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陕南茶区茶网蝽“屡防不止”的原因分析及对策研究

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特种经济动植物 2024年第1期27卷 193-196页

作者：谢满超吴冲刘欢杨金宏李增义游新才安康学院现代农业与生物科技学院陕西安康725000 陕西省安康市农业技术推广中心陕西安康725000 陕西省紫阳县农业农村局茶叶管理中心陕西紫阳725300

茶网蝽自2010年入侵陕南茶区以来,虽经多年防控,但仍不断蔓延,发展成陕南茶区危害最严重的吸汁性害虫。通过研究文献,结合实践经验,分析茶网蝽“屡防不止”的原因,并提出防控对策。

关键词：茶网蝽绿色防控陕南茶区生态茶园

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畸形桑叶中病毒的鉴定及其小RNA特征分析

植物保护 2022年第5期48卷 251-255,268页

作者：孔卫青凌君杨金宏安康学院陕西省蚕桑重点实验室安康725000

从安康市桑园采集了68份畸形桑树叶片样品,利用PCR扩增检测鉴定其中存在4种病毒,分别是桑花叶型萎缩病相关病毒(mulberry mosaic dwarf-associated virus,MMDaV)、桑花叶卷叶病相关病毒(mulberry mosaic leaf roll associated virus,MMLRaV)、桑花叶萎缩类病毒(mulberry mosaic dwarf viroid,MMDVd)和桑潜隐病毒(mulberry cryptic virus,MuCV),存在复合侵染。对4种病毒复合侵染桑叶进行小RNA深度测序和分析,结果显示其中的sRNA来自MMDaV、MMLRaV、MMDVd、MuCV 4种病毒,与RT-PCR检测结果一致。进一步分析sRNA长度和5′-末端序列,MMDaV sRNA长度以24 nt最多,其他病毒sRNA主要为21 nt。MMDaV基因组链sRNA 5′-末端以A和T为主,MuCV以C最多,MMLRaV和MMDVd一致,均以T最多。

关键词：畸形桑叶病毒复合侵染小RNA

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桑花叶萎缩类病毒基因组核酶活性及其对桑树侵染性的研究

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病毒学报 2022年第3期38卷 705-713页

作者：杨金宏江微凌君孔卫青安康学院陕西省蚕桑重点实验室安康725000

桑花叶萎缩类病毒(Mulberry mosaic dwarf viroid,MMDVd)基因组由单链环状小分子RNA组成,根据预测二级结构可能存在锤头核酶(Hammerhead ribozyme,HH)和疑似发夹核酶(Hairpin ribozyme,HP),但目前还缺乏对核酶活性的研究。本研究使用体... 详细信息

桑花叶萎缩类病毒(Mulberry mosaic dwarf viroid,MMDVd)基因组由单链环状小分子RNA组成,根据预测二级结构可能存在锤头核酶(Hammerhead ribozyme,HH)和疑似发夹核酶(Hairpin ribozyme,HP),但目前还缺乏对核酶活性的研究。本研究使用体外自切割和2,3-环磷酸基测序对核酶活性及自切割位点进行了鉴定,并在发夹核酶Loop1增加一对碱基设计合成了突变核酶MMDVd-HP’,比较了其与MMDVd-HP的活性差异,分析了MMDVd对正常未染病和桑花叶卷叶病相关病毒(Mulberry mosaic leaf roll-associated virus,MMLRaV)阳性桑树的侵染。体外自切割结果显示,所有核酶均成功自切割产生了相应的单体,均有核酶活性。2,3-环磷酸基测序结果显示,腺苷化接头分别连接于第7位的C和302位的A之后,MMDVd-HH的切割位点位于AUC↑处,MMDVd-HP切割位点位于ACA↓处。定量PCR结果显示反应体系中的MMDVd-HP多于MMDVd-HP’,表明MMDVd-HP’更多的发生了切割,活性高于MMDVd-HP。侵染性实验结果显示,桑树(-)没有检测到MMDVd,而所有桑树(MMLRaV)样本均检测到了MMDVd,说明MMDVd能侵染桑树(MMLRaV),与satRNA的特征相似。

关键词：桑花叶萎缩类病毒锤头核酶发夹核酶 2 3-环磷酸基切割位点侵染性

茶网蝽线粒体基因组全序列测定及系统发育分析

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茶叶科学 2022年第6期42卷 839-850页

作者：杨金宏谢满超文欣茹陈蕊茹孔卫青安康学院现代农业与生物科技学院/陕西省茶叶省市共建重点实验室陕西安康725000 安康学院陕西省蚕桑重点实验室陕西安康725000

为明确茶网蝽(Stephanitis chinensis)线粒体基因组序列特征,探究其系统发育地位。利用Illumina和Sanger测序对陕西省安康市茶网蝽线粒体基因组进行测定。结果显示,茶网蝽线粒体基因组全长18085 bp,包含37个基因(13个蛋白质编码基因,22... 详细信息

为明确茶网蝽(Stephanitis chinensis)线粒体基因组序列特征,探究其系统发育地位。利用Illumina和Sanger测序对陕西省安康市茶网蝽线粒体基因组进行测定。结果显示,茶网蝽线粒体基因组全长18085 bp,包含37个基因(13个蛋白质编码基因,22个tRNA,2个rRNA)和1个3678 bp的控制区,基因排列与昆虫线粒体祖先基因顺序(Ancestralgeneorder)相同。基因组AT含量为78.10%。13个蛋白质编码基因中,6个以ATG起始,7个以ATT或ATA起始,10个以TAA或TAG为终止密码子,cox2、atp6和cox3以T终止,蛋白质编码基因使用频率最高的密码子是UUA、AUU、UUU和AUA,使用频率最高的氨基酸为亮氨酸(Leu)、异亮氨酸(Ile)、苯丙氨酸(Phe)和丝氨酸(Ser)。22个tRNA基因存在GU、UU、GA和AA错配23处,trnS1(GCU)缺少DHU臂,其他tRNA均能形成典型三叶草结构。控制区包含位于前端的3种非串联重复、4个(TTAG)_(n)和1个位于后端的串联重复序列,含有多个茎环结构。系统发育分析结果表明,茶网蝽与直脊冠网蝽(Stephanitis mendica)的亲缘关系最近,所有网蝽科聚为一簇,位于发育树的根部。

关键词：茶网蝽线粒体基因组序列分析系统发育

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网红品牌基业长青策略

中小企业管理与科技 2023年第18期 72-74页

作者：杨金宏广州华南商贸职业学院数智经济贸易学院广州510550

互联网时代,商业逻辑被颠覆和重构,网红品牌在一个相对较短的时期形成“爆款”火遍全网,有其基本规律,通过洞察年轻粉丝群体需求痛点、锤炼产品力,加之成功的新媒体运营策略,以此作为短期品牌策略,迅速帮助网红品牌打开知名度;从长期视... 详细信息

互联网时代,商业逻辑被颠覆和重构,网红品牌在一个相对较短的时期形成“爆款”火遍全网,有其基本规律,通过洞察年轻粉丝群体需求痛点、锤炼产品力,加之成功的新媒体运营策略,以此作为短期品牌策略,迅速帮助网红品牌打开知名度;从长期视角来看,通过塑造品牌文化,提升品牌形象在粉丝群体中的认可度,利用持续性创新,不断提升粉丝的新鲜感和品牌的亲和力,保持品牌活力和文化认可度。基于此,论文对网红品牌的特征和生命周期进行了简单介绍,从短期和长期视角提出了网红品牌基业长青的策略。

关键词：网红品牌策略品牌文化

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工程检测对建筑工程质量控制的影响及重要性

城市建设理论研究(电子版) 2022年第36期 58-60页

作者：杨金宏中国水利水电第十四工程局有限公司

随着经济快速发展，我国的建筑工程项目越来越多，人们对于建筑工程的质量有了更高的要求。保障建筑工程质量的相关问题成了当前最重要的内容，工程检测可以有效保障建筑工程的质量，工程检测贯穿全工程，对工程的每个施工环节进行检测... 详细信息

随着经济快速发展，我国的建筑工程项目越来越多，人们对于建筑工程的质量有了更高的要求。保障建筑工程质量的相关问题成了当前最重要的内容，工程检测可以有效保障建筑工程的质量，工程检测贯穿全工程，对工程的每个施工环节进行检测，可以避免不合格工程给人民生命财产带来威胁和损失。为此本文研究工程检测如何控制建筑工程质量以及对建筑工程的影响。

关键词：工程检测建筑工程质量控制影响重要性

侵染小构树的双生病毒及其缺陷DNA形式的检测和特征分析

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山东农业科学 2022年第9期54卷 131-136页

作者：孔卫青杨金宏凌君楚渠孟刚安康学院陕西省蚕桑重点实验室陕西安康725000

为明确侵染小构树(Broussonetia kazinoki)并引起叶片黄化卷曲症状的病毒种类及其基因组特征,本研究利用转录组高通量测序技术获得病毒基因组,利用PCR扩增和基因克隆技术对病毒基因组及其缺陷DNA进行鉴定。结果表明,通过转录组高通量测... 详细信息

为明确侵染小构树(Broussonetia kazinoki)并引起叶片黄化卷曲症状的病毒种类及其基因组特征,本研究利用转录组高通量测序技术获得病毒基因组,利用PCR扩增和基因克隆技术对病毒基因组及其缺陷DNA进行鉴定。结果表明,通过转录组高通量测序和无参组装,获得引起小构树叶片黄化卷曲的双生病毒,命名为小构树卷叶病毒2(Kozo leaf curl virus 2,KozoLCV-2)。进一步克隆测序获得的KozoLCV-2基因组全长为3756~3758 bp,其与构树卷叶病毒(Paper mulberry leaf curl virus 2,PMLCV-2)具有相同的基因组结构和较高的序列一致性;病毒正义链编码4个ORF(V1、V2、V3和V4),互补链编码2个(C1和C1:C2),互补链存在选择性剪接。PCR扩增和克隆测序获得了10种KozoLCV-2的缺陷DNA(defective DNA,D-DNA)形式,其中9种完全或部分缺失复制酶区域,4种形式的D-DNAs与来自PMLCV-2-TL RepA第二外显子末端的序列发生了重组。

关键词：小构树转录组小构树卷叶病毒2 分子特征缺陷DNA

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植原体侵染对桑树叶片转录组的影响

陕西农业科学 2022年第6期68卷 78-82,86页

作者：杨金宏孔卫青安康学院陕西省蚕桑重点实验室陕西安康725000

桑黄花型萎缩病是桑树重大病害之一,会对桑树产生多方面的影响。转录组可检测物种的整体转录活动,为此研究黄花型萎缩病桑树湖桑32叶片转录组的变化,并分析其中的关键UniGenes与代谢途径。结果获得8265个具有差异表达的UniGenes,其中444... 详细信息

桑黄花型萎缩病是桑树重大病害之一,会对桑树产生多方面的影响。转录组可检测物种的整体转录活动,为此研究黄花型萎缩病桑树湖桑32叶片转录组的变化,并分析其中的关键UniGenes与代谢途径。结果获得8265个具有差异表达的UniGenes,其中4445个表达上调,3820个表达下调。差异表达基因的GO功能显著性富集获得18734个具有显著差异的对应关系,其中富集50条UniGenes以上的GO分类涉及了12个亚类。两样品的代谢通路富集分析显示,UniGenes参与的6大类41个亚类代谢通路中8个途径差异显著。与植物抗性基因数据库PRGDB比对,发现37类89个R基因表达模式发生了变化。这为进一步对该病原菌的致病机理研究提供了基础。

关键词：桑树黄花型萎缩病转录组差异表达

家蚕Bmugt 3基因cDNA序列的克隆、表达与序列分析

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西北农林科技大学学报（自然科学版） 2009年第11期37卷 19-24页

作者：孔卫青杨金宏安康学院陕西省蚕桑重点实验室陕西安康725000

【目的】克隆分析家蚕Bmugt 3基因cDNA序列,并对其在家蚕不同组织中的表达进行检测。【方法】以家蚕ak1和873为供试材料,采用生物信息学方法和RT-PCR技术,对家蚕Bmugt3基因cDNA序列进行克隆和组织表达谱研究,并通过XbaⅠ和HindⅢ双酶切... 详细信息

【目的】克隆分析家蚕Bmugt 3基因cDNA序列,并对其在家蚕不同组织中的表达进行检测。【方法】以家蚕ak1和873为供试材料,采用生物信息学方法和RT-PCR技术,对家蚕Bmugt3基因cDNA序列进行克隆和组织表达谱研究,并通过XbaⅠ和HindⅢ双酶切重组质粒,将Bmugt 3亚克隆至具有2个反向T7启动子,用于体外诱导合成双链RNA(dsRNA)的L4440载体。【结果】克隆得到了家蚕Bmugt 3基因1675bp的cDNA序列,编码462个氨基酸,编码蛋白的分子质量为52.3ku,等电点6.5;多序列比对显示,Bmugt 3基因缺失了C末端的跨膜结构域;聚类分析结果显示,其与家蚕phenol-UGT基因聚合在同一分支上。Bmugt 3基因主要在家蚕丝腺中表达。【结论】Bmugt 3基因是组织特异性表达基因,可能在家蚕类黄酮素的代谢中起作用。

关键词：家蚕 Bmugt 3 克隆组织表达