检索结果-南通市图书馆

TaqMan实时荧光PCR检测菰米成分的方法建立

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

食品工业科技 2022年第21期43卷 344-349页

作者：杨爱馥万超刘雪华梁冰郑秋月姜丽大连海关辽宁大连116001 大连民族大学辽宁大连116600

本研究建立了一种能够快速检测食品中菰米成分的TaqMan实时荧光PCR方法。以菰米核糖体内转录间隔区(internal transcribed space, ITS)基因为检测靶标,设计特异性引物和探针,建立菰米成分的实时荧光PCR检测方法,并进行物种特异性分析、... 详细信息

本研究建立了一种能够快速检测食品中菰米成分的TaqMan实时荧光PCR方法。以菰米核糖体内转录间隔区(internal transcribed space, ITS)基因为检测靶标,设计特异性引物和探针,建立菰米成分的实时荧光PCR检测方法,并进行物种特异性分析、灵敏度分析以及实际应用检测。结果显示:本研究所建立的实时荧光PCR检测方法特异性强,仅对菰米品种中国菰(Z. latifolia)、水生菰(Z. aquatica)、沼生菰(Z. palustris)和德克萨斯菰(Z. texana)基因组DNA出现特异性扩增曲线,供试的其他30种谷物以及异源性动植物基因组DNA均无扩增曲线;该方法对菰米成分检测的灵敏度为0.001 ng/μL菰米基因组DNA或0.01%(W/W)菰米粉。应用该方法对100份市售的进口菰米、菰米碎米、杂粮米及混合米粉等样品进行检测,在80份进口菰米和5份菰米碎米中检测出菰米成分,其他样品中未检出菰米成分,与商品标识一致。该方法灵敏度高,特异性强,可快速高效地进行菰米成分的真实性甄别。

关键词：菰米 ITS基因 TaqMan实时荧光PCR 快速检测真实性鉴别

利用子房滴注法获得无载体骨架序列和选择标记的转基因玉米

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

遗传 2009年第1期31卷 95-100页

作者：杨爱馥苏乔安利佳大连理工大学环境与生命学院大连116024

转基因植物中的载体骨架序列和选择标记基因是引起生物安全性争论的根本原因,最直接、最有效的解决方法是在转化过程中不使用载体骨架序列和选择标记基因。本研究建立并优化了玉米子房滴注转化法,其操作要点是将DNA转化溶液直接滴加在... 详细信息

转基因植物中的载体骨架序列和选择标记基因是引起生物安全性争论的根本原因,最直接、最有效的解决方法是在转化过程中不使用载体骨架序列和选择标记基因。本研究建立并优化了玉米子房滴注转化法,其操作要点是将DNA转化溶液直接滴加在完全去除花柱的子房上。利用子房滴注法将无载体骨架序列和选择标记的线性GFP基因表达框转化玉米。PCR结果表明:适合子房滴注法转化的玉米品种为9818,最佳转化时间为授粉后18～20 h,在此条件下得到最高的PCR阳性率,为3.01%;Southern blotting结果表明外源基因的整合方式简单(1～2条杂交带);RT-PCR结果表明转基因植株中GFP基因能够在RNA水平上正常表达;在转基因植株的根和幼胚中观察到GFP表达。

关键词： GFP 无载体骨架无选择标记子房滴注法转基因玉米

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

几个影响黄瓜子叶体细胞胚胎发生的因素

植物生理学通讯 2003年第3期39卷 206-208页

作者：杨爱馥朱延明侯爱菊东北农业大学生命科学学院植物生物工程研究室哈尔滨150030

黄瓜品种“叶三旱”是体细胞胚胎发生的理想基因型 ;愈伤组织诱导阶段和胚胎发生阶段分别采用 9%和 6 %的蔗糖浓度 ,可促进体细胞胚胎发生 ;胚诱导培养基中添加 6 BA 0 .5mg·L-1,体细胞胚胎发生率较高 (达到 6 7.8% ) ;愈伤组织诱导... 详细信息

黄瓜品种“叶三旱”是体细胞胚胎发生的理想基因型 ;愈伤组织诱导阶段和胚胎发生阶段分别采用 9%和 6 %的蔗糖浓度 ,可促进体细胞胚胎发生 ;胚诱导培养基中添加 6 BA 0 .5mg·L-1,体细胞胚胎发生率较高 (达到 6 7.8% ) ;愈伤组织诱导阶段甘露醇与蔗糖配合使用 ,可提高体细胞胚胎发生率 (高达 82 .2 % )。

关键词：黄瓜子叶体细胞胚胎发生

双色实时荧光聚合酶链式反应法检测产玉米赤霉烯酮毒素的黄色镰孢菌

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

食品安全质量检测学报 2022年第5期13卷 1488-1494页

作者：李鑫杨爱馥陈亮蒋斌郝风涛董伟峰郑秋月大连海关技术中心大连116001 河南工业大学生物工程学院郑州450001 大连友谊粮食储备库有限公司大连116600 大连民族大学生命科学学院大连116600

目的建立双色实时荧光聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)法同时检测黄色镰孢菌(Fusarium culmorum)及其所产玉米赤霉烯酮毒素合成基因的方法。方法依据EF1α基因和PKS基因,优化建立双色实时荧光PCR反应体系和扩增条件;建... 详细信息

目的建立双色实时荧光聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)法同时检测黄色镰孢菌(Fusarium culmorum)及其所产玉米赤霉烯酮毒素合成基因的方法。方法依据EF1α基因和PKS基因,优化建立双色实时荧光PCR反应体系和扩增条件;建立粮食霉变模型,检测霉变粮食中产毒真菌,验证方法的特异性、灵敏度和重复性。结果应用本研究设计的引物和探针,仅产玉米赤霉烯酮毒素的黄色镰孢菌EF1α和PKS基因出现特异性扩增,其余真菌扩增结果均为阴性;检出限达3.5×10^(2)CFU/mL,重复性良好;且采用此方法对粮食霉变模型中选取的样品进行检测,可检出产玉米赤霉烯酮的黄色镰孢菌。结论该方法可准确鉴定霉变粮食中的产玉米赤霉烯酮毒素的黄色镰孢菌,实现在真菌毒素未产生前或者产生早期,对粮食受真菌及真菌毒素污染的情况进行早期监控。

关键词：黄色镰孢菌玉米赤霉烯酮毒素 EF1α基因 PKS基因双色实时荧光聚合酶链式反应法

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

基于高通量测序分析进口大麦真菌多样性

食品科技 2022年第11期47卷 297-302页

作者：杨爱馥姜红旭孙赟梁冰崔博采郑秋月姚丽锋姜丽大连海关辽宁大连116001 大连民族大学辽宁大连116600 拱北海关广东珠海519020

文章介绍了高通量测序技术在食品安全及植物病害真菌检疫中的应用。利用Illumina-Hiseq测序技术,对进口和国产大麦的真菌多样性进行了研究。从澳大利亚、法国、加拿大和国产大麦样品中共获得331054个ITS序列,系统分类学分析将其归类为6... 详细信息

文章介绍了高通量测序技术在食品安全及植物病害真菌检疫中的应用。利用Illumina-Hiseq测序技术,对进口和国产大麦的真菌多样性进行了研究。从澳大利亚、法国、加拿大和国产大麦样品中共获得331054个ITS序列,系统分类学分析将其归类为6门、25纲、50目、80科、115属、158种,表明样品的真菌多样性较高。进口大麦和国产大麦的优势真菌均以子囊菌门Ascomycota和担子菌门Basidiomycota为主,两者之和占到全部真菌的97.46%~99.97%;优势菌属为李维菌属Lewia、隐球菌属Cryptococcus、Udeniomyces菌属、埃里格孢属Embellisia、锁掷酵母属Sporidiobolus、赤霉属Gibberella、蜡蚧菌属Lecanicillium、链格孢属Alternaria、红酵母属Rhodotorula、曲霉属Aspergillus、格孢腔菌属Pleospora等。韦恩图分析结果显示法国、加拿大、澳大利亚和中国的大麦真菌群落种类差异较大,每个产地的大麦真菌群落有各自的特性真菌。文章利用高通量测序建立了进口和国产大麦真菌多样性生物信息学数据库,不仅能够指导以大麦为原料的食品工业的安全生产、产品质量保障,也为进出口大麦的生物安全监测预警、风险防范及管控提供了科学的数据支持。

关键词：大麦高通量测序真菌多样性

仿刺参profilin基因全长cDNA的克隆及表达分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国农业科技导报 2013年第2期15卷 159-167页

作者：董颖高杉陈仲杨爱馥姜北关晓燕王摆周遵春辽宁省海洋水产科学研究院辽宁省海洋水产分子生物学重点实验室辽宁大连116023

仿刺参(Apostichopus japonicus)是我国北方沿海重要养殖品种之一。克隆了仿刺参profilin基因全长cDNA序列,并分析了基因的表达规律。该基因cDNA序列全长787 bp,5'-非翻译区(5'-untranslated region,UTR)长205 bp,3'-UTR长204 bp,开放阅读框378 bp,编码125个氨基酸,预测蛋白分子量13.4 kDa。仿刺参Profilin蛋白的PROF保守结构域中含有肌动蛋白互作位点、多聚脯氨酸结合位点和PIP2互作位点。氨基酸序列比对结果显示,仿刺参Profilin与丝盘虫(Trichoplax adhaerens)和囊舌虫(Saccoglossus kowalevskii)相似度最高,为46%。Quantitative real-time PCR结果显示,profilin mRNA在仿刺参未受精卵、受精卵、多细胞期、囊胚期、原肠期、小耳状幼体、中耳状幼体、大耳状幼体、樽型幼体、五触手幼体和稚参11个发育阶段及幼参的体壁、体腔细胞、肠道和呼吸树中均有表达;在仿刺参的不同发育阶段中,未受精卵至原肠期profilin mRNA表达量低,从小耳状幼体至稚参表达量增高;在仿刺参的不同组织中,profilin mRNA在体腔细胞中的表达量最高。经过棘皮动物免疫系统有效激活物脂多糖LPS的刺激,体腔细胞中profilin mRNA表达量显著升高,为仿刺参养殖病害的防控提供科学依据。

关键词：仿刺参 profilin 序列分析基因表达 LPS刺激

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

诱导黄瓜直接器官发生主要影响因素的研究

园艺学报 2003年第1期30卷 101-103页

作者：侯爱菊朱延明杨爱馥张彬彬东北农业大学生命科学学院植物生物工程研究室哈尔滨150030

对诱导黄瓜直接器官发生的主要因素进行了探讨。结果表明 :外植体类型、基因型及植物生长调节剂对再生频率均有显著影响。子叶节是最佳的外植体类型 ;‘长春密刺’及‘龙杂黄七号’再生频率较高 ,分别达到 93.2 %和 92 .5 % ,前者每块... 详细信息

对诱导黄瓜直接器官发生的主要因素进行了探讨。结果表明 :外植体类型、基因型及植物生长调节剂对再生频率均有显著影响。子叶节是最佳的外植体类型 ;‘长春密刺’及‘龙杂黄七号’再生频率较高 ,分别达到 93.2 %和 92 .5 % ,前者每块外植体上的平均芽数 (13.2 )极显著高于后者 (3.1) ;6 BA单独存在即可诱导产生丛生芽 ,0 .

关键词：影响因素黄瓜再生体系直接器官发生芽分化外植体植物生长调节剂基因型

DREB2A基因的克隆、序列分析及其植物表达载体的构建

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

东北农业大学学报 2005年第1期36卷 36-40页

作者：李杰朱延明吴迪杨爱馥柏锡东北农业大学生命科学学院黑龙江哈尔滨150030

研究提取盐处理的拟南芥植株叶片总RNA,用DREB2A基因特异引物通过RT-PCR扩增出1050bp的片段,并将该片段克隆至pUC18上。序列分析结果表明,该克隆序列与GenBank上的DREB2A基因序列同源性达100%。进一步将DREB2A基因分别克隆至植物表达载... 详细信息

研究提取盐处理的拟南芥植株叶片总RNA,用DREB2A基因特异引物通过RT-PCR扩增出1050bp的片段,并将该片段克隆至pUC18上。序列分析结果表明,该克隆序列与GenBank上的DREB2A基因序列同源性达100%。进一步将DREB2A基因分别克隆至植物表达载体卡盒pCCE12和pCC29A上,构建了分别由E12启动子、rd29A启动子调控的DREB2A基因植物表达载体pCDRE12和pCDR29A。通过冻融法将重组质粒导入根癌农杆菌LBA4404中,为农杆菌介导的DREB2A基因对植物的遗传转化奠定基础。

关键词： DREB2A基因基因克隆载体构建

仿刺参过氧化氢酶基因全长cDNA的克隆及表达分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国农业科技导报 2014年第2期16卷 127-134页

作者：高杉周遵春董颖杨爱馥陈仲王摆关晓燕蒋经伟姜北辽宁省海洋水产科学研究院辽宁省海洋水产分子生物学重点实验室辽宁大连116023

研究仿刺参(Apostichopus japonicus)免疫相关基因的功能和作用机制可为仿刺参养殖病害的防控提供科学依据。克隆了仿刺参过氧化氢酶(catalase)基因的全长cDNA序列,全长1 885 bp,其中5'-非翻译区(5'-untranslated region,UTR)长76 bp,3'... 详细信息

研究仿刺参(Apostichopus japonicus)免疫相关基因的功能和作用机制可为仿刺参养殖病害的防控提供科学依据。克隆了仿刺参过氧化氢酶(catalase)基因的全长cDNA序列,全长1 885 bp,其中5'-非翻译区(5'-untranslated region,UTR)长76 bp,3'-UTR长306 bp,开放阅读框(open reading frame,ORF)1 503 bp,编码500个氨基酸,预测蛋白分子量为56.56 kDa。氨基酸序列比对结果显示,仿刺参Catalase与三角帆蚌(Hyriopsis cumingii)和紫海胆(Strongylocentrotus purpuratus)的相似度最高,为75%。仿刺参catalase cDNA推导的氨基酸序列具有过氧化物酶定位信号PTS2、与还原型辅酶Ⅱ(NADPH)结合的氨基酸残基及与其它物种高度保守的Catalase近端血红素配体签名序列(351RLFSYSDTH359)。系统进化分析显示仿刺参处于无脊椎动物分支中,和紫海胆位于同一小支上。实时定量PCR结果显示,catalase mRNA在仿刺参肠、体壁、肌肉、呼吸树、体腔细胞和管足中均有表达,在肠中表达量最高。在细菌脂多糖LPS刺激后4 h,体腔细胞中catalase mRNA表达量显著升高,表明仿刺参的catalase基因在应对外来病原菌刺激的免疫应答中发挥了重要作用。

关键词：仿刺参过氧化氢酶基因 LPS刺激