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二代测序在Omicron株新型冠状病毒灭活疫苗毒种遗传稳定性研究中的应用

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中华实验和临床病毒学杂志 2022年第5期36卷 527-534页

作者：杨洁郭靖庞德钦杨安纳杨东升吴杰廖文博周以斯孟胜利王泽鋆申硕武汉生物制品研究所有限责任公司病毒性疫苗研究一室国家联合疫苗工程技术研究中心湖北省疫苗技术创新中心武汉430207

目的分析并监测Omicron株新型冠状病毒灭活疫苗毒种遗传稳定性。方法毒种通过不同的方式,即未经过空斑纯化的毒种和空斑纯化的毒种,在细胞上进行连续传代后,收获细胞培养上清提取病毒核酸,利用二代测序进行病毒宏转录组分析,比较不同条... 详细信息

目的分析并监测Omicron株新型冠状病毒灭活疫苗毒种遗传稳定性。方法毒种通过不同的方式,即未经过空斑纯化的毒种和空斑纯化的毒种,在细胞上进行连续传代后,收获细胞培养上清提取病毒核酸,利用二代测序进行病毒宏转录组分析,比较不同条件下Omicron株新型冠状病毒灭活疫苗毒种的全基因组突变位点及突变频率和插入/缺失的差异。结果空斑纯化毒种连续传代后,ORF1ab和S基因序列上的高于5%的突变位点明显少于未经空斑纯化的毒种,且在纯化毒种全基因组中未检测到插入/缺失突变。结论通过二代测序技术,分析不同路径的毒种连续传代样本的全基因组序列,结果表明毒种经过空斑纯化后的遗传稳定性优于未纯化毒种,为灭活疫苗研发毒种的选育提供了科学依据。

关键词：灭活疫苗毒种二代测序技术遗传稳定性

Omicron株新型冠状病毒灭活疫苗(Vero细胞)原液特异性鉴别试验RT-PCR法的建立及验证

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中国生物制品学杂志 2022年第6期35卷 700-705页

作者：杨安纳庞德钦周以斯杨洁杨东升吴杰孟胜利王泽鋆郭靖申硕武汉生物制品研究所有限责任公司湖北武汉430060

目的建立Omicron株新型冠状病毒灭活疫苗(Vero细胞)原液特异性鉴别试验的RT-PCR法,并对该方法进行验证。方法根据GIAIDS数据库中新型冠状病毒Omicron株及其他突变株和原型株的S基因序列差异设计并合成引物OSTF1、OS1R,提取Omicron株新... 详细信息

目的建立Omicron株新型冠状病毒灭活疫苗(Vero细胞)原液特异性鉴别试验的RT-PCR法,并对该方法进行验证。方法根据GIAIDS数据库中新型冠状病毒Omicron株及其他突变株和原型株的S基因序列差异设计并合成引物OSTF1、OS1R,提取Omicron株新型冠状病毒灭活疫苗(Vero细胞)原液病毒RNA,逆转录为cDNA,利用对Omicron株S蛋白基因序列中的特异性插入及缺失核苷酸序列设计的引物对进行PCR扩增,扩增产物进行1%琼脂糖凝胶电泳鉴定。对建立的RT-PCR法进行重复性、中间精密度、专属性、耐用性及灵敏度验证,并用该方法鉴别6批Omicron株新型冠状病毒灭活疫苗原液。结果Omicron株新型冠状病毒灭活疫苗(Vero细胞)原液利用引物OSTF1/OS1R进行RT-PCR检测,可扩增出约460 bp的条带,而原型株、Beta株、Delta株新型冠状病毒灭活疫苗原液(Vero细胞)均无法扩增出条带;重复3次检测、2名实验人员分别在3 d重复3次检测、利用3种不同退火温度进行RT-PCR,Omicron株新型冠状病毒灭活疫苗(Vero细胞)原液均可扩增出约460 bp的条带;原液蛋白浓度在0.04μg/mL以上、RNA浓度在0.128 ng/μL以上均可扩增出较亮的约460 bp的条带;6批Omicron株新型冠状病毒灭活疫苗(Vero细胞)原液经RT-PCR检测,均可见约460 bp的条带。结论RT-PCR法专属性、重复性、中间精密度、耐用性和灵敏度均良好,可用于Omicron株新型冠状病毒灭活疫苗(Vero细胞)原液鉴别。

关键词： Omicron株新型冠状病毒灭活疫苗原液鉴别试验 RT-PCR

新型冠状病毒灭活疫苗(Vero细胞)中β-丙内酯残留气相色谱检测方法的建立、优化及验证

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中国生物制品学杂志 2021年第4期34卷 448-452页

作者：杨安纳王吟杨东升周艳萍涂晶卢佳李茜施金荣王泽鋆申硕武汉生物制品研究所有限责任公司湖北武汉430207

目的建立新型冠状病毒灭活疫苗(Vero细胞)中β-丙内酯(β-propiolactone,BPL)残留量的气相色谱检测方法,并进行优化及验证。方法气相色谱条件:进样口温度为180℃,分流比为2∶1,载气为氮气,检测器温度为250℃,运行时间为10 min。对柱温条... 详细信息

目的建立新型冠状病毒灭活疫苗(Vero细胞)中β-丙内酯(β-propiolactone,BPL)残留量的气相色谱检测方法,并进行优化及验证。方法气相色谱条件:进样口温度为180℃,分流比为2∶1,载气为氮气,检测器温度为250℃,运行时间为10 min。对柱温条件(升温程序和等温程序)、流速(1和3 mL/min)和进样量(1和0.2μL)进行优化。同时验证方法的专属性、检测限及定量限、线性范围、重复性、耐用性。采用建立的方法检测新型冠状病毒灭活疫苗(Vero细胞)生产工艺中灭活和水解过程及疫苗原液中BPL含量的变化。结果最佳检测条件:柱温条件为等温程序,流速为3 m L/min,进样量为0.2μL。BPL对照品溶液与疫苗原液混合液的BPL峰保留时间为2.328 min,与BPL对照品溶液一致,BPL对照品溶液连续6次进样的峰面积和保留时间的RSD均≤4.0%,BPL对照品溶液在不同检测器温度及进样口温度条件下检测的峰面积和保留时间的RSD均≤4.0%,BPL对照品溶液在3.125~500μg/mL浓度范围内,峰面积与浓度呈良好的线性关系,回归方程为y=1.3991 x-0.5586,相关系数(r)为0.9999,定量限为2.530μg/mL,检测限为0.843μg/mL。疫苗灭活过程中BPL含量高于定量限,水解后其含量远低于检测限,疫苗原液中未检测到BPL。结论建立了新型冠状病毒灭活疫苗(Vero细胞)中BPL残留含量的气相色谱检测方法,该方法具有良好的专属性、精密性及耐用性,可用于检测疫苗各生产环节中BPL的含量。

关键词：新型冠状病毒灭活疫苗(Vero细胞) β-丙内酯气相色谱法

新型冠状病毒Beta株灭活疫苗原液鉴别实验

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国际生物制品学杂志 2023年第1期46卷 7-12页

作者：庞德钦周艳萍杨安纳周以斯杨洁杨东升吴杰王泽鋆郭靖申硕武汉生物制品研究所有限责任公司病毒性疫苗研究一室国家联合疫苗工程技术研究中心武汉430207

目的建立特异性鉴别新型冠状病毒Beta株灭活疫苗原液的逆转录PCR(reverse transcription PCR, RT-PCR)并验证。方法在新型冠状病毒Beta株刺突蛋白(spike, S)受体结合域(receptor binding domain, RBD)中3个特异性突变位点的上下游保守... 详细信息

目的建立特异性鉴别新型冠状病毒Beta株灭活疫苗原液的逆转录PCR(reverse transcription PCR, RT-PCR)并验证。方法在新型冠状病毒Beta株刺突蛋白(spike, S)受体结合域(receptor binding domain, RBD)中3个特异性突变位点的上下游保守区域设计引物S3F/S3R, 通过RT-PCR扩增843 bp目的DNA。对扩增产物进行测序, 与原型株的S基因序列进行对比, 通过3个特征突变识别Beta株。对该方法的重复性、专属性、耐用性和灵敏度进行验证。结果该方法能准确扩增出843 bp目的DNA, 经测序表明, 扩增产物与新型冠状病毒Beta株基因序列一致, 包含3个特征突变位点。取1批Beta株原液进行6次PCR, 测序结果显示与Beta株核苷酸序列一致。S3F/S3R引物只对S的RBD区域有扩增作用。Beta株原液4 ℃和-70 ℃放置8周, 仍然可以扩增出目的条带, 且测序结果正确。将原液提取RNA稀释成不同浓度后进行RT-PCR, 得出最低检测限为0.032 ng/μl。结论建立的RT-PCR具有良好的专属性、重复性、耐用性和灵敏度, 能成功区分新型冠状病毒原型株与Beta株, 可用于新型冠状病毒疫苗生产中原液的鉴别。

关键词：新型冠状病毒Beta株逆转录聚合酶链反应鉴别

住宅小区的酒店式大跨度V型门厅的钢结构受力分析探讨

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中华建设 2025年第1期 68-71页

作者：刘光荣杨安杰邓先涛武汉市万科房地产有限公司

优秀的住宅小区出入口，其建筑风格新颖、品质精工卓越，并且在住宅设计中引入酒店设计的思想理念和设计元素，已经成为标杆房企的综合住区产品迭代的研究方向。以万科锦绣湖山项目的酒店式大跨度V型门厅钢结构设计为例，对箱形柱外露...

优秀的住宅小区出入口，其建筑风格新颖、品质精工卓越，并且在住宅设计中引入酒店设计的思想理念和设计元素，已经成为标杆房企的综合住区产品迭代的研究方向。以万科锦绣湖山项目的酒店式大跨度V型门厅钢结构设计为例，对箱形柱外露刚接节点、V型柱脚节点、V型链接顶点、二层局部悬挑等荷载应力集中点进行分析，探讨与补强钢结构，保障酒店式大跨度V型门厅的安全、可靠，为后续住宅小区的酒店式大跨度V型门厅的钢结构设计与施工提供参考。

关键词：

UMTransNet:结合U-Net和多尺度感知Transformer的图像拼接定位方法

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现代电子技术 2025年第1期48卷 33-39页

作者：张维何月顺谢浩浩杨安博杨超文吕熊东华理工大学信息工程学院江西南昌330013

当前基于深度学习的图像拼接定位方法大多只关注深层次特征,且感受野有限,忽略了浅层次特征,影响图像拼接定位的准确性。针对上述问题,文中提出一种结合改进U-Net和多尺度多视角Transformer的图像拼接定位网络UMTransNet。改进U-Net模... 详细信息

当前基于深度学习的图像拼接定位方法大多只关注深层次特征,且感受野有限,忽略了浅层次特征,影响图像拼接定位的准确性。针对上述问题,文中提出一种结合改进U-Net和多尺度多视角Transformer的图像拼接定位网络UMTransNet。改进U-Net模型的编码器,将编码器中的最大池化层替换成卷积层,防止浅层次特征的流失;将多尺度多视角Transformer嵌入到U-Net的跳跃连接中,Transformer的输出特征与U-Net的上采样特征进行有效融合,实现深层次特征与浅层次特征的平衡,从而提高图像拼接定位的准确性。通过可视化检测结果图显示,所提方法在定位拼接篡改区域方面表现得更加出色。

关键词：数字图像取证图像拼接定位 U-Net 多尺度感知自注意力机制交叉注意力机制

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高温环境对激光火工品发火性能的影响

火工品 2025年第1期 32-36页

作者：鱼小港贺爱锋陈建华郑薇杨安民祝捷李敏杰陕西应用物理化学研究所瞬态化学效应与控制全国重点实验室陕西西安710061 中北大学环境与安全工程学院山西太原030051

为了研究高温环境对激光火工品发火性能的影响,建立了激光火工品的热力场仿真模型,并搭建光学测试系统,探究了激光火工品自聚焦透镜在100℃高温下的激光光斑尺寸变化。仿真结果表明:高温环境下自聚焦透镜长度产生92.4μm的变形量,导致... 详细信息

为了研究高温环境对激光火工品发火性能的影响,建立了激光火工品的热力场仿真模型,并搭建光学测试系统,探究了激光火工品自聚焦透镜在100℃高温下的激光光斑尺寸变化。仿真结果表明:高温环境下自聚焦透镜长度产生92.4μm的变形量,导致激光光斑尺寸从94μm增大至150μm;试验结果表明:高温环境下激光火工品输出光斑在243~272μm之间变化,自聚焦透镜变形量的增大导致激光火工品的刺激功率密度降低、作用时间超差。研究表明自聚焦透镜变形降低了激光火工品的发火可靠性。

关键词：激光火工品自聚焦透镜激光光斑发火可靠性高温环境

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基于实验教学的大学生实践能力培养探究

光学技术 2007年第S1期33卷 324-326页

作者：杨安庆合肥工业大学合肥230009

在高等教育规模迅速扩大的同时,需要十分关注学生的培养质量,尤其是实践能力的培养。高校毕业生的实践能力与发达国家相比还有距离,难以适应国家与社会发展的需求。因此,积极探索一条现实的有效地培养学生实践能力的途径是迫切和必须的... 详细信息

在高等教育规模迅速扩大的同时,需要十分关注学生的培养质量,尤其是实践能力的培养。高校毕业生的实践能力与发达国家相比还有距离,难以适应国家与社会发展的需求。因此,积极探索一条现实的有效地培养学生实践能力的途径是迫切和必须的。在全面理解实践能力内涵的基础上,根据高等工科院校电工与电子技术课程实践性强的特点,着重讨论了实验教学在大学生实践能力培养上所发挥的作用,从理论与实践的结合上探究了基于实验教学的大学生实践能力培养模式,对于进一步深化高等工科院校大学生实践能力的培养具有非常大的意义。

关键词：实践能力电工和电子技术实验教学

在二氧化钛修饰的基体上生长氧化锌纳米棒阵列的研究

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无机材料学报 2006年第5期21卷 1092-1096页

作者：杨安丽崔作林青岛科技大学纳米重点实验室青岛266042

以硝酸锌和六亚甲基四胺为主要原料,采用简单、低温的水热法在预先用金红石二氧化钛薄膜修饰过的硅基体上生长了高取向性的ZnO纳米棒阵列．运用扫描电子显微镜(SEM),透射电子显微镜(TEM)和X射线衍射(XRD)对产物的结构和形貌进行了表征... 详细信息

以硝酸锌和六亚甲基四胺为主要原料,采用简单、低温的水热法在预先用金红石二氧化钛薄膜修饰过的硅基体上生长了高取向性的ZnO纳米棒阵列．运用扫描电子显微镜(SEM),透射电子显微镜(TEM)和X射线衍射(XRD)对产物的结构和形貌进行了表征．并且讨论了溶液浓度对ZnO形貌的影响．测试结果表明,在0．025mol／L的Zn(NO3)2·6H2O和C6H12N4水溶液中70℃反应4h后的ZnO纳米棒的平均直径为100nm,平均长度为1μm,属于六方纤锌矿结构且沿c轴择优取向生长．并且对制备出的ZnO纳米棒阵列薄膜进行了室温下的荧光测试,发现ZnO纳米棒阵列膜在389nm处具有很强的紫外发射峰,在466nm处有一个比较弱的发射峰．

关键词： ZnO纳米棒阵列 TiO2薄膜水热法