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基于网络药理学探讨黄芪甲苷作为保健食品对慢性萎缩性胃炎调节作用

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食品与发酵工业 2024年第12期50卷 284-291页

作者：包哲隈胡舒楠杨兰珠喻文娟杨靖亚上海海洋大学食品学院上海201306 上海海洋大学水产与生命学院上海201306 农业部水产品贮藏保鲜质量安全风险评估实验室(上海) 上海201306 国家淡水水产品加工技术研发分中心(上海) 上海201306

该研究依托网络药理学预测分析黄芪甲苷(astragalosideⅣ)对调节慢性萎缩性胃炎的功效,为其在功能性食品中的应用提供依据。该实验从Swiss Target Prediction、PharmMapper、OMIM等数据库中获取黄芪甲苷调节慢性萎缩性胃炎的目标基因,... 详细信息

该研究依托网络药理学预测分析黄芪甲苷(astragalosideⅣ)对调节慢性萎缩性胃炎的功效,为其在功能性食品中的应用提供依据。该实验从Swiss Target Prediction、PharmMapper、OMIM等数据库中获取黄芪甲苷调节慢性萎缩性胃炎的目标基因,取交集确定靶点基因。在STRING数据库上构建蛋白质相互作用(protein-protein interaction,PPI)网络。PPI网络依据介数中心性用Cytoscape软件进行拓扑分析,并通过Autodock Vina软件模拟可能的分子对接结果。在微生信在线平台进行GO和KEGG富集分析,筛选出相关信号通路。体外实验通过1-甲基-3-硝基-1-亚硝基胍(1-methyl-3-nitro-1-nitrosoguanidine,MNNG)诱导人胃黏膜上皮细胞并用黄芪甲苷干预,来检测细胞活力及炎症因子分泌水平进行验证。最终筛选得到黄芪甲苷调节慢性萎缩性胃炎的潜在靶点53个,其中关键基因8个。GO富集分析显示,囊泡腔是生物过程发生的主要场所。KEGG结果表明,肿瘤中的蛋白聚糖是黄芪甲苷调节慢性萎缩性胃炎的关键信号通路。体外实验发现,黄芪甲苷对MNNG诱导的细胞损伤具有预防治疗作用,且可以下调IL-6、IL-8、IL-1β、TNF-α等炎症因子的分泌(P<0.05)。该研究表明黄芪甲苷可以通过多个靶点和途径发挥抗慢性萎缩性胃炎作用,可作为功能因子用于防治慢性萎缩性胃炎。

关键词：黄芪甲苷慢性萎缩性胃炎药食同源网络药理学分子对接

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异荭草苷通过MAPK/FoxO信号通路减轻LPS诱导的RAW 264.7细胞炎症反应

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安徽农业大学学报 2024年第1期51卷 132-137页

作者：杨兰珠李诗怡孙雨伟王勇杨靖亚上海海洋大学食品学院上海201306 中国科学院上海生命科学研究院上海200032

为了研究异荭草苷(Isoorientin,ISO)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的RAW264.7细胞炎症反应的影响及其机制,将对数生长期的RAW264.7细胞随机分为对照组、模型组(LPS 1μg·mL^(-1))和异荭草苷(ISO 2.5~40μg·mL^(-1)+LPS)给药组。各组细胞培养24 h后,MTT法检测ISO对RAW 264.7细胞毒性,Griess法检测细胞培养液中一氧化氮(NO)的含量,ELISA法检测细胞培养液中TNF-α的含量,q RT-PCR方法检测环氧合酶2(COX-2)m RNA的表达水平,蛋白质印迹分析法测定细胞中COX-2、JNK、p-JNK、p38、p-p38、FoxO1和FoxO3蛋白的表达。结果表明,与LPS模型组比较,ISO显著抑制LPS诱导的TNF-α(P<0.001)和NO(P<0.01)的产生,且未见其细胞毒性。此外,ISO以剂量依赖的方式显著抑制RAW 264.7细胞COX-2基因(P<0.001)和蛋白(P<0.05)的表达。蛋白质印迹分析显示,ISO显著抑制MAPK信号通路中p-JNK和p-p38的磷酸化,并减少Fox O1/3的核转位。综上所述,ISO可抑制LPS诱导的RAW 264.7细胞炎症反应,其作用机制可能与其在MAPK/FoxO信号通路中发挥调节作用有关。

关键词：异荭草苷炎症 RAW264.7巨噬细胞 MAPK信号通路 FoxO信号通路

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副溶血性弧菌产耐热直接溶血毒素对黑色素瘤的抑制作用研究

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海洋科学 2022年第8期46卷 121-129页

作者：杨兰珠李诗怡郑雯静李静包哲隈杨靖亚上海海洋大学食品学院上海201306

为探讨耐热直接溶血毒素(Thermostabile direct hemolysin,TDH)在体内和体外对小鼠黑色素瘤细胞B16的抑制作用,本研究通过MTT法、克隆形成试验、凋亡试验、Caspase-8和Caspase-3的活性试验、线粒体膜电位的检测以及体内C57BL/6小鼠(Mus ... 详细信息

为探讨耐热直接溶血毒素(Thermostabile direct hemolysin,TDH)在体内和体外对小鼠黑色素瘤细胞B16的抑制作用,本研究通过MTT法、克隆形成试验、凋亡试验、Caspase-8和Caspase-3的活性试验、线粒体膜电位的检测以及体内C57BL/6小鼠(Mus musculus)荷瘤实验,比较TDH作用于不同细胞的半抑制浓度(IC50),评价TDH对小鼠黑色素瘤细胞B16的体内外抑制作用。结果发现:人结肠上皮细胞NCM460、人正常肝细胞LO2、人肝癌细胞SMMC-7721和小鼠黑色素瘤细胞B16在TDH处理24 h之后,细胞的半抑制质量浓度IC50分别为151、118、54和48μg/mL,正常细胞的IC50高出癌细胞近2~3倍。当质量浓度低于20μg/mL时,TDH以剂量依赖性的方式抑制B16细胞的克隆形成,6 mg/kg TDH在移植瘤模型中显著抑制体内肿瘤的生长(P<0.001)。流式细胞术和荧光试剂盒检测表明:20μg/mL的TDH能诱导19.4%的B16细胞发生早期凋亡,并激活Caspase-8和Caspase-3,但不影响线粒体膜电位。TDH具有体内外的抗肿瘤活性,可能通过细胞表面的死亡受体介导的凋亡信号通路引起凋亡,从而发挥抗肿瘤作用。

关键词：海洋毒素耐热直接溶血毒素抗肿瘤死亡受体凋亡

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斑马鱼模型应用于肝损伤疾病模型的研究进展

安徽农业大学学报 2023年

作者：杨靖亚包哲隈杨兰珠喻文娟武万强上海海洋大学水产与生命学院上海海洋大学食品学院国家淡水水产品加工技术研发分中心(上海) 农业部水产品贮藏保鲜质量安全风险评估实验室(上海)

由于斑马鱼细胞组成、同源基因，免疫反应，药物代谢等方面与人类相比具有高度保守性。再加上斑马鱼体积小，产量大，适合被基因编辑等特点，适合于高通量的药物筛选。所以斑马鱼和斑马鱼胚胎常被用来模拟发育缺陷或化合物诱导的肝脏疾... 详细信息

由于斑马鱼细胞组成、同源基因，免疫反应，药物代谢等方面与人类相比具有高度保守性。再加上斑马鱼体积小，产量大，适合被基因编辑等特点，适合于高通量的药物筛选。所以斑马鱼和斑马鱼胚胎常被用来模拟发育缺陷或化合物诱导的肝脏疾病。对斑马鱼作为肝脏疾病模型的优点，以及斑马鱼模型在免疫反应，药物代谢等方面的与人类的相似性进行综述。归纳了目前一些针对不同因素开发的斑马鱼模型及其相关病理机制以及相关药物筛选，并简要分析了其与哺乳动物模型的差异及优势，以期对肝脏疾病的药物筛选有所帮助。

关键词：斑马鱼肝损伤肝脏结构药物筛选免疫系统

聚多曲霉菌—龙葵联合修复镉污染农田土壤的研究与应用

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聚多曲霉菌—龙葵联合修复镉污染农田土壤的研究与应用

作者：杨兰江南大学

学位级别：硕士

镉（cadmium,Cd）具有高迁移性、持久性和生物毒性,土壤中的Cd可进入食物链并对人类健康造成严重威胁。针对我国Cd污染农田土壤分布广泛、原生植被退化较严重、Cd修复效率低的问题,构建土培条件下根际植物促生真菌（plant growth promot... 详细信息

镉（cadmium,Cd）具有高迁移性、持久性和生物毒性,土壤中的Cd可进入食物链并对人类健康造成严重威胁。针对我国Cd污染农田土壤分布广泛、原生植被退化较严重、Cd修复效率低的问题,构建土培条件下根际植物促生真菌（plant growth promoting fungi,PGPF）和典型超积累植物联合修复体系,设置对植物和微生物影响明显的高Cd施用浓度,深入剖析PGPF对促进龙葵Cd耐受性及其对Cd的吸收、转运和富集的生理效应的贡献,探索原位强化土壤Cd污染修复技术。为评价联合体系修复Cd污染农田土壤的应用价值,进行根际互作盆栽试验,研究作物和超积累植物的生态竞争关系,探明根际互作对重金属Cd竞争吸收的影响机制,组合形成联合修复体系与低积累作物间作的应用模式,实现Cd污染农田土壤的边生产边修复的安全利用。具体从以下三个方面开展研究:（1）聚多曲霉菌（Aspergillus sydowii）DJ515-2对Cd具有较高的耐受性,在100mg L Cd条件下,菌株仍可以生长,但发育迟缓。菌株具备产酸能力,可以活化Cd CO,降低培养液p H。菌株长有纤维状菌丝和凹凸褶皱,增大其与溶液中Cd接触面积。吸附实验发现,菌株在200 mg L Cd条件下,菌体冷冻干燥吸附剂的Cd吸附能力达到最大值24.94 mg g,其吸附过程符合Langmuir吸附模型,属于特定同质位点的单层吸附。菌株对Cd的吸附以胞外为主,胞外吸附类型中以物理吸附为主,这部分Cd容易洗脱,不易形成复杂团聚体,这意味着菌株在土壤Cd修复中难以发挥固定作用。Cd的亚细胞分布表明,Cd多数分布在细胞壁上。定量测定了菌株的生物促生性能,其具备较好的分泌吲哚-3-乙酸（indole-3-acetic acid,IAA）、1-氨基环丙烷-1-羧酸（1-aminocyclopropane-1-carboxylate,ACC）脱氨酶能力、以及一定的产生铁载体和溶磷的能力。（2）低浓度(3 mg kg)Cd刺激龙葵生长,中高浓度(30和60 mg kg)Cd胁迫则会抑制龙葵的生长发育,PGPF缓解Cd对龙葵的毒害效应。具体表现为高Cd胁迫下株高、根伸长等生长参数均显著降低,生物量下降,叶片光合色素受到破坏和降解。龙葵叶片丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量和相对电导率显著提高,叶片细胞膜受到的氧化损伤加重。Cd胁迫诱导龙葵叶片脯氨酸含量迅速积累,并且在中浓度(30mg kg)Cd处理下起到较强的细胞渗透调节作用。接种PGPF显著提高龙葵在不同浓度Cd胁迫下生长构型、生物量及光合色素含量,降低了龙葵叶片MDA含量、相对电导率和脯氨酸含量,一定程度上缓解了Cd胁迫对龙葵叶片组织的伤害。此外,PGPF能够提高龙葵叶片细胞抗氧化酶活性,提高龙葵对Cd的抗氧化防御能力。从植物修复角度分析,接种PGPF提高了龙葵吸收的总Cd含量,这对提高超积累植物修复效率具有重要现实意义。（3）应用PGPF-龙葵联合修复体系与低积累作物油菜间作,结果表明间作处理下龙葵生物量显著升高,低积累油菜生物量较单作处理显著降低。间作处理下油菜叶片的光合色素含量较单作处理均显著降低,油菜地上可食用部分Cd含量较单作降低16.98%,Cd浓度(0.15 mg kg)低于中国食品安全国家标准允许的阈值水平,龙葵地上部Cd含量增加。间作系统中,油菜的可溶性糖和可溶性蛋白含量在添加PGPF后升高。PGPF强化下间作模式虽然对油菜的生物量和光合作用有一定的影响,但不影响油菜的品质,且可以使油菜中Cd的累积浓度和总累积量降低。单作条件下,油菜降低了土壤有效态Cd含量,龙葵增加有效态Cd含量。间作条件中,土壤有效态Cd含量升高,联合体系与油菜间作也表现出相同趋势。土壤蔗糖酶、脲酶、过氧化氢酶活性相较单作显著升高,土壤细菌多样性和丰富度相较于单作显著升高,联合间作系统中,PGPF对微生物群落多样性有提升作用。

关键词：龙葵根际促生真菌土壤修复间作

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基于生态网络效用的宁波市土地碳代谢分析

环境科学 2024年

作者：李理周小平梁颖杨兰北京师范大学政府管理学院

揭示土地利用对碳代谢的影响机制，为推动土地资源可持续利用和城市绿色低碳转型发展提供依据。以宁波市为研究对象，在多源数据收集的基础上构建碳代谢分析框架，综合运用生态网络分析、标准差椭圆、推力和拉力等模型追踪碳要素流动过... 详细信息

揭示土地利用对碳代谢的影响机制，为推动土地资源可持续利用和城市绿色低碳转型发展提供依据。以宁波市为研究对象，在多源数据收集的基础上构建碳代谢分析框架，综合运用生态网络分析、标准差椭圆、推力和拉力等模型追踪碳要素流动过程，刻画碳代谢时空演化规律，进而提出土地利用碳减排策略。结果发现：①宁波市净碳排放量（以C计）由381.78万t增至2978.11万t，增加了7.80倍。②垂直方向上净碳排放量为负值，除林地和草地为正碳代谢分室外，其他用地类型均表现为负碳代谢分室；水平方向上的净碳排放量为负值，主要是耕地、林地向其他建设用地转变导致。③掠夺限制是主要的生态关系，整体生态函数值为0.86，相较于2000～2010年，2010～2020年掠夺限制标准差椭圆中心向东旋转1.47°，竞争关系标准差椭圆中心向西旋转10.46°，椭圆总体范围减小。④耕地、林地和其他建设用地是主要的推力类型，其他建设用地和城镇用地是主要的拉力类型。因此，需要通过采取多种措施降低高碳排放用地密度，同时对生态用地分类制定碳汇提升策略，实现土地利用结构优化和国土空间减排增汇的目标。

关键词：土地利用碳代谢生态网络效用分析碳流宁波市

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天然产物治疗炎症性肠病的研究进展

安徽农业大学学报 2022年第5期49卷 855-860页

作者：杨靖亚杨兰珠郭若晖李静武万强上海海洋大学食品学院上海201306

炎症性肠病是一组慢性胃肠道炎症性疾病,临床表现为腹胀、腹泻、腹痛,有时甚至出现血便。目前用于治疗炎症性肠病的药物有氨基水杨酸、糖皮质激素和免疫抑制剂等。这些药物可以减轻或延缓炎症性肠病的发生和发展,但在长期使用后,一些患... 详细信息

炎症性肠病是一组慢性胃肠道炎症性疾病,临床表现为腹胀、腹泻、腹痛,有时甚至出现血便。目前用于治疗炎症性肠病的药物有氨基水杨酸、糖皮质激素和免疫抑制剂等。这些药物可以减轻或延缓炎症性肠病的发生和发展,但在长期使用后,一些患者可能会出现某种程度的毒副作用。近年来研究发现许多天然产物具有明显的抗炎作用,它们可以降低炎症性肠病的复发率,提高治疗安全性。系统综述了来自几种植物、动物和微生物天然产物的抗炎活性。

关键词：天然产物补充或替代药物炎症性肠病克罗恩病溃疡性结肠炎

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斑马鱼应用于肝损伤疾病模型的研究进展

安徽农业大学学报 2023年第6期50卷 957-963页

作者：杨靖亚包哲隈杨兰珠喻文娟武万强上海海洋大学食品学院上海201306 农业部水产品贮藏保鲜质量安全风险评估实验室(上海) 上海201306 国家淡水水产品加工技术研发分中心(上海) 上海201306 上海海洋大学水产与生命学院上海201306

由于斑马鱼细胞组成、同源基因,免疫反应,药物代谢等方面与人类相比具有高度保守性。再加上斑马鱼体积小,产量大,适合被基因编辑等特点,适合于高通量的药物筛选。所以斑马鱼和斑马鱼胚胎常被用来模拟发育缺陷或化合物诱导的肝脏疾病。... 详细信息

由于斑马鱼细胞组成、同源基因,免疫反应,药物代谢等方面与人类相比具有高度保守性。再加上斑马鱼体积小,产量大,适合被基因编辑等特点,适合于高通量的药物筛选。所以斑马鱼和斑马鱼胚胎常被用来模拟发育缺陷或化合物诱导的肝脏疾病。对斑马鱼作为肝脏疾病模型的优点,以及斑马鱼模型在免疫反应,药物代谢等方面的与人类的相似性进行综述。归纳了目前一些针对不同因素开发的斑马鱼模型及其相关病理机制以及相关药物筛选,并简要分析了其与哺乳动物模型的差异及优势,以期对肝脏疾病的药物筛选有所帮助。

关键词：斑马鱼肝损伤肝脏结构药物筛选免疫系统

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邢台市南和区蔬菜种植合作社风险防控研究

邢台市南和区蔬菜种植合作社风险防控研究

作者：程杨兰河北科技师范学院

学位级别：硕士

在现代农业发展的背景下,蔬菜种植合作社作为一种新兴的农业组织形式,深受广大农民喜爱。蔬菜种植合作社不仅能有效地推动农户之间的互助合作,在一定程度上消除农产品与市场之间的壁垒,还能增加农户的收入,促进农村经济的发展。中国作... 详细信息

在现代农业发展的背景下,蔬菜种植合作社作为一种新兴的农业组织形式,深受广大农民喜爱。蔬菜种植合作社不仅能有效地推动农户之间的互助合作,在一定程度上消除农产品与市场之间的壁垒,还能增加农户的收入,促进农村经济的发展。中国作为农业大国,农业生产力较为充足,但抗风险能力不足,大规模经营下产能可得到充分利用,风险也会随之增加。合作社的农业投入高,收益低,受市场波动较大,再加上其资本力量薄弱,抵御风险的能力不强,风险很容易给合作社和农户造成损失。因此,这就要求合作社在提升风险管理意识的同时增强自身的风险防控能力。本文以邢台市南和区蔬菜种植合作社存在的风险为研究对象,分析了蔬菜种植合作社面临的风险类型、风险防控现状以及合作社风险防控中存在的问题,提出了与之风险相关的防控措施。通过文献研究法、问卷调查法、实地调查法等研究了邢台市南和区蔬菜种植合作社发展现状,以及邢台市南和区蔬菜种植合作社风险防控过程中出现的问题,如防灾能力不足、管理者专业水平较低、内部资金短缺等问题,并对国内外合作社风险防控的情况进行了介绍,吸取了一些好的做法和经验,同时根据蔬菜种植合作社在运行中的具体需求,结合风险管理理论、蛛网理论及利益相关者理论,对南和区蔬菜种植合作社风险防控过程中存在的问题提出了防控建议,比如建立自然风险预警机制、提升管理者能力水平、积极争取资金扶持、加强合作社农产品品牌建设、提高经营主体合同法律意识等对策建议,以促进合作社长期可持续发展。

关键词：风险蔬菜种植合作社风险防控