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IL-33对克罗恩病小鼠肠组织细胞因子及转录因子的影响

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山东医药 2016年第40期56卷 29-31,I0002页

作者：孙科明孙华文曾放刘顺杨厚涞吴红学武汉大学人民医院武汉430060

目的探讨IL-33对克罗恩病(CD)小鼠肠组织细胞因子(IFN-γ、IL-4、IL-10、TGF-β)及转录因子(T-bet、GATA-3、FOXP3)的影响。方法选择雌性BALB/c小鼠45只,随机分为对照组、TNBS组、IL-33组,每组15只。TNBS组、IL-33组给予TNBS/50%乙醇混合溶液灌肠建立CD模型,对照组仅予生理盐水灌肠。灌肠后TNBS组腹腔注射PBS,IL-33组腹腔注射重组鼠IL-33(r IL-33),对照组腹腔注射PBS。各组于腹腔注射第5天处死,取肠组织行HE染色,观察肠组织病理变化;采用ELISA法检测肠组织上清液IFN-γ、IL-4、IL-10、TGF-β,Western blotting法检测肠组织T-bet、GATA-3、FOXP3蛋白表达。结果与对照组比较,TNBS组肠组织炎症明显;肠组织IFN-γ水平升高,IL-4、IL-10、TGF-β水平降低(P均<0.05);T-bet蛋白表达升高,GATA-3、FOXP3蛋白表达降低(P均<0.05)。与TNBS组比较,IL-33组肠组织炎症相对较轻;IFN-γ水平降低,IL-4、IL-10、TGF-β表达升高(P均<0.05),T-bet蛋白表达降低,GATA-3、FOXP3蛋白表达升高(P均<0.05)。结论 IL-33能缓解CD小鼠病情,其机制与抑制Th1细胞分化、诱导Th2和Treg细胞产生有关。

关键词：克罗恩病白细胞介素33 细胞因子转录因子

胃间质瘤内镜下黏膜剥离术后出血的危险因素分析

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中国普通外科杂志 2017年第10期26卷 1304-1309页

作者：杨厚涞王琦孙华文王秋爽孙科明武汉大学人民医院胃肠外一科湖北武汉430060

目的:探讨胃间质瘤内镜下黏膜剥离术(ESD)后出血的危险因素。方法:回顾性分析武汉大学人民医院2011年2月—2017年5月124例胃间质瘤行ESD治疗患者的临床资料,采用单因素及多因素非条件Logistic回归分析胃间质瘤ESD术后出血的危险因素。结... 详细信息

目的:探讨胃间质瘤内镜下黏膜剥离术(ESD)后出血的危险因素。方法:回顾性分析武汉大学人民医院2011年2月—2017年5月124例胃间质瘤行ESD治疗患者的临床资料,采用单因素及多因素非条件Logistic回归分析胃间质瘤ESD术后出血的危险因素。结果:纳入的124例患者中,10例(8.06%)发生术后出血。单因素Logistic回归分析结果显示,肝硬化、冠心病、陈旧性脑梗塞、房颤病史与胃间质瘤ESD术后出血明显有关(均OR>1,P1,P<0.05)。结论:肝硬化、冠心病、陈旧性脑梗塞、房颤病史为胃间质瘤ESD术后出血的危险因素,对于这些危险因素的患者应优化术前评估,加强术前准备与术后管理,以降低术后出血率。

关键词：胃肠道间质肿瘤胃手术后出血危险因素

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未成熟树突状细胞治疗小鼠克罗恩病

中华实验外科杂志 2016年第2期33卷 388-391页

作者：曹放孙华文刘顺孙科明杨厚涞吴红学武汉大学人民医院胃肠外科消化系统疾病湖北省重点实验室 430060

目的观察小鼠骨髓来源的未成熟树突状细胞（imDC）对2，4，6-i硝基苯磺酸（TNBS）诱导出的克罗恩病小鼠模型的治疗作用，探讨其缓解小鼠克罗恩病的作用机制。方法40只小鼠随机分为4组，每组10只，分为对照组、TNBS组、imDC组和成熟树突... 详细信息

目的观察小鼠骨髓来源的未成熟树突状细胞（imDC）对2，4，6-i硝基苯磺酸（TNBS）诱导出的克罗恩病小鼠模型的治疗作用，探讨其缓解小鼠克罗恩病的作用机制。方法40只小鼠随机分为4组，每组10只，分为对照组、TNBS组、imDC组和成熟树突状细胞（mDC）组，除对照组予以乙醇灌肠外，其余3组都予以乙醇-TNBS混合溶液灌肠造模，在灌肠前后各1d经尾静脉注射磷酸盐缓冲液（PBS）或者细胞进行干预，对照组和TNBS组尾静脉注射PBS，imDC组尾静脉注射imDC，mDC组尾静脉注射mDC进行干预。每天观察小鼠的一般状况，于造模第7天后处死小鼠，分别行疾病活动指数（DAI）、结肠病理组织学（TDI）和结肠大体形态损伤指数（CMDI）评分，用酶联免疫吸附试验（ELISA）法分析小鼠结肠组织白细胞介素-10（IL-10）、转化生子因子-β（TGF—β）的表达，Western blot分析小鼠结肠组织又头状／翅状螺旋蛋白3（Foxp3）蛋白的表达。结果TNBS组的DAI、CMDI、TDI的评分别为（5．420±0．326）、（4．923±0．226）、（7．200±0．851）分，较对照组明显升高，差异有统计学意义（P〈0．01），结肠组织抗炎因子IL—10和TGF—β分别为（6．103±1．140）、（21．164±3．252）ng／L，调节性T细胞（Treg）转录因子Foxp3的相对表达量为0．4392±0．0459，较对照组明显降低，差异有统计学意义（P〈0．01）；imDC能显著降低小鼠DAI、CMDI、TDI评分，下渊抗炎因子IL—10和TGF—β和转录因子Foxp3的水平；mDC则显著升高小鼠DAI、CMDI、TDI评分，降低抗炎因子IL-10和TGF-β和转录网子Foxp3蛋白的水平，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论本实验成功地制作出了小鼠克罗恩病模型，并证明mDC能明显缓解小鼠克罗恩病模型的进程，而诱导Treg的产生可能是其缓解炎症的机制之一。

关键词：树突状细胞克岁恩病免疫耐受调节性T细胞

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3D腹腔镜手术治疗胃底部间质瘤的临床疗效

中国普通外科杂志 2017年第4期26卷 432-436页

作者：王琦孙华文王秋爽杨厚涞钱彧童仕伦武汉大学人民医院胃肠外一科湖北武汉430060

目的:探讨3D腹腔镜手术治疗胃底部间质瘤的临床应用价值。方法:回顾性分析武汉大学人民医院2014年1月—2015年6月间收治的36例胃底部间质瘤患者临床资料,其中18例行3D腹腔镜手术(3D腔镜组),18例行开腹手术(开放手术组),比较两组患者的... 详细信息

目的:探讨3D腹腔镜手术治疗胃底部间质瘤的临床应用价值。方法:回顾性分析武汉大学人民医院2014年1月—2015年6月间收治的36例胃底部间质瘤患者临床资料,其中18例行3D腹腔镜手术(3D腔镜组),18例行开腹手术(开放手术组),比较两组患者的围手术期指标,术后病理资料及复发转移情况。结果:两组患者在年龄、性别、BMI、肿瘤大小等一般资料方面差异无统计学意义(均P>0.05)。两组手术时间差异无统计学意义(P>0.05),但3D腔镜组在术中出血量、手术切口长度、术后排气时间及住院天数等指标方面均明显优于开放手术组(均P0.05)。所有患者随访12~36个月,无复发、转移及死亡病例。结论:应用3D腹腔镜技术治疗胃底部间质瘤,能明显减少患者的手术创伤,且远期疗效与开放手术相似。

关键词：胃肿瘤胃肠道间质肿瘤胃底腹腔镜三维视觉

CEA-EPO质粒的构建及其诱导造血干细胞定向生成的红细胞疫苗治疗结肠癌的研究

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中国普外基础与临床杂志 2018年第7期25卷 792-799页

作者：孙华文杨厚涞王秋爽武汉大学人民医院胃肠外科武汉430060

目的研究癌胚抗原(CEA)-红细胞生成素(EPO)质粒的构建及其诱导的造血干细胞定向生成红细胞疫苗的抗结肠癌效果。方法构建CEA-EPO重组质粒,同时构建空载体质粒、CEA质粒和EPO质粒。用含抗体CD117磁珠分离纯化和收集小鼠骨髓造血干细胞,... 详细信息

目的研究癌胚抗原(CEA)-红细胞生成素(EPO)质粒的构建及其诱导的造血干细胞定向生成红细胞疫苗的抗结肠癌效果。方法构建CEA-EPO重组质粒,同时构建空载体质粒、CEA质粒和EPO质粒。用含抗体CD117磁珠分离纯化和收集小鼠骨髓造血干细胞,用重组腺病毒法将CEA-EPO基因体外转染到造血干细胞内,检测CEA和EPO基因及其蛋白的表达;将疫苗注入小鼠体内,进行扩增,使造血干细胞定向生成携带CEAEPO基因的红细胞,经过提取和纯化获得CEA-EPO基因共转染红细胞疫苗,再进行基因共转染红细胞疫苗的体外和体内实验。实验分组为空载体组、CEA组、EPO组和CEA-EPO组。结果成功收集造血干细胞,流式细胞仪分析结果表明:分选后的阳性管标本纯化后的CD117阳性细胞比例较纯化前升高,差异有统计学意义(P<0.01);CEA-EPO m RNA及其蛋白表达的检测结果表明:造血干细胞体外转染CEA-EPO基因成功,获得CEA-EPO基因共转染红细胞疫苗;采用细胞红系相关标志抗体GPA和CD71标记后,流式细胞仪结果证实红细胞疫苗培养成功;相关疫苗激活的单核细胞对结肠癌细胞株CT26细胞杀伤作用的实验结果表明:在比例为40∶1时,CEA-EPO组的杀伤作用强于空载体组、CEA组和EPO组(P<0.05);体内试验的成瘤性研究结果表明:处理后2周CEA-EPO组的肿瘤体积和死亡率小于或低于其他3组(P<0.05),且CEA-EPO组的生存时间长于其他3组(P<0.05)。结论携带CEA-EPO基因肿瘤抗原的红细胞疫苗对结肠癌有明显的抗肿瘤作用,既可以诱导造血干细胞定向分化成红细胞疫苗,又可以合成携带肿瘤抗原的红细胞疫苗,有望发展成为临床治疗结肠癌的重要疫苗。

关键词：结肠癌癌胚抗原红细胞生成素质粒转染红细胞疫苗

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阿卡宁治疗炎症性肠病模型小鼠的实验研究

中国医药 2018年第4期13卷 609-613页

作者：杨厚涞孙华文王秋爽王琦武汉大学人民医院胃肠外一科 430060

目的探讨阿卡宁在炎症性肠病模型小鼠急性炎症中的治疗作用及可能机制。方法选取64只6～8周龄雌性无特定病原体级Bal/c小鼠完全随机分为8组,每组8只。正常对照组给予充足的食物和水,每天给予1 ml食用橄榄油灌胃;模型组给予充足的食物、3... 详细信息

目的探讨阿卡宁在炎症性肠病模型小鼠急性炎症中的治疗作用及可能机制。方法选取64只6～8周龄雌性无特定病原体级Bal/c小鼠完全随机分为8组,每组8只。正常对照组给予充足的食物和水,每天给予1 ml食用橄榄油灌胃;模型组给予充足的食物、3%葡聚糖硫酸钠(DSS)灭菌水溶液,每天给予1 ml食用橄榄油灌胃;1 mg/kg阿卡宁(AKN-1)组、2 mg/kg阿卡宁(AKN-2)组、4 mg/kg阿卡宁(AKN4)组、8 mg/kg阿卡宁(AKN-8)组、16 mg/kg阿卡宁(AKN-16)组分别给予充足的食物、3%DSS灭菌水溶液,每天给予1 ml溶解相应剂量阿卡宁的食用橄榄油灌胃;阳性对照组给予充足的食物、3%DSS灭菌水溶液,每天给予1ml溶解美沙拉嗪的食用橄榄油灌胃。每天给药1次,连续6 d。比较各组小鼠结肠大体形态损伤指数评分(CMDI)、结肠病理组织学评分(TDI)和转化生长因子β_1(TGF-β_1)、白细胞介素17(IL-17)的mRNA和蛋白表达水平。结果 AKN-1组及AKN-2组CMDI及TDI与模型组比较,差异无统计学意义(均P>0.05)。AKN-4组、AKN-8组、AKN-16组CMDI及TDI均明显低于模型组(均P<0.05)。AKN-1组、AKN-2组、AKN4组、AKN-8组、AKN-16组的TGF-β_1、IL-17 mRNA表达水平均明显低于模型组[TGF-β_1 mRNA:(2.90±0.33)、(2.71±0.73)、(2.14±0.19)、(2.06±0.35)、(1.63±0.31)比(3.88±0.58);IL-17 mRNA:(2.48±0.35)、(2.25±0.64)、(2.07±0.21)、(1.78±0.24)、(1.67±0.23)比(3.21±0.41)](均P<0.05)。AKN-1组、AKN-2组、AKN-4组、AKN-8组、AKN-16组的TGF-β_1、、IL-17蛋白表达水平均明显低于模型组(均P<0.05)。结论阿卡宁可以作用于TGF-β_1—辅助性T细胞17-IL-17轴,发挥抗炎效果,对炎症性肠病有一定的治疗作用。

关键词：炎症性肠病阿卡宁转化生长因子-β1 白细胞介素17

M细胞及AIEC经M细胞途径致克罗恩病研究进展

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胃肠病学和肝病学杂志 2017年第7期26卷 819-822页

作者：杨厚涞孙华文孙科明王秋爽武汉大学人民医院胃肠外科湖北武汉430060

M细胞具有特殊的形态结构,其作为肠道一种免疫细胞,也是一种特殊的抗原转运细胞,与肠黏膜免疫功能密切相关。在克罗恩病(Crohn’s disease,CD)早期,存在M细胞增生、破裂这种细胞学水平的病理损伤,本研究就目前国内外学者所做M细胞的起... 详细信息

M细胞具有特殊的形态结构,其作为肠道一种免疫细胞,也是一种特殊的抗原转运细胞,与肠黏膜免疫功能密切相关。在克罗恩病(Crohn’s disease,CD)早期,存在M细胞增生、破裂这种细胞学水平的病理损伤,本研究就目前国内外学者所做M细胞的起源、形态结构、功能及贴壁侵入性大肠杆菌(adherent-invasive Escherchia coli,AIEC)经M细胞途径致CD研究进展作一概述。

关键词： M细胞起源形态结构功能克罗恩病侵入性大肠杆菌

球囊胃管引导3D腹腔镜楔形切除术治疗邻近贲门部胃间质瘤

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腹部外科 2018年第2期31卷 112-115页

作者：王琦孙华文王秋爽杨厚涞沈世强武汉大学人民医院胃肠外一科武汉430060 武汉大学人民医院普通外科武汉430060

目的探讨应用球囊胃管引导3D腹腔镜楔形切除术治疗邻近贲门部胃间质瘤的安全性和可行性。方法 2014年1月至2015年12月间,对武汉大学人民医院就诊的20例邻近贲门部(距离≤5 cm)胃间质瘤病人,在球囊胃管引导下行3D腹腔镜楔形切除术。回顾... 详细信息

目的探讨应用球囊胃管引导3D腹腔镜楔形切除术治疗邻近贲门部胃间质瘤的安全性和可行性。方法 2014年1月至2015年12月间,对武汉大学人民医院就诊的20例邻近贲门部(距离≤5 cm)胃间质瘤病人,在球囊胃管引导下行3D腹腔镜楔形切除术。回顾性分析该组病人的围手术期指标,术后病理结果及复发转移情况。结果所有病人均在球囊胃管引导下完成3D腹腔镜楔形切除术,未发生术中肿瘤破裂、中转开腹以及术后病理切缘阳性。平均手术时间(79.2±23.4)min,术中平均出血量(35.1±17.1)ml。除1例术后腹腔出血病人经保守治疗痊愈外,无其他术后并发症发生。术后3个月胃镜或上消化道钡餐检查未发现贲门狭窄。随访12~38个月(中位随访时间为22.5个月)未见肿瘤复发和转移。结论对于邻近贲门的胃间质瘤,应用球囊胃管引导行3D腹腔镜楔形切除术安全可行,符合手术原则,并可预防术后贲门狭窄。

关键词：胃肠道间质瘤贲门球囊胃管腹腔镜三维视觉

基于动态键交联生物质水凝胶的制备及其应用研究

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基于动态键交联生物质水凝胶的制备及其应用研究

作者：杨厚基中南林业科技大学

学位级别：硕士

近年来,生物质基水凝胶因具有绿色环保、可生物降解、力学和导电性可调等优点,在柔性电子、润滑、组织工程等领域得到了广泛的应用。然而,以生物质材料制备的离子导电水凝胶和润滑水凝胶普遍存在机械性能与导电性能互斥,聚合物网络不可... 详细信息

近年来,生物质基水凝胶因具有绿色环保、可生物降解、力学和导电性可调等优点,在柔性电子、润滑、组织工程等领域得到了广泛的应用。然而,以生物质材料制备的离子导电水凝胶和润滑水凝胶普遍存在机械性能与导电性能互斥,聚合物网络不可逆等问题,导致其难以满足实际工程中的应用需求。因此,本论文基于动态键交联,分别设计了具有应变-电阻稳定性的生物质基离子导电水凝胶和动态力学转变的生物质基润滑水凝胶,实现在柔性电子和智能润滑领域的高价值利用。主要工作内容如下:(1)选择果胶、硼砂和醋酸锌为原料,采用一锅法和溶胶-凝胶法制备了果胶基离子导电水凝胶(SICH)。通过硼砂和醋酸锌分别与果胶交联形成了动态的B-羟基共价键和Zn-羧基离子键。在Zn-羧基离子键和B-羟基共价键的协同作用下,SICH水凝胶实现了优异的应变-电阻稳定性。电化学和拉伸测试结果表明,SICH水凝胶具有高的离子电导率(3.89 S/m),高拉伸性(>1800%),强的抗拉强度和韧性值(2.28 MPa±0.15 MPa、3.3 MPa)。此外,通过在水凝胶网络中引入甘油,实现SICH水凝胶优异的耐受恶劣环境能力。其在-40℃到60℃的温度范围内能够保持稳定的导电能力,避免水凝胶在低温发生凝结和高温发热导致脱水。作为柔性电子器件的导电部件,该水凝胶具有高的寿命和稳定的运行性能。(2)将海藻酸钠、硼砂、甘油和乙醇作为原料,采用一锅法和溶胶-凝胶法制备了具有可调力学性能和可切换摩擦系数的自适应润滑水凝胶(ALH)。通过调节甘油与乙醇的比例可以控制B-O键的结合数量,进而改变水凝胶的力学性能,最终实现ALH润滑水凝胶摩擦系数的双向调控。力学测试结果表明,该水凝胶的力学强度可在0.55-6.93 MPa之间可控地调节,具有优异的力学调节能力。此外,通过加入银耳多糖润滑剂拓宽了润滑水凝胶的摩擦调节范围。摩擦测试分析显示,ALH水凝胶的摩擦系数可在0.022-0.157之间实现双向调控。最后,甘油与水分子之间形成氢键赋予了水凝胶优异的环境耐受性,其可以在-40℃到60℃的温度范围内保持润滑性能的稳定性。该水凝胶为高性能智能材料提供了新的见解,促进了自适应润滑水凝胶在智能调速和机械传动等领域的应用,从而扩大了其市场潜力。综上所述,本研究以生物质材料果胶和海藻酸钠作为聚合物基体,通过动态键交联设计制备了两种功能型生物质水凝胶,并探讨了水凝胶在柔性电子与智能润滑领域的应用。这些研究工作为实现生物质材料的高价值循环利用和水凝胶的多功能化提供了新的方法。

关键词：生物质离子导电水凝胶润滑水凝胶柔性电子智能润滑