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盾叶薯蓣唤阿屯醇合成酶基因的克隆与表达

盾叶薯蓣唤阿屯醇合成酶基因的克隆与表达

食虫沟瘤蛛钠离子通道基因cDNA片段的克隆和序列分析

2006年度学术研讨会

作者：陈迪杨之帆陈永勤湖北大学生命科学学院植物基因工程实验室

皂苷是一类植物次生物质,具有广泛的药理和生物活性,如表面活性作用,溶血作用抑菌抗肿瘤作用。其水解产物皂素(皂苷元)是产生激素类药物的重要原料。盾叶薯蓣(Dioscorea zingiberensis C．H Wright)是我国所特有的一种经济型作物,其根...

皂苷是一类植物次生物质,具有广泛的药理和生物活性,如表面活性作用,溶血作用抑菌抗肿瘤作用。其水解产物皂素(皂苷元)是产生激素类药物的重要原料。盾叶薯蓣(Dioscorea zingiberensis C．H Wright)是我国所特有的一种经济型作物,其根茎富含有薯蓣皂苷元(Diosgenin)。薯蓣皂苷元是合成甾体激素类药物的最主要的原料之一,

关键词：

来源： cnki会议评论

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cnki会议

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植物保护学报 2007年第2期34卷 219-220页

作者：张丹丹杨之帆彭宇焦彦成王荫长湖北大学生命科学学院武汉430062 南京农业大学植物保护学院南京210095

昆虫对拟除虫菊酯类杀虫剂的敏感性下降主要与神经细胞膜上钠离子通道的敏感性降低有关。至今已在14种昆虫的para直向同源钠离子通道基因序列中发现了与击倒抗性有关的20个突变。作者利用反转录-多聚酶链式反应（RT-PCR）对食虫沟瘤蛛... 详细信息

昆虫对拟除虫菊酯类杀虫剂的敏感性下降主要与神经细胞膜上钠离子通道的敏感性降低有关。至今已在14种昆虫的para直向同源钠离子通道基因序列中发现了与击倒抗性有关的20个突变。作者利用反转录-多聚酶链式反应（RT-PCR）对食虫沟瘤蛛的钠离子通道基因ⅢS5-ⅣS6区域进行了克隆、序列分析及同源性比较分析。

关键词：钠离子通道基因序列序列分析 cDNA片段反转录-多聚酶链式反应克隆拟除虫菊酯类杀虫剂同源性比较

一个含有玉米器官专一性启动子的表达质粒的构建

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湖北大学学报（自然科学版） 1998年第3期20卷 284-287页

作者：杨之帆罗忠训夏胜周炜湖北大学生命科学学院

报道了玉米醇溶蛋白基因启动子的亚克隆以及利用该启动子和ＧＵＳ基因来构建表达质粒ｐＨＺＰ—ＧＵＳ．经过部分降解和亚克隆，得到玉米醇溶蛋白基因启动子，将该启动子与含ＧＵＳ基因编码序列和ＮＯＳ终止子的ＢａｍＨⅠ片段连接，构... 详细信息

报道了玉米醇溶蛋白基因启动子的亚克隆以及利用该启动子和ＧＵＳ基因来构建表达质粒ｐＨＺＰ—ＧＵＳ．经过部分降解和亚克隆，得到玉米醇溶蛋白基因启动子，将该启动子与含ＧＵＳ基因编码序列和ＮＯＳ终止子的ＢａｍＨⅠ片段连接，构成融合基因．将该融合基因克隆到含有ＨＰＴ筛选标记基因的质粒ｐＧＬ２中，得到表达质粒ｐＨＺＰ—ＧＵＳ．

关键词：表达质粒转基因植物玉米启动子器官专一性

褐飞虱谷胱苷肽转移酶基因cDNA片段的克隆、测序及表达分析

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武汉科技大学学报 2007年第1期30卷 99-102页

作者：杨之帆何光存湖北大学生命科学学院湖北武汉430062 武汉大学生命科学学院湖北武汉430072

谷胱苷肽转移酶是昆虫体内重要的解毒酶系之一,研究水稻害虫褐飞虱的谷胱苷肽转移酶基因在褐飞虱与水稻互作中的表达变化,可为有效防治褐飞虱提供新的理论依据。利用反转录多聚酶链式反应(RT-PCR)技术克隆了褐飞虱谷胱苷肽转移酶基因编... 详细信息

谷胱苷肽转移酶是昆虫体内重要的解毒酶系之一,研究水稻害虫褐飞虱的谷胱苷肽转移酶基因在褐飞虱与水稻互作中的表达变化,可为有效防治褐飞虱提供新的理论依据。利用反转录多聚酶链式反应(RT-PCR)技术克隆了褐飞虱谷胱苷肽转移酶基因编码区的cDNA片段,并使用Northern杂交技术检测了该基因对两种不同抗性水稻的分子反应。结果表明,所克隆到的cDNA片段长度为201bp,该片段所编码的氨基酸序列与来自大劣按蚊、细小按蚊、冈比亚按蚊、果蝇和木瓜果实蝇的谷胱苷肽转移酶的片段存在高度同源性。Northern杂交显示,在褐飞虱取食抗性水稻后,谷胱苷肽转移酶基因表达水平明显升高,但褐飞虱取食感虫水稻TN1后,该基因的表达水平没有明显变化。

关键词：褐飞虱 RT—PCR 谷胱苷肽转移酶基因 Northern杂交分析

能量代谢工程促地衣芽胞杆菌DW2高效合成杆菌肽

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生物工程学报 2020年第6期36卷 1126-1137页

作者：张清朱杉崔乃香张博闻王志陈晓斌刘军李俊辉蔡冬波杨之帆陈守文马昕湖北大学生命科学学院省部共建生物催化与酶工程国家重点实验室湖北省环境微生物工程技术研究中心湖北武汉430062 湖北工业大学生物工程与食品学院发酵工程教育部重点实验室工业微生物湖北省重点实验室湖北武汉430068 绿康生化股份有限公司福建浦城353400

杆菌肽是一种主要由芽胞杆菌产生的广谱性环肽类抗生素,目前广泛应用于兽药领域。能量代谢在微生物高效合成目的代谢产物中具有重要作用。文中以杆菌肽工业生产菌株地衣芽胞杆菌Bacillus licheniformis DW2为出发菌株,首先构建了呼吸链... 详细信息

杆菌肽是一种主要由芽胞杆菌产生的广谱性环肽类抗生素,目前广泛应用于兽药领域。能量代谢在微生物高效合成目的代谢产物中具有重要作用。文中以杆菌肽工业生产菌株地衣芽胞杆菌Bacillus licheniformis DW2为出发菌株,首先构建了呼吸链分支途径细胞色素bd泛醇氧化酶基因cydB缺失菌株,发现cydB缺失后杆菌肽效价和胞内ATP浓度相比于对照菌株分别提高了10.97%和22.96%。接着,证实了强化表达另外一条呼吸链分支途径--细胞色素aa3氧化酶基因qoxA能够提高杆菌肽合成水平,其杆菌肽效价和胞内ATP浓度相比于对照菌株分别提高了18.27%和34.00%。强化ADP合成供给也是促进胞内ATP积累的有效策略,结果表明强化表达腺苷激酶DcK和腺苷酸激酶AdK均可以提高杆菌肽效价和胞内ATP浓度,其中强化表达DcK效果较好,其杆菌肽效价相比对照提高16.78%。最后,通过组合代谢工程育种,在基因cydB缺失菌DW2ΔcydB基础上整合表达了qoxA和dck,得到工程菌株DW2-CQD(DW2ΔcydB::qoxA::dck),发酵结果表明,DW2-CQD杆菌肽效价达到954.25 U/mL,相比于对照菌株提高了21.66%,单位菌体杆菌肽效价为2.11 U/CFU,相比对照提高了11.05%。此外,DW2-CQD胞内ATP浓度为39.54 nmol/L,相比于对照提高了49.32%。结果证实能量代谢工程是提高杆菌肽发酵水平的有效策略,提供了一株具有工业化应用前景的杆菌肽生产菌株。

关键词：地衣芽胞杆菌杆菌肽 ATP供给代谢工程

白芨假鳞茎芽无菌苗高效增殖影响因子初步筛研究

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湖北大学学报（自然科学版） 2020年第1期42卷 32-36页

作者：陈小艺陈俊杨之帆湖北大学生命科学学院湖北武汉430062 武汉科技大学化学工程与技术学院湖北武汉430081)

以白芨(Bletilla striata)无菌苗材料为外植体在不同培养基上通过不同外源添加物、接种密度、活性炭浓度、切割手法对白芨假鳞茎芽无菌苗增殖影响试验研究提高白芨假鳞茎芽无菌苗增殖系数的因子以确定最适宜增殖条件. 结果表明在... 详细信息

以白芨(Bletilla striata)无菌苗材料为外植体在不同培养基上通过不同外源添加物、接种密度、活性炭浓度、切割手法对白芨假鳞茎芽无菌苗增殖影响试验研究提高白芨假鳞茎芽无菌苗增殖系数的因子以确定最适宜增殖条件. 结果表明在不同外源添加物的试验中白芨假鳞茎芽无菌苗增殖的最适宜培养基为:MS+BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L+琼脂7.0g/L+香蕉. 试验中以MS+BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L+琼脂7.0g/L+蔗糖30g/L为基础培养基其中接种密度为6、活性炭浓度为3g/L 交叉相切的切割手法接种密度为4的同时中间横划一刀均能显著提高白芨假鳞茎芽无菌苗的增殖系数最高可以达到 4 本实验为白芨快速繁殖和工厂化生产提供了技术支持.

关键词：白芨外源添加物质接种密度活性炭浓度切割手法增殖系数

中国股市的扩容因素并不是造成股市波动的主要因素

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经济研究参考 2001年第55期 26-27页

作者：何国华杨之帆

一般认为，扩容速度不适当会造成股票价格的暴涨暴跌。若扩容过快，而股票的需求相对跟不上时，根据供求理论，股票价格会下降，新股的发行和增资配股都会受到压抑，“新股失败”成为可能；若扩容过缓，

关键词：扩容速度股市波动中国股市股票价格暴涨暴跌供求理论增资配股新股

褐飞虱NADH泛醌氧化还原酶51kDa亚基cDNA片段的克隆及表达分析

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武汉科技大学学报 2006年第6期29卷 611-613,617页

作者：杨之帆何光存湖北大学生命科学学院湖北武汉430062 武汉大学生命科学学院湖北武汉430072

NADH泛醌氧化还原酶是动物体内呼吸链电子传递系统的第一个酶,克隆水稻害虫褐飞虱的NADH泛醌氧化还原酶基因,及研究其在褐飞虱与水稻互作中的表达变化,将为科学防治褐飞虱提供新的线索。利用反转录多聚酶链式反应(RT-PCR)技术克隆了褐飞... 详细信息

NADH泛醌氧化还原酶是动物体内呼吸链电子传递系统的第一个酶,克隆水稻害虫褐飞虱的NADH泛醌氧化还原酶基因,及研究其在褐飞虱与水稻互作中的表达变化,将为科学防治褐飞虱提供新的线索。利用反转录多聚酶链式反应(RT-PCR)技术克隆了褐飞虱NADH泛醌氧化还原酶51 kDa亚基基因的cDNA片段,并进行了序列测定;使用Northern杂交技术检测了该基因对两种不同抗性水稻的分子反应。分子杂交结果表明,在取食抗性水稻品种B5后,褐飞虱的NADH泛醌氧化还原酶51 kDa亚基基因表达水平明显升高,而取食感虫水稻TN1后,该基因的表达水平没有明显变化。

关键词：褐飞虱 RT—PCR NADH泛醌氧化还原酶51 kDa亚基基因 Northern杂交分析

三角褐指藻岩藻黄素合成途径及其关键基因对高光照的响应

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中国油料作物学报 2017年第1期39卷 128-136页

作者：张南南罗玲陈卓杨之帆黄凤洪万霞龚阳敏湖北大学生命科学学院湖北武汉430062 中国农业科学院油料作物研究所农业部油料作物生物学与遗传重点实验室湖北武汉430062

以三角褐指藻为材料,以岩藻黄素的合成途径中主要的六个酶:八氢番茄红素合成酶、八氢番茄红素脱氢酶、ζ-胡萝卜素脱氢酶、胡萝卜素异构酶、番茄红素β-环化酶和玉米黄素环氧酶为研究对象,研究高光照胁迫对三角褐指藻岩藻黄素合成代谢... 详细信息

以三角褐指藻为材料,以岩藻黄素的合成途径中主要的六个酶:八氢番茄红素合成酶、八氢番茄红素脱氢酶、ζ-胡萝卜素脱氢酶、胡萝卜素异构酶、番茄红素β-环化酶和玉米黄素环氧酶为研究对象,研究高光照胁迫对三角褐指藻岩藻黄素合成代谢途径中关键基因表达量以及岩藻黄素含量的变化规律。以光照强度为500μE/(m2·s),分别照射处理三角褐指藻3h、6h、12h,采用HPLC对岩藻黄素含量进行定量分析。随着光照时间的延长,岩藻黄素含量呈现先上升后下降的趋势;高光照6h样品中岩藻黄素含量为1.85mg·g-1DW(dry cell weight),比高光照0h对照组中岩藻黄素含量增加了2.16倍。qRT-PCR分析结果表明玉米黄素环氧酶基因zep1和八氢番茄红素合成酶基因pys转录本在高光照胁迫6h时丰度最高,与对照组相比提高了近2倍,基因表达量的变化表现出与岩藻黄素含量变化相一致的趋势。高光照处理3h后,胡萝卜素异构酶基因crtiso3、八氢番茄红素脱氢酶基因pds、ζ-胡萝卜素脱氢酶基因zds的表达水平相比于对照组明显降低,表现出应对高光照胁迫的快速响应;番茄红素β-环化酶基因lcyb、胡萝卜素异构酶基因crtiso1的表达水平则在高光照处理12h后明显提高;与zep1和pys相比,lcyb和crtiso1基因的表达对高光照胁迫处理的响应时间要滞后至少6h。本研究揭示了高光照胁迫处理下三角褐指藻中岩藻黄素含量及其合成途径中关键基因的表达模式,表明zep1和pys基因表达水平与岩藻黄素合成量之间存在明显的线性关系。

关键词：高光照三角褐指藻岩藻黄素转录本丰度