检索结果-南通市图书馆

鸡胚发育过程中金属硫蛋白水解酶17在视顶盖中的过表达与血管生成的关系

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

解剖学杂志 2014年第4期37卷 437-439,476,F0002页

作者：李小英范文艳林俊堂李晗崔莉马义杰杨慈清新乡医学院生命科学技术学院新乡453003 河南省医用组织再生重点实验室新乡453003

目的：探索金属硫蛋白水解酶17（ADAM17）在胚胎发育过程中过表达与血管形成的关系.方法：鸡胚正常培养到第3天（E3 d）,采用鸡胚带壳开窗培养方法,取出3～4 ml蛋清,密封开口继续培养至E5d,将pCAGGS-ADAM17和pCAGGS-GFP质粒通过活体电... 详细信息

目的：探索金属硫蛋白水解酶17（ADAM17）在胚胎发育过程中过表达与血管形成的关系.方法：鸡胚正常培养到第3天（E3 d）,采用鸡胚带壳开窗培养方法,取出3～4 ml蛋清,密封开口继续培养至E5d,将pCAGGS-ADAM17和pCAGGS-GFP质粒通过活体电转基因导入视顶盖,电转后继续培养到胚胎发育的E12 d,取材、4％多聚甲醛固定、OCT包埋、切片后采用原位杂交检测ADAM17表达水平,免疫荧光组织化学分析ADAM17过表达对微血管形成的影响.结果：鸡胚发育过程,采用活体电转基因实现了ADAM17在视顶盖中的过表达,ADAM17过表达对微血管的形成具有一定的影响.结论：ADAM17过表达促进微血管数量的增加.

关键词：金属硫蛋白水解酶17 视顶盖微血管过表达

C1型尼曼-匹克氏症小鼠免疫系统功能异常初步研究

维普期刊数据库评论

在线全文

维普期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

中华微生物学和免疫学杂志 2018年第10期38卷 739-747页

作者：孙钰椋杨记超何亚南任雅坤乔梁王聪睿刘彦礼林俊堂新乡医学院生命科学技术学院 453003 河南省医用组织再生重点实验室精神与神经研究院新乡医学院生物医学工程学院

目的探讨Ⅳpcl基因突变型（Npcl^-/-）和野生型（Npcl^＋/＋）小鼠免疫系统差异，从免疫学角度完善对C1型尼曼-匹克病（Niemann-Pick disease type C1，NPCI）发病机制的研究，为人NPCI疾病的治疗提供重要支持。方法分别测量不同时间节... 详细信息

目的探讨Ⅳpcl基因突变型（Npcl^-/-）和野生型（Npcl^＋/＋）小鼠免疫系统差异，从免疫学角度完善对C1型尼曼-匹克病（Niemann-Pick disease type C1，NPCI）发病机制的研究，为人NPCI疾病的治疗提供重要支持。方法分别测量不同时间节点Npc1^-/-与Npcl^＋/＋小鼠体重、胸腺及脾脏重量，计算胸腺与脾脏指数；血常规检测小鼠外周血白细胞数量；qPCR检测小鼠外周血白细胞细胞因子表达：流式细胞术检测小鼠外周血与脾脏中CD4^＋、CD8^＋和CDl9^＋淋巴细胞比例；免疫荧光及β-半乳糖苷酶染色检测小鼠脾脏的凋亡与衰老。结果与野生型小鼠相比，Day14±2时Npcl^-/-小鼠脾脏和胸腺重量差异无统计学意义，Day42±2时，Npc1^-/-小鼠脾脏重量显著增加，而胸腺重量却显著降低，至Day63±2时，脾脏重量显著降低；其次，Day42±＋2时Npc1^-/-小鼠中性粒细胞数量的显著增加，淋巴细胞绝对数量虽与野生型小鼠相比差异无统计学意义，但所占百分比显著降低；其次，Day42±2时Npc1^-/-小鼠血液白细胞中细胞因子（IL-1、IL-2、IFN-γ、TNFα、IL-4、GA及GB）的基因表达与野生型小鼠相比具有明显异常；进一步，流式细胞术检测发现，Day42±2时Npc1^-/-小鼠无论在血液还是脾脏中，T（CD4^＋和CD8^＋）淋巴细胞数量较野生型小鼠显著减少，而B（CDl9^＋）淋巴细胞却显著增多；最终，通过对小鼠脾脏组织的凋亡和衰老染色发现，Day63±2时Npc1^-/-小鼠脾脏细胞凋亡和衰老明显。结论Npc1基因突变引起的脂质代谢异常，导致Npc1^-/-小鼠在其生长过程中免疫系统及功能活性与野生型小鼠存在明显异常。该结果可为NPCI患者在临床上的用药与治疗提供借鉴，最大限度地改善患者生活质量并延长患者生存时间。

关键词： c1型尼曼.匹克氏症 Npcl基因免疫功能异常衰老

基于鸡胚电转技术研究脊髓神经干细胞相关基因功能方法的建立

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

解剖学报 2016年第3期47卷 415-420页

作者：于亚楠刘彦礼杨慈清张必超徐振平林俊堂新乡医学院生命科学技术学院河南新乡453003 河南省医用组织再生重点实验室河南新乡453003

目的建立一种基于鸡胚电转技术研究脊髓神经干细胞（NSCs）相关基因功能的方法。方法 RT-PCR检测鸡胚发育不同时期脊髓NSCs表面标志物;在鸡胚胚龄（E）E2.5~E3时,利用活体电转基因技术将p CAGGSGFP质粒转染到鸡胚脊髓,E6时体视荧光显微... 详细信息

目的建立一种基于鸡胚电转技术研究脊髓神经干细胞（NSCs）相关基因功能的方法。方法 RT-PCR检测鸡胚发育不同时期脊髓NSCs表面标志物;在鸡胚胚龄（E）E2.5~E3时,利用活体电转基因技术将p CAGGSGFP质粒转染到鸡胚脊髓,E6时体视荧光显微镜下筛选绿色荧光蛋白（GFP）阳性胚胎,每组至少取材5个;通过脊髓横切及open-book技术观察神经纤维投射情况;普通光学显微镜下剥离出3~5条脊髓,经胰蛋白酶消化、离心后,无血清NSCs培养基重悬获得细胞铺板,于37℃、5%CO_2细胞培养箱内培养,定时观察GFP阳性脊髓NSCs的形态变化。结果 RT-PCR结果表明,鸡胚脊髓中阳性表达NSCs表面标志物;随后的脊髓横切及open-book结果表明,GFP阳性转染侧的神经纤维能穿过底板,投射到脊髓对侧;而脊髓NSCs体外培养结果显示,GFP标记的脊髓细胞具有典型的NSCs形态,继续培养后有明显突起产生。结论本实验成功建立了一种基于鸡胚电转技术研究脊髓神经干细胞相关基因功能的方法。

关键词：脊髓神经干细胞基因功能活体电转鸡胚

诱导性多能干细胞技术在帕金森病研究中的进展

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

医学研究生学报 2016年第7期29卷 770-774页

作者：任佩佩樊晋宇丰慧根林俊堂新乡医学院生命科学技术学院新乡医学硕士研究生453003

近年来,诱导性多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPSCs)技术在帕金森病(parkinson's disease,PD)的基础与应用研究中发挥了重要作用并取得了显著进展。如利用iPSCs技术及定向诱导分化技术从体细胞获得的神经祖/干细胞或者多... 详细信息

近年来,诱导性多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPSCs)技术在帕金森病(parkinson's disease,PD)的基础与应用研究中发挥了重要作用并取得了显著进展。如利用iPSCs技术及定向诱导分化技术从体细胞获得的神经祖/干细胞或者多巴胺能神经元,在PD的细胞治疗研究中取得了很好结果;通过i PSCs技术分别从携带LRRK2、PAKK2、PINK和SNCA突变的PD患者体细胞建立了多巴胺能神经元细胞模型,并在线粒体功能和形态、氧化应激性、SNCA累积深入研究了PD的发生机制。文中从i PSCs用于PD移植治疗和建立PD疾病细胞模型等方面,对最近研究进展进行综述。

关键词：诱导性多能干细胞帕金森病细胞移植细胞模型

淫羊藿苷对经血源性子宫内膜干细胞成心肌样细胞分化的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国细胞生物学学报 2016年第11期38卷 1373-1381页

作者：杨芬刘彦礼闫岩张大林吉祥林俊堂新乡医学院生命科学技术学院河南省医用组织再生重点实验室新乡453003

选择安全高效的诱导剂促进干细胞成心肌样细胞分化,将为干细胞治疗心脏疾病提供更佳的种子细胞,加强干细胞治疗效果。该研究重在明确淫羊藿苷(icariin,ICA)对经血源性子宫内膜干细胞(menstrual blood-derived endometrial stem cells,Me... 详细信息

选择安全高效的诱导剂促进干细胞成心肌样细胞分化,将为干细胞治疗心脏疾病提供更佳的种子细胞,加强干细胞治疗效果。该研究重在明确淫羊藿苷(icariin,ICA)对经血源性子宫内膜干细胞(menstrual blood-derived endometrial stem cells,Men ESC)成心肌样细胞分化的影响。首先,通过MTT法和划痕实验检测ICA对Men ESC增殖和迁移的影响。RT-PCR检测ICA与5氮杂胞苷(5azacytidine,5aza C)诱导前后心肌特异性转录调控因子肌细胞增强因子-2C(myocyte enhancer factor-2C,MEF-2C)、NK2转录因子相关蛋白5(NK2 transcription factor related locus 5,Nkx2.5)、GATA结合蛋白4(GATA binding protein 4,GATA4)以及心肌特异性标志物人类心房钠尿肽(human atrial natriuretic peptide,h ANP)、肌钙蛋白I(cardiac tropomin I,c Tn I)、肌钙蛋白T(cardiac tropomin T,c Tn T)基因的表达水平。免疫荧光检测ICA与5aza C诱导后细胞中c Tn T的蛋白质水平表达。结果表明,ICA对Men ESC的增殖和迁移无显著性影响;进一步发现,ICA与5aza C诱导Men ESC后,均能显著上调MEF-2C、Nkx2.5、GATA4、h ANP、c Tn I及c Tn T基因的表达;而最终的免疫荧光结果也证实,ICA诱导后的Men ESC阳性表达c Tn T。综上所述,ICA可在不影响Men ESC增殖和迁移活性的基础上促进其成心肌样细胞分化,为Men ESC在临床上治疗心脏疾病提供新途径。

关键词：经血源性子宫内膜干细胞淫羊藿苷心肌分化心脏疾病

C1型尼曼-匹克氏症小鼠的肾脏功能及病理变化

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国病理生理杂志 2016年第8期32卷 1435-1439页

作者：刘彦礼乔梁张金珠杨芬闫岩闫欣林俊堂新乡医学院生命科学技术学院河南省医用组织再生重点实验室河南新乡453003

目的:探讨Npc1基因突变小鼠肾脏功能及病理生理的变化,为C1型尼曼-匹克氏症(NPC1)患者临床上药物的使用及肾功能的维持提供理论依据。方法:用PCR法确定小鼠基因型;选取出生后第60天(P60)的野生型NCPC1(Npc1^(+/+))和突变型NCPC1(Npc1^(-... 详细信息

目的:探讨Npc1基因突变小鼠肾脏功能及病理生理的变化,为C1型尼曼-匹克氏症(NPC1)患者临床上药物的使用及肾功能的维持提供理论依据。方法:用PCR法确定小鼠基因型;选取出生后第60天(P60)的野生型NCPC1(Npc1^(+/+))和突变型NCPC1(Npc1^(-/-))小鼠,检测血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)和乳酸脱氢酶(LDH)的活性及尿素(Urea)、尿酸(UA)和肌酐(Cr)的含量来评价Npc1-/-小鼠的肝肾功能变化;进一步常规冷冻切片后通过β-半乳糖苷酶染色及Masson染色来分别评价Npc1^(-/-)小鼠肾脏衰老及纤维化情况。结果:与P60的Npc1^(+/+)小鼠相比,Npc1^(-/-)小鼠的体重和肾脏重量显著降低(P<0.01);肝肾功能明显减退:ALT、AST及LDH活性显著升高(P<0.05),Urea、UA及Cr的含量显著增加(P<0.05);冷冻切片染色结果表明肾脏组织衰老明显(P<0.01),纤维化程度显著增强(P<0.01)。结论:Npc1基因突变导致的脂质异常代谢可加速肾间质纤维化,促使肾脏衰老,最终导致肾功能减退。

关键词： C1型尼曼-匹克氏症肾脏纤维化 Npc1基因

人白血病抑制因子和血管内皮生长因子165双基因真核表达载体的构建与鉴定

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国组织工程研究 2014年第24期18卷 3870-3877页

作者：栗炳南李卫东林俊堂丰慧根原志庆新乡医学院生命科学技术学院河南省新乡市453003

背景:人白血病抑制因子(LIF)和血管内皮生长因子165(VEGF165)对脊髓损伤后神经元存活有重要作用。病毒载体临床应用存在安全隐患,利用真核表达载体表达蛋白为解决安全性问题提供了一种方法。目标:构建双基因共表达载体pIRES2-LIF-VEGF16... 详细信息

背景:人白血病抑制因子(LIF)和血管内皮生长因子165(VEGF165)对脊髓损伤后神经元存活有重要作用。病毒载体临床应用存在安全隐患,利用真核表达载体表达蛋白为解决安全性问题提供了一种方法。目标:构建双基因共表达载体pIRES2-LIF-VEGF165并对其进行鉴定。方法:是采用直接PCR的方法从人外周血单个核细胞的基因组DNA中获取人白血病抑制因子基因,然后将人白血病抑制因子的cDNA片段插入到pIRES2-EGFP多克隆位点构建成为pIRES2-LIF-EGFP。人血管内皮生长因子165 cDNA片段是通过双PCR的方法从pIRES2-VEGF165-EGFP质粒中获取,接着将血管内皮生长因子165 cDNA片段以替换EGFP的方式插入pIRES2-LIF-EGFP中,最后构建成为含有IRES(即内部核糖体进入位点)的pIRES2-LIF-VEGF165双基因共表达载体。通过双酶切和DNA测序方法对其鉴定,将重组的双基因共表达载体感染HEK293细胞,利用RT-PCR与Western-blot方法检测双基因的表达。结果与结论:DNA测序显示,提取的人白血病抑制因子和血管内皮生长因子165均与基因库报道序列一致,片段大小分别为609 bp和576 bp。构建的pIRES2-LIF-VEGF165双基因共表达载体经EcoRI/BamHI切出LIF条带,经BamHI/NotI双酶切后切出IRES-VEGF165片段,经EcoRI/NotI双酶切后切出LIF-IRES-VEGF165片段。RT-PCR与Western-blot方法检测显示,此载体转染后,HEK293细胞均能表达人白血病抑制因子和血管内皮生长因子165 mRNA和蛋白。结果证实,实验成功构建了人白血病抑制因子和血管内皮生长因子165双基因真核表达载体。

关键词：组织构建组织工程白血病抑制因子血管内皮生长因子165 真核双表达载体内部核糖体进入位点转染

中美高校生物工程专业本科人才培养方案比较分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

教师 2022年第34期 105-107页

作者：管丽红李小英井长勤林俊堂杨慈清新乡医学院生命科学技术学院河南新乡453003

生物工程专业是将生物学理论与方法和工程学手段相结合,培养应用型专业人才的新兴专业。面对生物工程产业的迅速发展、专业人才需求激增、生物工程专业本科就业专业对口率不高的现状,优化人才培养方案、凸显专业特色、提高人才竞争力势... 详细信息

生物工程专业是将生物学理论与方法和工程学手段相结合,培养应用型专业人才的新兴专业。面对生物工程产业的迅速发展、专业人才需求激增、生物工程专业本科就业专业对口率不高的现状,优化人才培养方案、凸显专业特色、提高人才竞争力势在必行。因此,文章比较了中美两国6所高校生物工程专业本科人才培养方案,阐述了中美高校在培养目标、课程设置和培养特色方面的特点和差异,提出了新乡医学院生物工程专业人才培养方案优化建议,以期为我国生物工程专业本科人才培养方案优化提供理论依据和参考。

关键词：本科生生物工程专业培养目标课程设置培养特色

小鼠胚胎发育过程中N-Cadherin异常表达对大脑皮层神经元迁移的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国免疫学杂志 2013年第8期29卷 866-869,871页

作者：付苏雷杨慈清贾阳阳李晗郭志坤林俊堂新乡医学院生命科学技术学院新乡453003 河南省医用组织再生重点实验室新乡453003

目的:探究N-Cadherin异常表达对小鼠大脑皮层发育过程中神经元迁移的影响。方法:通过小鼠活体子宫电转基因技术和RNA干扰技术相结合,在小鼠胚胎大脑皮层发育过程中实现对N-Cadherin的超表达和抑制表达,荧光免疫组化检测超表达结果,用GF... 详细信息

目的:探究N-Cadherin异常表达对小鼠大脑皮层发育过程中神经元迁移的影响。方法:通过小鼠活体子宫电转基因技术和RNA干扰技术相结合,在小鼠胚胎大脑皮层发育过程中实现对N-Cadherin的超表达和抑制表达,荧光免疫组化检测超表达结果,用GFP示踪N-Cadherin超表达和抑制表达后神经元在大脑皮层发育过程中的迁移特征。结果:与对照组相比,N-Cadherin超表达后有更多的GFP阳性神经元迁移到皮层的Ⅱ-Ⅳ层;N-Cadherin被抑制后大量GFP阳性神经元停滞在SVZ区。结论:N-Cadherin在小鼠大脑皮层发育过程中对神经元的迁移具有影响作用。

关键词：子宫内电转神经钙黏蛋白神经元迁移 RNA干扰