠脾组织基因表达情况，并分析脓毒症时脾功能障碍的可能机制。方法30只雄性Wistar大鼠按随机数字表法等分为对照组和脓毒症组。采用盲肠结扎穿孔术（CLP）复制脓毒症大鼠模型；对照组仅开腹、关腹，不行CLP。两组大鼠术后均肌注平衡液5ml／kg。采用RatRef-12大鼠表达谱基因芯片进行检测，用计算机软件筛选并分析比较脓毒症组与对照组大鼠脾组织基因表达的变化。结果在22523个基因中，与对照组比较脓毒症组大鼠脾组织差异表达基因共205个，占基因芯片总点数的0．910％。其中表达上调者98个，已知功能基因48个；表达下调者107个，已知功能基因64个。这些差异基因主要涉及细胞凋亡、炎症反应、能量代谢相关基因表达异常。结论脓毒症时，脾功能障碍可能是由于细胞凋亡、炎症反应及能量代谢相关基因的表达异常共同作用导致的．可能为脓毒痱晚期机体龟疫抑制的原因。

关键词：脓毒症脾基因表达谱基因芯片

一个遗传性多发性骨软骨瘤家系的基因变异分析

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中华医学遗传学杂志 2021年第6期38卷 549-552页

作者：郭小艳郑钦钦林名瑞张怡元施腾飞厦门大学附属福州第二医院检验科福州350007 福建中医药大学附属人民医院重症医学科福州350005 厦门大学附属福州第二医院骨科福州350007

目的对1个遗传性多发性骨软骨瘤家系进行基因变异检测,明确其可能的致病原因。方法提取先证者及其家系成员的外周血基因组DNA,用二代测序技术(next generation sequencing,NGS)筛查先证者EXT1/EXT2编码区及邻近内含子序列,对疑似致病变... 详细信息

目的对1个遗传性多发性骨软骨瘤家系进行基因变异检测,明确其可能的致病原因。方法提取先证者及其家系成员的外周血基因组DNA,用二代测序技术(next generation sequencing,NGS)筛查先证者EXT1/EXT2编码区及邻近内含子序列,对疑似致病变异进行先证者及家系成员Sanger测序和酶切验证。结果NGS检测结果显示先证者EXT1基因第10外显子存在c.1911C>A杂合无义变异,Sanger测序验证家系中先证者及父亲均检测到该变异,而先证者三姐及对照均未携带该变异。根据美国医学遗传学与基因组学学会遗传变异分类标准与指南,判定EXT1基因c.1911C>A变异为致病性变异(PVS1+PM2+PP1)。结论EXT1基因的c.1911C>A可能是该家系的致病原因,该变异的检出拓展了遗传性多发性骨软骨瘤的基因变异谱。

关键词：遗传性多发性骨软骨瘤 EXT1基因无义变异生物信息学

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乌司他丁对脓毒症大鼠肝组织基因表达的影响

中国急救医学 2012年第7期32卷 628-635页

作者：黄惠斌林建东刘勇肖雄箭林名瑞福建医科大学附属第一医院ICU 福建福州350005 福建医科大学附属漳州市医院ICU 福建漳州363000

目的采用基因芯片技术检测乌司他丁（ulinastatin，UTI）预处理对脓毒症大鼠肝组织基因表达的影响，并从基因水平上探讨其作用机制。方法将45只雄性Wistar大鼠随机等分为对照组、脓毒症组和UTI组。采用盲肠结扎穿孔术（cecal ligation a... 详细信息

目的采用基因芯片技术检测乌司他丁（ulinastatin，UTI）预处理对脓毒症大鼠肝组织基因表达的影响，并从基因水平上探讨其作用机制。方法将45只雄性Wistar大鼠随机等分为对照组、脓毒症组和UTI组。采用盲肠结扎穿孔术（cecal ligation and puncture，CLP）复制脓毒症模型；UTI组于制模前1h肌肉注射UTI 100kU／kg；脓毒症组及对照组肌肉注射平衡液5mL／kg。采用RatRef一12大鼠表达谱基因芯片进行检测，用计算机软件筛选并分析比较对照组、脓毒症组及UTI组大鼠肝组织基因表达的差异。结果在22523条基因中，与对照组比较，脓毒症组大鼠肝组织差异表达基因共284条，其中表达上调者149条，已知功能基因74条；表达下调者135条，已知功能基因63条。与对照组比较，uTI组大鼠肝组织差异表达基因共100条，其中表达上调者51条，已知功能基因26条；表达下调者49条，已知功能基因22条。脓毒症组和UTI组与对照组比较，同样表达的基因有21条，其中上调10条，下调11条。结论UTI预处理可部分纠正脓毒症大鼠过度炎症反应及免疫抑制所致肝组织基因表达异常，从基因水平上对肝组织起到保护作用。

关键词：脓毒症乌司他丁肝组织基因芯片

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乌司他丁对脓毒症大鼠脑组织基因表达的影响

中国危重病急救医学 2011年第8期23卷 490-494页

作者：林建东林名瑞肖雄箭福建医科大学附属第一医院ICU 福州350005

目的采用基因芯片技术检测乌司他丁（UTI）预处理脓毒症大鼠的脑组织基因表达，并分析推论其可能的作用机制。方法45只雄性Wistar大鼠按随机数字表法等分为对照组、脓毒症组和UTI组。采用盲肠结扎穿孔术（CLP）复制脓毒症大鼠模型；对... 详细信息

目的采用基因芯片技术检测乌司他丁（UTI）预处理脓毒症大鼠的脑组织基因表达，并分析推论其可能的作用机制。方法45只雄性Wistar大鼠按随机数字表法等分为对照组、脓毒症组和UTI组。采用盲肠结扎穿孔术（CLP）复制脓毒症大鼠模型；对照组仅开腹、关腹，不行CLP。UTI组于制模前1h肌肉注射（肌注）UTI 100kU／kg；脓毒症组及对照组肌注平衡液5ml／kg。采用RatRef-12大鼠表达谱基因芯片进行检测，用计算机软件筛选并分析比较脓毒症组和UTI组与对照组大鼠脑组织基因表达的变化，并初步分析脓毒症组和UTI组表达基因之间的差异。结果在22523个基因中，与对照组比较，脓毒症组大鼠脑组织差异表达基因共55个，占基因芯片总点数的0．244％；其中表达下调者47个，已知功能基因23个；表达上调者8个，已知功能基因6个。与对照组比较，UTI组大鼠脑组织差异表达基因共82个，占基因芯片总点数的0．364％；其中表达下调者66个，已知功能基因39个；表达上调者16个，已知功能基因8个。与对照组比较，脓毒症组与UTI组有同向表达的基因19个，其中下调18个，包括Adora2a、Avp、Cart、Gng7、Myh7、Oxt、Pde1b、Pdyn、Prkcd、Prkch、Rgs9、Rxrg、Six3、Slc17a6、Slco1a5、Sostdc1、Tac1、Ttr；上调1个，为S100a8。结论脓毒症时存在脑功能障碍相关的基因表达紊乱；UTI预处理可部分纠正脓毒症大鼠过度炎症反应及免疫抑制所致脑组织基因表达异常，从基因水平上对脑组织起到保护作用；同时脓毒症时机体可能存在一定的自我调节作用，一定程度上对脑组织具有保护作用。

关键词：脓毒症乌司他丁脑基因表达谱基因芯片

一例由EXT1基因新的剪接突变c．1164＋1G〉A导致的多发性骨软骨瘤

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中华医学遗传学杂志 2017年第3期34卷 411-415页

作者：郭小艳陈文旭林名瑞施腾飞黄殿华王志红厦门大学附属福州第二医院检验科福州350007 厦门大学附属福州第二医院小儿骨科福州350007 福建中医药大学附属人民医院重症医学科福州350005 厦门大学附属东方医院实验科福州350025

目的对1个多发性骨软骨瘤家系EXT1基因进行突变分析，探索其致病机制。方法PCR-测序分析家系成员外周血DNAEXT1／EXT2基因编码区及邻近序列；计算机及生物信息学分析预测变异;单核苷酸多态性筛查、TA克隆-测序分析先证者血组织的EXT1基... 详细信息

目的对1个多发性骨软骨瘤家系EXT1基因进行突变分析，探索其致病机制。方法PCR-测序分析家系成员外周血DNAEXT1／EXT2基因编码区及邻近序列；计算机及生物信息学分析预测变异;单核苷酸多态性筛查、TA克隆-测序分析先证者血组织的EXT1基因转录本，卡方检验统计分析比较其异常转录本数与正常对照的差异以探讨变异的致病机制。结果基因测序发现先证者EXT1基因第3内含子5′剪接位点存在一新的杂合性点突变（c．1164＋1G〉A），而正常个体未发现该突变；计算机及生物信息学预测突变位于保守区并可导致第3外显子跳跃或异常剪接；TA克隆测序及统计分析表明，与正常对照相比，先证者含第3外显子跳跃的转录本数出现增加（P〈0.05）。结论c．1164＋1G〉A导致较多拷贝的EXT1基因转录本第3外显子跳跃，导致具有肿瘤抑制功能的拷贝数减少，从而引起多发性骨软骨瘤的发生。

关键词：多发性骨软骨瘤 EXT1基因突变分析剪接突变致病机制

犀角地黄汤对脓毒症大鼠肝组织mRNA表达的影响

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中国中西医结合急救杂志 2020年第6期27卷 749-756页

作者：林名瑞文丹陈怀宇姚洁李玮福建中医药大学附属人民医院重症医学科福建福州350004 福建中医药大学附属人民医院急诊科福建福州350004

目的观察犀角地黄汤对脓毒症大鼠肝组织mRNA表达的影响.方法将45只Wistar大鼠按随机数字表法分为假手术组、脓毒症模型组和犀角地黄汤干预组,每组15只.采用盲肠结扎穿孔术(CLP)复制脓毒症大鼠模型;假手术组按同法手术,但不行CLP.各组术... 详细信息

目的观察犀角地黄汤对脓毒症大鼠肝组织mRNA表达的影响.方法将45只Wistar大鼠按随机数字表法分为假手术组、脓毒症模型组和犀角地黄汤干预组,每组15只.采用盲肠结扎穿孔术(CLP)复制脓毒症大鼠模型;假手术组按同法手术,但不行CLP.各组术后肌肉注射平衡液5 mL/kg.犀角地黄汤组于术前2 d开始灌胃犀角地黄汤(组成:水牛角30 g、生地黄24 g、赤芍12 g、牡丹皮9 g),相当于生药3 g,每日2次,术后再连续灌胃2 d.2 d后各组随机选择5只大鼠取肝组织提取总RNA,采用RNA-seq检测肝组织mRNA;光镜下观察各组肝组织病理学改变;应用生物信息学软件分析犀角地黄汤干预后大鼠肝组织mRNA差异表达及所涉及的相关通路.结果光镜下可见:犀角地黄汤干预组大鼠肝汇管区炎性细胞浸润较脓毒症模型组明显减轻.犀角地黄汤干预组大鼠肝组织mRNA上下调数较脓毒症模型组明显增多,脓毒症模型组大鼠肝组织mRNA上调914个、下调822个,犀角地黄汤组肝组织mRNA上调2263个、下调1253个(均P<0.05).犀角地黄汤干预组肝组织辅助性T细胞1(Th1)和Th2细胞分化通路相关mRNA表达下调,而犀角地黄汤干预组恢复正常表达的有9个,表达上调转正常表达4个,正常表达转为表达上调5个,表达下调转表达上调有1个,正常表达转为表达下调有1个,同时上调的有4个.B细胞受体通路相关差异mRNA表达上调恢复正常表达的有14个,正常表达转表达上调4个,正常表达转表达下调有1个,同时上调的3个.Toll样受体(TLR)信号通路相关差异mRNA表达上调恢复正常表达的8个,正常表达转表达上调的7个,表达下调转正常表达的5个,正常表达转表达下调的2个,同时上调的10个,同时下调的3个.结论犀角地黄汤可改善脓毒症大鼠肝组织病理学改变,其机制可能与犀角地黄汤调节Th1和Th2分化、B细胞受体通路及TLR信号通路相关mRNA的表达有关.

关键词：犀角地黄汤脓毒症肝组织 mRNA表达