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绝经后骨质疏松小鼠骨髓间充质干细胞免疫相关因子抗体芯片检测及关键差异基因分析

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中国组织工程研究 2024年第25期28卷 3947-3954页

作者：杨杉杉欧阳仁俊田佳令狐敏王振杨晓红遵义医科大学附属口腔医院口腔修复科贵州省遵义市563006 遵义医科大学基础药理教育部重点实验室贵州省遵义市563006

背景:近年来,绝经后骨质疏松症骨骼与免疫系统之间相互作用机制的研究已成为热点,但关键免疫相关因子表达改变对绝经后骨质疏松症的影响尚不明确,仍需进一步探索。目的:通过生物信息学方法探讨绝经后骨质疏松症小鼠骨髓间充质干细胞免... 详细信息

背景:近年来,绝经后骨质疏松症骨骼与免疫系统之间相互作用机制的研究已成为热点,但关键免疫相关因子表达改变对绝经后骨质疏松症的影响尚不明确,仍需进一步探索。目的:通过生物信息学方法探讨绝经后骨质疏松症小鼠骨髓间充质干细胞免疫相关因子差异化表达情况。方法:通过卵巢切除手术构建绝经后骨质疏松症小鼠模型,采用全骨髓贴壁法获取骨髓间充质干细胞并稳定传代至第2代,使用RayBio L-Series Mouse Antibody Array 308 Glass Slide Kit免疫相关因子抗体芯片检测卵巢切除组及假手术组小鼠骨髓间充质干细胞中存在差异表达的蛋白,对检测结果进行GO、KEGG富集分析及PPI网络分析,通过MCC、EPC及MNC算法所得值筛选共同的Hub基因。结果与结论:共获得68个差异表达基因。GO分析发现差异表达基因富集于免疫系统过程、胞外区、信号受体结合等条目。KEGG分析发现差异基因主要富集于细胞因子-细胞因子受体的相互作用、肿瘤坏死因子信号通路和趋化因子信号通路等条目。通过对68个差异表达基因构建PPI网络分析进一步筛选得到了8个Hub基因,绘制小提琴图和相关性矩阵发现8个Hub基因的表达水平在卵巢切除组均较假手术组显著下调。结果显示,绝经后骨质疏松症小鼠骨髓间充质干细胞存在差异性表达的免疫相关因子,筛选得到其中的关键基因主要涉及细胞因子-细胞因子受体的相互作用、免疫系统相关过程等具有潜在靶向的信号通路及细胞生物学过程,为绝经后骨质疏松症的诊治和预防提供新的靶点。

关键词：骨质疏松绝经后骨质疏松症骨髓间充质干细胞卵巢切除免疫相关因子生物信息学

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中西医治疗溃疡性结肠炎的研究进展

中国科技期刊数据库医药 2024年第6期 0036-0040页

作者：王婷杨杉杉郝小鹰成都中医药大学四川成都610075

溃疡性结肠炎是一种长期慢性疾病,具体发病机制也尚不清楚,临床多表现为长期反复的粘液脓血便,通常还伴有腹泻、腹痛、里急后重等症状。由于无法根治,极大程度影响了患者的生活质量。不过随着对该疾病的不断认识,新的治疗方法也在不断... 详细信息

溃疡性结肠炎是一种长期慢性疾病,具体发病机制也尚不清楚,临床多表现为长期反复的粘液脓血便,通常还伴有腹泻、腹痛、里急后重等症状。由于无法根治,极大程度影响了患者的生活质量。不过随着对该疾病的不断认识,新的治疗方法也在不断更新并应用于临床中。中西医治疗溃疡性结肠炎本文旨在对溃疡性结肠炎的中西医治疗进展展开综述,为该病的治疗提供一定思路。

关键词：溃疡性结肠炎中西医治疗研究进展

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养阴活血法治疗慢性萎缩性胃炎的研究进展

中国科技期刊数据库医药 2024年第7期 0004-0007页

作者：杨杉杉王婷郝小鹰成都中医药大学四川成都610032 成都中医药大学附属自贡市中医医院四川自贡643000

慢性萎缩性胃炎(chronic atrophic gastritis,CAG)是一种胃部慢性炎症,其胃粘膜上皮和固有腺体萎缩甚至消失,当发生肠上皮化生或异型增生时被称为胃癌前病变。CAG的病因有很多,本虚标实是其主要病机,在后期多会伴有不同程度阴虚血瘀的表... 详细信息

慢性萎缩性胃炎(chronic atrophic gastritis,CAG)是一种胃部慢性炎症,其胃粘膜上皮和固有腺体萎缩甚至消失,当发生肠上皮化生或异型增生时被称为胃癌前病变。CAG的病因有很多,本虚标实是其主要病机,在后期多会伴有不同程度阴虚血瘀的表现,因此养阴活血是该病的重要治法。该文从病因病机、临床研究和实验研究等方面对养阴活血法治疗慢性萎缩性胃炎的现状进行分析总结,以期为临床治疗及实验研究提供参考。

关键词：养阴活血法慢性萎缩性胃炎中医药治疗研究进展综述

激光辅助巩膜切除及白内障摘除联合房角分离治疗闭角型青光眼

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实用医学杂志 2024年第2期40卷 213-218页

作者：谢九冰陈喜月岳向东陈艳辉姜伟杨杉杉唐山市眼科医院青光眼科河北唐山063000

目的探究激光辅助巩膜切除及白内障摘除联合房角分离治疗闭角型青光眼的临床疗效。方法选择闭角型青光眼患者162例为研究对象,分为观察组81例行激光辅助巩膜切除及白内障摘除联合房角分离术,对照组81例行白内障摘除联合房角分离术,观察... 详细信息

目的探究激光辅助巩膜切除及白内障摘除联合房角分离治疗闭角型青光眼的临床疗效。方法选择闭角型青光眼患者162例为研究对象,分为观察组81例行激光辅助巩膜切除及白内障摘除联合房角分离术,对照组81例行白内障摘除联合房角分离术,观察两组患者治疗效果。结果观察组患者术后视力、BCVA、房角宽度、角膜内皮细胞计数高于对照组,眼压、中央前房深度、角膜厚度均低于对照组,观察组不良反应发生率(6.2%)低于对照组(13.6%)。术后随访,两组眼压均无再升高,对照组滤过泡高度降低无观察组明显;术后1个月观察组BCVA、角膜内皮细胞计数高于对照组(P0.05)。结论激光辅助巩膜切除及白内障摘除联合房角分离术治疗闭角型青光眼临床效果好,安全性高。

关键词：激光辅助巩膜切除白内障摘除房角分离闭角型青光眼

可溶性TIM-4抑制非小细胞肺癌的作用研究

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可溶性TIM-4抑制非小细胞肺癌的作用研究

作者：杨杉杉山东大学

学位级别：硕士

[研究背景]肺癌分为小细胞肺癌和非小细胞肺癌(Non-small cell lung cancer,NSCLC),其中NSCLC占85%。免疫检查点分子通过抑制机体免疫功能促进多种肿瘤进展。研究表明,免疫检查点阻断剂可显著提高肺癌患者生存率、延长肺癌患者生存时间... 详细信息

[研究背景]肺癌分为小细胞肺癌和非小细胞肺癌(Non-small cell lung cancer,NSCLC),其中NSCLC占85%。免疫检查点分子通过抑制机体免疫功能促进多种肿瘤进展。研究表明,免疫检查点阻断剂可显著提高肺癌患者生存率、延长肺癌患者生存时间,但免疫检查点阻断剂耐受、抵抗和毒副作用等现象也不断出现,探索新的治疗手段十分必要。近年来,可溶性免疫检查点逐渐引起关注。研究报道,肿瘤与炎症疾病患者体内可检测到可溶性免疫检查点分子,并且其表达量与疾病严重程度、临床治疗效果及患者预后相关。研究发现,靶向治疗后的肺癌患者血清中可溶性PD-L1水平与治疗效果呈负相关,口腔鳞癌患者血清中可溶性TIM-3水平显著升高,并与患者生存期负相关,相关研究揭示了可溶性免疫检查点具有预测肿瘤治疗效果和患者预后的潜能。TIM-4为选择性高表达于抗原提呈细胞的免疫检查点分子。作为磷脂酰丝氨酸的受体,TIM-4可介导抗原提呈细胞吞噬凋亡细胞。近年发现,TIM-4也表达于非小细胞肺癌、鼻咽癌、宫颈癌等肿瘤细胞及肿瘤相关免疫细胞,TIM-4可促进多种肿瘤进展,具有癌基因的特性。TIM-4属于Ⅰ型跨膜糖蛋白,经去整合素金属蛋白酶10和去整合素金属蛋白酶17水解后形成可溶性TIM-4(soluble TIM-4,sTIM-4)。研究发现,缺血性脑卒中患者和强直性脊柱炎患者血清中sTIM-4水平显著上升,并且其表达水平与疾病严重程度正相关,与患者预后负相关。此外,宫颈癌患者血清中sTIM-4水平明显升高。但肺癌患者体内sTIM-4水平以及sTIM-4在肿瘤进展中的作用目前尚未见相关报道。[研究目的]1.明确NSCLC患者体内sTIM-4的水平。2.明确sTIM-4在NSCLC进展中的作用。3.探讨sTIM-4对其他肿瘤以及抗肿瘤免疫的影响。[研究方法与结果]利用ELISA检测NSCLC患者血清中sTIM-4水平,结果显示,NSCLC患者体内sTIM-4水平显著高于健康对照,提示sTIM-4可能与肺癌发生发展有关。然而,肺癌患者血清中sTIM-4水平与患者PD-1抗体治疗响应性之间无明显相关性。为明确sTIM-4对肺癌进展的影响,构建了人sTIM-4真核表达载体以及过表达sTIM-4的肺癌细胞系。通过CCK-8和EdU检测,发现sTIM-4可显著抑制肺癌细胞的增殖,并利用含sTIM-4的条件性培养基进行了验证。通过RT-qPCR和流式细胞术检测,发现sTIM-4降低肺癌细胞增殖相关分子PCNA和Ki67的表达。划痕愈合实验和Transwell实验结果显示,sTIM-4可抑制肺癌细胞的迁移能力。将稳转sTIM-4的A549细胞接种于裸鼠皮下,发现过表达sTIM-4的肺癌细胞成瘤能力显著被抑制。为明确sTIM-4对其他肿瘤的影响,我们以黑色素瘤为研究对象,探索sTIM-4在体内对B16细胞荷瘤小鼠的肿瘤进展、抗肿瘤免疫影响以及毒副作用。与对照组相比,sTIM-4可显著延长荷瘤小鼠的生存期、抑制肿瘤生长。流式细胞术检测荷瘤小鼠肿瘤组织中单个核细胞的浸润情况,发现sTIM-4显著提高肿瘤组织中CD8+T细胞和NK细胞的比例,提示sTIM-4可增强机体抗肿瘤免疫。另外,通过检测小鼠体重、各脏器形态、重量及HE染色,未发现sTIM-4对机体有明显毒副作用。[结论]sTIM-4可降低肺癌细胞的增殖和迁移能力,进而抑制肺癌的发生发展;此外,sTIM-4还可抑制黑色素瘤的进展,并提高机体抗肿瘤免疫能力。

关键词： sTIM-4 增殖迁移抗肿瘤免疫 NSCLC

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初中历史科技史教学中家国情怀的培养研究

初中历史科技史教学中家国情怀的培养研究

作者：杨杉杉信阳师范学院

学位级别：硕士

《普通高中历史课程标准(2017年版)》提出了历史学科五大核心素养,以期通过诸素养的培育,达到立德树人的培养目标,并规定了家国情怀素养是学习和探究历史应具备的人文追求和价值关怀。家国情怀的培养不仅是高中历史教学应关注的问题,在... 详细信息

《普通高中历史课程标准(2017年版)》提出了历史学科五大核心素养,以期通过诸素养的培育,达到立德树人的培养目标,并规定了家国情怀素养是学习和探究历史应具备的人文追求和价值关怀。家国情怀的培养不仅是高中历史教学应关注的问题,在初中历史教学中尤其必须予以重视。科技史教学是初中历史教学的重要组成部分,其内容在部编版初中历史教科书中有着丰富的呈现,是初中学生家国情怀素养培养的重要载体。在科技史教学中培养初中学生家国情怀,有助于立德树人根本任务的实现。本文通过分析家国情怀的具体内涵和部编版初中历史教科书中科技史内容的呈现和特点,探讨科技史教学中培养初中学生家国情怀素养的策略和方法。本文正文分为四个部分:第一章分析了家国情怀的内涵和部编版初中历史教科书科技史内容的呈现和特点,并根据初高中历史课程标准提炼初中生应具备的家国情怀内容,即文化自信、爱国主义、共同体意识和责任意识。第二章结合家国情怀的内涵和科技史教学的具体价值,分析了科技史教学培养家国情怀的必要性和独特优势。第三章将家国情怀具体内涵同部编版初中历史教科书中科技史内容相结合,探讨初中历史中科技史教学培养家国情怀的策略与方法。第四章结合部编版初中历史教科书中中国古代科技史、中国近现代科技史和世界科技史的内容,尝试科学地设计教学案例。在初中历史科技史教学中培养文化自信、爱国主义、共同体意识和责任意识,即是在培养初中学生家国情怀,也有利于实现科技史的教育价值。虽然目前学界对于科技史教学与家国情怀关系问题的研究成果不多,但是随着新课改的深入发展,科技史教学对于家国情怀素养的培养价值会得到更多的重视,在初中历史教学中也会得到更加合理的运用。

关键词：家国情怀初中历史教学科技史教学初中学生

FUSCA3蛋白调控拟南芥At3g21380基因表达的初步研究

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FUSCA3蛋白调控拟南芥At3g21380基因表达的初步研究

作者：杨杉杉曲阜师范大学

学位级别：硕士

种子的发育与植物生命体的正常生长息息相关。种子发育是一个极其复杂的过程,种子特异性基因可在种子特定发育阶段特定部位特异性表达,其表达产物在种子发育及成熟过程中发挥着重要作用,因此对种子特异性基因表达调控的研究极为重要。... 详细信息

种子的发育与植物生命体的正常生长息息相关。种子发育是一个极其复杂的过程,种子特异性基因可在种子特定发育阶段特定部位特异性表达,其表达产物在种子发育及成熟过程中发挥着重要作用,因此对种子特异性基因表达调控的研究极为重要。基因表达过程可被多个层次调控,对基因表达转录水平的调控是控制其表达的重要环节之一。由多种转录因子构成的复杂调控网络的严格控制使基因在特定部位特定时间顺利表达,并编码特定产物发挥其功能。因此对转录水平基因表达调控的研究在分析基因功能及解析植物生长发育调控网络中发挥着重要作用。植物LAFL转录因子在调控种子特异性基因表达中发挥不可忽视的作用,其家族成员—FUSCA3(FUS3)转录因子是种子发育阶段的关键调节因子。多项研究表明,FUS3等LAFL家族转录因子通过与种子特异性表达基因启动子中的RY顺式元件相互作用,从而调控基因在种子发育过程中的表达,参与种子贮藏物质积累及早期幼苗生长等过程。RY元件是研究较为深入的种子特异性顺式调控元件之一,在调控种子特异性基因表达过程中发挥重要作用。本实验室前期实验结果发现编码拟南芥甘露糖结合凝集素蛋白的At3g21380基因是种子特异性基因。对At3g21380基因启动子序列分析发现,该启动子中存在多个RY元件,预示该基因的表达可能受FUS3转录因子调控。为了初步探究FUS3蛋白对At3g21380基因表达的调控机理,开展本次实验:主要实验结果如下:(1)RT-PCR检测拟南芥fus3突变体中At3g21380基因表达水平。提取野生型拟南芥及fus3突变体的总RNA,反转录为c DNA,并以其为模板,扩增At3g21380基因。结果显示野生型拟南芥中At3g21380基因的表达量较高,而拟南芥fus3突变体中At3g21380基因的表达量极低,表明FUS3基因突变后严重影响了At3g21380基因表达,FUS3转录因子可能正向调控拟南芥At3g21380基因表达。(2)获得纯化后的His-FUS3重组蛋白。根据TAIR(https://***/)及NCBI(https://***/)网站提供的拟南芥FUS3基因相关信息及DNA编码序列,利用引物设计软件设计引物。PCR扩增FUS3基因,与克隆载体p EASY-Blunt相连构建重组克隆载体,转化感受态细胞并进行鉴定。将FUS3基因与表达载体p ET-28a相连,转化BL21(DE3)感受态细胞,随后进行菌落PCR鉴定、酶切鉴定及公司测序,结果显示成功构建p ET-28a-FUS3重组表达载体。IPTG成功诱导His-FUS3重组蛋白原核表达,经变性、纯化、复性后获得单一的有活性的FUS3蛋白。(3)制备含RY元件或突变RY元件的DNA探针。分析发现At3g21380基因启动子序列中含有4个RY元件(序列为CATGCA)。按照启动子序列中RY元件的位置,将其依次命名为RY1、RY2、RY3、RY4。根据拟南芥At3g21380启动子序列,设计特异性引物。PCR扩增含有RY元件或突变RY元件的DNA片段,扩增成功后,胶回收备用。(4)凝胶阻滞实验(EMSA)分析FUS3蛋白与RY元件的相互作用。将RY元件或突变RY元件、FUS3蛋白共孵育,随后进行凝胶阻滞实验(EMSA)。凝胶阻滞实验(EMSA)结果表明FUS3蛋白可与拟南芥At3g21380启动子序列中的全部RY元件发生特异性结合,但不同RY元件与FUS3蛋白结合力不同,即:RY3>RY2>RY1>RY4。综上所述,FUS3蛋白通过与RY1、RY2、RY3、RY4元件特异性结合从而正向调控At3g21380基因的表达,且在调节At3g21380基因表达过程中4种RY元件与FUS3蛋白的结合能力大小顺序为:RY3>RY2>RY1>RY4。这一发现为进一步探究At3g21380基因表达的调控机理奠定了基础。

关键词： At3g21380基因 FUS3蛋白 RY元件凝胶阻滞实验

安徽省旅游业碳排放测算、脱钩效应及其影响因素研究

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安徽省旅游业碳排放测算、脱钩效应及其影响因素研究

作者：杨杉杉安徽大学

学位级别：硕士

为了应对由全球变暖带来的极端气候变化对生产生活带来的不利影响，实现中国经济社会的可持续发展，中国政府在2020年提出了“碳达峰”和“碳中和”的双碳战略并在2021年将其纳入我国生态文明建设战略布局，节能降碳减排成为中国经济社... 详细信息

为了应对由全球变暖带来的极端气候变化对生产生活带来的不利影响，实现中国经济社会的可持续发展，中国政府在2020年提出了“碳达峰”和“碳中和”的双碳战略并在2021年将其纳入我国生态文明建设战略布局，节能降碳减排成为中国经济社会发展的共识。作为“无烟产业”的旅游业具备与诸多行业有着密切的联系，能够拉动内需、促进经济增长的特征，使其成为中国国民经济战略性支柱产业。节能降碳减排目标需要分解到不同区域不同行业不同部门，旅游业顺利实现节能降碳减排的目标不仅有利于本行业的“碳达峰”和“碳中和”战略的达成，也能带动相关产业进行优化升级，从而推动相关产业的节能减排。　　基于上述背景，本文测算区域旅游业碳排放量，能够直观了解旅游业碳排放量的动态变化特征，分析旅游经济发展与碳排放量的脱钩关系有利于从宏观上认识区域旅游业现有发展模式及能源利用效率，而通过分析驱动旅游业碳排放量增长的因子，有助于量化旅游业降碳减排的目标与方向。本研究选择的能源消费大省和旅游发展迅速且旅游资源丰富的安徽省为案例地，对旅游业碳排放的研究具有一定的代表性。通过对安徽省旅游业碳排放量测度来获取旅游业不同部门碳排放量的动态变化情况，从而分析安徽省当前发展现状和发展模式，并进一步剖析旅游业业碳排放量驱动因素在此基础上提出安徽省旅游业低碳化发展对策。以上研究综合利用了可持续发展理论、脱钩理论以及文献分析法、“自下而上”法、脱钩指数法、LMDI分解模型等方法，并以2001-2019年的时间序列为起始点对安徽省旅游业碳排放量的动态变化和趋势进行定性和定量的深入研究。研究的相关内容和得出的结论如下:　　第一，首先在对相关文献进行梳理和综合分析的基础上，将安徽省旅游业划分为交通、住宿和活动三个部门并对上述三个部门分别进行碳排放量的测算和分析，其次，利用“自下而上”法对三个部门的碳排放量进行加总从而得到安徽省旅游业碳排放总量。结果显示:2001-2019年，安徽省旅游业的二氧化碳排放量增长较大，2001年为2.501Mt,2019年为5.324Mt，增长了2.823Mt，年均增长率为3.80％;从部门碳排放的组成结构来看，研究期内，每年旅游交通方式产生的碳排放量均占旅游业碳排放的80％,平均碳排放量为89.48％,是旅游业碳排放量的主要来源;旅游住宿产生的二氧化碳量在研究期内的平均碳排放量占总量的7.52％,排在第二位，住宿碳排放量自2010年开始，比例开始降低;旅游活动的碳排放最小（研究年份平均碳排放量为3.00％),但上升趋势明显。　　第二，首先对碳排放整体进行测度和分析的基础上，再利用碳排放强度指标和脱钩模型对碳排放量从不同维度进行探讨，结果显示:除2003年外，在研究期间碳排放强度指标整体呈现下降趋势且下降速度较快，从2001年的1.343吨/万元下降到2019年的0.062吨/万元，下降了95.38％;利用脱钩指数模型对碳排放量与旅游经济发展关系进行分析发现，在研究期间，安徽省旅游业整体呈现出弱脱钩状态，表明经济增长率快于碳排放增长率。上述两个指标均显示出安徽省旅游业发展较为绿色、健康、低碳。　　最后，通过梳理2015-2022年内相关学者对旅游业碳排放影响因素的研究文献并结合安徽省旅游发展现状的基础上，本文把安徽省的旅游业的碳排放影响因素划分为四个方面:能源结构、能源强度、经济规模和旅游人数，并选择LMDI分解模型对四类影响因素的贡献值进行求解，结果显示:旅游人次规模和经济规模两个因素对安徽省旅游业碳排放量的增长具有促进作用，其中旅游人次的促进作用最为明显;能源结构和能源强度因素对安徽省旅游业碳排放增长具有抑制作用，且能源强度的抑制作用最明显。　　通过以上分析进一步挖掘本文针对安徽省旅游业碳排放问题分析结果的指导性意义，并结合安徽省实际情况，针对性地提出旅游业降碳减排对策建议。

关键词：安徽省旅游业碳排放量脱钩效应 LMDI分解模型

高质量发展驱动下区域旅游产业联动研究——以安徽省为例

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中文科技期刊数据库（全文版）社会科学 2022年第12期 8-10页

作者：杨杉杉安徽大学商学院安徽合肥230601

以高质量发展为引领,利用产业结构相似性系数、共生度模型、产业联系度模型对2011-2019年安徽省旅游产业联动情况进行实证研究。结果表明:(1)安徽省皖南、皖中、皖北旅游业结构相似(2)安徽省皖南、皖中、皖北旅游业处于非对称互惠状态... 详细信息

以高质量发展为引领,利用产业结构相似性系数、共生度模型、产业联系度模型对2011-2019年安徽省旅游产业联动情况进行实证研究。结果表明:(1)安徽省皖南、皖中、皖北旅游业结构相似(2)安徽省皖南、皖中、皖北旅游业处于非对称互惠状态且正进行着有益的竞争(3)安徽省16各市主要在地理位置上进行旅游业联动且开发程度与交通通达性是影响旅游联动发展的主要因素。

关键词：高质量发展产业联动安徽省