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A型FMDV感染BHK-21细胞差异表达基因的筛选和初步分析

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A型FMDV感染BHK-21细胞差异表达基因的筛选和初步分析

作者：杨双中国农业科学院

学位级别：硕士

口蹄疫病毒(FMDV)是对偶蹄类家畜如牛、绵羊、山羊和猪等影响最为严重的病毒之一,可以引起口蹄疫(FMD),发病动物的主要症状是高热以及在口、鼻、蹄和母畜乳头无毛部位发形成水疱。口蹄疫病毒除了具有感染性和致病力强、潜伏期短、发病急... 详细信息

口蹄疫病毒(FMDV)是对偶蹄类家畜如牛、绵羊、山羊和猪等影响最为严重的病毒之一,可以引起口蹄疫(FMD),发病动物的主要症状是高热以及在口、鼻、蹄和母畜乳头无毛部位发形成水疱。口蹄疫病毒除了具有感染性和致病力强、潜伏期短、发病急,可通过含毒空气传播等特点外,最重要的特点是病原变异性强、具有准种特征,因此,给该病的控制和消灭增加了难度。如果没有得到快速有效的控制,易感动物就会将FMDV传播给野生动物。表达谱芯片是基因芯片的一种,它可以从整体上分析细胞表达情况,通过比较不同个体或物种之间以及同一个体在不同生长发育阶段以及正常和疾病状态下基因转录和其表达的差异,寻找和发现新的基因,并研究它们在生物体发育、遗传、进化等过程中的功能;表达谱芯片可为研究基因调控网络及机理,揭示不同层次多基因协同作用的生命过程提供手段,将在研究许多重大疾病的相关基因及作用机理方面发挥巨大作用。疾病的发生与发展往往伴随着基因表达模式的改变,正常宿主基因的表达和感染病原后宿主基因的表达存在一定的相关性和差异,本研究通过A型FMDV流行毒株(A/WH/CHA/09)和A型FMDV重组毒株分别感染BHK-21细胞,运用包含35,882个转录体,其中包括了28853个已知基因的全转录组分析芯片-Mouse Gene 1.0 ST芯片,对感染后1h和2h这两个时间点的BHK-21细胞的总RNA进行了转录组比较分析。采用ratio>2倍的标准筛选差异表达基因,结果显示A型FMDV流行毒株感染BHK-21细胞1h后获得了45个差异表达基因,其中16个上调表达基因和29个下调表达基因;感染后2h获得了144个差异表达基因,其中50个上调表达基因和94个下调表达基因。其中上调表达的基因主要有组蛋白家族、缝隙连接蛋白、B淋巴细胞前体基因、凋亡诱导因子等,下调表达的基因有真核翻译起始因子、泛素结合酶、核糖体蛋白等。而A型口蹄疫病毒重组毒株感染BHK-21细胞1h后获得了49条差异表达基因,其中32个上调表达基因和17个下调表达基因;感染后2h获得了175个差异表达基因,其中101个上调表达基因和74个下调表达基因。其中,上调表达的基因主要有RASD家族、缝隙连接蛋白、凋亡诱导因子等,下调表达的基因主要有动力蛋白、核糖体核蛋白、核糖体蛋白等。实时定量PCR技术通过PCR反应产物逐渐累积,使荧光信号强度等比例增加来实时监控扩增产物。实时定量PCR除了具有普通PCR的优点外,还能对样品进行定量,减少污染,从而扩展了PCR技术的应用范畴,是一项具有划时代意义的新技术。本研究用实时荧光定量PCR技术验证了目标基因eIF3、UBE2、AIF和Connexin在口蹄疫病毒感染BHK-21细胞后2h总RNA的表达量,变化趋势与芯片结果基本一致,证实了芯片结果的可靠性。本研究成功建立了A型口蹄疫病毒感染BHK-21细胞的表达谱芯片杂交模型,并筛选出了差异表达的基因,在此基础上利用荧光定量PCR技术进一步验证了芯片结果的可靠性,以此为平台可以进一步探讨口蹄疫病毒感染BHK细胞发病的分子机制,对口蹄疫的早期诊断具有重要价值。

关键词： A型FMDV BHK-21 表达谱芯片实时定量PCR

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全域旅游视角下庐山市旅游发展策略研究

全域旅游视角下庐山市旅游发展策略研究

作者：杨双苏州科技大学

学位级别：硕士

全域旅游是适应服务业主导的后工业化时期旅游发展的一种全新理论,也是一种崭新的区域旅游发展思路,目前已经成为我国提升区域旅游品牌影响力、激发区域旅游活力、促进区域旅游产业优化升级的重要手段。本文基于全域旅游视角,以庐山撤... 详细信息

全域旅游是适应服务业主导的后工业化时期旅游发展的一种全新理论,也是一种崭新的区域旅游发展思路,目前已经成为我国提升区域旅游品牌影响力、激发区域旅游活力、促进区域旅游产业优化升级的重要手段。本文基于全域旅游视角,以庐山撤县设市为契机,研究了庐山市全域旅游发展策略的制定问题。论文在研读国内外全域旅游理论和相关实践案例的基础上,从发展全局性、产业融合性、空间联结性、服务多元性、社会共享性等五个方面总结了全域旅游的基本特征;通过对区域旅游需求、资源、支持三个系统的深度剖析,归纳了当前全域旅游视角下区域旅游发展的影响因素、存在的困境和挑战,从构建全域联动的空间体系、打造全业融合的产业体系、健全全域一体的服务体系、营建共建共享的社会体系四方面构建全域旅游视角下区域旅游发展策略框架。论文对庐山市旅游发展基础条件、现状特征、发展困境以及发展机遇进行了全面分析,在上述策略理论框架的指导下,提出了庐山市旅游发展的四大策略:拥山抱湖——构建庐山全域旅游空间格局的空间策略;固本培新——创新升级融合发展的产业体系的产业策略;承外启内——完善全域支撑的旅游服务设施的设施策略;共建共享——建立全域多元协调的管理架构的管理策略,从而为庐山市全域旅游高质量发展提供治理策略。

关键词：全域旅游庐山市区域旅游发展策略

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我国猪肉价格波动影响因素的实证研究

价格理论与实践 2011年第11期 23-24页

作者：方燕杨双慧北京工商大学

自2010年6月份以来,我国猪肉价格波动频繁。本文拟利用月度统计数据,从理论和实证两个方面深入分析此次猪肉价格波动的原因,分析结果表明:猪肉供给量的不足、生产成本中仔猪成本的上涨、上期猪肉价格的惯性拉动作用等因素是本轮猪肉价... 详细信息

自2010年6月份以来,我国猪肉价格波动频繁。本文拟利用月度统计数据,从理论和实证两个方面深入分析此次猪肉价格波动的原因,分析结果表明:猪肉供给量的不足、生产成本中仔猪成本的上涨、上期猪肉价格的惯性拉动作用等因素是本轮猪肉价格持续上涨的主要原因;突发事件、国家的相关调控政策等因素也能在一定程度上影响猪肉价格;通货膨胀和玉米价格对猪肉价格的影响不显著。最后根据研究的结果提出了政策建议。

关键词：猪肉价格波动 x-12季节分解双对数多元线性回归模型

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中小高新技术企业供应链融资模式研究

中小高新技术企业供应链融资模式研究

作者：杨双哈尔滨理工大学

学位级别：硕士

中小高新技术企业是我国科技进步和经济发展的重要力量,它在扩大就业、促进技术进步、发展国际贸易、推动经济健康发展等方面起着十分积极的作用。影响我国中小高新技术企业发展的最主要因素之一是资金短缺。中小高新技术企业在融资过... 详细信息

中小高新技术企业是我国科技进步和经济发展的重要力量,它在扩大就业、促进技术进步、发展国际贸易、推动经济健康发展等方面起着十分积极的作用。影响我国中小高新技术企业发展的最主要因素之一是资金短缺。中小高新技术企业在融资过程中存在融资成本高、信息不透明、用资风险高、缺少担保等问题。虽然我国政府出台了很多政策促进中小高新技术企业的融资,但是并不能从根本上解决其资金短缺的困境。供应链管理强调核心企业与相关企业的协作关系,通过信息共享、技术扩散(交流与合作)、资源优化配置和有效的价值链激励机制等方法体现经营一体化。中小高新技术企业融入供应链后,借助供应链内的信息平台和供应链管理的先进方法,能够加强和投资者之间的信息交流、降低风险、拓宽融资渠道。因此,如何有效地充分利用供应链内部的协同发展优势和供应链外部的丰富资源融资,加强融资方和投资者之间的信息交流,时时监督,降低风险和成本,满足中小高新技术企业的发展需要、促进中小高新技术企业的快速发展是一个值得研究的问题。本文在对国内外中小高新技术企业的融资现状和供应链研究现状进行分析的基础上,应用系统分析和比较研究等方法对国内外的融资模式进行了比较研究。从中小高新技术企业在供应链中资金管理特点,信息交流,物流、信息流和资金流的协调运转,对风险和资本结构的影响方面对中小高新技术企业的融资优势进行了系统分析。在此基础上,结合我国金融体系和资本市场的特点,对融通仓、供应链战略联盟的直接融资模式和民间融资、私募融资的间接融资模式进行了深入研究。最后对北京双鹭药业股份有限公司进行供应链融资实证研究。本文的研究为进一步加快我国中小高新技术企业供应链融资提供科学依据和参考。

关键词：中小高新技术企业供应链融资模式

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杂填土堤基中桩侧土水平抗力试验研究与分析

人民珠江 2023年第S2期44卷 158-161页

作者：余定仙杨双超广东珠荣工程设计有限公司广东广州510610

为进一步研究杂填土地基中桩侧水平抗力系数的比例系数,了解其对桩基水平承载力的影响及作用,为工程设计提供可靠的数据支持,采用现场水平静载试验及旁压试验,分别对杂填土地基中灌注桩的水平承载力、桩侧水平抗力系数的比例系数(m)、... 详细信息

为进一步研究杂填土地基中桩侧水平抗力系数的比例系数,了解其对桩基水平承载力的影响及作用,为工程设计提供可靠的数据支持,采用现场水平静载试验及旁压试验,分别对杂填土地基中灌注桩的水平承载力、桩侧水平抗力系数的比例系数(m)、桩的水平变形系数、桩顶水平位移等进行深入研究。研究表明:m值对桩基水平承载力影响显著,杂填土的密实程度直接影响m值的大小,松散杂填土表现出较弱的水平抗力,通过杂填土注浆处理可有效提高桩侧土m值,较加固前提高45%。m值的选用应与实际荷载及位移允许值相适应,对于混凝土灌注桩,当水平位移较大时,则应适当降低m取值。m值对于相同地基的同一根桩并非固定值,与上部结构传递的荷载呈非线性关系。在荷载水平较低时,m值较大。随荷载增加,桩侧杂填土塑性区逐渐扩大而导致m值呈下降趋势。

关键词：杂填土水平抗力系数的比例系数水平静载试验

初中《道德与法治》课堂教学中的师生互动研究 ——以延安市子长县某中学为例

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初中《道德与法治》课堂教学中的师生互动研究 ——以延安市子长...

作者：杨双延安大学

学位级别：硕士

初中《道德与法治》课程是一门充满实践性和人文情怀的学科,它以培养学生自主能力,提高学生的思想道德素质,把他们塑造成全面发展的社会需要的人才为目标。《道德与法治》教材以社会主义核心价值观为统领,围绕新课程标准开展教学,以法... 详细信息

初中《道德与法治》课程是一门充满实践性和人文情怀的学科,它以培养学生自主能力,提高学生的思想道德素质,把他们塑造成全面发展的社会需要的人才为目标。《道德与法治》教材以社会主义核心价值观为统领,围绕新课程标准开展教学,以法治教育大纲为依据对初中阶段落实法治教育,以社会主义核心价值观、优秀传统文化和党的十八大以来的历次会议精神为教育内容来落实立德树人教育目标,增强社会责任感,培养学生的实践能力。新课程改革注重培养学生的独立性和自主性,促进学生在教师的引导下自主学习。有效的课堂师生互动有助于增加《道德与法治》课魅力,激发学生的求知欲,构建良好的师生关系,培养学生自主能力,提升课堂教学质量。本文立足于增强初中《道德与法治》课课堂教学中的师生互动,在相关课堂师生互动理论基础上,结合延安市子长县某中学《道德与法治》课课堂教学师生互动的问卷调查、访谈和课堂观察,对初中《道德与法治》课堂教学中的师生互动现状进行分析,针对《道德与法治》课课堂教学中存在着教师专业能力不足、互动方式单一、互动缺乏深度、学生互动兴致不高、师生互动与实践分离等问题,努力寻找存在这些问题的原因,并提出了提高《道德与法治》课教师的专业能力、丰富课堂教学师生互动方式、加强课程内容的深层互动、提升学生课堂师生互动兴致、师生互动与实践相结合等增强《道德与法治》课课堂教学中师生互动的建议。本文力图通过研究提高初中《道德与法治》课课堂教学的质量进而提升课堂教学效果,也为《道德与法治》课教师的课堂教学提供一定参考,引发他们对课堂师生互动问题的重视和思考,积极实施有效的课堂师生互动。

关键词：《道德与法治》课课堂教学师生互动

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网络教学对中小学教育的影响

中国教育信息化（高教职教） 2007年第11X期 17-19页

作者：杨双丽浙江师范大学数理信息学院浙江金华321004

网络的快速发展推动了信息社会的迅速发展,也推动了教育的飞速发展,当人们正在享受网络教育带来的成果时,一些不利于教育发展的因素凸现了出来,我们不得不以理性的头脑去思考这些问题。本文主要对网络教育对中小学生的影响进行阐述,通... 详细信息

网络的快速发展推动了信息社会的迅速发展,也推动了教育的飞速发展,当人们正在享受网络教育带来的成果时,一些不利于教育发展的因素凸现了出来,我们不得不以理性的头脑去思考这些问题。本文主要对网络教育对中小学生的影响进行阐述,通过对学生情感培养、实践能力培养、思维能力培养以及对教学管理四个方面的研究,从而引起人们对网络教育问题的关注。

关键词：网络教育情感虚拟现实思维模式

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我国农村投融资体制存在的问题及对策分析

农业经济 2015年第4期 105-106页

作者：杨双鸽平顶山学院河南平顶山467044

全面推进社会主义新农村建设、实现城乡统筹发展,离不开规范完善的投融资体系支撑。文章在全面分析当前我国农村投融资体制存在问题的基础上,重点从国家层面对农村投融资力度、农村托融资供求失衡、农村投融资诚信环境等三个方面对存在... 详细信息

全面推进社会主义新农村建设、实现城乡统筹发展,离不开规范完善的投融资体系支撑。文章在全面分析当前我国农村投融资体制存在问题的基础上,重点从国家层面对农村投融资力度、农村托融资供求失衡、农村投融资诚信环境等三个方面对存在的问题进行阐述,对破解农村投融资体制现存问题的现实路径进行深入剖析,以更好发挥农村投融资体制优势、带动农村经济社会又好又快发展。

关键词：农村投融资体制存在问题对策

从《十力语要》的改定看熊十力中期思想之变化

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从《十力语要》的改定看熊十力中期思想之变化

作者：杨双湖南大学

学位级别：硕士

熊十力（1885－1968）是20世纪中国颇富变化性的著名哲学家，要准确把握其哲学思想，必须全面考察其思想历程。到目前为止这方面已有不少研究成果，但对熊十力中期思想历程的研究仍然相当薄弱而亟待加强。《十力语要》收录了熊十力1924... 详细信息

熊十力（1885－1968）是20世纪中国颇富变化性的著名哲学家，要准确把握其哲学思想，必须全面考察其思想历程。到目前为止这方面已有不少研究成果，但对熊十力中期思想历程的研究仍然相当薄弱而亟待加强。《十力语要》收录了熊十力1924－1947年间的思想言论，最后成书时又经熊十力全面改定，其形成过程几乎贯穿了整个熊十力中期思想历程。研究这些改动之处，不仅可以看出熊十力中期思想的发展变化情况，也将彰显《十力语要》一书的文献学价值，并有助于反思和改进熊十力思想历程研究中的相关研究模式与方法。通过比照与分析《十力语要》定本与其原本或原始资料的异同可以发现，熊十力在其“新唯识论”哲学体系完全成熟之后，对其体系未定之前思想言论的修改反要少于体系已定数年之后思想言论的修改。这从一个侧面初步表明，熊十力中期思想历程并不是一条持续向前而并无曲折的直线。通过进一步考察与分析则可发现，熊十力中期思想历程中的本体论探索无论在观点上还是在思路上都有相当明显的变化与转折。其一，在理器论和体用论上的变化非常明显。理器不二论和体用不二论虽是熊十力的一贯主张，但其实际内涵却因整个思路的不同而大不相同乃至截然相反。其二，在本体论上自1927年以后有过两次重要转折，第一次是“新唯识论”哲学体系大体确立之际，由非现成的“明智”本体论转向现成具足的“性智”本体论;第二次则是在“新唯识论”哲学体系完全成熟之后，又开始转向原来的非现成性本体论。其三，在工夫论上自1927年以后有过两次更为明显的转折，先是在“新唯识论”哲学体系中放弃1927年以来的“创性”工夫论，主张以“复性”为目的的“创习”工夫论;四十年代下半叶之后，又重新强调“创性”工夫论。因此，熊十力中期思想历程所呈现出来的，并不是一般所说的单线累积式轨迹，而是在两种不同的本体论思路之间不时往复的钟摆运动式轨迹。这一结论不仅为我们解释熊十力1927年以后整个思想历程的重要转变找到了内在根据，也为我们研究熊十力哲学思想提供了新的视域和模式。

关键词：熊十力中期思想思想历程十力语要本体论