检索结果-南通市图书馆

单克隆抗体影响利什曼原虫侵入吞噬细胞的扫描电镜观察

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 1993年第4期11卷 267-269页

作者：瞿靖琦沈炳贵汪俊云包意芳杨玥涛中国预防医学科学院寄生虫病研究所上海200025

用扫描电镜观察在体外培养条件下利什曼原虫与小鼠腹腔吞噬细胞的相互关系。实验证明,前鞭毛体在抗杜氏利什曼单克隆抗体处理后,形态发生很大变异,部分原虫呈溶解现象,部分原虫仍可粘附于吞噬细胞外,但单克隆抗体经 56℃灭活后,则原虫... 详细信息

用扫描电镜观察在体外培养条件下利什曼原虫与小鼠腹腔吞噬细胞的相互关系。实验证明,前鞭毛体在抗杜氏利什曼单克隆抗体处理后,形态发生很大变异,部分原虫呈溶解现象,部分原虫仍可粘附于吞噬细胞外,但单克隆抗体经 56℃灭活后,则原虫形态无改变,且粘附在吞噬细胞周围,有些原虫的鞭毛及虫体前端已进入细胞内,认为其机制可能与前鞭毛体外膜上的配基与吞噬细胞受体的结合有关。

关键词：吞噬细胞单克隆抗体利什曼原虫

细粒棘球绦虫H3蛋白的克隆表达及囊型包虫病检测效果评价

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国血吸虫病防治杂志 2016年第5期28卷 541-544,593页

作者：朱慧慧高春花汪俊云杨玥涛石锋中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室科技部国家级热带病国际联合研究中心世界卫生组织热带病合作中心上海200025

目的克隆、表达细粒棘球绦虫基底膜特异性硫酸乙酰肝素聚糖核心蛋白（H3）,并评价其检测囊型包虫病的效果。方法将从细粒棘球绦虫原头节cDNA文库中免疫筛选的H3基因,克隆入pGEX-4T表达载体,将重组质粒转化大肠杆菌BL21细胞,用异丙基硫... 详细信息

目的克隆、表达细粒棘球绦虫基底膜特异性硫酸乙酰肝素聚糖核心蛋白（H3）,并评价其检测囊型包虫病的效果。方法将从细粒棘球绦虫原头节cDNA文库中免疫筛选的H3基因,克隆入pGEX-4T表达载体,将重组质粒转化大肠杆菌BL21细胞,用异丙基硫代半乳糖苷（IPTG）进行诱导表达,用亲和层析法纯化重组蛋白,用ELISA方法检测囊型包虫病患者血清、其他寄生虫病患者血清及健康人血清,评价其检测效能,并与本课题组制备的细粒棘球蚴包囊液粗抗原（Hydatid cyst fluid,HCF）和重组Ag B8/2进行比较。结果成功构建细粒棘球蚴pGEX-4T-H3重组质粒,并在原核细胞中成功表达。重组H3抗原、纯化HCF和rAgB8/2检测囊型包虫病患者血清的敏感度分别为84.0%（68/81）、90.1%（73/81）、77.8%（63/81）,3者差异无统计学意义（χ2=4.58,P〉0.05）。重组H3抗原与泡型包虫病患者、囊虫病患者及血吸虫病患者血清分别存在63.3%（19/30）、16.7%（5/30）和5.0%（1/20）的交叉反应,与50份健康者血清无交叉反应;H3检测总特异度为80.8%（105/130）,H3、纯化HCF[71.5%（93/130）]和rAgB8/2[82.3%（107/130）]特异度间差异无统计学意义（χ2=5.71,P〉0.05）。结论重组H3抗原在囊型包虫病诊断上具有潜在的应用价值。

关键词：细粒棘球绦虫基底膜特异性硫酸乙酰肝素聚糖核心蛋白(H3) 基因克隆表达诊断抗原酶联免疫吸附试验敏感度特异度交叉反应

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

PCR检测婴儿利什曼原虫无症状感染的研究

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2006年第2期24卷 92-96页

作者：高春花汪俊云杨玥涛包意芳中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所世界卫生组织疟疾血吸虫病和丝虫病合作中心上海200025

目的建立适合检测我国婴儿利什曼原虫无症状感染的PCR方法。方法选择6种常用于诊断内脏利什曼病的PCR引物(RV1-RV2、K13A-K13B、MC1-MC2、174-798、Pia3-Pia4和DBY-Ajs31),以培养的甘肃人株利什曼原虫前鞭毛体种植人抗凝全血抽提的DNA... 详细信息

目的建立适合检测我国婴儿利什曼原虫无症状感染的PCR方法。方法选择6种常用于诊断内脏利什曼病的PCR引物(RV1-RV2、K13A-K13B、MC1-MC2、174-798、Pia3-Pia4和DBY-Ajs31),以培养的甘肃人株利什曼原虫前鞭毛体种植人抗凝全血抽提的DNA为模板,确定了这6种PCR引物检测我国婴儿利什曼原虫的最适条件,并比较其检测的敏感性和特异性。选用两种敏感性和特异度均佳的引物对采自利什曼病疫区100份无利什曼病症状居民的静脉血进行检测。结果6种PCR引物检测的特异性均达到100%,而检测的敏感性各异,检测到的原虫数目从0.1～1000条原虫/ml,其中引物RV1-RV2(0.1个原虫/ml血)和K13A-K13B(1个原虫/ml血)敏感性较高。这两对引物对100份无症状居民血的阳性检出率分别为33%(33/100)和30%(30/100)。结论引物RV1-RV2和K13A-K13B适于检测我国婴儿利什曼原虫无症状感染。在我国甘肃动物源性利什曼病疫区,人群利什曼原虫无症状感染率颇高。

关键词：婴儿利什曼原虫无症状感染 PCR

抗杜氏和什曼原虫单克隆抗体的应用——Ⅱ.内脏利什曼病治疗前后循环抗原的检测

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 1991年第1期9卷 21-22页

作者：瞿靖琦许永湘包意芳杨玥涛汪俊云中国预防医学科学院寄生虫病研究所

以抗杜庆利什曼单克隆抗体L_(12)F_7检测黑热病病人的循环抗原。文中对1986～1989年收集并低温保存的118份血清加以检测,阳性率为88.9％;另检测经锑剂治疗后的患者血清57份,结果均为阴性。同时又以IFA检测体内抗体,阳性率为68.4％。这5... 详细信息

以抗杜庆利什曼单克隆抗体L_(12)F_7检测黑热病病人的循环抗原。文中对1986～1989年收集并低温保存的118份血清加以检测,阳性率为88.9％;另检测经锑剂治疗后的患者血清57份,结果均为阴性。同时又以IFA检测体内抗体,阳性率为68.4％。这57例治愈者经追踪观察并未出现复发及抗锑现象。因而用单克隆抗体检测循环抗原的另一优越性,可以作为疗效考核的新方法。

关键词：杜氏利什曼循环抗原单克隆抗体

恶性疟原虫乳酸脱氢酶特异性单克隆抗体的制备

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2005年第4期23卷 213-216页

作者：汪俊云包意芳杨玥涛汤林华中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所世界卫生组织疟疾血吸虫病和丝虫病合作中心上海200025

目的制备恶性疟原虫乳酸脱氢酶特异性单克隆抗体.方法克隆、表达恶性疟原虫乳酸脱氢酶基因,并以表达的重组蛋白免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备单克隆抗体,对所制备的单克隆抗体确定其亚类和效价,蛋白质印迹法(Western blotting) 分... 详细信息

目的制备恶性疟原虫乳酸脱氢酶特异性单克隆抗体.方法克隆、表达恶性疟原虫乳酸脱氢酶基因,并以表达的重组蛋白免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备单克隆抗体,对所制备的单克隆抗体确定其亚类和效价,蛋白质印迹法(Western blotting) 分析其特异性.结果成功克隆并表达了恶性疟原虫乳酸脱氢酶基因,以重组恶性疟原虫乳酸脱氢酶蛋白作为免疫源制备单克隆抗体,共筛选了15株能高效分泌效价在 1∶6 400～1∶51 200 特异抗体的细胞株,抗体亚类为IgG1或IgG2.所有抗体均能唯一识别恶性疟原虫虫源蛋白 Mr 33 000组分,而与疫区非疟疾发热病人的红细胞组分无交叉反应.结论以重组恶性疟原虫乳酸脱氢酶蛋白为免疫源成功制备了能识别天然恶性疟原虫乳酸脱氢酶蛋白的特异性单克隆抗体.

关键词：恶性疟原虫乳酸脱氢酶单克隆抗体

我国不同利什曼病流行区利什曼原虫分离株核糖体内转录间隔区1的多态性分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2019年第2期37卷 196-201页

作者：程芳洲高春花杨玥涛汪俊云中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所国家热带病研究中心世界卫生组织热带病合作中心科技部国家级热带病国际联合研究中心卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室上海200025

目的分析我国不同利什曼病流行区的利什曼原虫分离株核糖体内转录间隔区1 (ITS-1)序列的多态性。方法实验室培养10个分离自我国不同利什曼病流行区的利什曼原虫分离株,包括四川/甘肃山丘型内脏利什曼病流行区的SC6和Cy分离株,新疆喀什... 详细信息

目的分析我国不同利什曼病流行区的利什曼原虫分离株核糖体内转录间隔区1 (ITS-1)序列的多态性。方法实验室培养10个分离自我国不同利什曼病流行区的利什曼原虫分离株,包括四川/甘肃山丘型内脏利什曼病流行区的SC6和Cy分离株,新疆喀什人源型内脏利什曼病流行区的801和KS-2分离株,新疆伽师荒漠型内脏利什曼病流行区的JIASHI-1、 JIASHI-5、 XJ771分离株以及新疆克拉玛依皮肤利什曼病流行区的KXG-Xu、KXG-Liu和KXG-927分离株。收集利什曼原虫前鞭毛体,提取DNA, PCR扩增各利什曼原虫分离株的ITS-1并送测序,用GENEDOC软件对ITS-1序列进行比对分析,从GenBank下载利什曼原虫其他分离株的ITS-1序列,构建系统进化树,分析我国利什曼原虫分离株的亲缘关系。结果我国10个利什曼原虫分离株均扩增出单一的条带。序列分析结果显示, 801和KS-2分离株的ITS-1片段为316 bp,与MHOM/IN/80/DD8参照株比较其碱基突变率为0; JIASHI-1、 JIASHI-5和XJ771分离株为313 bp,碱基突变率为1.6%; KXG-Xu、 KXG-Liu和KXG-927分离株为312 bp,碱基突变率为1.6%; Cy和SC6分离株为318 bp,碱基突变率为0.6%。系统进化树显示,这10个利什曼原虫分离株ITS-1序列聚集成2个群和3个亚群,其中JIASHI-1、 JIASHI-5和XJ771分离株聚集为A亚群, KXG-Xu、 KXG-Liu和KXG-927分离株聚集为B亚群, A和B亚群聚集于群Ⅰ,为婴儿利什曼原虫; Cy、SC6、 801和KS2分离株聚集为C亚群,属群Ⅱ,为杜氏利什曼原虫。结论我国不同利什曼病流行区的利什曼原虫分离株的ITS-1序列存在多态性。

关键词：利什曼病利什曼原虫分离株内转录间隔区1 基因分型中国

婴儿利什曼原虫汶川株动基体小环DNA序列分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国病原生物学杂志 2013年第5期8卷 404-406,416页

作者：丁丹高春花杨玥涛张松汪俊云中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室世界卫生组织疟疾血吸虫病和丝虫病合作中心上海200025 新疆维吾尔自治区疾病预防控制中心新疆乌鲁木齐830002

目的分析我国婴儿利什曼原虫汶川株动基体小环DNA株内序列差异性。方法应用来自小环DNA保守区的一对引物KP1-KP2扩增汶川株婴儿利什曼原虫动基体小环DNA。扩增产物克隆于pGEM-T载体,随机选取20个阳性克隆进行双向测序,应用DNAStar软件... 详细信息

目的分析我国婴儿利什曼原虫汶川株动基体小环DNA株内序列差异性。方法应用来自小环DNA保守区的一对引物KP1-KP2扩增汶川株婴儿利什曼原虫动基体小环DNA。扩增产物克隆于pGEM-T载体,随机选取20个阳性克隆进行双向测序,应用DNAStar软件进行比对分析和开放阅读框预测,利用Mega5.0构建系统进化树。结果应用KP1-KP2引物从汶川株婴儿利什曼原虫扩增出动基体小环DNA片段,长约850bp。经序列比对可将20个阳性克隆序列区分为CQ18和CQ07两大类,进化分析显示这两类序列与杜氏利什曼原虫种团的原虫亲缘关系最近。CQ07序列含一较大开放阅读框,预计编码69个氨基酸残基的蛋白。结论婴儿利什曼原虫汶川株动基体小环DNA株内序列存在差异。

关键词：婴儿利什曼原虫动基体小环DNA 序列分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

美洲钩虫病患者血清优势抗体的检测分析

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2016年第1期34卷 40-43页

作者：杨益杨玥涛石锋高春花汪俊云中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室国家级热带病国际联合研究中心世界卫生组织热带病合作中心上海200025

目的检测钩虫成虫抗原对钩虫病患者血清的反应性,以分析钩虫病患者血清中识别抗原组分的优势特异抗体类或亚类。方法以美洲钩虫成虫粗抗原为包被抗原,应用辣根过氧化物酶(HRP)标记的羊抗人抗体(不同类或亚类)作为检测试剂进行酶联免疫... 详细信息

目的检测钩虫成虫抗原对钩虫病患者血清的反应性,以分析钩虫病患者血清中识别抗原组分的优势特异抗体类或亚类。方法以美洲钩虫成虫粗抗原为包被抗原,应用辣根过氧化物酶(HRP)标记的羊抗人抗体(不同类或亚类)作为检测试剂进行酶联免疫吸附试验(ELISA),分析比较钩虫病患者、健康人及其他寄生虫病患者的血清抗体的反应性。结果ELISA法分析显示,98份钩虫病患者血清含有特异抗体Ig M、Ig D、Ig E、Ig G、Ig G1、Ig G2、Ig G3和Ig G4的比例分别为41.84%、2.04%、1.02%、92.93%、19.39%、25.51%、17.35%和88.78%;而健康人和其他寄生虫病患者血清未检测到相应抗体的比例分别为77.61%、97.01%、92.54%、79.10%、95.52%、92.53%、92.53%和92.53%;若分别以这些特异抗体为检测靶,其诊断效能分别为56.36%、40.61%、38.18%、87.88%、50.30%、52.73%、47.88%和90.30%。Ig G4和Ig G作为检测靶分子的检测敏感性远高于Ig M、Ig D、Ig E及其他3种Ig G亚类(P0.05),Ig G4的特异性高于Ig G(χ2=4.97,P<0.05)。结论Ig G4抗体为美洲钩虫病患者(或感染者)血清中特异优势抗体。

关键词：美洲钩虫成虫抗原抗体 ELISA IgG4

利什曼原虫K26序列应用于我国利什曼原虫分离株鉴定的价值分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2020年第2期38卷 181-187页

作者：刘建秀高春花杨玥涛郑彬汪俊云中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所国家热带病研究中心世界卫生组织热带病合作中心科技部国家级热带病国际联合研究中心卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室上海200025

目的评价利什曼原虫K26序列应用于我国利什曼原虫分离株鉴定的价值。方法收集我国不同流行区的利什曼原虫16个分离株和6个国际参照株,培养后收集前鞭毛体,提取DNA,扩增K26序列并测序,应用ClustalX2进行序列比对,从GenBank下载同源性较... 详细信息

目的评价利什曼原虫K26序列应用于我国利什曼原虫分离株鉴定的价值。方法收集我国不同流行区的利什曼原虫16个分离株和6个国际参照株,培养后收集前鞭毛体,提取DNA,扩增K26序列并测序,应用ClustalX2进行序列比对,从GenBank下载同源性较高的利什曼原虫分离株的K26序列,构建系统进化树,分析我国不同流行区的利什曼原虫分离株的亲缘关系。结果我国16个利什曼原虫分离株和国际参照株DD8均扩增出单一条带,而5个非杜氏利什曼原虫复合体虫株均未扩增出任何条带。序列分析结果表明,我国人源型利什曼病流行区的3个分离株801、KS-2和KS-6均扩增出920 bp片段,自然疫源型利什曼病流行区的4个分离株XJ771、JIASHI-1、JIASHI-2和JIASHI-5均扩增出491 bp片段,人犬共患型利什曼病流行区4个分离株Cy、SC6、Hebei-Lv和Shanxi-Yang均扩增出404 bp片段,皮肤利什曼病流行区的5个分离株KXG-Xu、KXG-Liu、KXG-65、KXG-918和KXG-927均扩增出449 bp片段,且各流行区内虫株间的序列一致性均为100%。各流行区之间的虫株间的序列一致性较低,为40.2%~91.4%。系统进化树分析结果显示,我国16个利什曼原虫分离株聚集成2个群3个亚群,其中KXG-Xu、KXG-Liu、KXG-65、KXG-918、KXG-927、XJ771、JIASHI-1、JIASHI-2、JIASHI-5分离株聚集为A亚群,Cy、SC6、Hebei-Lv、Shanxi-Yang与婴儿利什曼原虫聚集为B亚群,A亚群和B亚群聚集为Ⅰ群;801、KS-2和KS-6分离株与杜氏利什曼原虫聚集为C亚群,进一步与国际参照株DD8聚集为Ⅱ群。结论利什曼原虫K26序列可应用于我国利什曼原虫分离株的鉴定。

关键词：利什曼病利什曼原虫分离株 K26 系统进化树中国