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鳖甲煎丸调控EGFR/MAPK/ERK信号通路对MHCC-97H肝癌细胞的影响及作用机制

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北京中医药大学学报 2024年

作者：伍梦思刘华谭年花李杳瑶丁琳夏宇陈扬陈斌湖南中医药大学中西医结合学院解放军总医院第八医学中心湖南中医药大学第一中医临床学院

目的探讨鳖甲煎丸通过miR-885-5p对表皮生长因子受体（EGFR）/丝裂原激活蛋白激酶（MAPK）/细胞外信号调节激酶（ERK）信号通路的靶向调控对MHCC-97H肝癌细胞的影响及作用机制。方法SPF级SD大鼠10只随意分为空白组和鳖甲煎丸（1.1g/kg... 详细信息

目的探讨鳖甲煎丸通过miR-885-5p对表皮生长因子受体（EGFR）/丝裂原激活蛋白激酶（MAPK）/细胞外信号调节激酶（ERK）信号通路的靶向调控对MHCC-97H肝癌细胞的影响及作用机制。方法SPF级SD大鼠10只随意分为空白组和鳖甲煎丸（1.1g/kg）组，制备空白及鳖甲煎丸含药血清。取对数生长期的MHCC-97H细胞，分为模型组、不同浓度（5%、10%、15%、20%）空白血清组梯度和鳖甲煎丸含药血清梯度组，以及不含细胞的空白组，CCK-8法检测细胞增殖，筛选含药血清最佳干预时间及浓度。采用双荧光素酶报告实验验证miR-885-5p与EGFR的靶向关系，将MHCC-97H细胞分为空白对照组（不做任何处理）、鳖甲煎丸含药血清组（20%鳖甲煎丸含药血清）、miR-885-5pmimics组（转染miR-885-5pmimics）、miR-NC组（转染miR-885-5p阴性对照物)、鳖甲煎丸含药血清＋miR-885-5pmimics组（20%鳖甲煎丸含药血清和转染hsa-miR-885-5pmimics）。各组细胞均培养72h。细胞划痕实验及Transwell侵袭实验检测细胞迁移和侵袭能力，AnnexinV-FITC/PI双染色法检测细胞凋亡水平，实时荧光定量聚合酶链反应（RT-qPCR）检测miR-885-5p、EGFR、MAPK的激酶（MEK）、ERK1/2mRNA表达水平；蛋白质印迹法(Westernblotting）检测EGFR、磷酸化的EGFR(p-EGFR)、MEK、磷酸化的MERK（p-MEK）、ERK1/2、磷酸化的ERK1/2（p-ERK1/2）、基质金属蛋白酶1（MMP1）、细胞周期蛋白D1（CyclinD1）蛋白表达；通过皮下注射法建立裸鼠MHCC-97H肝癌细胞皮下瘤模型，观察不同剂量鳖甲煎丸（0.55、1.1、2.2g/kg）对裸鼠肝癌皮下瘤的抑制效果。结果筛选出鳖甲煎丸含药血清最佳干预浓度及时间为20%、72h，同时双荧光素酶报告实验显示miR-885-5p可以直接靶向结合EGFR；各项实验报告显示空白对照组和miR-NC组比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）。与空白对照组比较，鳖甲煎丸含药血清组、miR-885-5pmimics组和鳖甲煎丸含药血清+miR-885-5pmimics组MHCC-97H肝癌细胞增殖率明显降低（P＜0.01），迁移和侵袭能力明显下降（P＜0.05或P＜0.01），同时与细胞增殖、侵袭密切相关的蛋白CyclinD1和MMP1的蛋白表达明显下调（P＜0.05或P＜0.01），早期、晚期凋亡率和总凋亡率均明显升高，促进细胞凋亡（P＜0.01）；鳖甲煎丸含药血清组、miR-885-5pmimics组和鳖甲煎丸含药血清+miR-885-5pmimics组明显上调miR-885-5pmRNA（P＜0.01），抑制EGFR、MEK、ERK1/2mRNA表达（P＜0.05或P＜0.01），抑制EGFR、MEK、ERK1/2磷酸化激活（P＜0.01），其中鳖甲煎丸含药血清＋miR-885-5pmimics组效果最好（P＜0.05或P＜0.01）。裸鼠肝癌皮下瘤模型验证了鳖甲煎丸可呈剂量依赖性抑制裸鼠肝癌皮下瘤生长。结论鳖甲煎丸可促进MHCC-97H肝癌细胞凋亡，抑制其增殖、侵袭和迁移，其作用机制可能和通过miR-885-5p靶向调控EGFR/MAPK/ERK信号通路有关。

关键词：鳖甲煎丸 miR-885-5p 表皮生长因子受体丝裂原激活蛋白激酶 MHCC-97H肝癌细胞裸鼠皮下瘤

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太阳熄灭之后

科学启蒙 2024年第3期 90-93页

作者：孤杳不详

启蒙“光在真空中的传播速度约为3×10^(8)米/秒。”小男孩认真数着科学画册上3后面有多少个0,喃喃道,“孙悟空一个筋斗才十万八千里,光可比他快多了。”他翻了几页后,又看到了杂志下方拓展知识里的小字写着:地球和太阳的距离约为1.5亿... 详细信息

启蒙“光在真空中的传播速度约为3×10^(8)米/秒。”小男孩认真数着科学画册上3后面有多少个0,喃喃道,“孙悟空一个筋斗才十万八千里,光可比他快多了。”他翻了几页后,又看到了杂志下方拓展知识里的小字写着:地球和太阳的距离约为1.5亿千米“这样,太阳光从太阳走到地球就要用上500秒。”

关键词：拓展知识传播速度孙悟空小男孩太阳米/秒

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睡眠糖果

科学启蒙 2024年第2期 38-41页

作者：孤杳不详

反常“喂,橙子!”程纪好的后桌陶齐喊着他的外号戳了戳他的肩膀,“你今天居然积极举手回答问题,不像你啊,哪根筋搭错了?”“哪有,正常发挥好不好,人学考试我可是年级第三名。”程纪好露出得意洋洋的样子。

关键词：橙子睡眠糖果

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坐在人间

诗刊 2024年第4期 7-10页

作者：震杳不详

探究人性化护理运用在小儿肺炎护理中的临床价值分析

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中国科技期刊数据库医药 2024年第5期 130-134页

作者：薛金杳苏州大学附属儿童医院江苏苏州215000

探讨人性化护理运用在小儿肺炎护理中的临床价值。方法选择本院2023年6月至2023年12月的小儿肺炎患儿120例,随机均分为观察组(60例)、对照组(60例),通过评估患者的满意度、并发症发生率、身体状态、睡眠质等指标,进行对比分析。结果 ... 详细信息

探讨人性化护理运用在小儿肺炎护理中的临床价值。方法选择本院2023年6月至2023年12月的小儿肺炎患儿120例,随机均分为观察组(60例)、对照组(60例),通过评估患者的满意度、并发症发生率、身体状态、睡眠质等指标,进行对比分析。结果观察组患者满意度更高(P<0.05);并发症发生率较低(P<0.05);身体状态得到明显改善(P<0.05);睡眠质量明显提升(P<0.05)。结论通过提高患者满意度、降低并发症发生率、改善身体状态以及提升睡眠质量,人性化护理为小儿肺炎患者的康复创造了更为有利的条件,为未来的临床实践提供了有益的经验。

关键词：小儿肺炎人性化护理临床应用

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今冬暖意浓志愿惠万家 001

今冬暖意浓志愿惠万家

满城尽染“志愿红” 绘就澴川好风景 002

孝感日报

作者：王悦韩杳

1月30日中午，孝感城区大东门商业城的爱心食堂里欢声笑语，一群老人在志愿者的照顾下吃着免费午餐。粉蒸肉、牛骨萝卜汤、清炒小白菜、大米饭，热乎软烂，很适合老人口味。自去年12月21日起，孝南区积善之家依托“爱心食堂”每周为... 详细信息

1月30日中午，孝感城区大东门商业城的爱心食堂里欢声笑语，一群老人在志愿者的照顾下吃着免费午餐。粉蒸肉、牛骨萝卜汤、清炒小白菜、大米饭，热乎软烂，很适合老人口味。自去年12月21日起，孝南区积善之家依托“爱心食堂”每周为社区老人送出200多份午餐，一份份热腾腾的?

关键词：志愿服务

来源： cnki报纸评论

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满城尽染“志愿红” 绘就澴川好风景

基于生物学核心素养的生物实验教学实践探究——以植物细胞失水和吸水实验为例

孝感日报

作者：王悦高群韩杳

春回大地，万象更新。行走在澴川大地上，一片片流动的志愿红，如点点火光汇聚，照亮街头巷尾。无偿献血、爱心义诊、公益课堂、爱心助餐，防火、防诈、禁毒知识宣传……一次次察民情、解民意的惠民服务，一场场有温度、有深度的实践... 详细信息

春回大地，万象更新。行走在澴川大地上，一片片流动的志愿红，如点点火光汇聚，照亮街头巷尾。无偿献血、爱心义诊、公益课堂、爱心助餐，防火、防诈、禁毒知识宣传……一次次察民情、解民意的惠民服务，一场场有温度、有深度的实践活动，让志愿服务的“种子”随文明新风融?

关键词：志愿服务组织学雷锋

来源： cnki报纸评论

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安徽教育科研 2024年第3期 65-67页

作者：张群利杨杳来合肥市第四中学合肥市第一中学安徽合肥230000

高中生物课程的核心组成之一是生物实验教学。实验教学能引导学生认识生物学大概念,提高学生生物核心素养,是实现知识向能力转化的关键,是培养学生科学思维能力和科学探究能力的重要途径。本文以植物细胞失水和吸水实验为例,探究生物学... 详细信息

高中生物课程的核心组成之一是生物实验教学。实验教学能引导学生认识生物学大概念,提高学生生物核心素养,是实现知识向能力转化的关键,是培养学生科学思维能力和科学探究能力的重要途径。本文以植物细胞失水和吸水实验为例,探究生物学科核心素养理念指引下实验教学新模式,培养学生实验探究能力、动手能力,提升学科素养,增强学科魅力,落实立德树人根本任务。

关键词：实验教学探究能力主体性立德树人生命教育

鳖甲煎丸调控EGFR/MAPK/ERK通路对MHCC-97H肝癌细胞的影响

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北京中医药大学学报 2024年第3期47卷 394-406页

作者：伍梦思刘华谭年花李杳瑶丁琳夏宇陈扬陈斌湖南中医药大学第一中医临床学院长沙410007 湖南中医药大学中西医结合学院解放军总医院第八医学中心

目的探讨鳖甲煎丸通过miR-885-5p对表皮生长因子受体(EGFR)/丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)/细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路的靶向调控对MHCC-97H肝癌细胞的影响及作用机制。方法 SPF级SD大鼠10只随意分为空白组和鳖甲煎丸(1.1 g/kg)组,... 详细信息

目的探讨鳖甲煎丸通过miR-885-5p对表皮生长因子受体(EGFR)/丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)/细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路的靶向调控对MHCC-97H肝癌细胞的影响及作用机制。方法 SPF级SD大鼠10只随意分为空白组和鳖甲煎丸(1.1 g/kg)组,制备空白及鳖甲煎丸含药血清。取对数生长期的MHCC-97H细胞,分为模型组、不同质量分数(5%、10%、15%、20%)空白血清梯度组和鳖甲煎丸含药血清梯度组,以及不含细胞的空白组。CCK-8法检测细胞增殖,筛选含药血清最佳干预时间及质量分数。将MHCC-97H细胞分为空白对照组(不做任何处理)、鳖甲煎丸含药血清组(20%鳖甲煎丸含药血清)、miR-885-5p mimics组(转染miR-885-5p mimics)、miR-NC组(转染miR-885-5p阴性对照物)、鳖甲煎丸含药血清+miR-885-5p mimics组(20%鳖甲煎丸含药血清和转染miR-885-5p mimics),各组细胞均培养72 h。采用双荧光素酶报告实验验证miR-885-5p与EGFR的靶向关系。CCK-8法检测细胞增殖,细胞划痕实验及Transwell侵袭实验检测细胞迁移和侵袭能力,Annexin V-APC/PI双染色法检测细胞凋亡水平,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测miR-885-5p、EGFR、MAPK的激酶(MEK)、ERK1、ERK2 mRNA表达水平;蛋白质印迹法检测EGFR、磷酸化的EGFR(p-EGFR)、MEK、磷酸化的MEK(p-MEK)、ERK1、ERK2、磷酸化的ERK1(p-ERK1)、磷酸化的ERK2(p-ERK2)、基质金属蛋白酶1(MMP1)、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)蛋白表达;通过皮下注射法建立裸鼠MHCC-97H肝癌细胞皮下瘤模型,观察不同剂量鳖甲煎丸(0.55、1.1、2.2 g/kg)对裸鼠肝癌皮下瘤的抑制效果。结果筛选出鳖甲煎丸含药血清最佳干预质量分数及时间为20%、72 h,同时,双荧光素酶报告实验显示,miR-885-5p可以直接靶向结合EGFR;各项实验报告显示空白对照组和miR-NC组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。与空白对照组比较,鳖甲煎丸含药血清组、miR-885-5p mimics组和鳖甲煎丸含药血清+miR-885-5p mimics组MHCC-97H肝癌细胞增殖率明显降低(P<0.01),迁移和侵袭能力明显下降(P<0.05,P<0.01),同时,与细胞增殖、侵袭密切相关的蛋白CyclinD1和MMP1的蛋白表达明显下调(P<0.05,P<0.01),晚期凋亡率和总凋亡率均明显升高,促进细胞凋亡(P<0.01);鳖甲煎丸含药血清组、miR-885-5p mimics组和鳖甲煎丸含药血清+miR-885-5p mimics组明显上调miR-885-5p mRNA(P<0.01),抑制EGFR、MEK、ERK1、ERK2 mRNA表达(P<0.05,P<0.01),抑制EGFR、MEK、ERK1、ERK2磷酸化激活(P<0.01),其中,鳖甲煎丸含药血清+miR-885-5p mimics组效果最好(P<0.05,P<0.01)。裸鼠肝癌皮下瘤模型验证了鳖甲煎丸可抑制裸鼠肝癌皮下瘤生长。结论鳖甲煎丸可促进MHCC-97H肝癌细胞凋亡,抑制其增殖、侵袭和迁移,其作用机制可能和通过miR-885-5p靶向调控EGFR/MAPK/ERK信号通路有关。

关键词：鳖甲煎丸 miR-885-5p 表皮生长因子受体丝裂原激活蛋白激酶 MHCC-97H肝癌细胞裸鼠皮下瘤