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菌根真菌对植物氮素利用影响研究进展

华北农学报 2023年第S1期38卷 348-353页

作者：刘春雨杨智宇李丽丽杨洪一东北林业大学生命科学学院黑龙江哈尔滨150040 黑龙江省林业科学研究所黑龙江哈尔滨150081 黑龙江省酶与类酶工程重点实验室黑龙江哈尔滨150040

氮素是植物生长发育的必需元素,是陆地生态系统初级生产力的主要限制因子,对植物生长发育有重要意义。菌根真菌与植物形成共生关系,促进植物从土壤中吸收氮素,减少氮素对植物生长的限制,增强土壤-菌根真菌-植物三者之间的氮素交流,在氮... 详细信息

氮素是植物生长发育的必需元素,是陆地生态系统初级生产力的主要限制因子,对植物生长发育有重要意义。菌根真菌与植物形成共生关系,促进植物从土壤中吸收氮素,减少氮素对植物生长的限制,增强土壤-菌根真菌-植物三者之间的氮素交流,在氮循环中起重要作用。从菌根真菌对不同形态氮素的利用、菌根真菌影响植物氮代谢、菌根真菌对土壤氮循环的生态学意义等方面进行了综述。基于当前菌根真菌对植物氮素利用影响的研究现状,建议结合基因组学、转录组学、蛋白组学及环境基因组学技术,重点研究菌根真菌-植物共生体的氮转运机制,解析菌根真菌-植物-土壤间氮素交流的主要路径及基因互作网络,以期促进植物氮素利用率,减少氮肥的施用,促进农业可持续发展。

关键词：菌根真菌氮素谷氨酰胺合成酶共生代谢机理

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平菇病毒dsRNA的提取及脱除

北方园艺 2013年第12期 111-113页

作者：付月月杨洪一东北林业大学生命科学学院黑龙江哈尔滨150040

以平菇为试材,采用改进SDS法从平菇组织中提取病毒特异dsRNA,并分别采用化学药剂-菌丝尖端处理和高温-菌丝尖端处理对平菇中的病毒进行了脱毒处理。结果表明:病毒dsRNA特点显示其与国外报道的平菇病毒dsRNA一致。其中高温-菌丝尖端脱除... 详细信息

以平菇为试材,采用改进SDS法从平菇组织中提取病毒特异dsRNA,并分别采用化学药剂-菌丝尖端处理和高温-菌丝尖端处理对平菇中的病毒进行了脱毒处理。结果表明:病毒dsRNA特点显示其与国外报道的平菇病毒dsRNA一致。其中高温-菌丝尖端脱除处理的效果最好,可有效脱除平菇病毒;病毒唑、放线菌酮及病毒唑与盐酸吗啉胍联合菌丝尖端脱除处理,可使病毒dsRNA条带减弱。该试验建立了从平菇组织中提取病毒dsRNA的技术体系,可有效对平菇中的病毒进行鉴定。

关键词：平菇 dsRNA 脱毒

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辣椒轻斑驳病毒的分子杂交检测

湖南农业大学学报（自然科学版） 2015年第4期41卷 360-363页

作者：刘崇高颖杨洪一东北林业大学生命科学学院黑龙江哈尔滨150040

为探索辣椒轻斑驳病毒(pepper mild mottle virus,PMMo V)的分子杂交技术检测方法,以感病辣椒叶片为试材,用改良CTAB法从辣椒叶片中提取总核酸,运用RT–PCR技术扩增出PMMo V特异片段。以带有PMMo V特异片段的质粒DNA为模板,以用PCR技术... 详细信息

为探索辣椒轻斑驳病毒(pepper mild mottle virus,PMMo V)的分子杂交技术检测方法,以感病辣椒叶片为试材,用改良CTAB法从辣椒叶片中提取总核酸,运用RT–PCR技术扩增出PMMo V特异片段。以带有PMMo V特异片段的质粒DNA为模板,以用PCR技术制备的地高辛标记PMMo V c DNA探针检测PMMo V。结果表明:1)干燥叶片、新鲜叶片中提取的总核酸稀释80、640倍(相当于12.5、1.60μg叶片)后仍可检测到其中的PMMo V;干燥叶片利于保存及长距离转运,利于对大批量样品进行集中检测;2)采用快速提取法提取叶片总核酸,可从稀释80倍(约12.5μg叶片)的总核酸样品中检测到PMMo V。该技术体系可基本满足常规检测试验的需要。

关键词：辣椒轻斑驳病毒核酸辣椒叶片地高辛标记

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北柴胡毛状根诱导及其植株再生体系的建立

药学学报 2013年第9期48卷 1491-1497页

作者：孙晶徐洁森赵立子魏建和杨洪一隋春中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所北京100193 东北林业大学生命科学院黑龙江哈尔滨150040 中草药物质基础与资源利用教育部重点实验室北京100193

本研究从设计多种诱导条件出发,探索建立稳定的柴胡毛状根诱导体系。发根农杆菌A4侵染北柴胡无菌苗叶基部,共培养3天后,转入抑菌培养,10天开始出现毛状根,经4～5周培养,转为液体摇培,获得大量毛状根,诱导产生的毛状根可再生成植株。毛... 详细信息

本研究从设计多种诱导条件出发,探索建立稳定的柴胡毛状根诱导体系。发根农杆菌A4侵染北柴胡无菌苗叶基部,共培养3天后,转入抑菌培养,10天开始出现毛状根,经4～5周培养,转为液体摇培,获得大量毛状根,诱导产生的毛状根可再生成植株。毛状根再生成植株有两种方式:一种是液体摇培的毛状根自发脱落形成幼苗的继续培养,另一种是将毛状根产生脱落的类愈伤组织置于经筛选的再生固体培养基上再生成植株。柴胡毛状根及其植株再生体系的建立,为开展柴胡次生代谢研究,尤其是利用农杆菌介导的遗传转化研究和利用奠定了基础。由毛状根诱导出再生植株在新种质产生和品种改良选育方面具有应用价值。

关键词：北柴胡发根农杆菌毛状根再生植株

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草莓斑驳病毒的分子杂交检测

湖南农业大学学报（自然科学版） 2014年第3期40卷 273-276页

作者：李丽丽杨洪一黑龙江省林业科学研究所黑龙江哈尔滨150081 东北林业大学生命科学学院黑龙江哈尔滨150040

为探索分子杂交技术在草莓斑驳病毒(Strawberry mottle virus,SMoV)检测中的运用,利用CTAB法从草莓叶片中提取总核酸,并以此为模板,利用特异引物扩增SMoV非编码区序列,经克隆、测序获得SMoV非编码区序列。系统进化分析结果显示:本研究... 详细信息

为探索分子杂交技术在草莓斑驳病毒(Strawberry mottle virus,SMoV)检测中的运用,利用CTAB法从草莓叶片中提取总核酸,并以此为模板,利用特异引物扩增SMoV非编码区序列,经克隆、测序获得SMoV非编码区序列。系统进化分析结果显示:本研究中的分离物与GenBank中已报道的分离物的亲缘关系较远,独立形成1个小的进化支。以带有病毒特异片段的质粒为模板,运用PCR技术制备了地高辛标记的cDNA探针。以草莓感染SMoV叶片为试材,利用地高辛标记探针可有效检测草莓叶片中的SMoV,草莓总核酸样品稀释10倍后仍可有效检测。

关键词：草莓斑驳病毒分子杂交技术 cDNA探针

间接原位RT-PCR法检测辣椒叶组织中辣椒轻斑驳病毒的分布

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园艺学报 2015年第3期42卷 489-495页

作者：杨洪一郭世辉李丽丽东北林业大学生命科学学院哈尔滨150040 黑龙江省林业科学研究所哈尔滨150081

为了了解辣椒轻斑驳病毒(Pepper mild mottle virus,PMMoV)在辣椒组织中的分布特点,探索利用间接原位RT-PCR技术对病毒在辣椒组织中进行定位。利用改进的CTAB法从辣椒叶片中提取总RNA,利用RT-PCR技术扩增出PMMoV的特异片段,并经克隆测序... 详细信息

为了了解辣椒轻斑驳病毒(Pepper mild mottle virus,PMMoV)在辣椒组织中的分布特点,探索利用间接原位RT-PCR技术对病毒在辣椒组织中进行定位。利用改进的CTAB法从辣椒叶片中提取总RNA,利用RT-PCR技术扩增出PMMoV的特异片段,并经克隆测序,证明其为PMMoV的特异片段。利用PCR技术,制备出了地高辛标记的特异cDNA探针。对原位RT-PCR反应体系进行优化,经过切片制备(切片厚度7μm、应用Superfrost plus正电荷防脱载玻片)、预处理(1 mg·L^(-1)蛋白酶K消化5 min)、RT-PCR(37℃反转录2.5h、PCR退火温度为58℃)、杂交检测,建立了应用间接原位RT-PCR技术检测PMMoV在辣椒组织中分布的方法。原位RT-PCR结果显示,叶片组织中PMMoV阳性信号主要分布于栅栏组织,其次是海绵组织,表皮组织中也有少量阳性信号。此外,叶柄中可见少量阳性信号,主要位于表皮组织。

关键词：辣椒辣椒轻斑驳病毒原位RT-PCR 地高辛组织定位 cDNA

利用多重RT-PCR技术检测草莓病毒的研究

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植物病理学报 2007年第5期37卷 549-552页

作者：杨洪一张志宏李丽丽赵敏东北林业大学生命科学学院哈尔滨150040 沈阳农业大学园艺学院沈阳110161

Coat protein gene of 12 isolates of Strawberry vein banding virus(SVBV) was studied by multiple sequence alignment and the primers located in conserved region were *** detection protocol for SVBV by reverse transcriptase polymerase chain reaction(RT-PCR) was *** primers of multiplex RT-PCR were selected by primer-primer interactions and the melting *** annealing temperature,the concentration of PCR buffer,the extension temperature,the extension time and the concentration of pri-mers were optimized,respectively.A multiplex RT-PCR assay was made for simultaneous detecting Strawberry mottle virus(SMoV),Strawberry mild yellow edge virus(SMYEV) and *** field-grown strawberries and microplants were detected *** was the first report that multiplex RT-PCR was used to assay the efficacy of strawberry viruses elimination.

关键词：草莓镶脉病毒 PCR技术斑驳病毒技术检测 virus RT 多重混合侵染

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草莓斑驳病毒分子变异及PCR检测技术研究

中国农业科学 2008年第7期41卷 1983-1988页

作者：杨洪一李丽丽代红艳张志宏东北林业大学生命科学学院沈阳农业大学园艺学院

【目的】明确草莓斑驳病毒(Strawberry mottle virus,SMoV)的分子变异特点;探索利用嵌套PCR和转录增强技术检测SMoV的方法。【方法】利用RT-PCR扩增SMoV3′非编码区(non-coding region,NCR)和大外壳蛋白(large coat protein,LCP)基因特异片段,并对扩增产物进行克隆测序。利用生物信息学软件分析不同地区分离物变异特点及系统发育关系。参考测序结果,在SMoV基因组保守区设计引物,利用嵌套PCR和转录增强技术检测SMoV。【结果】获得了SMoV中国分离物的NCR区和部分LCP基因核酸序列,不同分离物部分LCP基因核酸序列同源性为76.8%～99.7%。系统进化分析显示不同分离物呈现轻微的地理相关性。3个波兰分离物,4个中国分离物中的3个,7个荷兰分离物中的4个分别聚集成一簇;2个德国分离物与其它分离物亲缘关系较远,形成一个独立的分支。建立了利用半嵌套PCR和转录增强技术检测SMoV的技术体系,灵敏度高于常规PCR。【结论】SMoV不同分离物变异复杂,德国分离物可能是一个代表特殊株系的群体;基于定位基因组保守区引物,利用嵌套PCR和转录增强技术可有效检测SMoV。

关键词：草莓斑驳病毒 RT-PCR 嵌套PCR 变异系统进化分析

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玉竹锐顶镰孢菌的生物学特性及药剂防治

中国农学通报 2010年第9期26卷 315-318页

作者：周阳阳杨洪一东北林业大学生命科学学院哈尔滨150040

为了研究和掌握玉竹褐斑病的发生规律及更好的防治病害,从温度、pH、光照、碳源、氮源对玉竹锐顶镰孢菌(Fusarium acuminatum)菌落生长的影响以及不同种类杀菌剂对病菌的抑菌效果进行了研究。结果表明,锐顶镰孢菌菌丝生长最适温度为28℃... 详细信息

为了研究和掌握玉竹褐斑病的发生规律及更好的防治病害,从温度、pH、光照、碳源、氮源对玉竹锐顶镰孢菌(Fusarium acuminatum)菌落生长的影响以及不同种类杀菌剂对病菌的抑菌效果进行了研究。结果表明,锐顶镰孢菌菌丝生长最适温度为28℃,最适pH为7.0,光暗交替有利于菌丝生长,以可溶性淀粉为碳源、以甘氨酸为氮源时利用最优。药剂筛选中代森铵和吡唑醚菌酯对玉竹锐顶镰孢菌的抑制效果最优。通过对玉竹锐顶镰孢菌生物学特性的了解,得出有机硫类和唑类杀菌剂均可达到一定的防治作用。

关键词：玉竹锐顶镰孢菌生物学特性杀菌剂防治