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PRRSV tGP5基因克隆及pcDNA3.1-tGP5真核表达载体的构建

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PRRSV tGP5基因克隆及pcDNA3.1-tGP5真核表达载体的构建

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第三届猪病防控学术研讨会

作者：单虎秦晓冰黄娟陈佳杨瑞梅青岛农业大学

根据GenBank公布的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ORF5基因的核苷酸序列设计一对特异性引物,用PCR方法合成PRRSV S1 GP5蛋白非中和性表位缺失的tGP5基因,将基因定向连接在真核表达载体pcDNA3.1的HindⅢ和EcoRⅠ的多克隆位点之间,构建重... 详细信息

根据GenBank公布的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ORF5基因的核苷酸序列设计一对特异性引物,用PCR方法合成PRRSV S1 GP5蛋白非中和性表位缺失的tGP5基因,将基因定向连接在真核表达载体pcDNA3.1的HindⅢ和EcoRⅠ的多克隆位点之间,构建重组质枉pcDNA3.1-tGP5。转化DH5a感受态大肠杆菌,提取质粒。重组质粒经PCR、双酶切鉴定及DNA序列测定,成功构建pcDNA3.1-tGP5基因的重组体。

关键词： PRRSV 非中和表位 tGP5 pcDNA3.1-tGP5

来源： cnki会议评论

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cnki会议

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肝癌介入治疗联合三维适形放疗的疗效观察

中外医疗 2012年第27期31卷 41-41,43页

作者：蒋明马华兵杨瑞梅凡治国任超河南省安阳市肿瘤医院介入科河南安阳455000

目的探讨原发性肝癌(PHC)采用动脉化疗栓塞(TACE)联合三维适形放疗(3D-CRT)的临床疗效,为更好地进行临床应用提供依据。方法将该院收治的PHC患者55例,随机分为观察组28例和对照组27例。观察组行TACE联合3D-CRT治疗;对照组行单纯TACE治... 详细信息

目的探讨原发性肝癌(PHC)采用动脉化疗栓塞(TACE)联合三维适形放疗(3D-CRT)的临床疗效,为更好地进行临床应用提供依据。方法将该院收治的PHC患者55例,随机分为观察组28例和对照组27例。观察组行TACE联合3D-CRT治疗;对照组行单纯TACE治疗。结果观察组近期有效率(71.43%)明显高于对照组(29.63%),1年内观察组患者生存率(60.71%)明显优于对照组(29.63%),两组比较差异有统计学意义(P0.05),经治疗后缓解。结论 PHC采用TACE联合3D-CRT进行非手术治疗效果显著,可进一步在临床推广应用。

关键词：原发性肝癌(PHC) 动脉化疗栓塞(TACE) 三维适形放疗(3DCRT) 疗效

重组人P53腺病毒注射液联合介入治疗肝癌18例分析

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中国医疗前沿 2012年第10期7卷 39-39页

作者：蒋明马华兵杨瑞梅凡治国任超河南省安阳市肿瘤医院介入科

目的探讨重组人P53腺病毒注射液联合介入治疗肝癌的临床应用价值。方法选择18例患者使用重组人P53腺病毒注射液联合介入治疗,并与单纯使用介入治疗者比较两组临床疗效以及治疗后1个月患者Karuafsk变化情况。结果观察组有效率显著高于对... 详细信息

目的探讨重组人P53腺病毒注射液联合介入治疗肝癌的临床应用价值。方法选择18例患者使用重组人P53腺病毒注射液联合介入治疗,并与单纯使用介入治疗者比较两组临床疗效以及治疗后1个月患者Karuafsk变化情况。结果观察组有效率显著高于对照组(P<0.05),观察组患者治疗后1个月Karuafsk较治疗前显著提高(P<0.05),治疗后1个月观察组Karuafsk较对照组显著提高(P<0.05)。结论对于原发性肝癌,在介入注射化疗药物的基础上,使用重组人P53腺病毒注射液能更好地改善患者生存质量,提高临床效果,可以考虑临床使用。

关键词：重组人P53腺病毒介入肝癌

犬细小病毒VP2基因乳酸菌表达载体的构建及蛋白检测

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中国兽医杂志 2018年第10期54卷 7-10,15页

作者：段欣强张洪亮周保琨杨瑞梅单虎青岛农业大学动物医学院山东省预防兽医学重点实验室山东青岛266109 山东省即墨区畜牧兽医局山东青岛266200

本研究旨在克隆犬细小病毒VP2(CPV-VP2)基因,构建乳酸菌重组表达载体,以乳酸菌表达CPV-VP2目的蛋白,通过重组目的蛋白检测及分析,为CPV乳酸菌口服疫苗研究提供支撑。以PCR方法扩增CPV-VP2编码目的基因,纯化后连接表达载体pMG36e,构建重... 详细信息

本研究旨在克隆犬细小病毒VP2(CPV-VP2)基因,构建乳酸菌重组表达载体,以乳酸菌表达CPV-VP2目的蛋白,通过重组目的蛋白检测及分析,为CPV乳酸菌口服疫苗研究提供支撑。以PCR方法扩增CPV-VP2编码目的基因,纯化后连接表达载体pMG36e,构建重组乳酸菌表达载体p MG36e-VP2,电转至乳酸球菌MG1363感受态,经PCR鉴定、双酶切鉴定及测序分析,挑选阳性重组菌株,命名为:pMG36e-VP2-MG1363。使用诱导剂Nisin诱导表达,SDS-PAGE和Western Blotting鉴定重组蛋白。结果显示,成功构建重组表达载体pMG36e-VP2,SDS-PAGE,结果表明,重组目的蛋白分子大小约65 kD,与理论值相符; Western Blotting结果表明,重组目的蛋白可被犬源CPV阳性血清所识别,具有良好免疫反应性。本研究用乳酸菌成功表达犬细小病毒蛋白,为该病新型疫苗的研究提供基础。

关键词：犬细小病毒 VP2 活乳酸菌载体原核表达

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乳前牙反矫治后恒牙仍反临床分析

山东医药 2006年第7期46卷 45-45页

作者：杨瑞梅山东大学齐鲁儿童医院山东济南250022

猪圆环病毒2型鸡痘病毒活载体疫苗诱导的CTL杀伤活性检测

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动物医学进展 2011年第1期32卷 9-14页

作者：秦晓冰牛晋国杨瑞梅韩先杰孙月平单虎青岛农业大学山东青岛266109 山西省农科院畜牧兽医研究所山西太原030032

通过基因工程的方法获得猪圆环病毒2型(PCV-2)二联重组鸡痘活载体疫苗vUTAL-P1-ORF2ORF1和核酸疫苗pVAX1IL-18ORF2ORF1。将采取不同的免疫方案接种本体动物猪,在二免后15 d分别采猪抗凝血,用淋巴细胞分离液处理,得到淋巴细胞作为效应细... 详细信息

通过基因工程的方法获得猪圆环病毒2型(PCV-2)二联重组鸡痘活载体疫苗vUTAL-P1-ORF2ORF1和核酸疫苗pVAX1IL-18ORF2ORF1。将采取不同的免疫方案接种本体动物猪,在二免后15 d分别采猪抗凝血,用淋巴细胞分离液处理,得到淋巴细胞作为效应细胞;构建重组质粒p Display-ORF2,并转染PK-15传代细胞,用G418多次筛选得到靶细胞。借助CytoTox 96 Non-Radioactive Cytotoxicity Assay试剂盒从细胞免疫水平的特异性细胞毒性T淋巴细胞杀伤活性评价该重组鸡痘活载体疫苗的免疫效果。结果表明,采用"Pri me pVAX1-ORF2ORF1,boost vPUTAL-P1-ORF2ORF1"的免疫方案所获得的杀伤活性最高达66.005%±2.671%(效靶比50∶1)和38.870%±2.883%(效靶比25∶1),显著高于对照组(P<0.01)。说明vUTA-P1-ORF2ORF1可以诱导猪产生高水平的特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)杀伤活性,且以核酸疫苗首免,重组鸡痘活载体疫苗追加免疫的接种方案最优,为PCV-2基因工程疫苗的进一步研究奠定基础。

关键词：特异性细胞毒性T淋巴细胞猪圆环病毒2型重组鸡痘活疫苗细胞免疫

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肝动脉化疗栓塞治疗原发性肝癌200例分析

当代医学 2012年第27期18卷 70-71页

作者：蒋明马华兵杨瑞梅凡治国任超河南省安阳市肿瘤医院介入科 455000

目的探讨肝动脉化疗栓塞治疗原发性肝癌的临床疗效。方法对行肝动脉化疗栓塞治疗的原发性肝癌200例患者的临床资料进行回顾性分析,观察比较影响肝癌治疗的有关因素。结果肝动脉化疗栓塞治疗原发性肝癌的临床疗效显著,其一年、两年、三... 详细信息

目的探讨肝动脉化疗栓塞治疗原发性肝癌的临床疗效。方法对行肝动脉化疗栓塞治疗的原发性肝癌200例患者的临床资料进行回顾性分析,观察比较影响肝癌治疗的有关因素。结果肝动脉化疗栓塞治疗原发性肝癌的临床疗效显著,其一年、两年、三年、四年和五年生存率依次是75.6%、48.7%、23.6%、9.5%和7.9%。结论不能手术切除的原发性肝癌患者首选肝动脉化疗栓塞治疗,选择合适的治疗方案,可以获得明显的疗效。

关键词：肝动脉化疗栓塞原发性肝癌临床疗效

食管、贲门癌术后吻合口狭窄介入治疗(附128例病例)

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中国医疗前沿 2012年第9期7卷 51-51页

作者：蒋明马华兵杨瑞梅凡治国任超河南省安阳市肿瘤医院介入科

目的探讨食管、贲门癌术后吻合口狭窄介入治疗的临床疗效。方法将我院2009年2月-2011年8月收治的食管、贲门癌术后吻合口狭窄128例,给予介入治疗。观察比较患者治疗前后症状及并发症发生情况。结果患者治疗后积分(7.6±0.5)明显高于治疗... 详细信息

目的探讨食管、贲门癌术后吻合口狭窄介入治疗的临床疗效。方法将我院2009年2月-2011年8月收治的食管、贲门癌术后吻合口狭窄128例,给予介入治疗。观察比较患者治疗前后症状及并发症发生情况。结果患者治疗后积分(7.6±0.5)明显高于治疗前(1.3±0.5),差异具有统计学意义(P<0.05)。结论介入治疗食管、贲门癌术后吻合口狭窄的临床疗效确切,能够明显提高患者的生存质量,不良反应小,值得推广应用。

关键词：介入治疗食管、贲门癌术后吻合口狭窄临床观察

内蒙古乌兰察布市2015年8月1-2日强降水、冰雹、大风天气过程服务总结

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北京农业 2015年第32期 144-145页

作者：杨瑞梅董静陈杰郭晓丽刘烨焜内蒙古乌兰察布市气象局

2015年8月1-2日,受高空冷涡和底层冷暖空气的共同影响,内蒙古乌兰察布市出现强降雨、冰雹、大风等天气过程,造成乌兰察布市出现人员伤亡和重大经济损失。对此,乌兰察布市相关部分采取措施,力争做好气象服务工作,取得了一定成效。基于此... 详细信息

2015年8月1-2日,受高空冷涡和底层冷暖空气的共同影响,内蒙古乌兰察布市出现强降雨、冰雹、大风等天气过程,造成乌兰察布市出现人员伤亡和重大经济损失。对此,乌兰察布市相关部分采取措施,力争做好气象服务工作,取得了一定成效。基于此,介绍针对此次天气过程采取的气象服务工作,为今后应对类似天气现象提供参考。

关键词：冰雹气象局高空冷涡冷暖空气固态降水气象管理局气象服务工作乌兰察布市天气过程内蒙古