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酶偶联法催化还原潜手性酮类化合物的研究

酶偶联法催化还原潜手性酮类化合物的研究

作者：郭红颜河南师范大学

学位级别：硕士

醛酮还原酶作为催化剂制备手性化合物时,合成产物的同时会消耗掉一定量的辅酶。而这些辅酶往往比所制备的产物还要昂贵,稳定性差,难以重复利用。在工业化生产中,不可能投加大量的辅酶,所以高效辅酶再生系统的构建和辅酶的反复使用是当... 详细信息

醛酮还原酶作为催化剂制备手性化合物时,合成产物的同时会消耗掉一定量的辅酶。而这些辅酶往往比所制备的产物还要昂贵,稳定性差,难以重复利用。在工业化生产中,不可能投加大量的辅酶,所以高效辅酶再生系统的构建和辅酶的反复使用是当下必须解决的问题。为了解决辅酶再生问题,本文利用基因工程的方法,以洛德酵母的基因组为模板,经过聚合酶链式反应（PCR）扩增得到甲酸脱氢酶（FDH）基因,与载体p ET28a成功构建了重组质粒p FDH-p ET28a,并转化入E.coli BL21（DE3）中,得到重组菌E.coli BL21-FDH。分别考察了温度,浓度和时长对此蛋白酶可溶性表达的影响,并测得甲酸脱氢酶的酶活。利用构建的高效辅酶再生系统,制备两种医药中间体:L-2-氨基丁酸和（S）-1-（2,6-二氯-3-氟苯基）乙醇。分别构建了苏氨酸脱氨酶（TD）表达质粒p TD-p ET28a和亮氨酸脱氢酶（LDH）表达质粒p LDH-p ET21a。将p TD-p ET28a转化入E.coli BL21（DE3）中,得到重组菌E.coli BL21-TD,测得苏氨酸脱氨酶的酶活。将重组质粒p FDH-p ET28与p LDH-p ET21a共同转化入E.coli BL21（DE3）中,得到重组菌E.coli BL21-FDH/LDH。测得亮氨酸脱氢酶的酶活。利用酶偶联法制备L-2-氨基丁酸,探索并确定了此转化反应的最适条件:温度﹑p H﹑氧化型辅酶Ⅰ（NAD+）的初始浓度﹑最大底物投料量﹑酶加量配比和最终反应时长等。同时探索并确定了L-2-氨基丁酸的最佳纯化条件:温度﹑p H和醇洗次数等。质谱（MS）,核磁（NMR）和旋光检测证明此反应催化得到的产物为L-2-氨基丁酸。最终产物纯度为97%,收率为80.65%,已达到后续实验的要求。构建了乙醇脱氢酶（ADH）表达质粒p ADH-p ET21a,与p FDH-p ET28a共同转化入E.coli BL21（DE3）中,得到重组菌E.coli BL21-FDH/ADH。测得乙醇脱氢酶的酶活。利用酶偶联法制备（S）-1-（2,6-二氯-3-氟苯基）乙醇,探索并确定了转化反应的最适条件:温度﹑p H﹑最大底物投料量﹑最佳助溶剂和最终反应时长等。采用柱层析法纯化产物。质谱,核磁和旋光检测证明此反应催化得到的产物为（S）-1-（2,6-二氯-3-氟苯基）乙醇。最终产物纯度为100%,收率为50%以上,已达到后续实验的要求。通过L-2-氨基丁酸和（S）-1-（2,6-二氯-3-氟苯基）乙醇的制备,表明本文中构建的辅酶再生系统的有效性。

关键词：还原型辅酶Ⅰ 甲酸脱氢酶酶偶联法 L-2-氨基丁酸 (S)-1-(2 6-二氯-3-氟苯基)乙醇

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大型商超财务管理提升策略

理财（审计） 2022年第11期 80-81页

作者：张红颜周口龙润电力(集团)有限公司扶沟分公司

随着大型商超的市场竞争加剧,其面临的经营形势也越来越严峻,对财务管理能力的要求越来越高。为了更好地适应发展需要,财务人员要更多地扮演决策支持者的角色,运用本身的财务专业知识和数据分析能力,及时准确地反映公司的经营情况,提出... 详细信息

随着大型商超的市场竞争加剧,其面临的经营形势也越来越严峻,对财务管理能力的要求越来越高。为了更好地适应发展需要,财务人员要更多地扮演决策支持者的角色,运用本身的财务专业知识和数据分析能力,及时准确地反映公司的经营情况,提出经营建议,以保障公司能快速可持续发展,实现价值增长。一、强化资金管理资金贯穿营运全过程。

关键词：数据分析能力经营形势财务专业财务管理能力财务人员可持续发展大型商超竞争加剧

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客户投诉智能预警机制研究

客户投诉智能预警机制研究

过程教学法在高中英语写作教学中的应用与研究

作者：邵颖余绿杨红颜郑泽溪张力中国人寿浙江省分公司

在信息化时代,保险市场不断发展,消费者的服务需求和维权意识不断增强,一旦产生矛盾和纠纷,选择向监管部门直接投诉或运用互联网等广大媒介进行曝光等"零成本""强聚焦"的维权行为来表达诉求、维护利益的客户群体与日俱增,加之保险机构... 详细信息

在信息化时代,保险市场不断发展,消费者的服务需求和维权意识不断增强,一旦产生矛盾和纠纷,选择向监管部门直接投诉或运用互联网等广大媒介进行曝光等"零成本""强聚焦"的维权行为来表达诉求、维护利益的客户群体与日俱增,加之保险机构对投诉案件的处理与解决涉及人员较多、流程固化、时效较长等因素,导致所面临的投诉升级和声誉风险大幅增加,严重影响企业的品牌形象和社会信誉。本文旨在以市场形势为背景,以投诉问题为导向,以风险管控为核心,以数据分析为抓手,在公司高质量发展的战略攻坚转型期,就如何建立起一套完善的客户投诉智能预警机制,如何研发和应用客户服务品质管理系统,结合机制建设、平台运用、成效评价等方面落地执行,切实提高企业客户投诉风险预警管理水平进行专题探讨。

关键词：风险管理客户投诉预警机制

来源： cnki会议评论

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过程教学法在高中英语写作教学中的应用与研究

作者：张红颜山东师范大学

学位级别：硕士

随着经济的快速发展，世界各地联系日益密切，英语在人们生活学习中发挥着越来越重要的作用，由此加深了人们学习英语的意识。而作为英语四项基本技能之一的写作，最能体现学生的综合运用能力，但也一直是学习者较难掌握的一项技能。实... 详细信息

随着经济的快速发展，世界各地联系日益密切，英语在人们生活学习中发挥着越来越重要的作用，由此加深了人们学习英语的意识。而作为英语四项基本技能之一的写作，最能体现学生的综合运用能力，但也一直是学习者较难掌握的一项技能。实际英语写作教学中，大部分老师仍然采用传统的成果教学法，该方法以教师为中心，学生模仿范文进行写作，最终的关注点落在学生的写作成品上。基于英语写作教学的重要作用，国内外专家学者对此进行了相关的深入研究，产生了成果教学法，体裁教学法和过程教学法等。过程教学法产生于20世纪70年代，主要强调学生的写作过程而非写作成品。学生处于中心地位，教师扮演者指导者、组织者、监督者和评价者等不同的角色。整个写作过程划分为几个阶段有序进行，学生写作的重点不仅放在语言基础知识的掌握上，更加注重对文章内容结构的训练，写作技能的培养。虽然过程教学法在国外受到广泛的关注，但过程教学法是否适合我国高中英语写作教学，这还是一个值得考虑的问题。尽管近年来国内学者对过程教学法进行了理论研究与分析，过程教学法在我国也逐渐被采用，但是该方法在实际的高中英语写作教学中仍相对缺乏科学有效的实证研究。为探讨过程教学法在高中英语写作教学中的适用性问题，笔者进行了接近三个月的教学实验研究，以山东济钢高级中学两个高二平行班级的学生作为研究对象，实验班采用过程教学法进行写作教学，对照班则使用成果教学法，运用问卷调查法、教学实验法进行研究。研究结果表明：过程教学法应用于高中英语写作课堂不仅转变了学生对英语写作的态度，了解自身的写作过程，而且还能够促进学生写作能力的提高。综上所述，过程教学法比成果教学法更适合于高中英语写作教学，笔者期望本次研究能为高中英语老师提供有效可行的写作教学方法。同时，教师在具体运用过程教学法时可根据自身教学的实际情况进行调整或做出必要的改变，使过程教学法在高中英语写作教学中发挥更加积极的作用。

关键词：过程教学法成果教学法高中英语写作教学

MMP-2、3、9、11、14在乳腺癌中的表达及MMP-11的功能研究

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MMP-2、3、9、11、14在乳腺癌中的表达及MMP-11的功能研究

作者：黄红颜重庆医科大学

学位级别：硕士

目的:研究基质金属蛋白酶MMP-2、3、9、11和14在乳腺癌组织中的表达及其与临床病理特征之间的关系。探讨MMP-11对乳腺癌细胞迁移、侵袭能力的影响及其机制。方法:应用免疫组织化学法检测161例浸润性乳腺癌、39例癌旁乳腺组织中MMP-2、3... 详细信息

目的:研究基质金属蛋白酶MMP-2、3、9、11和14在乳腺癌组织中的表达及其与临床病理特征之间的关系。探讨MMP-11对乳腺癌细胞迁移、侵袭能力的影响及其机制。方法:应用免疫组织化学法检测161例浸润性乳腺癌、39例癌旁乳腺组织中MMP-2、3、9、11和14的表达情况,分析它们的表达与乳腺癌患者月经状态、肿瘤大小、组织学分级、淋巴结转移和TNM分期等临床病理特征之间的关系。应用小干扰RNA（si RNA）技术抑制MDA-MB-231细胞株中MMP-11表达,Western-blot检测其干扰效果。Transwell小室检测其迁移和侵袭能力。结果:MMP-3、9、11和14四种金属蛋白酶在161例乳腺癌组织中呈高表达,在39例癌旁乳腺组织中呈低表达,差异有统计学意义;MMP-2在161例乳腺癌组织与39例癌旁乳腺组织均呈高表达,差异无统计学意义。MMP-3、9、11和14在浸润性乳腺癌中的表达与临床病理特征之间具有差异性,MMP-3在绝经前、组织学分级和TNM分期越高的乳腺癌患者中表达越高;MMP-9在肿瘤大小≤2cm、组织学分级和TNM分期越高的乳腺癌患者中表达越高;MMP-11在绝经前、有淋巴结转移和TNM分期越高的乳腺癌患者中表达越高;MMP-14在肿瘤大小＞2cm、有淋巴结转移、组织分级与TNM分期越高的乳腺癌患者中表达越高。MMP-11被成功干扰后,MDA-MB-231细胞株中MMP-11表达明显降低,并且细胞迁移、侵袭能力明显减弱,差异均有统计学意义（p＜0.05）。结论:MMP-3、9、11和14在浸润性乳腺癌中普遍高表达,4种MMPs在乳腺癌组织中的差异性表达均提示基质金属蛋白酶与乳腺癌的发生、发展存在相关性。并且MMP-11被抑制后,乳腺癌MDA-MB-231细胞迁移和侵袭能力明显下降,它们可能是判断乳腺癌预后的分子标志物及临床治疗潜在靶点之一。

关键词：乳腺癌基质金属蛋白酶免疫组化迁移侵袭

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创新型小微企业税收激励机制优化研究

创新型小微企业税收激励机制优化研究

作者：魏红颜哈尔滨商业大学

学位级别：硕士

创新型小微企业作为我国实施创新驱动战略的一支重要力量,其在发展过程中存在诸多问题,需要政府引导、支持和调控,而税收激励机制恰恰是政府职能发挥的重要载体,在促进小微企业不断发展和创新的过程中发挥了不可忽视的作用。然而,我国... 详细信息

创新型小微企业作为我国实施创新驱动战略的一支重要力量,其在发展过程中存在诸多问题,需要政府引导、支持和调控,而税收激励机制恰恰是政府职能发挥的重要载体,在促进小微企业不断发展和创新的过程中发挥了不可忽视的作用。然而,我国小微企业在创新过程中仍面临许多制约瓶颈。税收激励机制作为刺激创新型小微企业发展的原动力,在享受国家出台的一系列税收优惠后,企业可以使用减免的资金进一步去开拓和发展新项目,有利于高科技发展目标的实现和社会经济的进一步发展。在这种背景下,政府需要构建科学、合理的税收激励机制,为这些企业的发展壮大营造一个良好的社会氛围,引领"大众创业,万众创新"的社会潮流。因此,研究创新型小微企业的税收激励机制优化,对小微企业的创新活动加以引导和扶持具有重要的理论和实践意义。基于以上原因,在我国已有企业自主创新税收激励机制基础上,面向创新型小微企业这一核心创新主体的创新特点与需求,引入熊彼特创新理论和税收激励理论等相关理论,运用文献查阅、定性分析、比较分析和实证研究等方法,通过对创新型小微企业的税收激励机制现状进行研究分析,发现当前税收激励机制与企业生命周期衔接不协调、税收激励机制责任划分与落实不到位、缺乏针对企业人才投资税收激励机制等问题,揭示问题的原因为税收激励机制的整合效应不强、覆盖范围较窄、作用手段单一、法律约束弱化等。在借鉴美国、德国、日本等发达国家和巴西、马来西亚等典型发展中国家税收激励机制优化成功经验的基础上,提出按企业不同发展阶段整合创新型小微企业的税收激励机制,构建针对创新企业人力资本投资和具体有效的产学研协同创新的税收激励机制以拓宽创新型小微企业税收激励机制的覆盖范围,调整税收激励机制对不同发展阶段创新型小微企业的作用方式以及健全创新型小微企业税收激励机制的法律约束等优化对策,从而提高论文的应用价值和时间价值。

关键词：创新型小微企业 AHP 激励机制

电化学置换法合成PtAgAu空心纳米颗粒及其电化学性能研究

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电化学置换法合成PtAgAu空心纳米颗粒及其电化学性能研究

作者：孙红颜山东大学

学位级别：硕士

多金属空心纳米材料较大的比表面积、较小的密度以及在同一纳米颗粒中不同的原子之间的电子协同作用使得其在生物成像、光热治疗以及能量存储等方面有很好的应用前景。铂基多金属空心纳米材料在燃料电池方面有很重要的应用。目前普遍使... 详细信息

多金属空心纳米材料较大的比表面积、较小的密度以及在同一纳米颗粒中不同的原子之间的电子协同作用使得其在生物成像、光热治疗以及能量存储等方面有很好的应用前景。铂基多金属空心纳米材料在燃料电池方面有很重要的应用。目前普遍使用的铂基空心纳米材料的合成方法为电化学置换法(galvanic replacement)。Au纳米颗粒的形貌丰富但是比较稳定难以被其他金属盐氧化。我们选择以Au@Ag核壳纳米颗粒为模板,通过Au、Ag之间的电荷转移来降低Au的电极电势促进其氧化来制备多金属空心纳米材料。我们通过电化学置换法合成了不同形貌的PtAgAu空心纳米颗粒,对反应过程和反应机理进行了探讨,并通过甲酸氧化对其电催化性能进行了研究。主要研究内容如下：1、在CTAB存在条件下,Au@Ag核壳纳米棒与K2PtCl4发生电化学置换反应(galvanic replacement),生成高质量的PtAgAu纳米管。在此过程过中,Ag壳与Au核都与K2PtCl4发生电化学置换反应。通过透射电子显微镜(TEM)照片发现产物的形貌演变过程为Au@PtAg摇铃结构、两端空心的Au@PtAgAu纳米棒、PtAgAu纳米管。通过一系列的对照实验证明了该反应中的氧化剂为K2PtCl4并非溶解在溶液中的氧气。Ag壳的存在以及其与Au纳米棒核的接触作用在Au核与K2PtCl4的置换反应中起着至关重要的作用,XPS光谱证明了电荷从Au向Ag转移,降低了Au纳米棒核的电极电势并促进了其氧化,我们通过对照实验也证明了这一点。我们通过甲酸氧化测试了PtAgAu纳米管的电催化性能。2、利用Au、Ag之间的电荷转移以Au@Ag核壳纳米球为模板,与K2PtCl4发生电化学置换反应合成PtAgAu空心纳米球,通过透射电子显微镜(TEM)照片表征了其反应过程。通过改变Au球的尺寸来控制PtAgAu空心纳米球中不同元素的比例。不同元素比例的PtAgAu空心纳米球在甲酸氧化方面的电催化活性不同,但是其电催化活性均高于商业铂碳。

关键词：空心纳米颗粒电化学置换反应机理甲酸氧化

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中国大学生的价值观结构

中国大学生的价值观结构

作者：黄红颜华东师范大学

学位级别：硕士

本研究在Schwartz价值观量表的基础上,对其研究方法加以改进,以考察大学生的价值观结构和特点。除了从前人研究采用的价值观项目中筛选出适合当前中国现实的材料外,本研究还引入了情境化、开放式调查(包括自评和他评),以期获得更全面、... 详细信息

本研究在Schwartz价值观量表的基础上,对其研究方法加以改进,以考察大学生的价值观结构和特点。除了从前人研究采用的价值观项目中筛选出适合当前中国现实的材料外,本研究还引入了情境化、开放式调查(包括自评和他评),以期获得更全面、客观的大学生价值观原始项目。本研究的步骤是：(1)开展初选问卷,并从中提取高频项目,确定了由117个项目构成的《大学生价值观问卷》;(2)发放《大学生价值观问卷》,对回收的数据做探索性因子分析,探索大学生的价值观结构;(3)修订问卷,用结构方程建模验证步骤(2)建立的价值观结构。结果发现,大学生的价值观结构包括“国泰民安”、“品格自律”、“家庭本位”、“人情温暖”、“享乐主义”、“权力地位”、“外在形象”和“自我保全”等8种因子,并可进一步概括为“集体发展”和“个体发展”两个二阶因子。相较于Schwartz所得的价值观结构,本研究验证了其中“安全”、“遵从”、“仁慈”、“大同主义”、“享乐主义”、“权力”和“成就”等因子,去除了“自我导向”、“刺激”和“传统”等不适合当前中国社会的因子,并加入了Schwartz未考虑到的“外在形象”和“自我保全”两个中国大学生特有的因子。

关键词：大学生价值观价值观结构价值观问卷

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饭遭殃的家常红烧肉

职业教育(上旬刊) 2021年第10期 52-53页

作者：红颜

红烧肉是一道非常家常的菜，很多人都喜欢吃，也会烧。今天为大家介绍一种非常简单的做法，让不擅厨艺的你也能烧好这道色香味俱全的家常红烧肉，绝不会让你踩雷。做这道菜时，记得多蒸点饭哦。所需材料五花肉500克，生姜几片，蒜几片...

红烧肉是一道非常家常的菜，很多人都喜欢吃，也会烧。今天为大家介绍一种非常简单的做法，让不擅厨艺的你也能烧好这道色香味俱全的家常红烧肉，绝不会让你踩雷。做这道菜时，记得多蒸点饭哦。所需材料五花肉500克，生姜几片，蒜几片，小米辣一个，花椒几粒，黄酒大半碗，生抽小半碗，老抽少许，冰糖一颗。

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