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RABV G蛋白免疫原性研究及特异性抗体的筛选与鉴定

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RABV G蛋白免疫原性研究及特异性抗体的筛选与鉴定

作者：季裕婷河北科技师范学院

学位级别：硕士

狂犬病（Rabies）是由狂犬病病毒（Rabies virus,RABV）引起的高致死性人畜共患病,其主要特征是侵害人和其他哺乳动物中枢神经系统和导致接近100%的死亡率,对全人类的生命健康构成了严重威胁。RABV G蛋白是唯一可对狂犬病提供全面保护... 详细信息

狂犬病（Rabies）是由狂犬病病毒（Rabies virus,RABV）引起的高致死性人畜共患病,其主要特征是侵害人和其他哺乳动物中枢神经系统和导致接近100%的死亡率,对全人类的生命健康构成了严重威胁。RABV G蛋白是唯一可对狂犬病提供全面保护的抗原。在B细胞介导的免疫应答中,G蛋白可以产生病毒中和抗体。本研究拟利用真核表达系统表达RABV G胞外区蛋白,并通过噬菌体展示技术筛选针对抗RABV G蛋白的特异性抗体,研究结果将有助于深入了解RABV G蛋白在狂犬病发病和免疫防御中的作用,并为狂犬病的治疗和预防提供新的思路和方法。主要的研究内容及结果包括:*** G胞外区重组蛋白的真核表达与纯化本研究将RABV CVS-N2c株G蛋白基因胞外区克隆到p CAGGS真核表达载体上,利用HEK-293F悬浮细胞表达系统表达G蛋白,经过Ni柱亲和层析、凝胶过滤层析两步纯化和SDS-PAGE鉴定。结果显示重组RABV G蛋白目的条带大小约55 k Da,蛋白浓度为0.8 mg/m L。2.真核表达纯化RABV G胞外区蛋白的活性验证和免疫原性研究本研究以纯化RABV G蛋白和灭活RABV作为抗原对4周龄Balb/c小鼠进行了3次免疫,并进行了Elisa血清效价测定,结果显示,免疫RABV G蛋白和灭活RABV的小鼠血清中抗体滴度可达10～6,但灭活RABV的小鼠血清中抗体滴度高于免疫RABV G蛋白的小鼠。同时,对免疫小鼠的脾淋巴细胞进行分离,并利用流式细胞术检测了脾淋巴细胞亚型及其细胞因子表达水平。结果显示:用RABV G蛋白和灭活RABV免疫的小鼠CD4和CD8T淋巴细胞比例均升高,CD4和CD8T淋巴细胞中IL-2、IL-4和IFN-γ表达水平均显著升高,但免疫灭活RABV的小鼠较免疫RABV G蛋白的小鼠CD4和CD8T淋巴细胞中细胞因子表达水平更高。证明灭活RABV免疫原性良好,纯化的RABV G胞外区蛋白保留了蛋白活性且具有免疫原性但弱于灭活RABV。3.基于噬菌体展示技术初步筛选针对抗RABV G蛋白的特异性抗体本研究以RABV G蛋白和灭活RABV作为包被抗原,对天然噬菌体单链抗体库和随机肽噬菌体纳米抗体库进行3轮淘选。然后,从单克隆噬菌体菌落中鉴定出阳性菌落,并进行小量原核表达。随后,利用Elisa法对原核表达的单链抗体和纳米抗体的结合能力进行了初步筛选,并进行基因测序。进一步,选取具有高亲和力的抗体进行大量原核表达,并经过Elisa和Western Blot验证其结合能力和表达情况。结果表明,其中有18株原核表达单链抗体和8株原核表达纳米抗体结合能力较高,在此基础上分别构建人源Ig重组全长抗体,并经过Elisa和Western Blot验证其结合能力和表达情况,结果显示,人源Ig重组纳米抗体SJG174的结合能力最高,HG164、HV108和HV177这3株人源Ig重组全长抗体结合能力较好。为研究狂犬病诊断新方法和治疗性RABV单克隆抗体提供前期基础。

关键词：狂犬病病毒 G蛋白噬菌体展示技术单链抗体纳米抗体

中国供销合作社制度变迁研究 ——基于历史制度主义的视角

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中国供销合作社制度变迁研究 ——基于历史制度主义的视角

作者：吕裕婷南昌大学

学位级别：硕士

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家哲学的登场、进路与前景

云南社会科学 2024年第4期 25-33页

作者：包晨婷庞俊来东南大学人文学院东南大学道德发展研究院

以“家”为基点的哲学思考在中国学界逐渐升温,“家哲学”的兴起是学界面对现代性的弊病,反思儒家伦理学,试图复兴优秀传统文化,促进儒家伦理的现代转型,构建中国特色哲学话语体系的一种尝试。通过中西比较视野,运用现象学、人类学方法... 详细信息

以“家”为基点的哲学思考在中国学界逐渐升温,“家哲学”的兴起是学界面对现代性的弊病,反思儒家伦理学,试图复兴优秀传统文化,促进儒家伦理的现代转型,构建中国特色哲学话语体系的一种尝试。通过中西比较视野,运用现象学、人类学方法,以及家的本体论建构,家哲学研究致力于寻找家的普遍性意义,呈现规范性的理论进路。家哲学的当代进路,需要从文明形态对话的视阈审视家哲学的理性限度,回应流动性社会、全球化、人工智能时代家哲学的建构功能,探索当代中国老龄文明所需要的家哲学文化战略。

关键词：家哲学亲亲现代性问题儒家伦理规范个体

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Profilin1的生物学作用研究进展

天津农学院学报 2022年第3期29卷 78-83页

作者：訾晶晶杨旭来裕婷李新丁向彬张林林天津农学院动物科学与动物医学学院天津市农业动物繁育与健康养殖重点实验室天津300392

Profilin最初发现于1976年,是最早确定的肌动蛋白(actin)结合蛋白之一,因其重要的生物学作用而被广泛研究。Profilin1因可以与肌动蛋白结合从而调控细胞骨架的聚合,成为最普遍存在的亚型。最近许多研究表明,Profilin1在癌症和人类疾病... 详细信息

Profilin最初发现于1976年,是最早确定的肌动蛋白(actin)结合蛋白之一,因其重要的生物学作用而被广泛研究。Profilin1因可以与肌动蛋白结合从而调控细胞骨架的聚合,成为最普遍存在的亚型。最近许多研究表明,Profilin1在癌症和人类疾病中也有重要的作用。本文介绍Profilin1的生物学作用,进一步解释其对细胞骨架的调控机制,并讨论Profilin1在癌症和人类疾病中的生理和病理作用。

关键词： Profilin1 细胞骨架肌动蛋白癌症疾病

信息-物理-社会视角下的电力-交通耦合网络建模与协同优化

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电力系统自动化 2024年第7期48卷 62-85页

作者：盛裕杰郭庆来薛屹洵王嘉炜常馨月清华大学电机工程与应用电子技术系北京市100084 山西省能源互联网研究院山西省太原市030006

近年来,电动汽车(EV)、快速充电设施的高速增长将电力系统和交通系统这两个复杂的基础设施网络紧密耦合。EV具备充电时间和充电位置的灵活性,对于新型电力系统正是理想的移动储能资源,可提供规模巨大的时间、空间灵活调节能力。然而,宏... 详细信息

近年来,电动汽车(EV)、快速充电设施的高速增长将电力系统和交通系统这两个复杂的基础设施网络紧密耦合。EV具备充电时间和充电位置的灵活性,对于新型电力系统正是理想的移动储能资源,可提供规模巨大的时间、空间灵活调节能力。然而,宏观的电力-交通耦合背后是海量EV用户在各类信息引导下做出的微观社会化决策,构成了复杂的信息-物理-社会系统。从这一视角对电力-交通耦合网络建模分析与协同优化的相关研究进行了梳理。首先,对两网耦合的基本场景和关键挑战进行了介绍;接着,以社会层与物理层为重点归纳了融合微观车主决策与宏观网络动态的EV群体出行-充电行为建模方法;然后,进一步纳入信息层,总结了多类定价主体与EV间的策略交互与协同优化;最后,对电力-交通耦合网络建模分析与协同优化相关方向的研究进行展望。

关键词：电动汽车电网交通网信息-物理-社会系统协同优化

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硫自养反硝化工艺亚硝酸盐积累研究进展

工业水处理 2024年第8期44卷 21-28页

作者：平彩霞周鑫聂裕婷太原理工大学环境科学与工程学院山西晋中030600 山西省市政工程研究生教育创新中心山西晋中030600

厌氧氨氧化(Anammox)由于具有不需外加碳源、污泥产量少、运行费用低等优势,被认为是一种最为高效、经济的污水生物脱氮新技术。然而,亚硝酸盐(NO_(2)^(-)-N)积累是Anammox发生的必要前提。研究表明:短程硝化存在亚硝酸盐氧化菌活性难... 详细信息

厌氧氨氧化(Anammox)由于具有不需外加碳源、污泥产量少、运行费用低等优势,被认为是一种最为高效、经济的污水生物脱氮新技术。然而,亚硝酸盐(NO_(2)^(-)-N)积累是Anammox发生的必要前提。研究表明:短程硝化存在亚硝酸盐氧化菌活性难以稳定抑制的问题,而异养短程反硝化又存在需要外加碳源、碳排放量大等问题。近年来,硫驱动的短程自养反硝化(SPAD)作为一种NO3--N还原为NO_(2)^(-)-N的新方法,因其具有不需要投加有机碳源、经济成本低、环境友好等优势而受到广泛关注。基于此,结合大量国内外文献,全面介绍了SPAD的工艺原理、NO_(2)^(-)-N积累影响因素、脱氮过程副产物、关键菌群和功能基因,并系统总结了SPAD处理效能,最后对各种类型SPAD工艺的经济性能进行了比较分析并提出了未来的研究展望。

关键词：硫短程自养反硝化亚硝酸盐积累电子供体

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金属氧化物型复合纳米材料的制备及应用

化工新型材料 2024年

作者：修梦婷郑之裕王通朱利民东华大学生物与医学工程学院

首先以乙酰丙酮铁(Fe(C5H7O2)3，98%)、乙酰丙酮铜(Cu(C5H7O2)2，97%)、二缩三乙二醇（TEG）为原料制备小型双金属氧化物纳米颗粒(CuFe2O4)。小型双金属氧化物纳米颗粒(CuFe2O4)通过静电吸附作用负载在过氧化镁(MgO2)纳米片上以形成金... 详细信息

首先以乙酰丙酮铁(Fe(C5H7O2)3，98%)、乙酰丙酮铜(Cu(C5H7O2)2，97%)、二缩三乙二醇（TEG）为原料制备小型双金属氧化物纳米颗粒(CuFe2O4)。小型双金属氧化物纳米颗粒(CuFe2O4)通过静电吸附作用负载在过氧化镁(MgO2)纳米片上以形成金属氧化物型复合纳米材料(CuFe2O4@MgO2)。该复合纳米材料在肿瘤酸性条件下能产生大量高毒性的羟基自由基（·OH），对肿瘤细胞有较大的损伤作用。采用透射电子显微镜（TEM）、X射线光电子能谱技术、Zeta电位等手段对复合纳米材料进行表征。结果表明：CuFe2O4纳米颗粒分布在过氧化镁(MgO2)纳米片的表面，同时结合Zeta电位等表征证明该复合纳米材料的成功制备。体外细胞实验证明该复合纳米材料具备抗肿瘤治疗效果。

关键词：金属氧化物静电吸附作用活性氧肿瘤治疗

钛/铋氧化物纳米材料用于声动力/放射联合治疗肿瘤

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精细化工 2024年

作者：郑之裕修梦婷王通张艳艳朱利民东华大学生物与医学工程学院

以钛酸四丁酯和冰醋酸为原料，经水热反应制备了TiO2纳米晶体，其与Bi(NO3)3反应得到Bi2O3/TiO2纳米颗粒(BTH)，BTH经聚多巴胺(PDA)涂层包覆，得到了BTH@PDA纳米颗粒(BTP)。通过TEM、XRD和XPS对BTP形貌和组成进行了表征，采用生物安全... 详细信息

以钛酸四丁酯和冰醋酸为原料，经水热反应制备了TiO2纳米晶体，其与Bi(NO3)3反应得到Bi2O3/TiO2纳米颗粒(BTH)，BTH经聚多巴胺(PDA)涂层包覆，得到了BTH@PDA纳米颗粒(BTP)。通过TEM、XRD和XPS对BTP形貌和组成进行了表征，采用生物安全性实验、体外细胞毒性测试、体外细胞摄取和活性氧染色测试了BTP的生物相容性、细胞毒性和活性氧生成能力。结果表明，BTP呈梭形，最长边粒径(125.18±14.66) nm，Zeta电位为(-4.17±0.33) mV；BTP悬液在远高于正常治疗质量浓度(300 μg/mL)的条件下，对L929细胞和4T1细胞无明显的毒性；BTP能增强放疗的疗效，在超声和X射线共同处理后，能将4T1细胞的存活率降至34.3%，并能有效产生活性氧；4T1细胞对BTP的摄取是时间依赖性的，在12 h附近有最大摄取。

关键词：纳米材料金属氧化物声动力治疗放射治疗联合治疗生物工程

中职学校涉农专业课程思政“三点一线”教学实践研究

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课堂内外（高中版） 2024年第21期 158-160页

作者：蒲裕来黄吉来中方县职业中等专业学校湖南怀化418000

为落实立德树人的根本任务,文章以中方县职业中等专业学校为研究对象,坚持以“思政为主线”,提炼中职学校涉农专业教学的“专业要点”,挖掘中职学校思政教育的重点,找准中职涉农专业教学与思政教育的“融合难点”,并将之运用于教学实践... 详细信息

为落实立德树人的根本任务,文章以中方县职业中等专业学校为研究对象,坚持以“思政为主线”,提炼中职学校涉农专业教学的“专业要点”,挖掘中职学校思政教育的重点,找准中职涉农专业教学与思政教育的“融合难点”,并将之运用于教学实践。通过涉农专业课程思政“三点一线”教学实践研究,旨在全面提升涉农专业人才培养质量,培养出更多高素质技术技能人才,使他们成为自己尊重、家庭满意、社会认可、祖国需要的人。

关键词：中职学校涉农专业课程思政