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人参皂苷Rh2干预sMICA相关蛋白酶ERp5促进NK细胞的肿瘤免疫监视

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作者：杨春媚南京中医药大学

学位级别：硕士

[研究背景与目的]乳腺癌的诊断和治疗一直是一个备受关注的研究方向。2020年乳腺癌成为全球第一大癌。中医理论认为,正气亏虚和脏腑阴阳失调是乳腺癌的内在发病基础。人参作为被沿用了两千多年的扶正补虚之要药,被广泛应用于乳腺癌的防... 详细信息

[研究背景与目的]乳腺癌的诊断和治疗一直是一个备受关注的研究方向。2020年乳腺癌成为全球第一大癌。中医理论认为,正气亏虚和脏腑阴阳失调是乳腺癌的内在发病基础。人参作为被沿用了两千多年的扶正补虚之要药,被广泛应用于乳腺癌的防治。人参皂苷作为人参中最主要的活性成分,用于乳腺癌的研究也很多,但是作用机制研究尚不全面,尤其是与免疫调节的关系,目前只停留在基础的药效验证上。自然杀伤(natural killer,NK)细胞作为固有免疫系统中唯一一类具有细胞毒性的免疫细胞,能快速地对机体异常作出应答,是机体对付肿瘤细胞的先遣部队。NK细胞功能与其活化受体NKG2D和相关配体(NKG2DLs)的识别和结合情况有关。MICA是一类主要的人源NKG2DLs。肿瘤细胞会通过脱落MICA形成可溶性的sMICA,来破坏NKG2D-MICA轴,抑制NK细胞功能的活化,实现NK细胞监视下的免疫逃逸。MICA的脱落需要几种蛋白酶的参与,其中ERp5具有梳理MICA蛋白结构域和暴露切割位点的作用,在MICA脱落过程中起到了先锋作用。基于前期研究基础和文献调研,本课题以Rh2作为人参皂苷的代表性成分,旨在明确Rh2对乳腺癌的影响,并证明其抗乳腺癌机制与促进NK细胞的活性有关,并进一步探究Rh2与MICA脱落及其关键蛋白酶ERp5的关系,以丰富人参皂苷抗乳腺癌的机制研究。[研究内容与结果]本课题选择人参皂苷成分Rh2,聚焦于乳腺癌的研究,体内实验通过构建MDA-MB-231人源乳腺癌小鼠原位模型和血行转移模型,以及质粒过表达MICA的4T1鼠源乳腺癌血行转移模型,体外实验用MDA-MB-231和MCF-7分别与NK92MI构建共孵育体系,以验证Rh2的药效并探讨相关作用机制。原位模型小鼠肿瘤体积和BrdU免疫组化结果显示,Rh2能抑制MDA-MB-231乳腺癌细胞的增殖,体外CCK8也证实一定浓度的Rh2能抑制MDA-MB-231、MCF-7和MICA-4T1细胞的增殖能力。在两个转移模型中,CT扫描和H&E染色结果都表明,Rh2可以有效抑制乳腺癌的肺部转移。在这些初步的研究基础上,我们进行进一步的机制探讨。用LDH细胞毒性实验检测两种体外共孵育体系中乳腺癌细胞的死亡率,结果表明Rh2确实可以促进NK细胞的细胞毒作用。用磁珠分选分离小鼠脾脏NK细胞,流式细胞术检测CD107a+NK细胞数量,并将NK细胞体外培养,与MICA-4T1共孵育,两个实验结果都与之前的一致。另外,ELISA检测小鼠血清,发现Rh2可以促进穿孔素、颗粒酶B和干扰素-γ的释放,这也验证了前面的结论。进一步,探讨Rh2对NKG2D-MICA轴的影响。结合Western blot和NKG2D抗体中和实验可知,Rh2对NK细胞活性的促进作用与NKG2D的表达无关,但是依赖于NKG2D-NKG2DLs轴。这说明Rh2增强NK细胞活性可能与加强了 MICA的表达有关。联系MICA脱落环节和ERp5在其中的关键性,采用Western blot和免疫荧光实验检测了原位小鼠肿瘤组织和血行转移小鼠肺组织上MICA和ERp5的表达,同时检测了血清中的sMICA含量,结果证实,Rh2可以抑制ERp5的表达,上调MICA的表达水平,减少sMICA的形成。体外对MDA-MB-231和MCF-7细胞进行同样的实验,结果与之相符。另外,CETSA实验也证实了 Rh2和MDA-MB-231细胞上ERp5有较强的结合。[结论与意义]基于以上可知,人参皂苷Rh2能通过增强NK细胞活性发挥良好的抗乳腺癌效果。Rh2通过抑制ERp5表达,干预MICA的脱落过程,减少sMICA的产生,保证乳腺癌细胞上的MICA表达量。这有利于NKG2D通过识别MICA更高效地激活杀伤途径,干预乳腺癌的免疫逃逸,促进NK细胞对乳腺癌的免疫监视功能。本课题明确了人参皂苷Rh2通过干预乳腺癌脱落MICA的免疫逃逸环节,促进NK细胞活性,从而发挥抗乳腺癌作用,这补充了人参抗肿瘤的免疫调节机制,丰富了人参皂苷抗乳腺癌的研究,为临床应用人参增强肿瘤患者机体免疫提供理论和实验依据,为乳腺癌的防治提供新的思路。

关键词：乳腺癌人参皂苷 NK细胞 NKG2D MICA ERp5

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中韩道歉语对比研究

中韩道歉语对比研究

作者：杨春媚黑龙江大学

学位级别：硕士

本文主要分析汉语和韩语中的道歉言语行为策略,具体将道歉言语行为策略划分为直接道歉策略和间接道歉策略。其中直接道歉策略具体划分为五种策略。间接道歉策略具体划分为六种策略。具体的研究内容如下：通过电视剧剧本具体分析中国人... 详细信息

本文主要分析汉语和韩语中的道歉言语行为策略,具体将道歉言语行为策略划分为直接道歉策略和间接道歉策略。其中直接道歉策略具体划分为五种策略。间接道歉策略具体划分为六种策略。具体的研究内容如下：通过电视剧剧本具体分析中国人和韩国人在道歉言语行为中直接道歉策略以及间接道歉策略在使用频度上的差异,以及依据语言、社会文化背景等客观因素探究出两个语言集团使用不同道歉策略的原因。本研究的最终目的是通过对比中国人和韩国人在日常生活中使用的道歉策略,以此来提高汉语语言学习者的语言交流能力,促进学习者加深对两国道歉文化的理解。

关键词：道歉言语行为直接道歉策略间接道歉策略语言社会文化背景

基于放射组学的特征选择和亚组分析对肺腺癌患者预后的预测价值

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实用临床医药杂志 2022年第2期26卷 108-112页

作者：焦玉泉常艳亮杨春媚王翔山西省运城市中心医院医学影像科山西运城044000

目的探讨基于放射组学的特征选择和亚组分析对肺腺癌患者预后的预测价值。方法选取293例接受放疗的肺腺癌患者,从胸部CT图像中提取107个放射学特征(14个形状特征、18个一阶统计特征和75个纹理特征)。分析3种不同的特征选择(FS)方法[即... 详细信息

目的探讨基于放射组学的特征选择和亚组分析对肺腺癌患者预后的预测价值。方法选取293例接受放疗的肺腺癌患者,从胸部CT图像中提取107个放射学特征(14个形状特征、18个一阶统计特征和75个纹理特征)。分析3种不同的特征选择(FS)方法[即重测和多重分割(FS1)、皮尔逊相关分析(FS2)以及FS1和FS2相结合的方法(FS3)]对生存预测性能的影响。对各个T分期进行亚组分析,采用一致性指数(C-index)和Kaplan-Meier法评估预后表现。亚组分析采用5倍交叉验证以确保模型的可靠性。结果在放射学模型的训练和测试数据集中,FS2的C-index是所有选择方法中最高的(分别为0.64、0.61)。同样,FS2在组合模型的训练和测试数据集中的所有选择方法中具有最高的C-index(分别为0.65、0.63)。亚组分析表明,基于T分期的预测模型对测试数据集的C-index高于基于全数据的预测模型。结论特征选择方法在一定程度上提高了生存预测的性能,基于T分期的亚组预测模型可以提高预测性能。

关键词：放射组学特征选择预后分析亚组分析肺腺癌

表面冶金复合材料残余应力产生及对热疲劳性能影响

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材料工程 1994年第8期22卷 78-80,82页

作者：杨春媚胡贻苏辛义德重庆大学

本文通过对基体及焊层材料线膨胀系数及焊层表面应力的测试，阐述了热喷焊层残余应力产生的原因主要与第一、二次冷却过程有关，表面冷却速度是影响焊层表面应力的关键因素，分析了表面应力对焊层热疲劳性能的影响，焊层表面残余压应力... 详细信息

本文通过对基体及焊层材料线膨胀系数及焊层表面应力的测试，阐述了热喷焊层残余应力产生的原因主要与第一、二次冷却过程有关，表面冷却速度是影响焊层表面应力的关键因素，分析了表面应力对焊层热疲劳性能的影响，焊层表面残余压应力对焊层抗热疲劳性有利。

关键词：残余应力热喷焊层热疲劳复合材料

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浅析心理辅导在小学班主任工作中的运用

中文科技期刊数据库（文摘版）教育 2019年第6期 297-297,300页

作者：杨春媚惠东县吉隆中心小学广东惠州516351

从客观的角度来分析,小学学生心理辅导的开展是一项持续性的工作,单纯追求短期工作效果并不能取得理想的成绩。相对而言,小学学生心理辅导的进行要求教师站在学生的角度来思考问题、解决问题,并按照多元化的方式来进行辅导,而不是通过... 详细信息

从客观的角度来分析,小学学生心理辅导的开展是一项持续性的工作,单纯追求短期工作效果并不能取得理想的成绩。相对而言,小学学生心理辅导的进行要求教师站在学生的角度来思考问题、解决问题,并按照多元化的方式来进行辅导,而不是通过强硬的方式来干预。小学学生心理辅导的过程中,教师必须坚持做出正确的干预和引导,同时运用一定的方法和技巧来辅助。本文针对小学学生心理辅导的方法与技巧展开讨论,并提出合理化建议。

关键词：心理辅导小学教育班主任工作

3种肿瘤特异性抗原联合检测应用于胃癌的价值分析

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中国医学工程 2018年第12期26卷 80-82页

作者：梁涛杨春媚许明艺茂名市人民医院检验科广东茂名525000

目的探讨3种肿瘤特异性抗原联合检测应用于胃癌的价值。方法选择2016年1月‐2018年1月该院收治的42例胃癌患者作为胃癌组,选择同期该院收治的42例良性胃部疾病患者作为良性胃病组,选择同期于该院进行体验且无胃部疾病的42例健康受检者... 详细信息

目的探讨3种肿瘤特异性抗原联合检测应用于胃癌的价值。方法选择2016年1月‐2018年1月该院收治的42例胃癌患者作为胃癌组,选择同期该院收治的42例良性胃部疾病患者作为良性胃病组,选择同期于该院进行体验且无胃部疾病的42例健康受检者作为对照组。3组受检者均进行血清糖类抗原199(CA199)、癌胚抗原(CEA)与糖类抗原724(CA724)肿瘤特异性抗原联合检测。结果胃癌组CA199、CEA与CA724水平、单项阳性率与联合检测的阳性率显著高于良性胃病组与对照组(P <0.01)。良性胃病组CA199、CEA与CA724水平、单项阳性率与联合检测的阳性率高于对照组(P <0.05)。结论 3种肿瘤特异性抗原联合检测在胃癌中具有显著的应用效果,进一步保证患者的诊断质量。

关键词：肿瘤特异性抗原胃癌 CEA CA724 CA199

IMA、Mb和cTnI联合检测用于急性心肌梗死早期诊断的评价研究

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中西医结合心脑血管病杂志 2019年第3期17卷 471-473页

作者：梁涛杨春媚许明艺茂名市人民医院广东茂名525000

目的探讨缺血修饰白蛋白(IMA)、血清肌红蛋白(Mb)和心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnI)联合检测在急性心肌梗死(AMI)早期诊断的意义。方法选取2015年6月—2016年10月因急性胸痛发作入院接受治疗的病人145例,根据是否患有急性心肌梗死分为AMI组和非AMI... 详细信息

目的探讨缺血修饰白蛋白(IMA)、血清肌红蛋白(Mb)和心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnI)联合检测在急性心肌梗死(AMI)早期诊断的意义。方法选取2015年6月—2016年10月因急性胸痛发作入院接受治疗的病人145例,根据是否患有急性心肌梗死分为AMI组和非AMI组,同时选取健康人群40名为对照组。行血清Mb、cTnI、心肌肌酸激酶同工酶(CK-MB)、IMA水平检测,对比分析Mb、cTnI、CK-MB、IMA单独及联合检测的诊断价值。结果 AMI组病人血清IMA、Mb、cTnI、CK-MB水平较正常对照组、非AMI组均显著升高(P<0.05);各指标单独检测时,IMA的诊断敏感度最高,Mb的诊断特异度最高;IMA+Mb+cTnI联合检测的敏感度、特异度分别为96.0%、95.7%,均高于任一单独指标检测。结论 IMA、Mb、cTnI联合检测用于AMI早期诊断有较高的敏感度、特异度,对于AMI早期诊断具有重要的临床价值。

关键词：急性心肌梗死缺血修饰白蛋白心肌肌钙蛋白I 早期诊断

Tg及TSGF在甲状腺癌诊断中的应用价值分析

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中国医药科学 2021年第21期11卷 185-188页

作者：杨春媚梁涛广东省茂名市人民医院检验科广东茂名525000

目的探讨甲状腺球蛋白(Tg)、肿瘤特异性生长因子(TSGF)在甲状腺癌诊断中的意义。方法选取2019年1月至2020年12月茂名市人民医院(我院)收治的150例甲状腺癌患者为恶性组和150例良性甲状腺病变患者为良性组,另选取同一时期于我院进行健康... 详细信息

目的探讨甲状腺球蛋白(Tg)、肿瘤特异性生长因子(TSGF)在甲状腺癌诊断中的意义。方法选取2019年1月至2020年12月茂名市人民医院(我院)收治的150例甲状腺癌患者为恶性组和150例良性甲状腺病变患者为良性组,另选取同一时期于我院进行健康检查的150名受检者为对照组,分别检测并比较三组Tg和TSGF;按照病理学检测结果将恶性组患者分为Ⅰ期(44例)、Ⅱ期(39例)、Ⅲ期(40例)、Ⅳ期(27例),比较不同分期甲状腺癌患者的血清Tg、TSGF水平;分析血清TSGF、Tg阳性率与颈部淋巴结转移的关系。结果良性组的血清TSGF、Tg水平高于对照组,恶性组患者的血清TSGF、Tg水平高于良性组(P0.05),Ⅳ期患者的血清Tg、TSGF水平显著高于Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期患者;Ⅲ期患者的血清Tg、TSGF水平显著高于Ⅰ期、Ⅱ期患者(P<0.05);出现有颈部淋巴结转移的甲状腺癌患者其血清TSGF、Tg阳性率更高(P<0.05)。结论对血清Tg和TSGF水平进行检测,有利于早期发现甲状腺癌,并为疾病的病程、是否出现颈部淋巴结转移提供判定依据,在甲状腺癌的早期诊断中具有非常重要的临床意义。

关键词：甲状腺球蛋白肿瘤特异性生长因子甲状腺癌诊断

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隐丹参酮对小鼠下肢缺血的保护作用研究

中药药理与临床 2019年第2期35卷 40-45页

作者：邹伟钱程张婷婷杨春媚陆茵王爱云南京中医药大学江苏省中药药效与安全性评价重点实验室南京210023 南京中医药大学江苏省中医药防治肿瘤协同创新中心南京210023

目的:探讨丹参脂溶性有效成分隐丹参酮对小鼠下肢缺血的影响。方法:选取ICR雌性小鼠,随机分为空白组、模型组、假手术组、溶剂组(PBS+4%Tween-80)、前列地尔0.01 mg/kg组、隐丹参酮10 mg/kg、20 mg/kg、40 mg/kg组。采用左下肢股动脉结... 详细信息

目的:探讨丹参脂溶性有效成分隐丹参酮对小鼠下肢缺血的影响。方法:选取ICR雌性小鼠,随机分为空白组、模型组、假手术组、溶剂组(PBS+4%Tween-80)、前列地尔0.01 mg/kg组、隐丹参酮10 mg/kg、20 mg/kg、40 mg/kg组。采用左下肢股动脉结扎及分支剔除术构建小鼠下肢缺血模型,其中假手术组仅进行下肢股动脉分离术。通过体式显微镜记录各组小鼠下肢缺血症状并对其进行评分,采用HE染色观察隐丹参酮对下肢缺血模型小鼠下肢肌肉病理组织以及炎症反应的影响,采用免疫组织化学的方法考察隐丹参酮对下肢缺血模型小鼠血管生成及微血管密度(microvascular density,MVD)的影响。结果:20、40 mg/kg隐丹参酮组小鼠左下肢缺血症状评分较模型组显著降低,小鼠左下肢缺血肌肉组织MVD显著增加;40 mg/kg隐丹参酮组小鼠左下肢缺血肌肉组织异常病理反应有所改善;可显著增加小鼠左下肢腓肠肌中CD34、α-SMA的表达。结论:丹参中脂溶性有效成分隐丹参酮对小鼠下肢缺血具有保护和促进血管修复的作用。

关键词：隐丹参酮下肢缺血血管生成微血管密度