检索结果-南通市图书馆

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

转移人端粒酶逆转录酶基因的实验研究

西安交通大学学报（医学版） 2003年第6期24卷 549-551,557页

作者：杨玉琮李旭陈葳西安交通大学第一医院实验医学中心陕西西安710061

目的　转移人端粒酶逆转录酶基因 (hTERT基因 ) ,建立其转移体系。方法　用脂质体转染的方法将逆转录病毒载体PLNC hTERT转入 ψ 2细胞 ,用产病毒的 ψ 2细胞克隆培养上清重复感染PA317细胞 ,建立产毒PA317/hTERT细胞 ;通过感染内皮细... 详细信息

目的　转移人端粒酶逆转录酶基因 (hTERT基因 ) ,建立其转移体系。方法　用脂质体转染的方法将逆转录病毒载体PLNC hTERT转入 ψ 2细胞 ,用产病毒的 ψ 2细胞克隆培养上清重复感染PA317细胞 ,建立产毒PA317/hTERT细胞 ;通过感染内皮细胞检测基因转移效果。结果　ψ 2细胞培养上清重复感染 ,使PA317细胞所产病毒滴度提高 2 0倍 ,得到高滴度的PA317/hTERT包装细胞系。用该细胞系产生的病毒上清感染内皮细胞成功。

关键词：转移人端粒酶逆转录酶基因 hTERT基因脂质体内皮细胞病毒细胞培养

不同表型的人宫颈癌细胞亚克隆株的基因表达谱

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

西安交通大学学报（医学版） 2004年第6期25卷 562-566页

作者：陈葳李旭杨玉琮程小丽西安交通大学第一医院检验医学中心陕西西安710061

目的　采用基因芯片技术分析同一人宫颈癌细胞株来源 ,锚着依赖性不同的两个亚克隆细胞株的侵袭相关基因表达。方法　采用有限稀释法建立CS12 13细胞的CS0 3和CS0 7亚克隆细胞株 ,检测其在软琼脂中的集落形成率 ,分别用流式细胞术和免... 详细信息

目的　采用基因芯片技术分析同一人宫颈癌细胞株来源 ,锚着依赖性不同的两个亚克隆细胞株的侵袭相关基因表达。方法　采用有限稀释法建立CS12 13细胞的CS0 3和CS0 7亚克隆细胞株 ,检测其在软琼脂中的集落形成率 ,分别用流式细胞术和免疫组化法观察细胞黏附分子CD4 4和E cadherin、Fibronetin的表达 ,并将CS0 3和CS0 7细胞的总RNA经逆转录获得的cDNA作为探针 ,与含 10 11个与细胞信号转导和细胞膜受体相关基因表达谱芯片杂交 ,信号用ScanArray 30 0 0扫描分析。结果　CS0 3和CS0 7细胞的集落形成率分别是 0和 38.5 % ,CD4 4表达分别是 35 .1%和 13.7% ;两者的基因表达谱差异明显 ,CS0 3细胞中表达上调的基因为 12个 ,CS0 7细胞中有 2 1个基因表达增加 ,其中一些与细胞增生、迁移、凋亡 ,细胞间信号传导和肿瘤转移相关 ,包括p34cdc2 、转化生长因子 β刺激蛋白 (TSC2 2 )、纤维蛋白酶原活性因子抑制剂 (PAI 1)和桥粒相关蛋白 (PININ)等。结论　同一来源的人宫颈癌细胞株中有多个差异表达基因 ,它们参与人宫颈癌细胞的表型特征 ,可能影响肿瘤的进展。

关键词：官颈癌亚克隆基因芯片

免疫相关基因在同一膀胱癌亚克隆细胞株中的差异表达

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

细胞与分子免疫学杂志 2006年第5期22卷 625-627页

作者：杨玉琮李旭陈葳西安交通大学医学院第一附属医院实验医学中心陕西西安710061

目的:筛选和鉴定同一膀胱癌亚克隆细胞株中差异表达的与BCG免疫相关的基因。方法:以已建立的两株同一来源、不同生物学表型的膀胱移行细胞癌细胞系BLX和BLS211为材料,采用抑制性削减杂交技术(SSH)筛选差异表达的基因片段。结果:在BLX细... 详细信息

目的:筛选和鉴定同一膀胱癌亚克隆细胞株中差异表达的与BCG免疫相关的基因。方法:以已建立的两株同一来源、不同生物学表型的膀胱移行细胞癌细胞系BLX和BLS211为材料,采用抑制性削减杂交技术(SSH)筛选差异表达的基因片段。结果:在BLX细胞中获得9个高表达的基因,在BLS211细胞中获得15个高表达的基因。BLX细胞中有3个基因,即与卡介苗(BCG)免疫治疗相关的基因BCG诱导的膜蛋白(BIGM103)基因、纤维连接蛋白(FN)基因和补体因子B(BF)基因;BLS211细胞中有8个基因均为新的表达序列标签(EST),已被GenBank登录(登录号为DY50570813,DY2304478)。结论:SSH技术筛选表明,BIGM103等免疫相关基因的不同,可能与不同膀胱癌细胞对BCG免疫治疗的差异性有关;新的EST的获得,为进一步克隆全长、研究基因的功能创造了条件。

关键词：膀胱癌免疫相关基因抑制性消减杂交差异表达

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

人膀胱癌异质性表型相关基因的筛选与鉴定

南方医科大学学报 2006年第3期26卷 270-274页

作者：杨玉琮李旭陈葳西安交通大学医学院第一附属医院实验医学中心陕西西安710061

目的筛选和鉴定膀胱肿瘤异质性生物学表型相关的基因。方法以已建立的两株同一来源、不同生物学表型的膀胱移行细胞癌细胞系为材料,采用抑制性削减杂交技术筛选差异表达的基因片段,构建cDNA文库;挑取克隆进行筛选,获得差异表达片段,测... 详细信息

目的筛选和鉴定膀胱肿瘤异质性生物学表型相关的基因。方法以已建立的两株同一来源、不同生物学表型的膀胱移行细胞癌细胞系为材料,采用抑制性削减杂交技术筛选差异表达的基因片段,构建cDNA文库;挑取克隆进行筛选,获得差异表达片段,测序并与Genbank比对,Northern blotting验证差异片段在两株细胞系的不同表达。结果建立了两个消减文库,分别含有168和206个白色克隆,白色克隆含有约200￣700 bp的插入片段,对这些克隆进行筛选,获得35个差异表达基因片段,其中15个对应于细胞骨架蛋白、细胞代谢酶基因等已知基因,另外19个为未知功能基因,1个为新EST片段,注册Genbank(注册号为DR008207)。结论抑制性消减杂交技术是筛选、克隆差异表达基因的有效手段;keratin 7、Vimentin等细胞骨架蛋白的不同表达,与细胞形态的表型差异有关;DDH等代谢基因的不同,与细胞的药物敏感性差异相关;筛选到的新基因片段为进一步克隆其全长、研究基因功能提供了实验基础。

关键词：膀胱癌,表型,基因抑制性消减杂交

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

外源性端粒酶基因对人脐静脉内皮细胞的影响

细胞生物学杂志 2003年第6期25卷 365-369页

作者：杨玉琮李旭陈葳程小丽西安交通大学第一医院实验医学中心西安710061

为了观察外源性端粒酶逆转录酶基因(hTERT)在人脐静脉血管内皮细胞 (HUVEC)的表达及对细胞功能和生长的影响。采用逆转录病毒载体转导的方法 ,将hTERT基因转入HU VEC ,检测基因转导后内皮细胞端粒酶的活性和生物学特性。结果发现hTERT... 详细信息

为了观察外源性端粒酶逆转录酶基因(hTERT)在人脐静脉血管内皮细胞 (HUVEC)的表达及对细胞功能和生长的影响。采用逆转录病毒载体转导的方法 ,将hTERT基因转入HU VEC ,检测基因转导后内皮细胞端粒酶的活性和生物学特性。结果发现hTERT转导后细胞端粒酶表达阳性 ,未转导的亲代细胞为阴性 ;转导细胞的体外生存时间延长但未永生化。

关键词：外源性端粒酶基因人脐静脉内皮细胞端粒酶血管内皮细胞基因转导细胞培养

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

支气管肺炎患儿机体免疫功能变化的分析

免疫学杂志 2012年第6期28卷 506-509页

作者：程小丽陈葳杨玉琮李旭西安交通大学医学院第一附属医院检验科 710061 西安交通大学医学院转化医学中心 710061

目的通过对支气管肺炎患儿T细胞亚群、血清免疫球蛋白、血清补体及细胞因子变化的分析,探讨小儿支气管肺炎机体免疫功能状态及免疫学发病机制,为临床了解病情、选择适当的治疗方案提供理论依据。方法支气管肺炎组65例,男39例,女26例,年... 详细信息

目的通过对支气管肺炎患儿T细胞亚群、血清免疫球蛋白、血清补体及细胞因子变化的分析,探讨小儿支气管肺炎机体免疫功能状态及免疫学发病机制,为临床了解病情、选择适当的治疗方案提供理论依据。方法支气管肺炎组65例,男39例,女26例,年龄2个月～13岁,平均年龄4.1岁。对照组20例,男12例,女8例,年龄1～12岁,平均年龄4.3岁。应用多色流式细胞术检测T细胞亚群(CD3+、CD3+CD4+Th、CD3+CD8+Ts、CD3+CD4+Th/CD3+CD8+Ts)、应用免疫散射比浊法检测血清免疫球蛋白(IgG、IgA、IgM)、血清补体(C3、C4)、应用ELISA法检测血清细胞因子(IFN-γ、IL-4)。结果支气管肺炎组T细胞亚群改变明显,CD3+、CD3+CD4+Th显著低于对照组,有统计学意义(P<0.01);CD3+CD8+Ts显著高于对照组,有统计学意义(P<0.01);CD3+CD4+Th/CD3+CD8+Ts比值降低,与对照组相比,有统计学意义(P<0.05)。支气管肺炎组血清IgA、IgG水平显著低于对照组,有统计学意义(P<0.01);支气管肺炎组血清补体C3低于对照组,有统计学意义(P<0.05)。支气管肺炎组血清细胞因子IFN-γ浓度及Th1/Th2比值高于对照组,有统计学意义(P<0.05)。结论支气管肺炎患儿存在细胞免疫和体液免疫功能紊乱,对支气管肺炎患儿检测免疫功能有助于判断病情、指导治疗。

关键词：支气管肺炎 T细胞亚群免疫球蛋白血清补体细胞因子

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

人正常肾组织全长cDNA文库的构建及鉴定

西安交通大学学报（医学版） 2004年第3期25卷 217-219页

作者：成瑜李旭陈葳赵乐杨玉琮西安交通大学第一医院医学实验中心陕西西安710061

目的　构建人正常肾组织的cDNA文库并鉴定文库质量。方法　运用mRNA 5′末端的模板转换方法以powerscript逆转录酶进行转录 ,在mRNA的 5′末端添加一段 5′ oligo做为延伸后的模板 ,从而富集全长cDNAs。扩增后的cDNAs经sfiⅠ酶切、柱层... 详细信息

目的　构建人正常肾组织的cDNA文库并鉴定文库质量。方法　运用mRNA 5′末端的模板转换方法以powerscript逆转录酶进行转录 ,在mRNA的 5′末端添加一段 5′ oligo做为延伸后的模板 ,从而富集全长cDNAs。扩增后的cDNAs经sfiⅠ酶切、柱层析洗脱 ,重组于λTripIEx2 载体并包装后 ,测定滴度、重组率 ,扩增文库。随机挑取 8个噬菌斑行PCR反应扩增插入片段。结果　构建的cDNA文库滴度为 2 .6× 10 6pfu·mL-1,重组率 >95 % ,扩增后滴度达 9× 10 11pfu·mL-1。 8个插入片段长度为 0 .7～ 2 .0kb。结论　构建的人正常肾组织cDNA文库为高效全长的cDNA文库 ,符合cDNA文库的要求 ,可以用探针、抗体等做免疫学筛选 ,进一步探寻与肾脏疾病相关的基因。

关键词：肾组织 cDNA文库全长

子宫颈癌细胞亚克隆株细胞周期相关基因的研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华妇产科杂志 2002年第3期37卷 168-170,W002页

作者：陈葳李旭付伟杨玉琮陈丽宏程小丽西安交通大学第一医院实验医学中心 710061 陕西省人民医院妇产科

目的　探讨不同生长特性的人宫颈癌细胞亚克隆株CS0 3和CS0 7与其细胞周期相关基因的关系。方法　采用流式细胞仪对两株细胞进行细胞周期分析 ,用含有 2 34条人类全长细胞周期相关基因的cDNA表达芯片 ,对两个同一来源、生长特性不同的... 详细信息

目的　探讨不同生长特性的人宫颈癌细胞亚克隆株CS0 3和CS0 7与其细胞周期相关基因的关系。方法　采用流式细胞仪对两株细胞进行细胞周期分析 ,用含有 2 34条人类全长细胞周期相关基因的cDNA表达芯片 ,对两个同一来源、生长特性不同的人宫颈癌细胞亚克隆株CS0 3、CS0 7进行细胞周期相关基因的差异表达谱分析。结果　正常生长条件下培养的CS0 3细胞G1期百分比明显较CS0 7细胞高 ,而CS0 7细胞S期百分比则较CS0 3细胞有所增加 ;在无血清培养条件下CS0 3细胞在4 8h后凋亡 (亚G1期 )细胞百分比明显高于CS0 7细胞 ,并且随着时间的延长而增加。两个亚克隆细胞株CS0 3、CS0 7有 3个差异表达基因 ,分别为人BN5 1mRNA、人热休克蛋白 90 (hsp90 )mRNA和Mcl 1基因 ,荧光强度的比值分别是 0 4 80、0 4 79和 0 4 90。结论　不同生长特性的宫颈癌细胞亚克隆株与其细胞周期相关基因BN5 1、hsp90和Mcl

关键词：寡核苷酸序列分析基因表达调控细胞周期子宫颈癌亚克隆株

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

急性白血病跨系列抗原表达特点分析

中国实验诊断学 2011年第2期15卷 236-239页

作者：杨玉琮陈葳程小丽李旭西安交通大学医学院第一附属医院分子医学中心陕西西安710061

目的探讨急性白血病跨系抗原表达的特点和临床意义。方法采用三色流式细胞术和CD45/SSC双参数散点图设门方法,对临床初诊的白血病患者幼稚细胞分化抗原进行分析,用EGIL(白血病分型欧洲协作组)积分系统,以得分>和≤2进行分组,对病人的分... 详细信息

目的探讨急性白血病跨系抗原表达的特点和临床意义。方法采用三色流式细胞术和CD45/SSC双参数散点图设门方法,对临床初诊的白血病患者幼稚细胞分化抗原进行分析,用EGIL(白血病分型欧洲协作组)积分系统,以得分>和≤2进行分组,对病人的分型特征和临床特征进行分析。结果在99例具有淋系和髓系抗原表达的白血病中,髓系优势组占53.5%,淋系优势占11.1%,双高表达组占15.2%,双低表达组占20.2%。淋系优势和髓系优势组免疫分型与FAB分型基本一致,而免疫分型双高组和双低组的FAB细胞形态分布各有特点;跨系列抗原表达可见T与髓系、B与髓系、T B髓三系共表达的形式,以B与髓系共表达为多见,未见T与B共表达的形式;CD7、CD19、CD33是跨系列白血病常表达的抗原;CD7阳性在髓系优势组具有较高的表达率;双低下组外周血白细胞计数值和外周血计数>50×109/L的发生率均高于其他组。结论髓系优势为跨系列白血病的主要构成;免疫分型较FAB分型更客观和详细的反映了白血病细胞的分化状态;髓系优势组中CD7阳性可能是干细胞的一个标志;淋髓双低表达组的病人幼稚细胞数高,其恶性程度可能高。

关键词：白血病免疫分型跨系列抗原表达流式细胞术