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EGCG对人牙源性角化囊肿上皮细胞增殖和凋亡影响的研究

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EGCG对人牙源性角化囊肿上皮细胞增殖和凋亡影响的研究

作者：杨绍滨青岛大学

学位级别：硕士

目的:探究表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对牙源性角化囊肿(OKC)上皮细胞增殖、凋亡的影响及其可能的分子机制。方法:采用冷酶消化法,从牙源性角化囊肿囊壁组织分离得到上皮细胞,在角化细胞无血清培养基中进行原代细胞培养。免疫荧光... 详细信息

目的:探究表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对牙源性角化囊肿(OKC)上皮细胞增殖、凋亡的影响及其可能的分子机制。方法:采用冷酶消化法,从牙源性角化囊肿囊壁组织分离得到上皮细胞,在角化细胞无血清培养基中进行原代细胞培养。免疫荧光染色法鉴定原代上皮细胞表面标志物广谱角蛋白(CK)、角蛋白10(CK10)、角蛋白14(CK14)以及间充质细胞表面标志物波形蛋白(Vimentin)。分别用0、20、40、80、160、320μmol/L EGCG溶液处理细胞24、48、72 h,CCK-8法检测各组细胞的增殖率。实验分组设计为对照组(0μmol/L),EGCG低、中、高浓度组(20、160、320μmol/L),分别处理细胞48 h,流式细胞术PI单染色法检测各组细胞周期分布情况;FITC-Annexin V/PI双染色法检测细胞凋亡情况。实时荧光定量PCR、Western免疫印迹法检测各组细胞Wnt/JNK信号通路关键蛋白FZD3和JNK3的表达。以正常人口腔角质细胞(HOKs)作为对照。采用SPSS 22.0软件对数据进行统计学分析。结果:牙源性角化囊肿上皮细胞可在体外成功培养并传代至3-4代。原代培养的细胞呈多边形,密集排列呈瓦片样外观。上皮细胞表面标志物CK,CK10,CK14表达阳性,间充质标志物Vimentin表达阴性。0、20、40、80、160、320μmol/L EGCG分别处理OKC上皮细胞和HOK细胞24、48、72 h后,细胞增殖率呈时间-剂量依赖性降低(P<0.05)。EGCG作用48 h,OKC上皮细胞的半数抑制浓度为158.7μmol/L,而HOK细胞的半数抑制浓度为282.1μmol/L。与对照组(0μmol/L)相比,中(160μmol/L)、高(320μmol/L)浓度EGCG可使OKC上皮细胞sub-G0和G0/G1期细胞比例增加,S和G2/M期细胞比例减少(P<0.05),细胞周期阻滞于G1期;而高浓度(320μmol/L)EGCG可增加HOK细胞sub-G0和G0/G1期细胞的比例,减少S和G2/M期细胞的比例(P<0.05),产生明显的G1期阻滞现象。EGCG低、中、高浓度组(20、160、320μmol/L)OKC上皮细胞的凋亡率呈剂量依赖性增加(P<0.05);而高浓度组(320μmol/L)HOK细胞凋亡率显著增加(P<0.05)。OKC上皮细胞Wnt/JNK信号通路相关蛋白FZD3和JNK3的表达量较HOK细胞上调(P<0.05)。中(160μmol/L)、高(320μmol/L)浓度EGCG处理OKC上皮细胞48 h后,FZD3和JNK3的表达量显著降低(P<0.05),而高浓度(320μmol/L)EGCG也能显著下调HOK细胞FZD3和JNK3的表达量(P<0.05)。结论:EGCG对OKC上皮细胞的增殖具有显著的抑制作用,将细胞周期阻滞于G1期,并诱导细胞凋亡。其机制可能与抑制Wnt信号通路相关蛋白FZD3和JNK3的表达有关。在一定的浓度范围内,EGCG选择性抑制OKC上皮细胞增殖,但对正常细胞的生长无明显影响,高浓度EGCG对正常细胞具有潜在的细胞毒性。

关键词：表没食子儿茶素没食子酸酯牙源性角化囊肿增殖凋亡

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国内首台商业化体积生物打印设备发布

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科技日报

作者：叶青杨绍滨陈苹

科技日报讯（记者叶青通讯员杨绍滨陈苹）记者8月29日获悉，在广州医科大学番禺校区近日召开的第一届绿钥体积打印技术应用论坛上，广州医科大学联合相关单位正式发布国内首台商业化体积生物打印装备OrganSEC。该设备解决了常规逐层... 详细信息

科技日报讯（记者叶青通讯员杨绍滨陈苹）记者8月29日获悉，在广州医科大学番禺校区近日召开的第一届绿钥体积打印技术应用论坛上，广州医科大学联合相关单位正式发布国内首台商业化体积生物打印装备OrganSEC。该设备解决了常规逐层式打印速度慢、细胞存活率低的问题，技术指......

关键词：打印设备

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口腔手术显微镜在牙髓精准治疗中的研究进展

精准医学杂志 2020年第5期35卷 467-470页

作者：杨绍滨渠薇梁宇红青岛市市立医院口腔医学中心山东青岛266071 北京大学国际医院口腔科北京大学口腔医学院口腔医院牙体牙髓科

口腔手术显微镜的使用解决了以往传统牙髓治疗中视野局限性及手感不确定性的问题,增强了操作的可视性和准确性,改善了牙髓治疗的效果。本文对口腔手术显微镜在牙髓疾病的诊断、根管治疗及再治疗、牙髓外科中的应用等方面的研究进行综述。

关键词：显微外科手术根管疗法牙髓病学牙髓疾病精准医学综述

核糖体蛋白L29在牙龈鳞状细胞癌中的表达及临床病理意义

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核糖体蛋白L29在牙龈鳞状细胞癌中的表达及临床病理意义

表没食子儿茶素没食子酸酯对牙源性角化囊肿上皮细胞增殖和凋亡的影响

第十四次中国口腔颌面外科学术会议

作者：薛娇袁荣涛杨绍滨段青云青岛市市立医院(东院)口腔科青岛市市立医院口腔医学中心青岛市市立医院口腔科杭州市第一人民医院口腔科

研究目的:研究核糖体蛋白L29(RPL29)在牙龈鳞状细胞癌中的表达及其临床病理意义。研究方法:收集牙龈癌50例肿瘤组织、癌旁组织及正常牙龈组织,以及21例舌癌肿瘤组织,应用SP免疫组化法检测RPL29蛋白的表达情况,分析RPL29在牙龈癌的不同临... 详细信息

研究目的:研究核糖体蛋白L29(RPL29)在牙龈鳞状细胞癌中的表达及其临床病理意义。研究方法:收集牙龈癌50例肿瘤组织、癌旁组织及正常牙龈组织,以及21例舌癌肿瘤组织,应用SP免疫组化法检测RPL29蛋白的表达情况,分析RPL29在牙龈癌的不同临床T分期、病理分级、有无淋巴结转移以及患者的性别、年龄、吸烟史、饮酒史之间表达的差异,探讨其临床病理意义。研究结果:RPL29在牙龈癌中的阳性表达率为66.67%,明显高于癌旁组织的19.05%,且在正常牙龈组织中不表达(阳性率0%),其表达有显著差异(P0.05)。高分化牙龈癌(36例)与较低分化牙龈癌(14例)中的RPL29阳性率分别为77.78%(28/36)、92.86%(13/14),统计学无明显差异(P> 0.05)。有淋巴结转移者RPL29阳性率100%(15/15),无淋巴结转移者阳性率74.29%(26/35),RPL29的表达在牙龈癌患者有无淋巴结转移组间存在明显差异,且差异有统计学意义(P0.05)。RPL29在舌癌中的阳性表达率为85.71%,明显高于癌旁组织的11.11%,且RPL29的表达在舌癌患者有无淋巴结转移组间存在明显差异,且差异有统计学意义(P<0.05),此表达情况与牙龈癌基本相似。研究结论:(1)RPL29在牙龈鳞状细胞癌中高表达,在癌旁组织中低表达,在正常牙龈组织中不表达,提示RPL29可能是牙龈鳞状细胞癌的促进因子,可以作为检测牙龈鳞状细胞癌的分子生物学标记物。(2)有颈淋巴结转移的牙龈鳞状细胞癌中RPL29均阳性表达,RPL29表达阴性的牙龈鳞状细胞癌均未发生淋巴结转移,提示RPL29与牙龈鳞状细胞癌是否发生颈淋巴结转移相关。(3)RPL29的表达与牙龈鳞状细胞癌患者的年龄、性别、吸烟史、饮酒史、肿瘤发生部位、临床T分期及病理分级等均无关。(4)RPL29在舌鳞状细胞癌中高表达,在癌旁组织中低表达,与舌鳞状细胞癌是否发生颈淋巴结转移相关,与牙龈鳞状细胞癌中的表达相似,提示RPL29与口腔鳞状细胞癌的发生发展相关。

关键词：核糖体蛋白L29 牙龈鳞状细胞癌临床病理免疫组化

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表没食子儿茶素没食子酸酯对牙源性角化囊肿上皮细胞增殖和凋亡的...

广医临床医学专业进入“一本”招生创纪录 006

第十四次中国口腔颌面外科学术会议

作者：杨绍滨袁荣涛薛娇周建华青岛市市立医院口腔颌面外科

研究目的:探究表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对牙源性角化囊肿(OKC)上皮细胞增殖、凋亡的影响以及与Wnt信号通路相关基因FZD3和JNK3表达的关系。研究方法:采用原代培养的人牙源性角化囊肿上皮细胞,分别用不同浓度EGCG处理24、48、72h,... 详细信息

研究目的:探究表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对牙源性角化囊肿(OKC)上皮细胞增殖、凋亡的影响以及与Wnt信号通路相关基因FZD3和JNK3表达的关系。研究方法:采用原代培养的人牙源性角化囊肿上皮细胞,分别用不同浓度EGCG处理24、48、72h,CCK-8法检测细胞增殖,FITC-Annexin V/PI染色法检测细胞凋亡,流式细胞术检测细胞周期分布,RT-PCR、Western blotting检测Wnt信号通路相关基因FZD3和JNK3的表达情况。研究结果:EGCG以剂量-时间依赖的方式抑制OKC上皮细胞增殖。低浓度EGCG(0-20μM)对OKC上皮细胞增殖无明显影响(P>0.05),高浓度EGCG(40-320μM)对细胞增殖有明显抑制效应(P<0.05)。且随着药物浓度增加及作用时间延长,抑制作用逐渐增强(P<0.05)。EGCG诱导OKC上皮细胞凋亡,呈剂量依赖性(P<0.05),并将细胞周期阻滞于G1期。EGCG可下调Wnt信号通路相关基因FZD3和JNK3的表达(P<0.05)。研究结论:EGCG抑制OKC上皮细胞增殖,诱导细胞凋亡,其机制可能与阻断Wnt信号通路相关基因FZD3和JNK3的表达有关。

关键词：表没食子儿茶素没食子酸酯牙源性角化囊肿增殖凋亡

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广州日报

作者：黄茜冯卫东陈苹杨绍滨

临床医学专业进入广东省“一本”批次招生；首次招收临床医学专业的留学生；在临床医学专业中开设实验班（暂时定名为“南山班”）、由钟南山院士领衔授课。广州医学院日前发布的招生方案中，这3个“亮点”格外引人注目。据了解，实现...

临床医学专业进入广东省“一本”批次招生；首次招收临床医学专业的留学生；在临床医学专业中开设实验班（暂时定名为“南山班”）、由钟南山院士领衔授课。广州医学院日前发布的招生方案中，这3个“亮点”格外引人注目。据了解，实现同一学校、部分专业“升级”到第一批次进行

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广医临床专业跻身“一本”招生 A11

表没食子儿茶素没食子酸酯对牙源性角化囊肿上皮细胞增殖和凋亡的影响

南方日报

作者：曹斯冯卫东陈苹杨绍滨

南方日报讯(记者/曹斯通讯员/冯卫东陈苹杨绍滨)广州医学院“招牌专业”临床医学“升格”,自今年起,该专业将纳入全省普通高等学校第一批次招生录取。据了解,非“211”工程建设高校部分专业跻身一本招生在我省还是头一例。　　　　近年...

南方日报讯(记者/曹斯通讯员/冯卫东陈苹杨绍滨)广州医学院“招牌专业”临床医学“升格”,自今年起,该专业将纳入全省普通高等学校第一批次招生录取。据了解,非“211”工程建设高校部分专业跻身一本招生在我省还是头一例。　　　　近年来,越来越多超一本线的高分考生报考广医

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中国口腔颌面外科杂志 2018年第6期16卷 481-487页

作者：杨绍滨薛娇庞宝兴袁荣涛青岛大学口腔医学院山东青岛266000 青岛大学附属青岛市立医院口腔医学中心山东青岛266071 青岛大学附属医院口腔颌面外科山东青岛266001

目的:探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对牙源性角化囊肿(OKC)上皮细胞增殖、凋亡的影响,以及与Wnt信号通路相关基因FZD3和JNK3表达的关系。方法:采用原代培养的人牙源性角化囊肿上皮细胞,分别用不同浓度的EGCG处理24、48、72 h,CCK-... 详细信息

目的:探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对牙源性角化囊肿(OKC)上皮细胞增殖、凋亡的影响,以及与Wnt信号通路相关基因FZD3和JNK3表达的关系。方法:采用原代培养的人牙源性角化囊肿上皮细胞,分别用不同浓度的EGCG处理24、48、72 h,CCK-8法检测细胞增殖,FITC-Annexin V/PI染色法检测细胞凋亡,流式细胞术检测细胞周期分布,RT-PCR、Western免疫印迹检测Wnt信号通路相关基因FZD3和JNK3的表达。采用SPSS 22.0软件包对数据进行统计学分析。结果:EGCG以剂量-时间依赖方式抑制OKC上皮细胞增殖。低浓度EGCG(0～20μmol/L)对细胞增殖无显著影响(P>0.05),高浓度EGCG(40～320μmol/L)对细胞增殖有显著抑制作用(P<0.05),且随着药物浓度增加及作用时间延长,抑制作用逐渐增强(P<0.05)。EGCG (20、160、320μmol/L)诱导OKC上皮细胞凋亡,呈剂量依赖性(P<0.05),并将细胞周期阻滞于G1期。EGCG可下调Wnt信号通路相关基因FZD3和JNK3的表达(P<0.05)。结论:EGCG抑制OKC上皮细胞增殖,诱导细胞凋亡,其机制可能与阻断Wnt信号通路相关基因FZD3和JNK3的表达有关。

关键词：表没食子儿茶素没食子酸酯牙源性角化囊肿增殖凋亡卷曲蛋白受体3 c—Jun氨基末端激酶3

牙源性角化囊肿上皮细胞体外培养及其生物学特性

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精准医学杂志 2019年第4期34卷 345-349页

作者：杨绍滨张静薛娇庞宝兴袁荣涛青岛大学口腔医学院山东青岛266003 青岛市市立医院手术室青岛市市立医院口腔医学中心青岛大学附属医院口腔颌面外科

目的探讨体外培养牙源性角化囊肿上皮细胞的方法,并且比较牙源性角化囊肿和正常口腔黏膜(NOM)上皮细胞增殖能力的差异,为牙源性角化囊肿的体外实验提供细胞模型。方法采用酶消化法,在角化细胞无血清培养基上原代培养牙源性角化囊肿和NO... 详细信息

目的探讨体外培养牙源性角化囊肿上皮细胞的方法,并且比较牙源性角化囊肿和正常口腔黏膜(NOM)上皮细胞增殖能力的差异,为牙源性角化囊肿的体外实验提供细胞模型。方法采用酶消化法,在角化细胞无血清培养基上原代培养牙源性角化囊肿和NOM上皮细胞。倒置显微镜下观察细胞形态学特征,免疫荧光染色鉴定细胞表面标记物,并通过生长曲线、克隆形成率和细胞周期分析比较两种细胞的增殖能力差异。结果体外培养的牙源性角化囊肿上皮细胞表现为典型的上皮细胞铺路石样外观,体外培养可传至3~4代。经过CK、CK10、CK14、Vimentin免疫荧光染色鉴定为角化上皮细胞。牙源性角化囊肿上皮细胞在生长速度、克隆形成率和增殖指数等方面均高于NOM上皮细胞。结论采用酶消化法在角化细胞无血清培养基上可实现牙源性角化囊肿上皮细胞体外连续培养,牙源性角化囊肿上皮细胞较NOM上皮细胞具有更强的增殖活力。

关键词：牙源性囊肿上皮细胞原代细胞培养细胞增殖