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CD_3 McAb联合rhIL-2激活的骨髓对白血病细胞杀伤净化作用的研究

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西安交通大学学报（医学版） 2002年第6期23卷 582-584,612页

作者：魏绪仓邢佩霓赵文理杨娣娣韩秀蕊李梅生陕西省人民医院血液病研究室西安710068

目的　探讨CD3单克隆抗体 (CD3McAb)联合重组人白细胞介素 2 (rhIL 2 )激活的骨髓对白血病细胞的杀伤及净化作用。方法　用MTT法检测激活骨髓的细胞毒作用 ;半固体集落培养法观察激活骨髓CFU GM水平和对白血病细胞的净化作用 ;采用间接... 详细信息

目的　探讨CD3单克隆抗体 (CD3McAb)联合重组人白细胞介素 2 (rhIL 2 )激活的骨髓对白血病细胞的杀伤及净化作用。方法　用MTT法检测激活骨髓的细胞毒作用 ;半固体集落培养法观察激活骨髓CFU GM水平和对白血病细胞的净化作用 ;采用间接荧光法测定激活骨髓的免疫标记。结果　CD3McAb与rhIL 2联合激活的骨髓对白血病细胞株K5 6 2、HL 6 0均有明显的杀伤净化作用 ,且优于rhIL 2或CD3McAb单用组 (P <0 .0 5或P <0 .0 1)。rhIL 2和 (或 )CD3McAb对激活骨髓的CFU GM水平无明显影响。CD3McAb +rhIL 2激活的骨髓 ,与活化前及rhIL 2或CD3McAb组相比 ,CD3+ 、CD8+ 、CD1 9+ 、CD2 5+ 、CD38+ 、CD56+ 细胞显著升高。结论　CD3McAb能增强rhIL

关键词： CD3McAb rhIL-2 激活骨髓白血病杀伤活性骨髓净化

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人胚胎期卵黄囊造血干/祖细胞的初步研究

中华血液学杂志 1998年第5期19卷 262-263页

作者：邢佩霓韩秀蕊杨娣娣魏续仓李梅生陕西省人民医院

人胚胎期卵黄囊造血干／祖细胞的初步研究邢佩霓韩秀蕊杨娣娣魏续仓李梅生迄今对卵黄囊造血的干／祖细胞研究，仅有关于小鼠的报道。我们就人卵黄囊造血及造血干／祖细胞进行初步观察。材料和方法１取材取胎龄４周左右的药物流产胚胎，... 详细信息

人胚胎期卵黄囊造血干／祖细胞的初步研究邢佩霓韩秀蕊杨娣娣魏续仓李梅生迄今对卵黄囊造血的干／祖细胞研究，仅有关于小鼠的报道。我们就人卵黄囊造血及造血干／祖细胞进行初步观察。材料和方法１取材取胎龄４周左右的药物流产胚胎，轻消毒后置洁净工作台中解剖分离卵黄...

关键词：胚胎期卵黄囊造血干细胞研究

慢性粒细胞白血病树突状细胞的体外无血清培养及杀瘤效应

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西安交通大学学报（医学版） 2002年第5期23卷 464-467页

作者：赵文理邢佩霓魏续仓王彤杨娣娣李梅生西安交通大学陕西医院血液科西安710068

目的　建立慢性粒细胞白血病 (CML)树突状细胞 (DCs)体外无血清培养体系。方法　小牛血清 (FCS)、无血清 (SFM)及自体血清分别培养CML病人CD34 + 细胞或单个核细胞 (MNCs) ,以SCF、GM CSF、TNF α、IL 4 (A)与GM CSF、TNF α、IL 4 (B)... 详细信息

目的　建立慢性粒细胞白血病 (CML)树突状细胞 (DCs)体外无血清培养体系。方法　小牛血清 (FCS)、无血清 (SFM)及自体血清分别培养CML病人CD34 + 细胞或单个核细胞 (MNCs) ,以SCF、GM CSF、TNF α、IL 4 (A)与GM CSF、TNF α、IL 4 (B)两组不同的细胞因子作对照。结果　CML DCsHLA DR高表达 ,CD80、CD83和CD86表达比例不高 ,异体混合淋巴细胞反应能力不强。SFM同FCS体系相比无显著差异。 5例CML DCsPh染色体比例与培养前MNCsPh染色体比例基本吻合 ;同时以CML DCs同自身T细胞、自体Ph+ MNCs共孵育 ,测其杀伤率为 (38.5± 6 .5 ) %。结论　CML DCs携带Ph染色体 ,能刺激自体T细胞杀伤自身白血病细胞 ,但需进一步改善其功能。

关键词：慢性粒细胞白血病树突状细胞无血清培养 Ph染色体细胞毒效应

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布洛芬固定膜TiO_2光催化降解特性研究

南京林业大学学报（自然科学版） 2013年第4期37卷 90-94页

作者：林少华杨娣娣路婧婧周婷婷南京林业大学土木工程学院江苏南京210037 南通市自来水公司江苏南通226009

采用小型光催化反应装置,以溶胶-凝胶法负载于玻璃纤维网上的固定膜TiO2为催化剂对布洛芬(IBP)进行光催化降解,分析了吸附、光解、IBP初始浓度、溶液初始pH和投加H2O2剂量对TiO2催化剂降解布洛芬的影响,并考察了IBP的矿化过程,对IBP降... 详细信息

采用小型光催化反应装置,以溶胶-凝胶法负载于玻璃纤维网上的固定膜TiO2为催化剂对布洛芬(IBP)进行光催化降解,分析了吸附、光解、IBP初始浓度、溶液初始pH和投加H2O2剂量对TiO2催化剂降解布洛芬的影响,并考察了IBP的矿化过程,对IBP降解中间产物进行定性分析。结果表明:吸附作用和在UV365下光解作用对降解布洛芬的影响不明显;IBP在较低浓度范围内,其降解呈伪一级反应,反应速率常数随初始浓度增大而减小;随着溶液初始pH的增大,IBP的光催化降解速率逐渐降低;H2O2投加剂量对IBP光催化降解影响显著,这是IBP在水中存在状态和TiO2界面电荷性质受到pH影响所致,为提高光催化降解布洛芬速率,较适宜的H2O2投加剂量为2.5 mg/L左右。光催化对IBP有较好的矿化作用。LC-MS分析表明,.OH攻击作用是IBP光催化降解的基本途径。

关键词：布洛芬固定膜光催化二氧化钛

Serum-free culture of dendritic cells from patients with chronic myeloid leukemia in vitro and estimation of their cytotoxicity

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Chinese Medical Journal 2002年第9期115卷 1296-1300,143-144页

作者：赵文理邢佩霓魏续仓王彤杨娣娣李梅生陕西省人民医院即西安交通大学陕西医院血液科西安710068

OBJECTIVE: To establish a serum-free culture system of dendritic cells (DCs) from chronic myeloid leukemia (CML) cells so that DCs vaccine may be applied to the adoptive immunotherapy of CML in the near future. METHODS: Fetal calf serum, serum-free medium and autologous serum were used for culture of DCs. The usage of cytokines was classified into two groups: group A (stem cell factor, granulocyte/macrophage colony-stimulating-factor, tumor necrosis factor-alpha and interleukin-4) and group B (granulocyte/macrophage colony-stimulating-factor, tumor necrosis factor-alpha and interleukin-4). The phenotypes of DCs were analyzed by using indirect immunofluorescence and flow cytometry. Mixed leukocyte responses were performed by methyl thiazolyl tetrazolium (MTT) assay. Chromosome analysis of DCs can be achieved by displaying G banding. T cells from CML patients were stimulated with autologous DCs and T-cell cytotoxicity was measured by (MTT) assay. RESULTS: CD34(+) cells or mononuclear cells were obtained from peripheral blood or bone marrow samples of eight patients of chronic-phase CML. Group A of serum-free medium was better than group B in expansion of total cell numbers and the rate of DCs. These results of serum-free medium were not significantly different from those of fetal calf serum medium, but the results of autologous serum medium were inferior to two groups above. The expression of major histocompatibility complex class II antigen on the surface of DCs was notable (> 50%), but the expression of CD83 and the costimulatory molecules CD86 was not noticeable (10% - 50%). Although CD1a(+)/CD14(-) DCs were potent stimulators of allogeneic lymphocytes, expansion of T cells from normal volunteers were not significant (average 27.2 fold at DCs: T cells ratio of 1:10). At day 12, CD1a(+) cells from three patients were studied by displaying G banding and Ph(+) cells in these populations were 100%, 98% and 60%, respectively. At an effector: target ratio of 40:1, 32% to

关键词： Cells, Cultured Culture Media, Serum-Free Cytotoxicity, Immunologic Dendritic Cells Humans Immunotherapy, Adoptive Leukemia, Myeloid, Chronic Research Support, Non-U.S. Gov't T-Lymphocytes

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人卵黄囊造血的探讨

细胞生物学杂志 1999年第1期21卷 37-39页

作者：邢佩霓韩秀蕊杨娣娣魏续仓李梅生陕西省人民医院血液病研究室西安710068

采用卵黄囊组织切片、涂片的形态学、细胞化学染色、造血干/祖细胞体外培养及CD_(34)单克隆抗体免疫荧光检测等方法研究表明:人卵黄囊中存在造血岛,造血岛内由于造血微环境的特点致使此期造血主要向红系分化。血岛中检测出CD_(34)^+细胞... 详细信息

采用卵黄囊组织切片、涂片的形态学、细胞化学染色、造血干/祖细胞体外培养及CD_(34)单克隆抗体免疫荧光检测等方法研究表明:人卵黄囊中存在造血岛,造血岛内由于造血微环境的特点致使此期造血主要向红系分化。血岛中检测出CD_(34)^+细胞,比例高于胎肝及成人骨髓,干/祖细胞于体外培养形成红系集落。结论:人胚胎期造血源于卵黄囊。

关键词：卵黄囊造血岛干/祖细胞

脐血树突状细胞与细胞因子诱导的杀伤细胞协同抗急性白血病细胞效应及生物学活性研究

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西安交通大学学报（医学版） 2011年第1期32卷 102-106页

作者：翟欣辉魏绪仓韩秀蕊杨娣娣王岐山陕西省人民医院血液科陕西西安710068 陕西省人民医院中心实验室陕西西安710068

目的研究脐血树突状细胞-细胞因子诱导的杀伤(DC-CIK)细胞的体外增殖、免疫表型、分泌细胞因子水平及其对急性白血病细胞细胞毒作用的影响。方法采集脐血单个核细胞诱导DC和CIK细胞。将DC和CIK细胞按1∶5的比例混合培养,以脐血CIK细胞... 详细信息

目的研究脐血树突状细胞-细胞因子诱导的杀伤(DC-CIK)细胞的体外增殖、免疫表型、分泌细胞因子水平及其对急性白血病细胞细胞毒作用的影响。方法采集脐血单个核细胞诱导DC和CIK细胞。将DC和CIK细胞按1∶5的比例混合培养,以脐血CIK细胞或外周血DC-CIK细胞为对照。用流式细胞术分析细胞表型,台盼蓝活细胞计数计算细胞扩增倍数,MTT法检测效应细胞杀伤白血病细胞的活性,ELISA法测定分泌干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-12(IL-12)的水平。结果脐血DC-CIK细胞的增殖能力显著高于脐血CIK细胞和外周血DC-CIK细胞(P均<0.05);脐血DC、CIK细胞共培养后,CD3+CD8+、CD3+CD56+细胞比例较同条件下CIK细胞明显增多(P<0.05);混合培养3 d,脐血DC-CIK细胞上清液中IL-12、IFN-γ、TNF-α含量均比CIK细胞单纯培养的分泌量高(P<0.01或P<0.05);在2.5∶1～20∶1的效靶范围内,脐血DC-CIK细胞对各亚型急性白血病细胞的杀伤率明显高于CIK细胞(P<0.05),且对各亚型白血病细胞杀伤活性无统计学意义,与外周血DC-CIK细胞对白血病杀伤效应相类同。结论脐血DC可增强同源CIK细胞的增殖活性和抗白血病效应。脐血DC-CIK细胞增殖能力比外周血DC-CIK细胞强,但两者在细胞毒方面无显著性差异。脐血来源丰富,且输注不易引起严重的移植物排斥反应,其DC-CIK细胞在免疫治疗方面应有更广泛的临床应用前景。

关键词：脐血树突状细胞细胞因子诱导的杀伤细胞共培养白血病细胞毒

脐血树突状细胞对同源CIK细胞生物学活性及抗白血病作用影响的研究(英文)

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中国实验血液学杂志 2010年第4期18卷 946-951页

作者：魏绪仓翟欣辉韩秀蕊杨娣娣王岐山陕西省人民医院血液科陕西西安710068

本研究旨在探索脐血树突状细胞(DC)对同源细胞因子诱导的杀伤(CIK)细胞体外增殖、免疫表型、分泌细胞因子水平及其对白血病细胞细胞毒作用的影响。采集脐血单个核细胞诱导DC和CIK细胞。将DC和CIK细胞按1∶5的比例混合培养,以脐血CIK细... 详细信息

本研究旨在探索脐血树突状细胞(DC)对同源细胞因子诱导的杀伤(CIK)细胞体外增殖、免疫表型、分泌细胞因子水平及其对白血病细胞细胞毒作用的影响。采集脐血单个核细胞诱导DC和CIK细胞。将DC和CIK细胞按1∶5的比例混合培养,以脐血CIK细胞或外周血DC-CIK细胞为对照。用流式细胞术分析细胞表型,台盼蓝活细胞计数计算细胞扩增倍数,MTT法检测效应细胞杀伤白血病细胞的活性,ELISA法测定分泌干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-12(IL-12)的水平。结果表明,脐血DC-CIK细胞增殖能力显著高于脐血CIK细胞和外周血DC-CIK细胞(p<0.05、p<0.05);脐血DC、CIK细胞共培养后,CD3+CD8+、CD3+CD56+细胞比例较相同条件下CIK细胞明显增多(p<0.05);混合培养3天,脐血DC-CIK细胞上清液中IL-12、IFN-γ、TNF-α含量均比单纯培养CIK细胞分泌含量高(p<0.01、p<0.05、p<0.05);在2.5∶1-20∶1的效靶比范围内,脐血DC-CIK细胞对各亚型急性白血病细胞的杀伤率明显高于CIK细胞(p<0.05),但对各亚型白血病细胞杀伤活性无显著性差异,与外周血DC-CIK细胞对白血病杀伤效应相类同。结论:脐血DC可增强同源CIK细胞的增殖活性和抗白血病效应。脐血DC-CIK细胞增殖能力比外周血DC-CIK细胞强,但两者在细胞毒方面无显著性差异。因脐血较易获得,且输注不易引起严重的排斥反应,因而DC-CIK细胞在免疫治疗方面具有更广泛的临床应用前景。

关键词：脐血树突状细胞细胞因子诱导的杀伤细胞共培养白血病细胞毒

DC-CIK细胞的生物学活性及体外抗白血病作用的研究(英文)

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中国实验血液学杂志 2008年第5期16卷 1150-1153页

作者：魏绪仓翟欣辉韩秀蕊杨娣娣赵文理陕西省人民医院血液内科陕西西安710068 苏州大学附属儿童医院血液内科江苏苏州215000

本研究探讨树突状细胞(DC)对细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)增殖能力、免疫表型、分泌细胞因子水平及抗白血病细胞的作用。健康人外周血单个核细胞诱导DC和CIK,将DC与CIK共培养,以CIK细胞单独培养为对照。用台盼蓝活细胞计数计算细胞扩增... 详细信息

本研究探讨树突状细胞(DC)对细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)增殖能力、免疫表型、分泌细胞因子水平及抗白血病细胞的作用。健康人外周血单个核细胞诱导DC和CIK,将DC与CIK共培养,以CIK细胞单独培养为对照。用台盼蓝活细胞计数计算细胞扩增倍数,MTT法测定杀伤活性,流式细胞术分析免疫表型,ELISA双抗体夹心法测定干扰素-γ(IFN-γ)、白介素-12(IL-12)的水平。结果表明:DC-CIK细胞增殖能力明显高于CIK细胞(p<0.05);DC、CIK细胞共培养后,CD3+CD8+、CD3+CD56+细胞比率较相同条件下CIK细胞组显著增多(p<0.05);共培养3天,DC-CIK细胞上清液中IL-12、IFN-γ水平均比CIK细胞单独培养的水平高(p<0.01,p<0.05);在5∶1-40∶1的效靶比范围内,DC-CIK细胞对白血病细胞的杀伤率显著高于CIK细胞(p<0.05),且杀伤率与效靶比呈正相关。结论:DC增加CIK细胞的增殖能力和抗白血病活性,有可能作为一种临床有效的抗白血病免疫治疗手段。

关键词：树突状细胞细胞因子诱导的杀伤细胞 DC-CIK细胞白血病