检索结果-南通市图书馆

作者：杨馥如中国农业科学院

学位级别：硕士

猪流感（swine influenza, SI）是由隶属于正黏病毒科的猪流感病毒（swine influenza virus, SIV）引起的猪急性高度传染性疾病。主要临床症状表现为体温升高、食欲不振、呼吸困难、咳嗽、流产以及延迟出栏等，是目前危害全世界养猪业... 详细信息

猪流感（swine influenza, SI）是由隶属于正黏病毒科的猪流感病毒（swine influenza virus, SIV）引起的猪急性高度传染性疾病。主要临床症状表现为体温升高、食欲不振、呼吸困难、咳嗽、流产以及延迟出栏等，是目前危害全世界养猪业的重要疫病之一。猪流感曾多次在世界上引起大的爆发和流行，其中最严重的一次是1918年西班牙大流感，全球近2100万人感染死亡。2009年墨西哥和北美爆发了甲型H1N1流感，其传染性很强，传播范围很广，再次突显了流感病毒对人类社会造成的巨大危害。目前预防流感发生与传播的最有效方式是疫苗接种，但是由于流感病毒亚型多，变异快，所以要定期更改疫苗株，这不仅消耗大量的人力和物力，并且还存在新疫苗研制滞后于病毒变异这一重大问题。因此，研制一种能够应对流感病毒快速变异，并具有广泛保护作用的“通用型”疫苗具有重要的应用价值。 DNA疫苗因其能够同时诱导机体产生特异性的体液免疫应答和细胞免疫应答而受到了广泛的关注，基于HA基因的流感DNA疫苗也得到了一定的研究，但由于DNA疫苗存在转染效率不高，抗原表达量低的缺点，制约了其在流感通用疫苗研究中的发展。本研究首先探讨了密码子的优化对流感病毒HA基因DNA疫苗在小鼠体内免疫原性及保护效力的影响，进而研究了基于HA基因共有序列的H1亚型流感通用疫苗对异源流感病毒的保护效力，同时也对本实验室之前设计的M2e分支肽疫苗对异源流感病毒的保护效力进行了研究。 1、密码子优化的流感病毒HA基因DNA疫苗在小鼠体内免疫保护效力研究。由于DNA疫苗存在转染效率不高，抗原表达量低的缺点，本实验通过密码子优化的方法提高病毒HA基因的免疫原性。将H1亚型猪流感病毒A/Swine/Guangdong/1/01（H1N1）和rPan09（HA和NA来自A/California/04/09,其余六个片段来自PR8的重组病毒）的HA基因密码子进行优化，连入pCAGGS真核表达载体中，获得pCA-opti-G11和pCA-opti-r09重组质粒。同时将野生型的A/Swine/Guangdong/1/01（H1N1）和rPan09的HA基因与载体pCAGGS相连接，得到pCA-G11和pCA-r09重组质粒，在小鼠体内验证免疫效果和攻毒保护效果。实验表明：HA基因密码子的优化不仅可显著提高DNA疫苗诱导的保护性体液免疫应答和细胞免疫应答的水平，还可有效抑制病毒在小鼠肺脏的复制同时减轻肺脏的病理学变化，能够提供较好的免疫保护。 2、H1亚型流感病毒通用疫苗的免疫保护效力研究。HA是流感病毒最主要的表面抗原，它能够诱导机体产生相应的中和抗体，产生免疫保护作用。本研究从经典H1亚型流感病毒和甲型流感病毒的主要靶抗原HA基因入手，分析获得HA基因的共有序列，进行密码子优化后（optimized consensus, opti-CS）与实验另外两株病毒（A/Swine/Guangdong/1/01（H1N1）和rPan09）优化后的HA基因连入pCAGGS真核表达载体中，构成三种重组质粒，命名为pCA-opti-CS，pCA-opti-G11和pCA-opti-r09，在小鼠体内验证免疫效果以及对异源病毒的保护效果。结果显示：HA基因共有序列密码子优化的DNA疫苗能够诱导小鼠产生较高的抗体滴度和细胞免疫应答水平，并可有效抑制流感病毒A/Swine/Guangdong/1/01（H1N1）和rPan09HA在肺脏中的复制，减轻肺脏病理变化，具有较好的交叉保护效力，能够保护小鼠抵抗异源流感病毒的攻击。 3、流感病毒M2蛋白N端的24个氨基酸M2e在流感病毒中十分保守，是诱导交叉保护性免疫的理想靶抗原。本研究将4个拷贝的M2e通过赖氨酸与通用Th细胞表位偶联获得M2e分支肽（M2e-MAP），添加弗氏佐剂制备了M2e分支肽疫苗（M2e-MAP+Freund），通过建立的攻毒保护试验的小鼠模型对M2e分支肽疫苗进行免疫保护效果评价。结果表明：M2e分支肽疫苗可刺激小鼠产生高滴度的M2e特异性IgG抗体，并对异源病毒H9N2的攻击提供有效的交叉保护。上述结果证实：通过密码子的优化可以显著提升基于流感HA基因DNA疫苗的免疫原性及免疫保护效果，表达H1亚型HA基因共有序列的DNA疫苗能够对异源流感病毒提供有效的交叉保护，作为通用疫苗具有广阔的应用前景。同时M2e分支肽也可作为猪流感的候选疫苗。本实验为流感通用疫苗的研制探索了新的思路，提供了理论基础。

关键词： HA基因密码子优化共有序列 M2e 通用疫苗

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

餐桌上的意大利

引用

作者： (意)杨馥如

来源：南通市图书馆图书评论

学校读者我要写书评

暂无评论

艺术鉴赏方法应用于电影赏析教学之研究

引用

洛阳师范学院学报 2012年第9期31卷 31-35页

作者：杨馥如开南大学资讯传播学系

电影欣赏深受许多学生喜爱也是许多学校会开设的课程之一。但一般电影赏析教学内容偏重于以符号学方式赏析。研究者将艺术鉴赏方法应用于电影赏析教学,希望提供教师另一教学之参考。该研究以文献探讨、行动研究(包含观察、访谈、文件分... 详细信息

电影欣赏深受许多学生喜爱也是许多学校会开设的课程之一。但一般电影赏析教学内容偏重于以符号学方式赏析。研究者将艺术鉴赏方法应用于电影赏析教学,希望提供教师另一教学之参考。该研究以文献探讨、行动研究(包含观察、访谈、文件分析等方式)来搜集研究资料。结果显示艺术鉴赏四阶段(描述、分析、解释、判断)方法,能助学生欣赏与分析电影。在描述阶段,学生能描述剧情大意、叙事结构、角色与环境背景;分析阶段,学生能分析时空、画面色彩、光影、镜头、角度、剪接、音效、音乐等;在解释阶段,学生能解释影片内容想表达的意义及其隐喻;在判断阶段,学生能提出个人感受、见解或评价。教学过程中透过对电影内容的提问与讨论,有助于学生对价值观的澄清,对事物持较多元及正面的看法。

关键词：艺术鉴赏鉴赏教学电影赏析

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

CRISPR系统促进脂肪干细胞成骨分化与抑制成脂分化的研究

引用

中国畜牧兽医 2019年第10期46卷 2867-2875页

作者：杨馥如王学智余四九甘肃农业大学动物医学院兰州730050 中国农业科学院上海兽医研究所上海200241 中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所兰州730050

本研究旨在优化组织培养法分离小鼠脂肪间充质干细胞(adipose-derived stem cells,ASCs),为研究成骨分化和成脂分化在间充质干细胞分化过程中的相互影响奠定基础。通过细胞形态学观察、细胞生长曲线和流式仪器检测所分离获得的间充质干... 详细信息

本研究旨在优化组织培养法分离小鼠脂肪间充质干细胞(adipose-derived stem cells,ASCs),为研究成骨分化和成脂分化在间充质干细胞分化过程中的相互影响奠定基础。通过细胞形态学观察、细胞生长曲线和流式仪器检测所分离获得的间充质干细胞的特性,利用CRISPR-dCas9系统在快速促进间充质干细胞成骨分化的前提下观察其对成脂分化的影响,并通过生化染色、实时荧光定量PCR和免疫细胞学等手段进行分析。结果显示,接种3~5 d后可见细胞从组织块周围爬出,光镜下可见细胞形态多为成纤维细胞样的梭形细胞,且形态单一均匀,具有较高的爬出率,可以大大提高脂肪间充质干细胞的分离效率;通过CRISPR-dCas9系统激活Runx 2和Osterix基因后可以促进间充质干细胞的成骨分化,实时荧光定量PCR及油红O染色结果显示,CRISPR-dCas9系统可以同时抑制间充质干细胞的成脂分化;通过CRISPR-dCas9-KRAB系统同时抑制成骨相关基因Runx 2和Osterix后可以促进成脂分化。本研究利用组织贴壁法成功获得了高纯度的脂肪间充质干细胞,具有间充质干细胞的特性和分化能力;利用CRISPR系统可以同时过表达Runx 2和Osterix两个基因,可以在进成骨分化的同时抑制成脂分化,表明成脂分化和成骨分化的相关性,为基因编辑在间充质干细胞诱导分化和临床应用方面提供了新的思路和方法。

关键词：脂肪间充质干细胞(ASCs) CRISPR系统成骨诱导分化成脂诱导分化

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

利用CRISPR-dCas9系统促进脂肪干细胞的成骨诱导分化

引用

中国兽医科学 2019年第3期49卷 372-377页

作者：杨馥如王学智余四九甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730050 中国农业科学院上海兽医研究所上海200241 中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所甘肃兰州730050

为了建立一种快速促进脂肪间充质干细胞成骨诱导分化的方法,本研究利用CRISPR-dCas9系统快速激活成骨前体基因的表达,通过对细胞内前体基因转录的检测和诱导分化后茜素红染色来确定成骨诱导分化的效率。结果可见,通过CRISPR-dCas9系统... 详细信息

为了建立一种快速促进脂肪间充质干细胞成骨诱导分化的方法,本研究利用CRISPR-dCas9系统快速激活成骨前体基因的表达,通过对细胞内前体基因转录的检测和诱导分化后茜素红染色来确定成骨诱导分化的效率。结果可见,通过CRISPR-dCas9系统可以快速地启动RUNX2和OSX基因的转录;经成骨诱导分化后茜素红染色显示,基因编辑过的细胞成骨诱导更快。本研究结果表明,通过CRISPR-On系统可以有效地促进成骨前体细胞相关基因RUNX2和OSX的表达,从而使得骨前体细胞相关基因可以被快速地内源性激活,使得脂肪间充质干细胞快速进入成骨诱导分化状态,促进成骨分化的潜能。

关键词：脂肪干细胞成骨诱导分化 CRISPR-On

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

我国发现超级稻增产新基因 001

引用

农民日报

作者：杨馥如吴佩

本报讯（杨馥如记者吴佩）日前，记者从中国农科院中国水稻研究所获悉，该所超级稻种质创新团队与中国科学院遗传与发育生物研究所等单位合作，从浙江地方大粒品种“宝大粒”中成功分离并克隆了一个能够显著提高超级稻产量的重要基因GS...

本报讯（杨馥如记者吴佩）日前，记者从中国农科院中国水稻研究所获悉，该所超级稻种质创新团队与中国科学院遗传与发育生物研究所等单位合作，从浙江地方大粒品种“宝大粒”中成功分离并克隆了一个能够显著提高超级稻产量的重要基因GS2。相关研究成果在线发表在最新一期的国际

关键词：

来源： cnki报纸评论

在线全文

cnki报纸

学校读者我要写书评

暂无评论

给生命音乐

引用

2020年

作者： (英)费欧娜·梅铎(Fion a Maddocks)

来源：南通市图书馆图书评论

学校读者我要写书评

暂无评论

H1亚型流感病毒通用疫苗的构建及其对小鼠免疫保护效力研究

引用

畜牧兽医学报 2013年第2期44卷 240-249页

作者：杨馥如于海王斌黄梦马继红温峰周艳君童光志中国农业科学院上海兽医研究所上海200241

本研究旨在为研制一种安全、有效并具有广泛保护作用的流感病毒通用疫苗进行初步的探索。从Gen-Bank上获得所有H1亚型经典猪源流感病毒和甲型流感病毒的HA基因序列,通过系统进化分析获得其共有序列,并对共有序列进行密码子优化(Optimize... 详细信息

本研究旨在为研制一种安全、有效并具有广泛保护作用的流感病毒通用疫苗进行初步的探索。从Gen-Bank上获得所有H1亚型经典猪源流感病毒和甲型流感病毒的HA基因序列,通过系统进化分析获得其共有序列,并对共有序列进行密码子优化(Optimized consensus,opti-CS),同时将H1亚型的A/Swine/Guangdong/1/01(H1N1)和重组甲型流感病毒rPan09(H1N1,其HA和NA来自A/Swine/California/04/09,其余6个片段来自PR8的重组病毒)的HA基因分别进行密码子优化(opti-G11,opti-r09),并将这3种片段与真核表达载体pCAGGS连接获得重组质粒pCA-opti-CS、pCA-opti-G11和pCA-opti-r09。将重组质粒瞬时转染293T细胞,检测HA基因在哺乳动物细胞中的表达情况。免疫6～8周雌性BALB/c小鼠,免疫3次,每次间隔3周,同时设立空载体pCAGGS对照。三免2周后从每个质粒免疫组中选取一半小鼠每只以50μL 103.87 EID50的剂量接种A/Swine/Guangdong/1/01(H1N1)病毒,另一半小鼠每只以50μL 107.45 EID50的剂量接种rPan09病毒。采集血清,对HA抗体水平、HI滴度、细胞因子产生情况、肺组织病毒含量进行检测,并对肺组织病理学变化进行观察。结果显示:重组质粒中HA基因均能够在哺乳动物细胞中有效的表达。pCA-opti-CS免疫后能够诱导小鼠产生较高的HA抗体水平,较高的HI滴度,并且能够诱导机体产生较高水平的IL-4和IFN-γ。肺组织病毒含量测定以及组织病理学观察结果显示:HA共有序列密码子优化的DNA疫苗pCA-opti-CS免疫后能够有效限制病毒A/Swine/Guangdong/1/01(H1N1)和rPan09HA在肺脏中的复制,减轻肺脏病理变化。结果提示:HA共有序列密码子优化的DNA疫苗pCA-opti-CS能够诱导小鼠产生较高水平的体液免疫和细胞免疫应答,并具有较好的交叉保护效力,能够保护小鼠抵抗异源流感病毒的攻击。本研究为流感通用疫苗的研究提供了有益的参考。

关键词： H1亚型流感病毒通用型疫苗共有序列密码子优化

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

H1亚型猪流感病毒HA基因密码子优化的DNA疫苗免疫保护效力研究

引用

中国动物传染病学报 2011年第4期19卷 13-19页

作者：杨馥如于海王斌黄梦马继红周艳君童光志中国农业科学院上海兽医研究所上海200241

DNA疫苗的免疫效果与抗原基因的表达量及表达抗原的免疫原性有直接关系。为了提高猪流感病毒（Swine influenza virus，SIV）HA基因DNA疫苗的表达量，增强其免疫效果，本研究通过人工合成的方法将H1亚型猪流感病毒A／Swine／Guangdong／... 详细信息

DNA疫苗的免疫效果与抗原基因的表达量及表达抗原的免疫原性有直接关系。为了提高猪流感病毒（Swine influenza virus，SIV）HA基因DNA疫苗的表达量，增强其免疫效果，本研究通过人工合成的方法将H1亚型猪流感病毒A／Swine／Guangdong／1／01（H1N1）的HA基因密码子优化为猪体内偏嗜性密码子optiHA，同野生型A／Swine／Guangdong／1／01（H1N1）的HA基因分别与真核表达载体PCAGGS连接构成重组质粒PCAGGS—optiHA和PCAGGS—HA，然后分别转染293T细胞，48h后采用间接免疫荧光的方法检测Ⅲ基因的瞬时表达蛋白情况。将质粒PCAGGS—HA、PCAGGS—optiHA以100μg／只的剂量，采用后腿肌肉多点注射的方式，免疫6-8周龄雌性BALB／c小鼠，同时设立空载体PCAGGS对照。共免疫3次，每次间隔2周，三免2周后对每组以10^3.87 EID50的A／Swine／Guangdong／1／01（H1N1）进行攻毒。采用ELISA、血凝抑制试验、细胞因子检测和肺组织病毒含量测定等实验评价这两种DNA疫苗的免疫效果。结果表明，HA基因密码子优化的DNA疫苗可显著提高体液免疫和细胞免疫的应答水平，攻毒后免疫组PCAGGS—optiHA的保护效力明显高于免疫组PCAGGS—HA。这一结果为进一步研究和设计有效的SIVDNA疫苗奠定了基础。

关键词：猪流感病毒 H1亚型 HA基因密码子优化 DNA疫苗

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

密码子优化的甲型H1N1流感病毒HA基因DNA疫苗在小鼠体内免疫保护效力研究

引用

中国动物传染病学报 2012年第2期20卷 36-41页

作者：杨馥如于海王斌黄梦马继红温峰周艳君童光志中国农业科学院上海兽医研究所上海200241

为了提高甲型H1N1流感病毒HA基因DNA疫苗的免疫原性,本研究将流感病毒rPan09（HA和NA来自A/California/04/09,其余6个片段来自PR8的重组病毒）的HA基因通过人工合成的方法将其密码子优化为哺乳动物体内偏嗜性密码子opti-HA,同未优化的rP... 详细信息

为了提高甲型H1N1流感病毒HA基因DNA疫苗的免疫原性,本研究将流感病毒rPan09（HA和NA来自A/California/04/09,其余6个片段来自PR8的重组病毒）的HA基因通过人工合成的方法将其密码子优化为哺乳动物体内偏嗜性密码子opti-HA,同未优化的rPan09的HA基因分别与真核表达载体pCAGGS连接构成重组质粒pCA-optiHA和pCA-HA转染293T细胞,48 h后采用间接免疫荧光的方法检测HA基因的体外表达情况,结果显示重组质粒pCA-optiHA的蛋白表达量明显高于pCA-HA。为评价这两种重组质粒的免疫及保护效力,选取6~8周龄雌性BALB/c小鼠,将质粒pCA-HA、pCA-optiHA以100μg/只的剂量,进行后腿肌肉多点注射,同时设立空载体pCAGGS对照,共免疫3次,每次间隔2周。结果表明DNA疫苗pCA-optiHA可显著提高小鼠的体液免疫和细胞免疫应答水平。三免2周后用107.45EID50的rPan09采用滴鼻方式进行攻毒,用Real-time PCR及制作肺组织石蜡切片检测DNA疫苗的保护效力。结果表明,pCA-optiHA免疫组的保护效力明显高于pCA-HA免疫组。本研究为进一步研究和设计有效的甲型流感病毒DNA疫苗奠定了基础。

关键词：甲型H1N1流感病毒 HA基因密码子优化 DNA疫苗

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

欢迎您,

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

欢迎您,

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：