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固体核磁共振研究纤维素凝胶/聚ε-己内酯复合材料的结构与分子运动

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功能高分子学报 2018年第6期31卷 585-594页

作者：侯立峰黄海龙杨仲丽徐敏华东师范大学物理与材料学院上海市磁共振重点实验室上海200062

利用固体核磁共振方法对纤维素凝胶(CG)/聚ε-己内酯(PCL)复合材料进行了结构表征,研究了其在温度变化过程中的分子运动,阐释了CG与PCL之间的相互影响。变温氢谱显示,与纯PCL相比,复合材料的谱图存在明显的宽化现象,表明CG和PCL两种组... 详细信息

利用固体核磁共振方法对纤维素凝胶(CG)/聚ε-己内酯(PCL)复合材料进行了结构表征,研究了其在温度变化过程中的分子运动,阐释了CG与PCL之间的相互影响。变温氢谱显示,与纯PCL相比,复合材料的谱图存在明显的宽化现象,表明CG和PCL两种组分之间存在很强的偶极相互作用。质子的自旋-自旋弛豫时间表明,PCL与CG之间相互影响,PCL组分受到CG组分的限制,运动能力大大降低;而CG组分受到PCL组分的影响,分子运动反而变得稍有活跃。这种相互作用造成了复合材料强度、韧性以及耐热性的大幅度提高。

关键词：纤维素聚ε-己内酯固体核磁共振分子运动

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应用易错PCR定向进化甘油脱氢酶

华侨大学学报（自然科学版） 2010年第6期31卷 661-666页

作者：李梓君方柏山杨仲丽刘嘉华侨大学工业生物技术福建省高等学校重点实验室福建泉州362021

经过连续易错聚合酶链式反应(Error-Prone PCR)向克雷伯杆菌(Klebsiella pneumoniae)甘油脱氢酶基因中引入突变,并构建突变文库.依据突变体催化番红O显色的特性,采用琼脂平板法和96微孔板法相结合的高通量筛选方法,成功获得突变体gldA-... 详细信息

经过连续易错聚合酶链式反应(Error-Prone PCR)向克雷伯杆菌(Klebsiella pneumoniae)甘油脱氢酶基因中引入突变,并构建突变文库.依据突变体催化番红O显色的特性,采用琼脂平板法和96微孔板法相结合的高通量筛选方法,成功获得突变体gldA-74,其酶活力是亲本重组酶的2.73倍.通过软件对突变体gldA-74酶基因和亲本重组酶基因进行分析对比,发现突变体gldA-74酶基因发生了一处点突变(A964T),该突变使一处氨基酸被取代.将亲本重组酶和进化酶的高效表达产物经Ni柱纯化后,酶学性质的测定结果表明,甘油的Km值由0.58 mmol.L-1升高至0.63 mmol.L-1,而NAD的Km值由0.74 mmol.L-1升高至0.77mmol.L-1,并且酶的最适pH值由原来的11.5升高至12.5,而最适温度由65℃降至55℃.

关键词：甘油脱氢酶克雷伯杆菌定向进化易错聚合酶链式反应

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核磁共振在纤维素研究中的应用

核磁共振在纤维素研究中的应用

中国化学会第一届全国纤维素学术研讨会

作者：徐敏黄海龙杨仲丽华东师范大学上海市磁共振重点实验室

＜正＞纤维素是地球上含量最丰富的天然高分子化合物,具有安全无毒、可再生、可生物降解等特点。新型碱脲溶剂的出现,更加扩展了纤维素的应用前景[1]。本文以纤维素为例,介绍了核磁共振（NMR）在天然高分子的溶解机理研究中的应用以及...

＜正＞纤维素是地球上含量最丰富的天然高分子化合物,具有安全无毒、可再生、可生物降解等特点。新型碱脲溶剂的出现,更加扩展了纤维素的应用前景[1]。本文以纤维素为例,介绍了核磁共振（NMR）在天然高分子的溶解机理研究中的应用以及其衍生物结构研究中的应用。

关键词：

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克雷伯杆菌中甘油脱氢酶的定向进化

克雷伯杆菌中甘油脱氢酶的定向进化

华东六省一市生物化学与分子生物学会2008年学术交流会

作者：李梓君方柏山杨仲丽朱春杰工业生物技术福建省高等学校重点实验室(华侨大学)

克雷伯杆菌甘油脱氢酶(GDH)在辅酶NAD+的存在下催化甘油生成二羟基丙酮(DHA),NAD+被还原成NADH。在微生物以甘油为底物发酵生成1,3-丙二醇的过程中,

关键词：

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辅酶依赖型和不依赖型甘油脱水酶的比较

华侨大学学报（自然科学版） 2010年第5期31卷 542-547页

作者：杨仲丽方柏山余劲聪王庆花李梓君华侨大学工业生物技术福建省高等学校重点实验室福建泉州362021

实验比较源自肺炎克氏杆菌(K.pneumoniae)和丁酸梭状芽孢杆菌(C.butyricum)中的甘油脱水酶(GDHt)的辅酶依赖特性.采用生物信息学的方法,对两种酶的异同点进行分析,发现两种酶结构上相似性较低、亲缘性较远、分属于两个不同的家族.SMART... 详细信息

实验比较源自肺炎克氏杆菌(K.pneumoniae)和丁酸梭状芽孢杆菌(C.butyricum)中的甘油脱水酶(GDHt)的辅酶依赖特性.采用生物信息学的方法,对两种酶的异同点进行分析,发现两种酶结构上相似性较低、亲缘性较远、分属于两个不同的家族.SMART数据库搜索结果表明,C.butyricum中不依赖辅酶的甘油脱水酶及其再激活酶,分别属于gly-Radical和Radical-SAM家族,多序列比对得到的一段富含半胱氨酸残基C**C**C的保守序列正是其共同特征.

关键词：肺炎克氏杆菌丁酸梭状芽孢杆菌辅酶甘油脱水酶维生素B12 依赖性

丁酸梭菌中甘油脱水酶及其再激活酶基因的克隆表达

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丁酸梭菌中甘油脱水酶及其再激活酶基因的克隆表达

华东六省一市生物化学与分子生物学会2008年学术交流会

作者：杨仲丽方柏山李梓君朱春杰工业生物技术福建省高等学校重点实验室(华侨大学)

丁酸梭状芽孢杆菌(Clostridia butyricum)甘油脱水酶(glycerol dehydratase,GDHt)是文献报道的一类不依赖辅酶B12的甘油脱水酶,它是一个单亚基二聚体,其基因DhaB1与再激活酶基因DhaB2分处于两个紧邻的ORF,甘油经甘油脱水酶生成3-羟基丙...

丁酸梭状芽孢杆菌(Clostridia butyricum)甘油脱水酶(glycerol dehydratase,GDHt)是文献报道的一类不依赖辅酶B12的甘油脱水酶,它是一个单亚基二聚体,其基因DhaB1与再激活酶基因DhaB2分处于两个紧邻的ORF,甘油经甘油脱水酶生成3-羟基丙醛(3-hydroxypropionaldehyde,3-HPA),再经1,3-丙二醇氧化还原酶的作用最终生成1,3-丙二醇(1,3-propanediol,1,3-PD),甘油脱水酶在此代谢中起着至关重要的作用。而3-HPA和1,3-PD均是重要的化工原料,3-HPA可以用于食品保藏及许多化工原料的前体;1,3-PD不仅是良好的溶剂、抗冻剂、保护剂,而且还是合成许多缩聚物的单体。本研究运用PCR技术从Clostridia butyricum VPI1718的基因组中扩增得到甘油脱水酶及其再激活酶的基因DhaB1和DhaB2,将其连入pMD-18T载体,构建了重组克隆质粒pMD-DhaB1B2。经测序鉴定正确后,将整段目的基因DhaB1B2亚克隆至表达载体pET-22b(+),构建了重组表达质粒pET-22gdrAB。将此重组质粒转入大肠杆菌BL21(DE3),以IPTG作诱导剂,运用均匀设计实验方案,结合回归分析同时对IPTG的浓度、诱导时间和诱导温度这三个因素在较大的范围内进行了优化,在诱导条件的进一步优化中,分别考察诱导温度、诱导时间、IPTG浓度等对其产GDHt的影响,得到优化的培养条件,最终在大肠杆菌BL21(DE3)中厌氧诱导表达可得到酶活性比野生菌的高6倍的重组甘油脱水酶(2.26U/mL)。其比活约为36.26U/mg。

关键词：

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纤维素复合材料的固体核磁共振研究

纤维素复合材料的固体核磁共振研究

第十一届全国高聚物分子与结构表征学术研讨会

作者：徐敏侯立峰黄海龙杨仲丽华东师范大学物理与材料学学院上海市磁共振重点实验室

利用固体核磁共振研究天然高分子纤维素及其复合材料的聚集态结构和分子运动。通过氢谱,碳谱,变温谱,弛豫时间等多种方法对材料进行多层次的研究。以纤维素/聚己内酯为例,阐述纤维素对聚己内酯的增强机理。

关键词：固体核磁共振纤维素聚集态结构分子运动

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低场核磁共振原位研究水凝胶的溶胀过程

低场核磁共振原位研究水凝胶的溶胀过程

第十一届全国高聚物分子与结构表征学术研讨会

作者：杨仲丽戎晨亮侯立峰徐敏华东师范大学物理与材料科学学院上海市磁共振重点实验室

利用固体NMR研究了温敏性水凝胶P（NIPAM-co-AM）分子链在不同温度,尤其是临界温度附近不同基团的运动状态变化。当温度低于LCST时,体系中分子链运动较快,当温度高于LCST后,由于疏水作用增强,凝胶结构收缩,分子链运动减慢。实验还发现,... 详细信息

利用固体NMR研究了温敏性水凝胶P（NIPAM-co-AM）分子链在不同温度,尤其是临界温度附近不同基团的运动状态变化。当温度低于LCST时,体系中分子链运动较快,当温度高于LCST后,由于疏水作用增强,凝胶结构收缩,分子链运动减慢。实验还发现,不同的基团在不同频段的运动对于温度的响应并不是同步的,而是有着一定的顺序。利用低场核磁共振（LF-NMR）原位研究了复合凝胶的溶胀过程。

关键词：水凝胶 LCST NMR 分子运动

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一种用于检测铁(Ⅲ)的新型荧光水凝胶

塑料工业 2021年第8期49卷 32-37,118页

作者：黄志坚黄海龙王艳玲韩卢杨仲丽蒋治成徐敏华东师范大学物理与电子科学学院上海市核磁共振重点实验室上海200240

出于对环境保护和身体健康的关切,检测水中尤其是饮用水中的金属离子的含量是很重要的。首先通过席夫碱反应用二苯甲酮(BP)对枝化聚乙烯亚胺(PEI)进行端基修饰,成功合成了一种二苯甲酮修饰的亚胺荧光聚合物PEI-BP;然后将PEI-BP溶于丙烯... 详细信息

出于对环境保护和身体健康的关切,检测水中尤其是饮用水中的金属离子的含量是很重要的。首先通过席夫碱反应用二苯甲酮(BP)对枝化聚乙烯亚胺(PEI)进行端基修饰,成功合成了一种二苯甲酮修饰的亚胺荧光聚合物PEI-BP;然后将PEI-BP溶于丙烯酸(AA)、2-丙烯酸-2-甲氧基乙酯(MEA)和聚乙二醇丙烯酸甲酯(PEGA)溶液中进行原位聚合,得到一种荧光水凝胶PEI-BP@PEGMA(PEI-BP@PEGA-co-MEA-co-AA)。采用红外光谱、核磁共振氢谱和荧光光谱对荧光聚合物与凝胶的结构和性质进行了表征和研究。结果表明,该水凝胶具有良好的荧光性能,并在pH值=2-6的酸性条件下具有良好的稳定性。Fe^(3+)对PEI-BP@PEGMA的荧光具有猝灭作用,Fe^(3+)浓度与荧光强度呈线性关系。因此,PEI-BP@PEGMA可以应用于Fe^(3+)检测,其检测限为8.22μmol。另外,PEI-BP@PEGMA对Fe^(3+)的响应性具有良好的抗干扰能力,在Fe^(3+)与其他离子共存的条件下,仍能做出准确检测。这表明PEI-BP@PEGMA在金属离子检测和环境保护领域具有潜在的应用前景。

关键词：离子检测水凝胶荧光铁离子